VALIDATIERAPPORT RAPPORT DE VALIDATION Analysemethode Méthode d analyse I-MET-LFSAL-119 Matériaux en mélamine : détermination de la teneur en formaldehyde après l essai de migration dans le simulant B. Techniek HPLC-UV Technique Matrix / matrixgroep Matériaux en mélamine Matrice / Groupe de matrices Datum laatste aanpassing / Date de la dernière adaptation 10/07/2013 Résumé des critères de performances : Modèle mathématique Linéaire Nombre de niveaux 5 d étalonnage Etalonnage Critère sur l étalonnage +/- 10% Etude inter-laboratoire -2< Z-score < 2 Justesse 0,5 x Norme 6% Norme 11% Incertitude de mesure 1,5 x Norme 5% Blanc matrice Absence de pic > à Spécificité 1,5 mg/l 0,5 x Norme 1,4% Norme 2,04% Fidélité intermédiaire 1,5 x Norme 0,38% LAB 00 P 180 F 001 I-MET model v.01 2011-07-01 1/15
. La validation répond aux exigences de la procédure LAB 00 P180. Le laboratoire qui veut appliquer cette méthode doit démontrer que les critères ci-dessous soient remplis : - Reproductibilité intra-laboratoire : doit satisfaire à l équation d Horwitz - Justesse : participation à un test inter-laboratoire et obtention de Z-score compris dans l intervalle +2 à -2. Historique de validation: Edition Révision par/date Motif de la révision Modifications 1 F-Etienne-Thewissen /avril 2013 Adaptation au nouveau template Adaptation du dossier de validation au nouveau template 2 F Etienne-Thewissen- 10/07/2013 Adaptation en fonction des remarques pour publication Mise en forme générale LAB 00 P 180 F 001 I-MET model v.01 2011-07-01 2/15
VALIDATIERAPPORT RAPPORT DE VALIDATION Analysemethode Méthode d analyse I-MET-LFSAL-119 Matériaux en mélamine : détermination de la teneur en formaldehyde après l essai de migration dans le simulant B. Techniek Technique Matrix / matrixgroep Matrice / Groupe de matrices Type validatie Type de validation Verantwoordelijke (Naam en functie) Responsable (Nom et fonction) Opgesteld door Rédaction par HPLC-UV Matériaux en mélamine Totale ETIENNE-THEWISSEN Fabian Responsable Section Phyto/Résidus ETIENNE-THEWISSEN Fabian Responsable Section Phyto/Résidus Signatures: Sé Medewerkers (Naam en functie) Collaborateurs (Nom et fonction) Periode van validatie Période de validation Methode goedgekeurd en geschikt bevonden door Méthode approuvée et jugé convenable pour la routine par Muriel Mertens Nathalie Dupuche Marie-Christine Offermanne Start - Début: novembre 2009 Fin: novembre 2012 ETIENNE-THEWISSEN Fabian Responsable Section Phyto/Résidus Signatures: Sé Hierna volgt een beschrijving van de resultaten van het validatieonderzoek zoals aangegeven in stap 8 van de procedure LAB 00 P 180. Ce qui suit est une description des résultats de l'étude de validation comme indiqué dans l'étape 8 de la procédure LAB P 00 180. LAB 00 P 180 F 001 I-MET model v.01 2011-07-01 3/15
Résumé des données de validation Table des matières : A. Calendrier des essais B. Critères de validation 1. Domaine de validation 2. Modèle de régression 3. Sélectivité 4. Répétabilité et reproductibilité intra-laboratoire 5. Justesse rendement apparent 6. Robustesse 7. LOD 8. LOQ C. Résultats 1. Domaine de validation 2. Modèle de régression 3. Sélectivité 4. Répétabilité et reproductibilité intra-laboratoire 5. Justesse rendement apparent 6. Robustesse 7. LOD 8. LOQ 9. Incertitude de mesure D. Conclusion Annexe 1 : Chromatogrammes Annexe 2 : Spectre de masses Annexe 3 : Flowchart de la méthode Annexe 4 : Photos LAB 00 P 180 F 001 I-MET model v.01 2011-07-01 4/15
