Introduction Ce TP a pour but de découvrir les deux types métaboliques des levures, la respiration puis la fermentation. Matériel nécessaire Console Foxy, réf. 485 000 Capteur CO 2, réf. 482 044 Sonde CO 2, réf. 453 076 1
Matériel nécessaire Bioréacteur, réf. 453 064 Capteur O 2, réf. 482 039 Sonde O 2, réf. 453 001 Capteur Ethanol, réf. 482 053 Sonde Ethanol, réf. 453 084 2
Raccorder la console Foxy au secteur 3
Connecter le capteur Oxymètre (O 2 ) 4
Connecter la sonde O 2 au capteur O 2 5
S assurer que la sonde O 2 est étalonnée Si elle ne l est pas, suivre la procédure d étalonnage 6
Connecter le capteur CO 2 mètre 7
Connecter la sonde CO 2 au capteur CO 2 mètre 8
S assurer que la sonde CO 2 est étalonnée Si elle ne l est pas, suivre la procédure d étalonnage 9
Connecter le capteur Ethanol 10
Connecter la sonde Ethanol au capteur Ethanol 11
S assurer que la sonde Ethanol est étalonnée Si elle ne l est pas, suivre la procédure d étalonnage 12
Raccorder le Bioréacteur au secteur et ôter le capot 13
Diluer environ 10 g de levures fraîches dans 1 Litre d'eau. Placer le récipient sur un agitateur magnétique, avec un bulleur, au minimum 48 heures (les levures doivent être affamées mais bien vivantes...) NB : avec des levures lyophilisées, ½ sachet par litre. Attention : si la concentration de levure est trop importante, cela risque d'obturer la membrane de la sonde à O 2 Préparation des levures 14
Préparer une solution de glucose à 10 g/l Préparation du glucose 15
Introduire la solution de levures affamées dans la cuve du bioréacteur 16
Remettre le capot et placer le barreau aimanté dans la cuve 17
Refermer le couvercle de la cuve Il doit se produire un débordement, qui assure l'absence d'air dans la cuve 18
Mettre l'interrupteur de l'agitation en position I 19
Introduire délicatement les sondes O 2, CO 2 et Ethanol dans le Bioréacteur 20
Montage 21
Connecter la console Foxy à l ordinateur 22
L Atelier Scientifique se lance automatiquement Choisir l Atelier Scientifique Sciences de la Vie et de la Terre Sélectionner le module Généraliste 23
Si un panneau Attention se trouve dans la partie gauche de la fenêtre, attendre que celui-ci disparaisse 24
Ce panneau signifie que le capteur CO 2 mètre et / ou le capteur Ethanol ne sont pas encore opérationnels Cliquer sur le panneau, la ou les fenêtres suivantes apparaissent puis cliquer sur OK 25
Glisser-déposer le capteur CO 2 mètre sur l axe des ordonnées 26
Cliquer sur CO2 eau 27
Glisser-déposer le capteur Oxymètre sur l axe des ordonnées 28
Cliquer sur O2 Eau 29
Glisser-déposer le capteur Ethanol sur l axe des ordonnées 30
Cliquer sur Ethanol dans l eau puis sur 20g/L 31
Glisser-déposer l horloge sur l axe des abscisses 32
Régler une durée égale à 10 min (par exemple) et un nombre de points égal à 301 33
Lancer l acquisition, cliquer sur le Feu tricolore La fenêtre ci-dessous, apparaît, il est alors possible de donner un nom à cette expérimentation Cliquer sur Lancer 34
Au bout de 2 minutes, injecter quelques ml de solution de glucose à l aide d une seringue dans l orifice prévu à cet effet 35
Exemple de courbe Conclusion Ce TP a permis de découvrir les deux types métaboliques des levures, la respiration en milieu aérobie puis la fermentation en milieu anaérobie. 36
-Le taux d oxygène (courbe rouge) décroît rapidement: les levures respirent et consomment tout l oxygène présent dans le bioréacteur. - Dès que le taux d oxygène est nul nous remarquons une croissance rapide du taux d éthanol (courbe rose): c est la fermentation. - Parallèlement nous constatons une forte croissance du taux de dioxyde de carbone (courbe verte). 37