Réticulum Endoplamsique
Réticulum endoplasmique Système membranaire de ramifications constitués de chenaux aplatis (saccules) et de tubes interconnectés Proportion variable entre REG et REL selon le type cellulaire Rugueux (REG) Composition membranaire 70% Protéines 30 % Lipides saccules applaties Présence de ribosomes sur la face cytoplasmique Lisse (REL) Citernes tubulaires
Fonctions du Réticulum endoplasmique granulaire (REG) 1) Protéogénèse (Formation des protéines) -Traduction Protéines à destinées extracellulaire Protéines membranaires 2) Accumulation d ions calcium Ca ++ (rôle dans la signalisation cellulaire comme second messager) 3) Détoxification de divers composés toxiques (Ex: C 2 H 5 OH; Médicaments,...) Principalment le foie (Enzyme cytochrome P450 ) transformation substrats hydrophobes en composés hydrophiles (oxydation) permettant leurs excrétions (Rein)
Distinction Ribosmomes libres vs Ribosmes liés au REG 1) Protéogénèse REG (Ribosome liés) - Traduction Protéines à destinées extracellulaire Protéines membranaires 2) Protéogénèse REG (Ribosome non liés - polysomes) - Protéines propre à la cellule - Protéines du cytosquelette - Mitochondries - Protéines membranes face cytoplasmique
Fonctions liées à l activité du Réticulum endoplasmique lisse Fonctions principales différentes en fonction du type cellulaire (Tissus) 1) Synthèse des lipides et des hormones stéroïdes: Ovaires & Testicules (Testostérone; Oestrogènes) Surrénale (Cortisol; minéralocorticoïdes) 2) Accumulation d ions calcium Ca ++ (rôle dans la signalisation cellulaire comme second messager) 3) Détoxification de divers composés toxiques (Ex: C 2 H 5 OH; Médicaments,...) Principalment le foie (Enzyme cytochrome P450 ) transformation substrats hydrophobes en composés hydrophiles (oxydation) permettant leurs excrétions (Rein)
REG
REG - Synthèse Protéique n Présence d une Séquence signal reconnue par une particule de reconnaissance du signal (SRP) composée de 6 polypeptides et un ARN 7SL n Liaison de SRP à un récepteur de SRP localisé à la surface cytosolique du RER n Libération de la SRP et translocation du polypeptide à travers un canal transmembranaire (translocon) n Clivage de la séquence signal par une peptidase du signal
REG - Synthèse Protéique (Signal de reconnaissance)
N -Glycosylation des dans le REG
Motifs glycoprotéiques
REG VÉSICULE Golgi
Appareil de Golgi
Golgi - Présentation Empilement d'au moins une demi-douzaine de sacs membranaires aplatis qu'on appelle des saccules ou citernes. Situé en périphérie du noyau Compartiments (séparables par centrifugation différentielle) et marquage en ME Trois compartiments Cis -Médian - Trans Trans Golgi Network - TGN (tri des protéines)
Appareil de GOLGI
Fonction Appareil de Golgi 1) Tri dans le réseau trans-golgien et orientation vers des destinations distinctes via des vésicules différentes 2) Incorporation dans des vésicules tapissées de clathrine (protéines dont la sécrétion est VECTRORISÉE ) 3) Maturation des protéines Synthèse des polysaccharides complexes de la matrice extracellulaire) nglycosylation des aa (Sérine -thréonine-fonction OH) (Enzymes - glycosyltransférases
Marquage compartiments Golgi Osmium Mannosidase II Nucléoside diphosphatase
TGN - Tri Tri dans le réseau trans-golgien et détermination des destinations des différentes vésicules «adressage» non sélectif Sécrétion constitutive (Façon continue) «adressage» sélectif Vésicules recouvertes de clathrine Sécrétion régulée (en réponse à des stimulis)
Récepteur des vésicules Cf. neurosécrétion
