VALIDATIERAPPORT RAPPORT DE VALIDATION
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- Joel Dussault
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1 VALIDATIERAPPORT RAPPORT DE VALIDATION Analysemethode Méthode d analyse Techniek Technique Matrix / matrixgroep Matrice / Groupe de matrices Datum laatste aanpassing / Date de la dernière adaptation Dénombrement des spores de microorganismes anaérobies sulfitoréducteur dans l eau (37 C) (I-MET-067) Filtration ensemencement de milieux de culture solides lecture des géloses ISO Tous les types d eau Sauf dans le cas où une grande quantité de matières sous forme de particules est susceptible d être retenue par la membrane. 21/02/2013
2 Résumé des critères de performance : - Répétabilité : 0.22 log ufc/100 ml - Ecart type de reproductibilité : 0.10 log ufc/100 ml - Incertitude de mesure (reproductibilité) : 0.28 log ufc/100 ml La validation répond aux exigences de la procédure LAB 00 P180 Le laboratoire qui veut appliquer cette méthode doit démontrer que les critères ci-dessous soient remplis pour les combinaisons matrices/paramètres : Participation à un test interlaboratoire et obtention de résultats corrects. Obtention d une répétabilité de 0,5 log et une reproductibilité de 1,0 log. Historique de validation : Edition Révision par/date Motif de la révision Modifications 1 MC Wilem / Adaptation au nouveau template et à la nouvelle procédure de validation (P180) Adaptation au nouveau template du dossier de validation du 24/09/2009 avec annexe photos.
3 VALIDATIERAPPORT RAPPORT DE VALIDATION Analysemethode Méthode d analyse Techniek Technique Matrix / matrixgroep Matrice / Groupe de matrices Type validatie Type de validation Verantwoordelijke (Naam en functie) Responsable (Nom et fonction) Opgesteld door Rédaction par Dénombrement des spores de microorganismes anaérobies sulfitoréducteurs dans l eau (37 C) (I-MET-067) Filtration ensemencement de milieux de culture solides lecture des géloses ISO Tous les types d eau - Sauf dans le cas où une grande quantité de matières sous forme de particules est susceptible d être retenue par la membrane. Vérification MC Wilem Responsable section microbiologie LFSAGx MC Wilem Responsable section microbiologie Date: 21/02/2013 Handtekeningen - Signatures: Sé Medewerkers (Naam en functie) Collaborateurs (Nom et fonction) Periode van validatie Période de validation Methode goedgekeurd en geschikt bevonden door Méthode approuvée et jugé convenable pour la routine par Collaborateurs de la section microbiologie LFSAGx A. Georges, A. Mandiki, F. Marlier, M. Martin, S. Petit, B. Polderman, C. Schauwers et MC Wilem Ce dossier de validation a été clôturé le 24/09/2009 Adaptation à la nouvelle procédure de validation (LAB-00-P-180) : février 2013 Handtekeningen - Signatures: A. Dubois Responsable Qualité LFSAGx Date : 22/02/2013 Sé Hierna volgt een beschrijving van de resultaten van het validatieonderzoek zoals aangegeven in stap 8 van de procedure LAB 00 P 180. Ce qui suit est une description des résultats de l'étude de validation comme indiqué dans l'étape 8 de la procédure LAB P LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
4 Samenvatting validatiegegevens Résumé des données de validation Matrices / paramètres de validation / critères Matrices : - Tous les types d eau Paramètres de validation : - Répétabilité - Reproductibilité / incertitude de mesure - Justesse ou justesse relative Critères - Répétabilité : 0.22 log ufc/100ml - Ecart type de reproductibilité : 0.10 log ufc/100ml - Incertitude de mesure (reproductibilité) : 0.28 log ufc/100ml - Justesse : z-scores conformes aux tests interlaboratoires LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
5 VALIDATIERAPPORT RAPPORT DE VALIDATION... 1 DÉNOMBREMENT DES SPORES DE MICROORGANISMES ANAÉROBIES SULFITORÉDUCTEURS DANS L EAU (37 C)... 1 (I-MET-067)... 1 SAMENVATTING VALIDATIEGEGEVENS RÉSUMÉ DES DONNÉES DE VALIDATION INTRODUCTION VALIDATION MATÉRIAUX UTILISÉS ORGANISATION RÉSULTATS JUSTESSE TESTS INTERLABORATOIRES CONCLUSIONS ANNEXES... 6 LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
