Analyse d échantillons alimentaires pour la présence d organismes génétiquement modifiés Exemple de programme de travail (Base pour un cours d une semaine) M. Querci WORLD HEALTH ORGANIZATION REGIONAL OFFICE FOR EUROPE ORGANISATION MONDIALE DE LA SANTE BUREAU REGIONAL DE L'EUROPE WELTGESUNDHEITSORGANISATION REGIONALBÜRO FÜR EUROPA ВСЕМИРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ ЕВРОПЕЙСКОЕ РЕГИОНАЛЬНОЕ БЮРО
Exemple de programme de travail 2 1 ER JOUR : LUNDI 9:00 Présentation du cours, des organisateurs et des participants 9:30 Théorie : Introduction consacrée aux procédures générales de détection d OGM et contenu du cours PREPARATION D ECHANTILLONS : EXTRACTION D ADN 10:00 Pratique : Extraction d ADN par la méthode CTAB (1 e partie) 10:30 Pause café 11:00 Théorie : Electrophorèse sur gel pour l analyse d acides nucléiques Pratique : Préparation des gels d agarose 12:00 Pratique : Extraction d ADN par la méthode CTAB (2 e partie) 13:00 Déjeuner 14:00 Pratique : Extraction d ADN par la méthode CTAB (3 e partie) 15:15 Pratique : Chargement des échantillons sur gels d agarose 16:00 Pause café 16:20 Théorie : Présentation générale de la configuration d un laboratoire de PCR : problèmes, etc. 17:20 Pratique : Interprétation des gels d agarose
Exemple de programme de travail 3 2 E JOUR : MARDI PCR QUALITATIVE 9:00 Théorie : Introduction à la réaction de polymérisation en chaîne (PCR) et à l utilisation de la PCR pour l analyse de maïs et de soja transgéniques 9:30 Pratique : Application de la PCR pour le maïs MON810 et le soja Roundup Ready Tests spécifiques de l espèce : détection des gènes de la zéine et de la lectine 10:15 Pause café 10:40 Préparation des gels d agarose 11:00 Présentation : Echantillonnage et validation : concepts de base 12:30 Déjeuner 14:00 Chargement des échantillons sur gels d agarose 14:30 Théorie : Caractéristiques du soja Roundup Ready et du maïs MON810 et introduction à la PCR nichée spécifique aux OGM 15:15 Interprétation des gels d agarose (PCR spécifique à la zéine et à la lectine) 16:00 Pause café 16:15 Pratique: PCR pour le maïs MON810 et le soja Roundup Ready Tests spécifiques aux OGM : détection du promoteur 35S et du terminateur nos 17:00 Présentation : Introduction à la législation européenne sur les OGM
Exemple de programme de travail 4 3 E JOUR : MERCREDI PCR QUALITATIVE 9:00 Pratique : PCR nichée pour l analyse spécifique du maïs MON810 et du soja Roundup Ready (1 e réaction PCR) 10:00 Préparation des gels d agarose 10:30 Pause café 11:00 Présentation : Détection d OGM et management de la qualité 12:00 Chargement des échantillons sur gels d agarose (PCR du promoteur 35S et du terminateur nos) 12:30 Déjeuner 13:30 Pratique : PCR nichée pour la détection spécifique de maïs MON810 et de soja Roundup Ready (2 e réaction PCR) 14:00 Interprétation des gels d agarose (PCR du promoteur 35S et du terminateur nos) 15:00 Pratique : Préparation des gels d agarose 15:30 Pause café 15:45 Pratique : Chargement des échantillons sur gels d agarose (PCR nichée) 16:00 Théorie : Introduction à la PCR en temps réel (RT-PCR) pour la détection et la quantification d OGM 17:30 Pratique : Interprétation des gels d agarose (PCR spécifique du maïs MON810 et du soja Roundup Ready )
Exemple de programme de travail 5 4 E JOUR : JEUDI PCR QUANTITATIVE EN TEMPS REEL (RT-PCR) 9:00 Pratique : Quantification de l ADN et préparation d échantillons pour la PCR en temps réel (RT-PCR) 9:30 Pratique : PCR en temps réel (RT-PCR) pour l analyse spécifique du soja Roundup Ready à l aide du LightCycler (Roche) (groupe 1) de l ABI PRISM 7700 (Applied Biosystems) (groupe 2) Pause café 13:00 Déjeuner 14:00 Pratique : PCR en temps réel (RT-PCR) pour l analyse spécifique du soja Roundup Ready en utilisant le LightCycler (Roche) (groupe 2) l ABI PRISM 7700 (Applied Biosystems) (groupe 1) 15:30 Théorie : Analyse de données : Introduction à quelques outils statistiques 16:30 Pause café 17:00 Pratique : Poursuite de la PCR en temps réel (RT-PCR) pour l analyse spécifique du soja Roundup Ready
Exemple de programme de travail 6 5 E JOUR : VENDREDI ANALYSE QUANTITATIVE DU SOJA ROUNDUP READY PAR LA METHODE ELISA 9:00 Théorie : Approche sérologique de la détection d OGM 9:20 Pratique : ELISA 1 e partie 10:00 Pause café 10:30 Présentation : Approche sérologique de la détection d OGM 11:30 Pratique : ELISA 2 e partie 12:00 Déjeuner 13:00 Pratique : ELISA 3 e partie 14:00 Interprétation des résultats 15:00 Présentation : Domaines de discussions internationales concernant l utilisation en toute sécurité d organismes génétiquement modifiés 16:00 Discussion générale et conclusions