A - Calendrier des essais : Date Analyste blanc méthode matrice dopé New Cal. Nbre level Contrôles 19/11/2009 MC OFFERMANNE OUI Essai 1 Répétabilité : simulant B dopé à 1 x la OUI 5 1ère ligne norme (15mg/l) : 6 x 03/12/2009 MC OFFERMANNE OUI Essai 2 Répétabilité : simulant B dopé à 1 x la OUI 5 1ère ligne norme (15mg/l) : 6 x 09/12/2009 MC OFFERMANNE OUI Essai 3 Répétabilité : simulant B dopé à 1x la OUI 5 1ère ligne norme (15mg/l) : 6 x 23/10/2012 Mertens.M OUI Essai 1 Répétabilité : simulant B dopé 0,5 X et OUI 5 1ère ligne 1,5 x la norme (6 x) 14/11/2012 Mertens.M OUI Essai 2 Répétabilité : simulant B dopé 0,5 X et OUI 5 1ère ligne 1,5 x la norme (6 x) 27/11/2012 Mertens.M OUI Essai 3 Répétabilité : simulant B dopé 0,5 X et 1,5 x la norme (6 x) OUI 5 1ère ligne LAB 00 P 180 F 001 I-MET model v.01 2011-07-01 5/15
B. Critères de validation 1. Domaine de validation Le domaine de validation de la méthode sera caractérisé par la gamme de concentration où la méthode aura été validée et les matrices analysées. 2. Modèle de régression La courbe d étalonnage sera construite sur un minimum de 5 points et le modèle de régression appliqué devra conduire à une déviation inférieure à 10% entre la concentration extrapolée et la concentration théorique pour un minimum de 4 points. 3. Sélectivité En fonction de la technique analytique, la spécificité d'une méthode peut être appréciée sur base du temps de rétention, de la spécificité avec un réactif, d'un spectre UV ou de masse,... 4. Répétabilité et reproductibilié intra-laboratoire La répétabilité et la reproductibilité intra-laboratoire seront calculées à partir de minimum 3 séries de 3 essais. Pour être dans les conditions de reproductibilité intra-laboratoire, il faut faire varier au moins un paramètre (analyste, jour, appareil,...) d'une série à l'autre. Les %RSDr et %RSD RW calculés devront être inférieurs ou égaux aux valeurs maximales admissibles découlant de l'équation d'horwitz : - %RSD r < CV Hor x 2/3 - %RSD Rw < CV Hor 5. Justesse Rendement apparent En l absence de CRM, le rendement apparent sera estimé à la place de la justesse. Le rendement sera estimé au départ d extraits supplémentés et devra être compris entre 70% et 120%. Dans la mesure du possible, le laboratoire participera à des études inter-laboratoires et la justesse sera estimée sur base du Z-score : -2 < Z-score <2 LAB 00 P 180 F 001 I-MET model v.01 2011-07-01 6/15
6. Robustesse Les facteurs principaux risquant d influencer le résultat doivent être envisagés au cours de la validation de la méthode (Ex : opérateur, jours, colonne, insert, entretien du système, etc ). La robustesse est évaluée par le respect des critères de qualité de la méthode. 7. LOD La limite de détection de la méthode correspondra à pouvoir détecter l'analyte dans la matrice à la moitié de la concentration du premier niveau d'étalonnage. 8. LOQ La limite de quantification de la méthode correspondra à pouvoir quantifier l'analyte dans la matrice à la concentration du premier point d'étalonnage. 1. Domaine de validation C. Résultats La méthode est entièrement validée à : - 0,5 x LMS - 1 x LMS - 1,5 x LMS LMS : limite de migration spécifique La limite de migration spécifique du formaldehyde est de 15 mg/l (Directive UE 10/2011). 2. Modèle de régression Le modèle de régression entre les surfaces absolues et les concentrations calculé sur 5 niveaux (3 mg/l 30 mg/l) conduit à une déviation relative inférieure à +/- 10% entre la concentration mesurée et la concentration théorique pour 4 niveaux. Les tableaux ci-dessous présentent les résultats de la régression linéaire lors de 3 séries d essais : Concentration mg/l 23/10/2012 (MM) - % 14/11/2012 (MM) - % 27/11/2012 (MM) - % 3 0,0 0,0 0,0 6-0.8-0,5-0,6 9-0,6-0,6-0,7 18-0,4-0,4-0,3 30-0,2-0,2-0,2 LAB 00 P 180 F 001 I-MET model v.01 2011-07-01 7/15