6 1 Introduction Ce dossier de validation est une mise à jour du dossier de validation pour le dénombrement des spores de microorganismes anaérobies sulfitoréducteurs dans l eau à 37 C suivant la norme ISO Le dossier de validation initial a été clôturé le 24/09/2009. Il a été adapté suite à la mise en application de la nouvelle procédure de validation LAB-00-P-180. La détermination de l incertitude de mesure y a été ajoutée. 2 Validation Cette validation a été effectuée sur base d échantillons artificiellement contaminés par une solution contenant des Clostridium perfringens. 2.1 Matériaux utilisés - Standard SRM Clostridium perfringens (lot : 4u-0801) - Eau stérile - Gélose TS (Lot : 9A0267) 2.2 Organisation L échantillon pour l essai consiste en 100ml d eau stérile contaminée avec une dilution du matériau certifié. La préparation de l échantillon pour l essai est décrite dans l annexe 1. 8 personnes ont participé à cette validation : A. Georges, A. Mandiki, F. Marlier, M. Martin, S. Petit, B. Polderman, C. Schauwers et MC Wilem. Chaque participant a suivi le mode opératoire décrit dans la procédure «Dénombrement des spores de microorganismes anaérobies sulfitoréducteurs dans l eau (37 C)» (détails de l analyse : annexe 1) 2.3 Résultats La répétabilité et l écart type de reproductibilité ont été calculés conformément à la norme ISO Les tableaux présentant les tests de Grubbs et de Cochran peuvent être trouvés dans l annexe 2. Le détail des résultats peut être consulté au laboratoire. Les résultats suivants ont été obtenus : Répétabilité : 0,22 log ufc/100 ml Ecart type de reproductibilité : 0,11 log ufc/100 ml Incertitude de mesure (2.8 x écart type de reproductibilité) : 0.28 log ufc/100 ml LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
7 2.4 Justesse Analyse d échantillons certifiés (échantillons à teneur garantie Senate) : Date Analyste Résultat obtenu (ufc/100ml) Résultat obtenu (log ufc/100ml) Résultat attendu (log ufc/100ml) Limite de dispersion (log) Août ± Ecart observé entre le résultat attendu et le résultat obtenu (log ufc/100 ml) 3 Tests interlaboratoires Résultats des tests interlaboratoires effectués en 2009 et 2010: Organisateur Date Analyste z-scores LGC Standards Juin Septembre Avril Juin Septembre Février Juillet LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
8 4 Conclusions Détermination de la répétabilité, de l écart type de reproductibilité et de l incertitude de mesure : Répétabilité : 0,22 log ufc/100 ml Ecart type de reproductibilité : 0,11 log ufc/100 ml Incertitude de mesure : 0.28 log ufc/100 ml Etude de la justesse Pour les tests retenus, les écarts observés par rapport au résultat attendu n excèdent pas les limites de dispersion indiquées par le fournisseur. La justesse a également été prouvée par l obtention de bons résultats lors de la participation à des tests interlaboratoires. Qualification du personnel Les personnes ayant participé à cette validation sont qualifiées pour le dénombrement de la flore mésophile aérobie totale. Elles devront régulièrement participer à des analyses interlaboratoires et obtenir des résultats satisfaisants. 5 Annexes - Annexe 1 : Préparation de l échantillon pour l essai - Annexe 2 : Analyse des résultats (Tests de Grubbs et de Cochran) - Annexe 3 : Photos LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
9 Annexe 1 : Préparation des échantillons pour l essai Détermination des conditions d analyse (durée d incubation des standards avant contamination des échantillons, dilutions utiles) Matrice : Eau stérile 9h00 Mise à température ambiante d un standard SRM Clostridium perfringens 10h00 Contamination de 100ml d eau stérile avec 5µl du SRM Traitement thermique : Bain-marie (102) 15minutes à 75 C Filtration sur membrane (pores de 0,2µm) Coulage du milieu TS Incubation à 37 C (incubateur 313) pendant 24h h00 Lecture de la gélose TS : 39 ufc/boîte Il a été décidé de contaminer des échantillons de 100ml d eau stérile avec 5 µl du SRM. LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
10 Détails de l analyse Chaque participant reçoit 6 flacons d eau contaminée. Ces flacons sont passés au bain-marie à 75 C pendant 15 minutes. Chacun suit le schéma d analyse suivant : Filtration des échantillons Placer les membranes filtrantes sur gélose TS Incubation 24h à 37 C (incubateur 313 (BP,CS,SP,MM,FM), incubateur 389 (AG,AM,MCW)) Lecture des boîtes LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
11 Annexe 2 : Analyse des résultats (tests de Grubbs et de Cochran) Le détail des résultats peut être consultés au laboratoire. LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
12 Annexe 3 : Photos Filtration de 100ml de l échantillon Aspect des colonies sur la gélose Tryptose-Sulfite : LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
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