Laboratoire de Biochimie et de Génie Enzymatique des Lipases



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Le Laboratoire de Biochimie et de Génie Enzymatique des Lipases de l ENIS est spécialisé dans l étude des relations structure-fonctions des enzymes impliqués dans la dégradation des lipides et responsables de l obésité. Le laboratoire s intéresse à l étude des enzymes de différentes et à l étude de certaines applications biotechnologiques. Les travaux de recherche au laboratoire sont axés sur plusieurs disciplines : biochimie, génie génétique, biologie moléculaire, modélisation, microbiologie... Le laboratoire est constitué de deux équipes de recherche : 1- Enzymes lipolytiques de microorganismes et applications biotechnologiques. Les principales activités de recherche de cette équipe sont : - Isolement et identification de microorganismes à partir de biotopes extrêmes Tunisiens et/ou marocain et optimisation des conditions de production des lipases. - Purification et caractérisation biochimique et moléculaire des enzymes isolées. - Modélisation et/ou cristallisation des lipases. - Amélioration de la biodégradabilité des effluents d industrie agroalimentaires riches en lipides (industrie laitière, transformation de la viande et des produits de la mer) par addition d enzymes lipolytiques. - Recherche d inhibiteurs de lipase qui peut être utilisé comme un médicament anti-obésité. - Valorisation des sous produits agricoles et d industries alimentaires (grignon d olive, son de blé, écorce d orange, écorce de sésame.) comme support et /ou substrat pour la production d enzymes lipolytiques par fermentation en milieu solide. - Collaboration avec des industriels pour tester l incorporation des molécules à haute valeur ajoutée présentant le label «bio». 2- Enzymes lipolytiques d animaux inférieurs terrestres et marins Les principales activités de recherche de cette équipe sont : - Caractériser les enzymes digestifs d animaux terrestres inférieurs (scorpion ) et produire des anticorps spécifiques pour la cytolocalisation de ces enzymes. - Explorer les systèmes digestifs des animaux marins pour pouvoir dégager des traits communs entre les systèmes lipolytiques des différentes classes d animaux marins (poissons osseux, poissons cartilagineux, arthropodes ). - Isoler les gênes codant pour les lipases de scorpion, de raie et de l anguille pour déterminer les séquences complètes en acides aminés de ces enzymes digestives et établir les relations phylogénétiques avec les autres familles de lipases. - Explorer les possibilités d utilisation un de ces enzymes lipolytiques d animaux inférieurs comme agents thérapeutiques potentiels.

- Purifier et caractériser des phospholipases de différentes origines (hépatopancréas, pancréas, venins, microorganismes). - Relations structure-fonctions de phospholipases anti-inflammatoires. - Relation entre activité phospholipasique et maladies. - Recherche d inhibiteurs de phospholipases anti-inflammatoires. Dernières publications (2007-2009) 2007 1. Habib Mosbah, Adel Sayari, Robert Verger and Youssef Gargouri. Gly311 residue triggers the enantioselectivity of Staphylococcus xylosus lipase: A monolayer study. J Colloid Interface Sci. (2007) 310:196-204. 2. Nacim Zouari, Nabil Miled, Souad Rouis and Youssef Gargouri. Scorpion digestive lipase: a member of a new invertebrate's lipase group presenting novel characteristics. Biochimie. (2007) 89:403-409. 3. Slim Cherif, Ahmed Fendri, Nabil Miled, Heykel Trabelsi, Hafedh Mejdoub and Youssef Gargouri. Crab digestive lipase acting at high temperature: Purification and biochemical characterization. Biochimie. (2007) 89: 1012-1018. 4. Hanen Ghamgui, Nabil Miled, Maha Karra-chaâbouni and Youssef Gargouri. Immobilization studies and biochemical properties of free and immobilized Rhizopus oryzae lipase onto CaCO3: A Comparative study. Biochemical Engineering Journal (2007) 37:34-41. 5. Adel Sayari, Habib Mosbah, Robert Verger and Youssef Gargouri. The N-terminal His-tag affects the enantioselectivity of Staphylococcal lipases: A monolayer study. Journal of Colloid and interface Science. (2007) 313: 261-267. 6. Habib Mosbah, Adel Sayari, Habib Horchani and Youssef Gargouri. Involvemnt of Gly311 residue on substrate discrimination, ph and temperature dependency of recombinant Staphylococcus xylosus lipase: A study with emulsified substrate. Protein Expression and purification. (2007) 55: 31-39. 7. Abir Ben Bacha, Ahmed Fendri, Youssef Gargouri, Hafedh Mejdoub and Nabil Miled. Proteolytic Cleavage of two bird pancreatic lipases: production of an active N-terminal domain. Pancreas. (2007). 35: 55-61. 8. Adel Sayari et Youssef Gargouri. Synthèse enzymatique de triaglycérols homogènes dans un milieu sans solvent. Arch.Inst.Pasteur ; Tunis (2006) 83 : 1-4.Publié en 2007. 9. Ahmed Fendri, Fakher Frikha, Nabil Miled, Abir Ben Bacha and Youssef Gargouri. Modulating the activity of avian pancreatic lipases by alkyl chain reacting with an accessible sulfhdryl group. BBRC. (2007) 360: 765-771. 10. Abir Ben Bacha, Youssef Gargouri, Sofiane Bezzine, Habib Mosbah and Hafedh Mejdoub.Ostrich pancreactic phospholipase A2: Purification and biochemical characterization. Journal of Chromatography B (2007)