Le modèle de régression linéaire entre les surfaces absolues et les concentrations pondérées satisfait au critère de déviation acceptable. 3. Spécificité Aucun pic supérieur à 0,5 x Level1 n est observé au temps de rétention du formaldehyde (+/- 5%) lors de l injection de la solution d extraction. Formaldehyde Level 1 Blanc (simulant B) 4. Fidélité intermédiaire (Répétabilité Reproductibilité) A l aide d une d une solution mère en formaldehyde, le simulant B a été supplémenté et les essais ont été réalisés à : - 7,5 mg/l : 6 essais par série, 3 séries - 15 mg/l : 6 essais par série, 3 séries - 22,5 mg/l : 6 essais par série, 3 séries LAB 00 P 180 F 001 I-MET model v.01 2011-07-01 8/15
CV r - % CV r Max (2/3 CV Horwitz)-% Fidélité intermédiaire : CVR - % CV R Max (CV Horwitz)-% 0,5 x N (7,5 mg/l) 0,13 7,8 1,04 11,8 1 x N (15 mg/l) 1,6 6,7 2,4 10,6 1,5 x N (22,5 mg/l) 0,15 6,7 0,38 10,0 Les résultats de répétabilité et de reproductibilité rencontrent les critères d Horwitz. La méthode est répétable et reproductible. 5. Justesse Rendement apparent 5.1 Justesse En l absence de matériaux de référence, la justesse de la méthode a été estimée au travers de participations à des études inter-laboratoires. Etude 1 Etude 2 Etude 3 Etude 4 Z-score 0.71 1.57 0.82 0.2 Valeur cible mg/l 9.1 18.9 229.5 13.9 Valeur laboratoire mg/l 9.9 21.9 242.7 14.2 5.2 Rendement apparent Le rendement apparent de la méthode doit être compris dans l intervalle de la valeur cible associé à l incertitude de mesure. 23/10/2012 Dopés à 0,5 x la norme (7,5 mg/l) Conc. Théorique (mg/l) Conc. Mesurée (mg/l) Rendement - % 1 dopé à 0,5 x norme 7,65 7,62 99,6 2dopé à 0,5 x norme 7,65 7,63 99,6 3dopé à 0,5 x norme 7,65 7,59 99,2 4dopé à 0,5 x norme 7,65 7,61 99,4 5dopé à 0,5 x norme 7,65 7,61 99,4 6dopé à 0,5 x norme 7,65 7,61 99,4 LAB 00 P 180 F 001 I-MET model v.01 2011-07-01 9/15
14/11/2012 Dopés à 0,5 x la norme (7,5 mg/l) Conc. Théorique (mg/l) Conc. Mesurée (mg/l) Rendement % 1 dopé à 0,5 x norme 7,57 7,41 97,8 2dopé à 0,5 x norme 7,57 7,41 97,9 3dopé à 0,5 x norme 7,57 7,40 97,8 4dopé à 0,5 x norme 7,57 7,42 98,0 5dopé à 0,5 x norme 7,57 7,43 98,1 6dopé à 0,5 x norme 7,57 7,40 97,7 27/11/2012 Dopés à 0,5 x la norme (7,5 mg/l) Conc. Théorique (mg/l) Conc. Mesurée (mg/l) Rendement - % 1 dopé à 0,5 x norme 8,74 8,54 97,7 2dopé à 0,5 x norme 8,74 8,53 97,6 3dopé à 0,5 x norme 8,74 8,53 97,6 4dopé à 0,5 x norme 8,74 8,54 97,7 5dopé à 0,5 x norme 8,74 8,53 97,6 6dopé à 0,5 x norme 8,74 8,53 97,6 19/11/09 Dopés à 1 x la norme (15mg/l) Conc. Théorique (mg/l) Conc mesurée (mg/l) Rendement - % E1 E2 E3 E4 E5 E6 14,93 14,60 14,14 13,81 15,46 15,18 14,24 13,92 15,38 14,98 16,37 15,84 03/12/09 Dopés à 1 x la norme (15mg/l) 97,8 97,6 98,2 97,8 97,4 96,7 Conc théorique (mg/l) Conc mesurée (mg/l) Rendement - % E1 15,90 15,21 95,7 E2 16,26 14,92 91,8 E3 13,85 13,03 94,1 E4 13,87 13,11 94,5 E5 14,78 13,81 93,4 E6 14,11 13,23 93,8 LAB 00 P 180 F 001 I-MET model v.01 2011-07-01 10/15
