Analyse d échantillons alimentaires pour la présence d organismes génétiquement modifiés

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1 Analyse d échantillons alimentaires pour la présence d organismes génétiquement modifiés Exemple de programme de travail (Base pour un cours d une semaine) M. Querci WORLD HEALTH ORGANIZATION REGIONAL OFFICE FOR EUROPE ORGANISATION MONDIALE DE LA SANTE BUREAU REGIONAL DE L'EUROPE WELTGESUNDHEITSORGANISATION REGIONALBÜRO FÜR EUROPA ВСЕМИРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ ЕВРОПЕЙСКОЕ РЕГИОНАЛЬНОЕ БЮРО

2 Exemple de programme de travail 2 1 ER JOUR : LUNDI 9:00 Présentation du cours, des organisateurs et des participants 9:30 Théorie : Introduction consacrée aux procédures générales de détection d OGM et contenu du cours PREPARATION D ECHANTILLONS : EXTRACTION D ADN 10:00 Pratique : Extraction d ADN par la méthode CTAB (1 e partie) 10:30 Pause café 11:00 Théorie : Electrophorèse sur gel pour l analyse d acides nucléiques Pratique : Préparation des gels d agarose 12:00 Pratique : Extraction d ADN par la méthode CTAB (2 e partie) 13:00 Déjeuner 14:00 Pratique : Extraction d ADN par la méthode CTAB (3 e partie) 15:15 Pratique : Chargement des échantillons sur gels d agarose 16:00 Pause café 16:20 Théorie : Présentation générale de la configuration d un laboratoire de PCR : problèmes, etc. 17:20 Pratique : Interprétation des gels d agarose

3 Exemple de programme de travail 3 2 E JOUR : MARDI PCR QUALITATIVE 9:00 Théorie : Introduction à la réaction de polymérisation en chaîne (PCR) et à l utilisation de la PCR pour l analyse de maïs et de soja transgéniques 9:30 Pratique : Application de la PCR pour le maïs MON810 et le soja Roundup Ready Tests spécifiques de l espèce : détection des gènes de la zéine et de la lectine 10:15 Pause café 10:40 Préparation des gels d agarose 11:00 Présentation : Echantillonnage et validation : concepts de base 12:30 Déjeuner 14:00 Chargement des échantillons sur gels d agarose 14:30 Théorie : Caractéristiques du soja Roundup Ready et du maïs MON810 et introduction à la PCR nichée spécifique aux OGM 15:15 Interprétation des gels d agarose (PCR spécifique à la zéine et à la lectine) 16:00 Pause café 16:15 Pratique: PCR pour le maïs MON810 et le soja Roundup Ready Tests spécifiques aux OGM : détection du promoteur 35S et du terminateur nos 17:00 Présentation : Introduction à la législation européenne sur les OGM

4 Exemple de programme de travail 4 3 E JOUR : MERCREDI PCR QUALITATIVE 9:00 Pratique : PCR nichée pour l analyse spécifique du maïs MON810 et du soja Roundup Ready (1 e réaction PCR) 10:00 Préparation des gels d agarose 10:30 Pause café 11:00 Présentation : Détection d OGM et management de la qualité 12:00 Chargement des échantillons sur gels d agarose (PCR du promoteur 35S et du terminateur nos) 12:30 Déjeuner 13:30 Pratique : PCR nichée pour la détection spécifique de maïs MON810 et de soja Roundup Ready (2 e réaction PCR) 14:00 Interprétation des gels d agarose (PCR du promoteur 35S et du terminateur nos) 15:00 Pratique : Préparation des gels d agarose 15:30 Pause café 15:45 Pratique : Chargement des échantillons sur gels d agarose (PCR nichée) 16:00 Théorie : Introduction à la PCR en temps réel (RT-PCR) pour la détection et la quantification d OGM 17:30 Pratique : Interprétation des gels d agarose (PCR spécifique du maïs MON810 et du soja Roundup Ready )

5 Exemple de programme de travail 5 4 E JOUR : JEUDI PCR QUANTITATIVE EN TEMPS REEL (RT-PCR) 9:00 Pratique : Quantification de l ADN et préparation d échantillons pour la PCR en temps réel (RT-PCR) 9:30 Pratique : PCR en temps réel (RT-PCR) pour l analyse spécifique du soja Roundup Ready à l aide du LightCycler (Roche) (groupe 1) de l ABI PRISM 7700 (Applied Biosystems) (groupe 2) Pause café 13:00 Déjeuner 14:00 Pratique : PCR en temps réel (RT-PCR) pour l analyse spécifique du soja Roundup Ready en utilisant le LightCycler (Roche) (groupe 2) l ABI PRISM 7700 (Applied Biosystems) (groupe 1) 15:30 Théorie : Analyse de données : Introduction à quelques outils statistiques 16:30 Pause café 17:00 Pratique : Poursuite de la PCR en temps réel (RT-PCR) pour l analyse spécifique du soja Roundup Ready

6 Exemple de programme de travail 6 5 E JOUR : VENDREDI ANALYSE QUANTITATIVE DU SOJA ROUNDUP READY PAR LA METHODE ELISA 9:00 Théorie : Approche sérologique de la détection d OGM 9:20 Pratique : ELISA 1 e partie 10:00 Pause café 10:30 Présentation : Approche sérologique de la détection d OGM 11:30 Pratique : ELISA 2 e partie 12:00 Déjeuner 13:00 Pratique : ELISA 3 e partie 14:00 Interprétation des résultats 15:00 Présentation : Domaines de discussions internationales concernant l utilisation en toute sécurité d organismes génétiquement modifiés 16:00 Discussion générale et conclusions