8ème Journées Biotechnologiques, 20-23 Déc. 2009, Sousse, Association Tunisienne de Biotechnologie Effect de Lactobacillus paracasei sur la cholestérolémie du lapin Dilmi-Bouras A., Koïche M. et Tabti M. - Laboratoire Bioressources Naturelles Locales, Université H.B. de Chlef Bp. 151, Chlef (02000), Algérie. - E-mail : dilmibourasa@hotmail.com Résumé : Certaines bactéries lactiques présentent un intérêt probiotique pour le consommateur. Dans cette étude, deux souches de Lactobacillus paracasei (Lp6 et Lp9) sont examinées pour leur aptitude à diminuer le taux de cholestérol total, de cholestérol des HDL et de cholestérol des LDL chez le lapin hypercholestérolémique. Les résultats obtenus n indiquent aucune modification ni du taux de cholestérol total ni de ses fractions pour le régime standard (T) ou additionné de lait fermenté (LF). Par contre, ils révèlent des augmentations significatives du taux de cholestérol total, de cholestérol des HDL et de cholestérol des LDL des lapins consommant en plus du régime standard du cholestérol (Ch) et du cholestérol avec du lait fermenté (Ch + LF). Cependant, le taux de cholestérol total, de cholestérol des HDL et de cholestérol des LDL est plus faible chez les lapins recevant du lait fermenté en plus du régime standard et du cholestérol. Les résultats montrent aussi que lorsqu on arrête les supplémentations du régime standard les taux de cholestérol total, de cholestérol des HDL et de cholestérol des LDL reviennent aux valeurs initiales après 14 jours. L addition du lait fermenté au régime standard des lapins n a aucun effet sur le taux de cholestérol total et de ses fractions, quand ces derniers sont initialement normaux. Par ailleurs, le nombre (> 10 8 cellules / g) et la durée de survie de Lp6 et de Lp9 au niveau tube digestif des lapins, pendant la supplémentation du régime par le lait fermenté et deux jours après l arrêt de celui-ci, semblent très satisfaisantes pour tirer profits de leurs effets bénéfiques. Mots-clés. Lactobacilus paracasei, cholestérol. 1. INTRODUCTION
Des concentrations élevées de cholestérol sérique sont associées au développement de maladies cardiovasculaires, hypercholestérolémie, lithiases vésiculaires..., et sont l une des causes les plus importantes de mortalité dans le monde. Des résultats de travaux récemment publiés, indiquent que la réduction du taux excessif de cholestérol dans le sang diminue les risques de ces maladies. L hypothèse que des laits fermentés enrichis de bactéries spécifiques sont capables de diminuer le taux de cholestérol est maintenant sujette à de nombreuses recherches. La présente étude est consacrée à examiner les effets de l ingestion d un lait fermenté par deux souches de Lb. paracasei (LpC6 et LpC9) (souches avec des propriétés technologiques excellentes) sur le taux du cholestérol total, du cholestérol des HDL et du cholestérol des LDL du lapin hypercholestérolémique. 2- MATERIELS ET METHODES 2.1. Souches de bactéries utilisées Lactobacillus paracasei 6 (Lp6) et Lactobacillus paracasei 9 (Lp9), deux souches utilisées pour la fabrication du lait fermenté (LF), proviennent du laboratoire de Lactologie de l Université Publique de Navarra, Espagne. 2.2. Lapins L expérimentation est réalisée sur des lapins mâles de même espèce (O. cuniculus). 3. RESULTATS ET DISCUSSIONS 3.1. Evolution du cholestérol des HDL Le RS seul (T) ou additionné de LF n'ont pas modifié le taux de cholestérol total des lapins ni pendant l'expérimentation ni après l arrêt des supplémentations. Alors que ce taux augmente très significativement (P < 0,01) de 0,515 g / l (soit 66 %) au bout de 42 jours, lorsque le cholestérol est ajouté au RS (Ch). De même, lorsqu'on ajoute du LF et Ch au RS (LF + Ch) le taux de cholestérol total des lapins augmente significativement (P > 0,05) de 0,103 g / l (soit 13,12 %) par rapport au RS seul. Après arrêt de la supplémentation du régime en cholestérol, le taux de cholestérol sanguin des lapins diminue pour atteindre sa valeur initiale, identique à celle du témoin, au bout de 7 à 14 jours.
A travers les résultats trouvés, nous pouvons conclure que Lp6 et Lp9 du lait fermenté (LF) diminuent de façon appréciable et très significative (P < 0,01) le taux excessif du cholestérol total sanguin des lapins. 0,9 0,8 0,7 Cholestérol total g/l) 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0 T Ch LF LF+Ch 0 14* 21 28 35 42 49 56** 63 70 Jours Figure 1: Evolution du cholestérol total chez le lapin avec différents régimes. (*- début des supplémentations; **- arrêt des supplémentations; T: Temoin; Ch : Cholestérol; LF : Lait fermenté). Par ailleurs, nous avons remarqué qu'en présence d'un taux normal de cholestérol sanguin, l'action hypocholestérolémiante du lait fermenté (LF) n'est pas significative (P > 0,05) et le taux du cholestérol des lapins reste inchangé durant toute la période de l'expérimentation. Ce phénomène est peut être dû à la régulation endogène du cholestérol. Dans les conditions physiologiques (chez l homme ou l animal) l apport exogène du cholestérol hépatique aux divers tissus est suffisant pour que la synthèse endogène dans ces tissus soit inhibée (Agerback et al., 1995; Weil, 1997). De même, l arrivée du cholestérol dans les cellules permet l autorégulation de la synthèse cellulaire du cholestérol et par la suite son entrée dans le sang est également autorégulée (Chanu et al., 1998). Il est possible que les Lp6 et Lp9 en association (LF) assimilent le cholestérol, et que cette assimilation soit compensée par la synthèse endogène.