09/12/09 Dopés à 1 x la norme (15mg/l) Conc théorique (mg/l) Conc mesurée (mg/l) Récupération - % E1 11,61 10,61 91,4 E2 11,35 11,03 97,2 E3 12,50 12,11 96,8 E4 11,11 10,77 96,9 E5 12,12 11,69 96,5 E6 11,30 10,99 97,3 23/10/2012 Dopés à 1,5 x la norme (22,5 mg/l) Conc. Théorique (mg/l) Conc. Mesurée (mg/l) Récupération - % 1 dopé à 1,5 x la norme 23,05 22,34 96,9 2 dopé à 1,5 x la norme 23,05 22,47 97,5 3 dopé à 1,5 x la norme 23,05 22,49 97,6 4 dopé à 1,5 x la norme 23,05 22,48 97,6 5 dopé à 1,5 x la norme 23,05 22,47 97,5 6 dopé à 1,5 x la norme 23,05 22,45 97,4 14/11/2012 Dopés à 1,5 x la norme (22,5 mg/l) Conc. Théorique (mg/l) Conc. Mesurée (mg/l) Récupération - % 1 dopé à 1,5 x la norme 22,81 22,26 97,6 2 dopé à 1,5 x la norme 22,81 22,25 97,5 3 dopé à 1,5 x la norme 22,81 22,25 97,5 4 dopé à 1,5 x la norme 22,81 22,24 97,5 5 dopé à 1,5 x la norme 22,81 22,25 97,5 6 dopé à 1,5 x la norme 22,81 22,25 97,5 27/11/2012 Dopés à 1,5 x la norme (22,5 mg/l) Conc. Théorique (mg/l) Conc. Mesurée (mg/l) Récupération - % 1 dopé à 1,5 x la norme 26,43 25,57 96,8 2 dopé à 1,5 x la norme 26,43 25,58 96,8 3 dopé à 1,5 x la norme 26,43 25,59 96,8 4 dopé à 1,5 x la norme 26,43 25,60 96,9 5 dopé à 1,5 x la norme 26,43 25,60 96,9 6 dopé à 1,5 x la norme 26,43 25,57 96,8 L ensemble des rendements observés lors de la validation répondent au critère imposé. LAB 00 P 180 F 001 I-MET model v.01 2011-07-01 11/15
6. Robustesse L effet jours, opérateurs et colonnes font partie des paramètres qui ont variés au cours des essais de validation. Ces variations sont inclues dans les résultats de validation. La robustesse sera évaluée au cours du temps au départ des cartes de contrôle construites sur des échantillons supplémentés en formaldéhyde à la concentration de 15 mg/l. 7. LOD LOQ La valeur moyenne du bruit de fond mesuré entre 3,25 minutes et 3,75 minutes est de 1250 µv. Le signal de l injection d une solution à 3 mg/l est de 125 000 µv. Au vu du rapport signal sur bruit S/N de 100 (125 000 / 1250), les limites de détection et de quantification n ont pas été déterminées. LAB 00 P 180 F 001 I-MET model v.01 2011-07-01 12/15
8. Incertitude de mesure L incertitude de mesure est calculée selon la procédure centralisée P508 avec un coefficient d élargissement k=2. Concentration mg/l Incertitude de mesure élargie - % 0,5 x N (7,5 mg/l) 6 1 x N (15 mg/l) 11 1,5 x N (22,5 mg/l) 5 L incertitude de mesure maximale (11%) déterminée dans le cadre du dossier de validation sera appliquée à la méthode. Conclusions : Les données présentées dans le cadre de la validation de l analyse du formaldehyde montrent que l application du mode opératoire décrit dans la méthode METLFSAL-119 permet de conduire à des résultats répétables et reproductibles lors de l analyse à des concentrations supérieure ou égales à 7,5 mg/l. La validation de la méthode sera poursuivie par les 3 lignes de contrôles : - 1 ère ligne : échantillon à 15 mg/l dans chaque séquence d analyse et suivi en carte de contrôle - 2 ème ligne : échantillon en aveugle - 3 ème ligne : tests inter-laboratoires LAB 00 P 180 F 001 I-MET model v.01 2011-07-01 13/15
Annexe : Photo Exemple de matériaux en mélamine soumis aux essais de migration Simulant après l essai de migrationet dérivatisation LAB 00 P 180 F 001 I-MET model v.01 2011-07-01 14/15
Analyse par HPLC-UV LAB 00 P 180 F 001 I-MET model v.01 2011-07-01 15/15