EXPERTISE, PRESTATIONS DE SERVICE ET RELATIONS CLIENTS QUALITE DES LABORATOIRES MEDICAUX COMMISSION DE BIOLOGIE CLINIQUE COMITE DES EXPERTS

EXPERTISE, PRESTATIONS DE SERVICE ET RELATIONS CLIENTS QUALITE DES LABORATOIRES MEDICAUX COMMISSION DE BIOLOGIE CLINIQUE COMITE DES EXPERTS EVALUATION EXTERNE DE LA QUALITE DES ANALYSES EN BIOLOGIE CLINIQUE ISP-2014/3/Allergie/73 Expertise, prestations de service et relations clients Qualité des laboratoires médicaux Rue J. Wytsman, 14 1050 Bruxelles Belgique www.wiv-isp.be

ISSN: 2294-3390 COMITE DES EXPERTS Nom Institution Tél. Email Secrétariat ISP 026425521 dcarlier@wiv-isp.be Coordinateur Bernard China ISP 026425385 bchina@wiv-isp.be Coordinateur remplaçant Wim Coucke ISP 026425523 wcoucke@wiv-isp.be Experts E. Van Hoeyveld KUL 016 34 79 10 erna.vanhoeyveld@uzleuven.be E. Cavalier/ Romy Gadisseur ULg 04 366 88 17 Etienne.cavalier@chu.ulg.ac.be Romy.gadisseur@chu.ulg.ac.be J. Smitz VUB 02 477 50 50 Johan.smitz@uzbrussel.be Réunion du comité d experts: Non Autorisation de diffusion de rapport: Par Bernard China, coordinateur d enquête le 12/09/2014 Tous les rapports sont également consultables sur notre site web: https://www.wiv-isp.be/qml/activities/external_quality/rapports/_fr/rapports_annee.htm FORM 43/124/F v4 2/21

TABLE DES MATIERES INTERPRETATION DU RAPPORT INDIVIDUEL... 4 LES ECHANTILLONS... 5 LA VALEUR CIBLE.... 5 LES STATISTIQUES... 5 REPRESENTATION GRAPHIQUE... 6 CAS CLINIQUE 2014-7... 7 CAS CLINIQUE 2014-8... 12 CAS CLINIQUE 2014-9... 17 FORM 43/124/F v4 3/21

INTERPRETATION DU RAPPORT INDIVIDUEL En plus de ce rapport global, vous avez également accès à un rapport individuel via le toolkit. Ci-dessous vous pouvez trouver des informations qui peuvent aider à interpréter ce rapport. La position de vos résultats quantitatifs est donnée en comparaison avec tous les résultats de tous les participants et en comparaison avec les résultats des participants utilisant la même méthode que vous. Les informations suivantes sont reprises: Votre résultat (R) Votre méthode La médiane globale (M g ): la valeur centrale des résultats fournis par tous les laboratoires, toutes méthodes confondues. L écart-type global ( g ): mesure de la dispersion des résultats fournis par tous les laboratoires, toutes méthodes confondues. La médiane globale de votre méthode (M m ): la valeur centrale des résultats fournis par les laboratoires utilisant la même méthode que vous. L écart-type de votre méthode ( m ): mesure de la dispersion des résultats fournis par les laboratoires utilisant la même méthode que vous. Le coefficient de variation (exprimé en ) pour tous les laboratoires et pour les laboratoires utilisant la même méthode que vous: m = ( m / M m ) * 100 () et g = ( g / M g ) * 100 (). Le score Z: la différence entre votre résultat et la médiane de votre méthode (exprimée en unités d écart type): Z m = (R - M m ) / m et Z g = (R - M g ) / g. Le score U: l écart relatif de votre résultat par rapport à la médiane de votre méthode (exprimé en ): U m = ((R - M m ) / M m ) * 100 () et U g = ((R - M g ) / M g ) * 100 (). l interprétation graphique de la position de votre résultat (R), d en côté en comparaison avec tous les résultats de tous les participants et de l autre côté en comparaison avec les résultats des participants utilisant la même méthode que vous, basée sur la méthode de Tukey, pour chaque paramètre et pour chaque échantillon analysé. R : votre résultat M m/g : médiane H m/g : percentiles 25 et 75 I m/g : limites intérieures (M ± 2.7 ) O m/g : limites extérieures (M ± 4.7 ) FORM 43/124/F v4 4/21

