Fiche sujet - candidat Un des aspects de la réponse immunitaire est la sécrétion d anticorps. Ces anticorps sont des protéines circulantes produites par les plasmocytes, issus de la différenciation des lymphocytes B. On recherche, par deux observations complémentaires, l une en microscopie photonique et l autre en microscopie électronique, quelles modifications des lymphocytes B conduisent à une cellule productrice d anticorps, le plasmocyte. Matériel - sang de petit mammifère (le sang remplit toutes les conditions d innocuité), un compte-goutte, sèche-cheveux - un fixateur, deux colorants spécifiques, lames, papier absorbant, eau distillée, gants, pinces, marqueur - un microscope avec l éclairage adapté - des microphotographies de leucocytes - des électronographies de leucocytes Activités et déroulement des activités Capacités Barème 1- Justifier l intérêt de compléter l observation en microscopie photonique par une Comprendre la manipulation observation en microscopie électronique. - Réaliser un frottis sanguin et le colorer selon le protocole fourni. Appeler l'examinateur pour vérification - Utiliser le microscope et la fiche document 1/ pour identifier un lymphocyte. Appeler l'examinateur pour vérification 4- Représenter par un dessin d observation le lymphocyte observé. Préciser dans la légende les critères qui vous ont permis de l identifier par rapport aux hématies. Appeler l'examinateur pour vérification 5- Représenter par un dessin simplifié le plasmocyte de la fiche document / de façon à mettre en évidence ses particularités. 6- Comparer les deux cellules observées au microscope électronique afin de répondre à la problématique initiale. 7- Remettre le microscope dans l état «prêt à l emploi» et ranger le poste de travail. Réaliser une manipulation d après un protocole Utiliser le microscope Représenter une observation par un dessin Représenter une observation par un dessin simplifié Appliquer une démarche explicative Gérer et organiser le poste de travail 4 4 1
Fiche technique - candidat Réalisation d un frottis sanguin - Prélever, une goutte de sang à l aide du compte-goutte - Déposer la goutte de sang à l extrémité d une lame - Appliquer une autre lame en avant de la goutte de sang inclinée à 45 de façon à ce que le sang s étale sous la lame par capillarité. - Faire glisser la lame inclinée à 45 pour étaler uniform ément la goutte. - Sécher le frottis avec le sèche-cheveux. - Repérer au marqueur, avec une lettre F, la face où se trouve le sang. Coloration variante de la coloration de MAY- GRÜNWALD - GIEMSA - Tremper la lame 5 fois de suite pendant une seconde dans le fixateur. Egoutter verticalement au contact du papier filtre. - Tremper la lame 5 fois de suite pendant une seconde dans le colorant 1. Egoutter verticalement au contact du papier filtre. - Tremper la lame 5 fois de suite pendant une seconde dans le colorant. Egoutter verticalement au contact du papier filtre. - Rincer en laissant couler l eau distillée doucement sur le frottis. - Egoutter sur papier filtre puis sécher au sèche-cheveux. - Observer au microscope sans lamelle (bien repérer la face F où se trouve le sang). NB : veiller à l organisation et à la propreté du plan de travail
Fiche document - candidat (1/) Document 1 : microphotographies de leucocytes Trois types de leucocytes observés au microscope optique un granulocyte = un polynucléaire un lymphocyte un monocyte x1000 x1700 x000 Source : extrait d un manuel scolaire de SVT (Bordas)
Fiche document - candidat (/) Document : électronographie d un plasmocyte et d un lymphocyte 15 µm Plasmocyte (x8000) 8 µm Lymphocyte (x8000) http://www.ulb.ac.be/sciences/biodic/images/cellules/plasmocyte.jpg http://www.indigo.com/software/gphpcd/em1.jpg
Fiche réponse - candidat ETABLISSEMENT : Classe : Nom : Prénom : A rendre à l issue de l épreuve Utiliser le verso si nécessaire
Fiche barème d'évaluation Capacités et critères d évaluation (en gras, évaluation pendant la séance) Barème 1- Comprendre la manipulation La microscopie photonique ne suffit pas pour observer les organites ce que permet par contre la microscopie électronique - Réaliser une manipulation d après un protocole - respect des différentes étapes du protocole - utilisation maîtrisée du matériel - Utiliser un microscope réalisation des réglages (éclairage, diaphragme, condenseur ) - utilisation des objectifs (ordre croissant des grossissements, choix adapté, mise au point) 4 - recherche puis centrage raisonné sur le lymphocyte 4- Représenter une observation par un dessin - représentation fidèle à l observation - netteté et finesse du tracé, mise en page - rédaction d un titre adapté et indication du mode d observation et grossissement - critères ayant permis la reconnaissance (légendes) 5- Représenter une observation par un dessin simplifié : - représentation fidèle au modèle - mise en évidence des structures cytoplasmiques sécrétant des anticorps 6- Appliquer une démarche explicative : - la différenciation du lymphocyte en plasmocyte se traduit par une augmentation de taille et un développement du réticulum endoplasmique 7- Gérer et organiser le poste de travail - Pendant la séance - Rangement final 1 1 Nom des candidats NOTE /0
Fiche laboratoire et évaluateurs Matériel - sang de petit mammifère (le sang remplit toutes les conditions d innocuité), un compte-goutte, sèche-cheveux - un fixateur, deux colorants spécifiques, lames, papier absorbant, eau distillée, gants, pinces, marqueur - un microscope et l éclairage adapté - des microphotographies de leucocytes - des électronographies de leucocytes Matériel par poste - Du sang de petit mammifère (acheté chez un fournisseur spécialisé ou prélevé sur des abats, par exemple cœur frais de lapin acheté chez le boucher). - Lames fournies pour la réalisation du frottis nettoyées à l alcool faces et tranches. - Les colorants peuvent être obtenus chez des fournisseurs spécialisés (ex : BIOLAB ou autre). - Fiche technique candidat - Fiche document candidat 1/ : microphotographies de leucocytes (ou planche à l écran : utiliser 07_I7_B_Obs_01_planche1). - Fiche document candidat / : électronographies de leucocytes (ou planche à l écran : utiliser 07_I7_B_Obs_01_planche) - Fiches réponse candidat 1/ et /. À vérifier : - le bon état de marche du microscope et des lampes, - la qualité d impression des documents. Réaliser au préalable un frottis avec le sang récupéré pour vérifier la richesse suffisante en lymphocytes A l attention de l évaluateur - Prévoir une lame de frottis sanguin du commerce à fournir au candidat en cas d échec dans la réalisation du frottis. En tenir compte dans l évaluation de la question (évaluer la prestation réellement réalisée). Prescriptions Autorisations Blouse Gants Lunettes de protection Calculette Papier brouillon oui oui oui non Fourni par l établissement