Traffic Cellulaire
Récepteur - Transduction des signaux Récepteurs couplés aux Protéines G
Activation des protéines G indépendamment du récepteur (RCGP)
Récepteurs couplés aux Protéines G
Outils biochimiques permettant l étude du traffic vésiculaire Marquage par des acides aminés radioactifs (leucine tritiée) Centifugation différentielle (Séparation par différence de densité des compartiments membranaires) Ex Lysosomes) Mesure des activités enzymatiques REG Golgi N exocytose Vésicules endocytose Endosome Lysosome Phagososme G r a d i e n t Ribosomes Vésicules golgiennes Vésicules exocytose Endosome Lysosome Phagososme
Marquage des protéines à la leucine radioactive
1) Ligand libre 2) Récepteur - ligand 3) vésicule endocytaire (mantelée -clathrine) 4) «Recyclage» clathrine 5) Vésicule «non mantelée» 6) Endosome pécoce (ph 6.0) 7) Recyclage récepteur à la membrane 8-9-10) Formation Lysosomes 12) Corps résiduel
Endocytose Principale voie d entrée des protéines: Historiquement Pinocytose Liquide Phagocytose Nourriture Trois voies d entrées : PHAGOCYTOSE PINOCYTOSE (Absence de clathrine) ENDOCYTOSE ADSORPTIVE (Par Récepteur interposé) Receptor-mediated endocytosis (Squelette de Clathrine)
Endocytose
Endocytose Fluide Pinocytose Phagocytose Endocytose Endocytose Adsorptive (Récepteur mb.) Dissociation récepteur et ligand (LDL) Récepteur & ligand recycle (Transferrine) Récepteur & ligand dégradé (Lysosome) Transcytose (IGA dans le lait maternel)
Pinocytose (Endocytose Fluide) Capture et absorption d une goutelettes de liquide du milieu extracellulaire Phagolysosome Capture de protéines du sérum, de la matrice extracellula ire
Phagocytose Ingurgitation de grosses particules Bactéries Débris cellulaires Cellules entières.
Phagocytose Signaux cellulaires guident la capture Chimiotactisme Formation de Pseudopodes (encercle la particule) Phagosome ( diamètre > 25 µm) Phagosome + Lysosome = Phagolysosome Marcophages ( Rate - éliminent cellules du sang périmées - 10 11 Globules Rouges/Jour ) Globules blancs (Neutrophiles) - Défense contre les infections
Endocytose Adsorptive Récepteur Interposé (Receptor-Mediated Endocytosis) Capture sélective de macromolécules «confinement» à certains domaines membranaires par présence récepteurs spécifiques Clathrine!! Fusion avec endosomes
Endocytose Adsorptive (Récepteur interposé) Clathrine
Clathrine
Endocytose Récepteur aux LDL
Exemples d endocytose Adsorptive le récepteur aux LDL et l Internalisation du Cholesterol Particule LDL
Endocytose Récepteur LDL
La Dynamine Pince la vésicule en formation
Hypercholestérolémie (Trop de cholestérol dans le sang) Incapacité d internaliser les récepteurs aux LDL mutation au niveau du site de liaison des protéines de clathrine
Le Cycle de la transferrine À la fois le récepteur et le ligand sont recyclés Fonction apport du Fer à la cellule
Exocytose- Exemple Glandes salivaires Pancréas
Exocytose Exocytose Constitutive A lieu de manière continue Sécrétion de protéines par le hépatocytes (cellules du foie) -Albumine Exocytose régulée Médiateurs (Synapse du neurone) Glande endocrines système immunitaires (Anticorps) Sécrétion Insuline (Pancréas)
Lysosome
Lysosomes Lysosomes = "estomacs" cellulaires Fournissent des Acides aminés (AA) AA pris en charge par les molécules d'arnt spécifiques Substrat pour les ribosomes pour y être assemblés en protéines Hydrolyse des macromolécules et recyclage des petites molécules diffusant dans le cytosplasme ph acide maintenu parla pompe à protons (H + -ATPase)