Association de Biologie Praticienne 70 avenue des Gobelins 75013 PARIS - Tél : 01 43 31 94 87 - Fax : 01 43 37 39 92 Email : secretariatabp@orange.fr Enregistrée à la Préfecture de la Région de l Ile de France, délégation à la formation professionnelle, sous le N 11750 397 375 SIRET : 321 609 489 00034 - APE 913 E Dr Annick DATRY Service de Parasitologie et Mycologie Hôpital Pitié Salpêtrière 47 bd de l Hôpital 75013 Paris Tél : 01.42.16.01.11 Email : annick.datry@psl.aphp.fr Paris, le 14 avril 2012 Cher confrère, Concerne : Résultats des confrontations de Biologie Médicale: Série 1 Mycologie 2012 Nombre de réponses reçues : 230 sur 242 1) Echantillon 1 (bouchon bleu) Il s agit d un jeune homme de 20 ans qui présente des lésions desquamantes au niveau de la plante des pieds et des lésions inter-orteils érythémateuses 1.1 - Résultats Trichophyton interdigitale 1.2 - Techniques d identification Le prélèvement a été ensemencé sur milieu de Sabouraud-chloramphénicol-actidione. Examen macroscopique +++ Examen microscopique : prélever un fragment de la colonie que l on dilacère dans 2 gouttes de lactophénol ou bleu-lactophénol, ou utiliser la technique de la cellophane adhésive. On recherche au microscope les éléments caractéristiques des dermatophytes : filaments, microconidies, macroconidies et ornementations particulières 1.3 - Caractéristiques morphologiques : - Voir annexe 1 1.4 - Thérapeutique recommandée Terbinafine crème pendant 2 semaines au moins. 1.5 - Commentaires concernant les réponses - Réponses exactes : Trichophyton interdigitale ou Trichophyton mentagrophytes, 162 fois - Réponses inexactes ou incomplètes : - Trichophyton rubrum, 45 fois - Trichophyton sp, 12 fois - Epidermophyton floccosum,4 fois - Microsporum persicolor, 2 fois - Candida albicans, 1 fois - Onychola cadanensis, 1 fois - Scopulariopsis sp, 1 fois - pas de réponse, 2 fois - Réponse non retournée, 12fois Réponses inexactes ou incomplètes : voir diagramme en annexe 5 2) Echantillon 2 (bouchon vert) LBA chez une patiente allogreffée de moelle osseuse et qui présente à J60 une pneumopathie aiguë 2.1 - Résultats Aspergillus nidulans
2.2 - Techniques de laboratoire utilisées Ensemencement sur milieu de Sabouraud - chloramphénicol sans actidione Même technique d identification que pour l échantillon 1 2.3 - Caractéristiques morphologiques - Voir annexe 2 2.4 - Thérapeutique recommandée Le traitement médical repose sur le voriconazole en première intention (800mg/jour en 2 prises séparées de 12h et loin des repas à J1 puis, 400mg/jour en 2 prises idem) 2.5 - Commentaires concernant les réponses - Réponses exactes : - Aspergillus nidulans 117 fois - Réponses inexactes ou incomplètes : - Aspergillus terreus,34 fois - Aspergillus sp, 25 fois - Aspergillus versicolor, 21 fois - Scedosporium sp,5 fois - Chysosporium, 3 fois - Penicillium sp, 3 fois - Scopulariopsis sp, 2 fois - Acremonium sp, 1 fois - Fusarium solani, 1 fois - Geotrichum sp, 1 fois - Mucoracée, 1 fois - Trichosporon mucoïdes, 1 fois - Trichosporon sp, 1 fois - Non identifié/pas de réponse, 14 fois - Réponse non retournée, 12fois Réponses inexactes ou incomplètes : voir diagramme en annexe 5 3) Echantillon 3 (à Ensemencer) Ecouvillon prélevé à l orifice d un cathéter 3.1 - Résultats Candida parapsilosis 3.2 - Techniques de laboratoire utilisées Ensemencer sur milieu de Sabouraud-chloramphénicol et Sabouraud-chloramphénicol-actidione ou ensemencement direct sur milieu chromogène (chromagar) 3.3 - Caractéristiques morphologiques - Voir annexe 3 3.4 - Thérapeutique recommandée Il est recommandé de traiter par fluconazole (antifongigramme souhaitable) 3.5 - Commentaires concernant les réponses - Réponses exactes : - Candida parapsilosis, 215fois - Réponses inexactes ou incomplètes : - Candida albicans, 2 fois - Candida famata, 4 fois - Candida glabrata, 1 fois - Candida krusei, 1 fois
Trichophyton interdigitale - Candida sake, 2 fois - Candida sp, 2 fois - Cryptococcus laurentii, 1 fois - Levure non identifiée / Pas de réponse, 2 fois - Réponse non retournée, 12 fois Réponses inexactes ou incomplètes : voir diagramme en annexe 5 ANNEXE 1 Ce dermatophyte est la variété anthropophile de T. mentagrophytes. Cette variété est strictement anthropophile et se transmet comme T. rubrum par l intermédiaire de lieux publics humides (piscine, sauna ).Elle donne des onyxis et des dermatophyties des pieds (intertrigos interdigitoplantaires). Les atteintes des grands plis sont exceptionnelles et elle ne donne pas d atteinte des cheveux ou des poils. Elle peut être responsable de dishydrose palmaire d origine allergique Diagnostic mycologique Aspect macroscopique Sa croissance est rapide : colonie plane, poudreuse devenant rapidement duveteuse ; couleur blanc à crème au recto, jaune, rouge ou brune au verso ; elle peut être d emblée duveteuse et on doit la différencier de T. rubrum, surtout si le revers est rouge-brun. Aspect microscopique - Filaments en raquettes avec de nombreuses ramifications courtes à angle