3.2. Evolution du cholestérol des HDL Cette analyse est réalisée dans le but de voir quelle est la fraction du cholestérol préférentiellement assimilée et dans quelle proportion, par les deux bactéries (Lp6 et Lp9) du lait fermenté (LF). Le RS seul (T) ou supplémenté avec du lait fermenté (LF) n ont pas modifié d'une manière significative (P > 0,05) le taux de cholestérol des HDL des lapins (figure 2). Par contre, pour les deux groupes de lapins, recevant en plus du RS du Ch (Ch) ou du Ch et du LF (LF + Ch), une augmentation significative (P = 0,02) du taux de cholestérol des HDL est enregistrée, respectivement de 0,074 g / l (25,69 %) et de 0,024 g / l (8,42 %). Cette augmentation diminue rapidement et très significativement (P < 0,008), pour atteindre la valeur initiale 7 à 14 jours après l'arrêt des supplémentations. 0,4 0,35 0,3 Cholestérol HDL (g/l) 0,25 0,2 0,15 0,1 0,05 T Ch LF LF+Ch 0 0 14* 21 28 35 42 49 56** 63 70 Jours Figure 2: Evolution du cholestérol des HDL chez le lapin avec différents régimes. (*- début des supplémentations; **- arrêt des supplémentations; T: Temoin; Ch : Cholestérol; LF : Lait fermenté).
Ces résultats montrent l'action modérée de Lp6 et de Lp9 du lait fermenté (LF) sur le taux de cholestérol des HDL, car les taux assimilés de ce dernier restent toujours inférieurs à ceux des taux de cholestérol total. 3.3. Evolution du cholestérol des LDL Les résultats de la figure 3 ne révèlent aucun changement significatif (P > 0,01) de cholestérol des LDL des lapins recevant le RS seul (T) ou additionné de LF (LF) durant toute la durée de l'expérimentation. Par contre, une augmentation très importante (0,363 g / l ou 74,08 %) du taux de cholestérol des LDL est observée chez les lapins recevant, en plus du RS, du Ch (Ch). Ce taux important de cholestérol des LDL diminue progressivement pour atteindre la valeur initiale 14 jours après l'arrêt de la supplémentation en cholestérol. L analyse statistique de ces résultats est très significative (P < 0.01). 0,9 0,8 0,7 Cholestérol LDL (g/l) 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0 T Ch LF LF+Ch 0 14* 21 28 35 42 49 56** 63 70 Jours Figure 3: Evolution du cholestérol des LDL chez le lapin avec différents régimes. (*- début des supplémentations; **- arrêt des supplémentations; T: Temoin; Ch : Cholestérol; LF : Lait fermenté).
Par ailleurs, une augmentation plus faible du taux de cholestérol des LDL de 0,119 g / (26,09 %), jusqu'au 42 ème jour de supplémentation, est enregistrée chez les lapins recevant du LF (LF), en plus du RS et du Ch (LF + Ch). Ainsi, l'addition du LF au RS et du Ch semble diminuer significativement (P < 0,05) le taux de cholestérol LDL en comparaison avec les taux observés chez les lapins ne recevant pas de LF. Ceci montre clairement que l abaissement du taux de cholestérol des LDL est étroitement lié à la présence des deux bactéries du LF dans le régime. 4- CONCLUSION Les résultats obtenus suggèrent que Lp6 et Lp9 auraient un rôle dans la réduction des taux excessifs du cholestérol total et de cholestérol des LDL. Cette diminution pourrait être le résultat d une assimilation directe du cholestérol ou de la production de substances inhibant la synthèse du cholestérol. 5- REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES Dilmi-Bouras A. (1991). Assimilation du cholestérol par les bactéries lactiques. Thèse de magister, INA El-harrach, Alger, 149 p. Dilmi-Bouras A., Sadoun D. (2002). Effet du yaourt à Streptococcus thermophilus et Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus sur le cholestérol sanguin chez le lapin. Méd. Nutr., 38 (1), p. 24-32. Dilmi-Bouras A. (2006). Assimilation (in vitro) of cholesterol by yogurt bacteria. Ann. Agric. Environ. Med., 13, N 1, p. 49-53. Draeger B., Ziegenhorn J., Wahlefeld AW. (1982). Improved method for the quantitation of serum HDL-cholesterol. Clin. Chem., 28 (126), p. 1574. Siedel J., Hagele EO., Ziegenhorn J., Wahlefeld AW. (1983). Reagent for the enzymatic determination serum total cholesterol with improved lipolytic efficiency. Clin. Chem., 29, p. 1075-1080. Tamaï Y., Yoshmitsu N., Watanabe Y., Kuwabara Y., Nagai S. (1996). Effect of milk fermented by culturing with various lactic acid bacteria and a yeast on serum cholesterol level in rats. J. Ferment. Bioeng., 81 (2), p.181-182. Wieland H., Cremer P., Siedel D. (1983). Specific preparation of LDL in complex with heparin at ph 5,12. Clin. Chem., 29, p. 81.