11. Riadh Ben Salah, Hanen Ghamgui, Nabil Miled, Hafedh Mejdoub and Youssef Gargouri. Production of butyl acetate ester by lipase from novel strain of Rhizopus oryzae. Journal of Bioscience and Bioengineering. (2007) 103: 368-372. 12. Imen Aissa, Mohamed Bouaziz, Hanen Ghamgui, Amel Kammoun, Nabil Miled, Sami Sayadi and Youssef Gargouri. Optimization of Lipase-Catalysed synthesis of acetylated Tyrosol by response surface methodology J. Agric. Food Chem. (2007) 55: 10298-10305. 2008 13. Slim Cherif, Fakher Frikha, Youssef Gargouri and Nabil Miled. Fatty acid composition of green crab (Carcinus mediterraneus) from the Tunisian Mediterranean coasts. Food Chemistry (2008) 111:930-933 14. Maher Kammoun, Youssef Gargouri and Sofiane Bezzine. Purification and Characterization of the First Reptile Pancreactic Lipase. Pancreas (2008) 36: 302-308 15. Fakher Frikha, Moncef Ladjimi, Youssef Gargouri and Nabil Miled. 3-D structure modelling and biochemical characterization of the Staphylococcus simulans lipase: conformational changes, substrate specificity and novel structural features. FEMS Microbiol Lett (2008) 286: 207-221 16. Maha Karra-Chaabouni, Ines Bouaziz, Sami Boufi, Ana Maria Botelho do Rego and Youssef Gargouri. Physical immobilization of Rhizopus oryzae lipase onto cellulose substrate: Activity and stability. Colloids and Surface B: Biointerfaces (2008) 66:168-177 17. Josiane De Caro, Cecilia Eydoux, Slim Cherif, Regine Lebrun, Youssef Gargouri, Frederic Carrière and Alain De Caro. Occurrence of pancreatic lipase-related protein-2 in various species and its relationship with herbivore diet. Comparative Biochemistry and Physiology B (2008) 150 (1): 1-9 18. Faouzi Ben Rabah, Fakher Frikha, Walid Kamoun, Lobna Belbahri, Youssef Gargouri and Nabil Miled. Culture of Staphylococcus xylosus in fish processing by product-based media for lipase production. Letters in Applied Microbiology (2008) ISSN 0266-8254 19. Faouzi Ben Rabah, Sana Smaoui, Fakher Frikha, Youssef Gargouri and Nabil Miled. Inhibotory Effects of Tunisian Marine Algal Extracts on Digestive Lipases. Appl Biochem Biotechnol (2008) doi: 10.1007 2009 20. Slim Cherif and Youssef Gargouri. Thermoactivity and effects of organic solvents on digestive lipase from hepatopancreas of the green crab. Food Chemistry. (2009), 116: 82-86 21. Dhouha Ghribi, Adel Sayari, Youssef Gargouri and Sofiane Bezzine. Improvement of Staphylococcus xylosus lipase production through optimization of the culture conditions. Eur. J. Lipid ScI. Technol (2009) doi: 10.1002/ ejlt. 200900004

22. Ikram Jemel, Ahmed Fendri, Youssef Gargouri, and Sofiane Bezzine. Kinetic properties of dromedary pancreatic lipase: A comparative study on emulsified and monomolecular substrate. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2009) 70 : 238-242 23. Habib Horchani, Habib Mosbah, Nadia Ben Salem, Youssef Gargouri and Adel Sayari. Biochemical and molecular characterisation of a thermoactive, alkaline and detergent-stable lipase from a newly isolated Staphylococcus aureus strain. Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic (2009) 56: 237-245 24. Aida Karray, Fakher Frikha, Abir Ben Bacha, Yassine Ben Ali and Youssef Gargouri. Biochemical and molecular characterization of purified chicken pancreatic phospholipase A 2.FEBS Journal (2009) 276: 4545-4554 25. Slim Cherif, Abir Ben Bacha, Yassine Ben Ali, Habib Horchani, Wiem Rekik, Youssef Gargouri. Crab digestive phospholipase: A new invertebrate member. Bioresource Technology, Volume 101, Issue 1, January 2010, Pages 366-371. 26. Raoudha Zouari-Kessentini, José Luis, Aida Karray, Olfa Kallech-Ziri, Najet Srairi-Abid, Amine Bazaa, Erwann Loret, Sofiane Bezzine, Mohamed El Ayeb, Naziha Marrakchi. Two purified and characterized phospholipases A2 from Cerastes cerastes venom that inhibits cancerous cell adhesion and migration. Toxicon, (2009) 53: 444-453. 27. Slim Cherif, Abir Ben Bacha, Yassine Ben Ali, Habib Horchani, Wiem Rekik, Youssef Gargouri. Crab digestive phospholipase: A new invertebrate member (2009) doi:10.1016/j.biortech.2009.07.031 28. Habib Horchani, Selmene Ouertani, Youssef Gargouri, Adel Sayari.The N- terminal His-tag and the recombination process affect the biochemical properties of lipase produced in Echerichia coli. Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic. doi:10.1016/j.molcatb.(2009).07.002 29. Habib Horchani, Moncef Chaâbouni, Youssef Gargouri, Adel Sayari. Solvent-free lipase-catalyzed synthesis of longchain starch esters using micro-wave heating. Optimization by response surface methodology. Carbohydrate Polymers 10.1016/j.carbpol.2009.09.003

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