droit donnant un aspect en «croix de Lorraine». - Très nombreuses microconidies rondes disposées en acladium sur les ramifications. - Macroconidies en massue inconstantes voire absentes. - Ornementations particulières Les vrilles apparaissent vers le 8 ème jour et sont inconstantes Les organes pectinés en «bois de cerf» sont en général absents Aspergillus nidulans ANNEXE 2 Les Aspergillus sont des moisissures cosmopolites, très répandues dans l environnement. Ils vivent aux dépens des matières organiques en décomposition et se développent dans les silos, les composts, les balles de foin mais aussi les céréales et diverses plantes. Aspergillus nidulans est une espèce très largement distribuée dans le monde, principalement isolée des sols des régions tempérées et sub-tropicales. Cette moisissure est surtout responsable de sinusites et plus rarement de pneumopathies. Diagnostic mycologique A l examen direct, on observe des filaments mycéliens septés, de 3à 4µm de diamètre La culture est rapide à 27 et 37 sur milieu de Sabouraud sans actidione. A l examen macroscopique, on observe des colonies poudreuses, planes de couleur vert cresson ; les cleistothèces (forme sexuée) sont fréquents et donnent l aspect de points jaunes sur la colonie. Le revers est rouge foncé. A l examen microscopique, on voit : - tête aspergillaire en colonne courte - des conidiophores très courts (60 à 200µm), sinueux et colorés en brun - vésicules hémisphériques colorées en brun - 2 séries de stérigmates situées sur la partie supérieure des vésicules - conidies globuleuses, échinulées - cléistothèces de couleur brun rouge ; asques transparents contenant 8 ascospores de couleur rouge vif - cellules en noisettes, toujours présentes autour des cléistothèces ANNEXE 3 : Candida parapsilosis Candida parapsilosis est une levure fréquente sur la peau. Elle peut être responsable de lésions cutanées et d onyxis mais surtout de septicémies de plus en plus fréquentes. Elle colonise facilement les catéthers en réalisant un biofilm. Diagnostic mycologique Ensemencement sur Sabouraud sans actidione ou sur milieu «Chromagar». Examen macroscopique : - Sur milieu de Sabouraud, colonie blanche à crème, plane, crèmeuse, lisse, parfois brillante
- Sur milieu «Chromagar», colonie rose plane Examen microscopique : levures ovoïdes, mesurant 3-4 X 3-7 µm Test de blastèse : absence de filamentation Sur PCB ou RAT, pseudofilamentation grêle avec peu de blastospores Assimilation des sucres : - galactose, saccharose, maltose, tréhalose positive - lactose, raffinose négative Echantillon 1 (bouchon bleu) Trichophyton interdigitale ANNEXE 4 : Iconographie Onyxis à dermatophyte - Trichophyton mentagrophytes var. interdigitale Trichophyton mentagrophytes culture sur milieu de sabouraud
Trichophyton mentagrophytes Aspect microscopique Echantillon 2 (bouchon vert) Aspergillus nidulans Poumon : Aspergillose invasive chez un sujet immunodéprimé (TDM)
Poumon : Aspergillose invasive aspect radiologique (RP) Poumon : filament mycéliens de type aspergillaire (imprégnation argentique)
Aspergillus nidulans - culture sur milieu de sabouraud Aspergillus nidulans aspect microscopique : tête aspergillaire et cellules en noisette
Echantillon 3 (Selles) Candida parapsilosis Aspects macroscopiques des levures en culture (forme blastospores) Aspects microscopiques des levures (forme blastospores)
ANNEXE 5 : Diagrammes Echantillon 1 (bouchon bleu) Trichophyton interdigitale MYCOSES Nombre de réponses 230 sur 242 inscrits % Identification des mycoses Trichophyton interdigitale ou mentagrophytes 162 70,43 Trichophyton rubrum 45 19,57 Trichophyton sp 12 5,22 Epidermophyton floccosum 4 1,74 Microsporum persicolor 2 0,87 Candida albicans 1 0,43 Onychola cadanensis 1 0,43 Scopulariopsis sp 1 0,43 Pas de réponse 2 0,87 Total 230,00 100,00
Echantillon 2 (bouchon vert) Aspergillus nidulans MYCOSES Nombre de réponses 230 sur 242 inscrits % Identification des mycoses Aspergillus nidulans 117 50,87 Aspergillus terreus 34 14,78 Aspergillus sp 25 10,87 Aspergillus versicolor 21 9,13 Scedosporium sp 5 2,17 Chysosporium 3 1,30 Penicillium sp 3 1,30 Scopulariopsis sp 2 0,87 Acremonium sp 1 0,43 Fusarium solani 1 0,43 Geotrichum sp 1 0,43 Mucoracée 1 0,43 Trichosporon mucoïdes 1 0,43 Trichosporon sp 1 0,43 Non identifier/pas de réponse 14 6,09 Total 230,00 100,00
Echantillon 3 Candida parapsilosis MYCOSES Nombre de réponses 230 sur 242 inscrits % Identification des mycoses Candida parapsilosis 215 93,48 Candida famata 4 1,74 Candida albicans 2 0,87 Candida sake 2 0,87 Candida glabrata 1 0,43 Candida krusei 1 0,43 Cryptococcus laurentii 1 0,43 Candida sp 2 0,87 Levure non identifiée / Pas de réponse 2 0,87 Total 230,00 100,00 Les résultats et les commentaires sont rédigés par le Dr Annick DATRY, Email : annick.datry@psl.aphp.fr Les échantillons sont préparés par Martine Palous, Technicienne de Laboratoire Les statistiques, les graphiques et la mise en page sont réalisés par Sadi SEHRINE, Email : sadi.sehrine@psl.aphp.fr