Le graphique global et celui de votre méthode sont exprimés selon la même échelle, ce qui les rend comparables. Ces graphiques vous donnent une indication approximative de la position de votre résultat (R) par rapport à la médiane (M m/g ). Vous pouvez trouver plus de détails dans les 3 brochures qui sont disponibles sur notre site web à l adresse suivante: https://www.wiv-isp.be/qml/index_fr.htm (Choisir «Brochures» dans le menu proposé) ou directement à l adresse suivante: https://www.wiv-isp.be/qml/activities/external_quality/brochures/_fr/brochures.htm Les 3 documents suivants apparaissent: 1) Brochure d information sur les programmes d évaluation externe de la qualité pour les laboratoires cliniques (Brochure d information générale sur l évaluation externe). 2) Brochure statistique (Procédure générale de calcul statistique mis au point par le professeur Albert). 3) Traitement des valeurs censurées (Procédure de calcul statistique appliquée aux valeurs censurées rédigée par le Professeur Albert). Les échantillons Les 3 échantillons 2014.7, 2014.8 et 2014.9 sont des sérums de patients. Les échantillons ont été prélevés et distribués par «Streekziekenhuis Koningin Beatrix», (Winterswijk, Pays-Bas) selon la norme ISO13485 :2003. Les sérums sont négatifs pour les virus suivants : H, HBV et VIH. L homogénéité des échantillons a été testée suivant la méthode décrite par Thompson (Fearn et Thompson, 2001). La stabilité des échantillons a également été testée. Après calculs, les échantillons ont été considérés comme homogènes et stables. La valeur cible. La valeur cible est la médiane de la méthode si le nombre de résultats pour cette méthode est supérieur ou égal à 6. La valeur cible est la médiane globale pour les participants dont la méthode comprend moins de 6 résultats. Les statistiques Globalement et pour chaque échantillon et chaque paramètre, lorsque n 6, la médiane, la déviation standard (), le coefficient de variation () et le nombre de laboratoires ont été calculés. Outre les statistiques expliquées ci-avant pour le rapport individuel, un test de Wilcoxon a été appliqué pour comparer les méthodes entre elles pour les paramètres par échantillon où n 6 et si le nombre de valeurs censurées n a pas empêché le calcul des statistiques descriptives (médiane, déviation standard). FORM 43/124/F v4 5/21

Représentation graphique A côté des tableaux de résultats, une représentation graphique en "boîte à moustaches" est parfois ajoutée. Elle reprend les éléments suivants pour les méthodes avec au moins 6 participants: un rectangle qui va du percentile 25 (P 25 ) au percentile 75 (P 75 ) une ligne centrale représente la médiane des résultats (P 50 ) une ligne inférieure qui représente la plus petite valeur x > P 25-1.5 * (P 75 - P 25 ) une ligne supérieure qui représente la plus grande valeur x < P 75 + 1.5 * (P 75 - P 25 ) tous les points en dehors de cet intervalle sont représentés par un rond. O = P 75 + 3 * (P 75-P 25) I = P 75 + 1.5 * (P 75-P 25) x < P 75 + 1.5 * (P 75 -P 25 ) LIMITES DE TUKEY H M H I = P 25-1.5 * (P 75-P 25) P 50 P 75 P 25 x > P 25-1.5 * (P 75 -P 25 ) < valeur < limite de quantification O = P 25-3 * (P 75-P 25) O I H M H I O M - 4.7σ M - 2.7σ P 25 P 7 M + 2.7σ M + 4.7σ Limites correspondantes en cas de distribution normale FORM 43/124/F v4 6/21

Cas Clinique 2014-7 Anamnèse Une femme de 34 ans qui est connue pour avoir le nez bouché de façon persistante par des polypes nasaux récurrents chroniques pour lesquels elle a déjà été opérée 3 fois par un ORL. De plus, elle souffre pendant la saison du rhume des foins, de façon intermittente de démangeaisons des yeux et des symptômes asthmatiques. Elle se plaint également lors de l'exposition aux animaux à fourrure tels que les chats et les chiens. Elle se plaint de symptômes compatibles avec un syndrome d allergie orale (pomme, noisette). Elle a eu des symptômes plus violents (allergie orale) tout en mangeant une glace avec une garniture à base de noix (qui se sont avérée être des noisettes). Elle a ensuite ressenti une sensation de gonflement de la gorge pour laquelle elle a été examinée et traitée aux urgences. L anamnèse allergique n a rien révélé de plus. Tests cutanés: - avec des allergènes des voies respiratoires: Positifs pour le pollen d arbres (2), les pollens de graminées (1,2); le pollen d armoise (1,4); l épithélium de chat (1,1); l épithélium de chien (1); les poils de cobaye (0,8); l épithélium de cheval (0,7); les spores d Alternaria alternata (0,8); les spores de Cladosporium herbarum (0,7). - avec des allergènes alimentaires: Positifs pour les noisettes (1); les amandes (0,7); les noix (1), la pomme (0,9); négatifs pour le reste. IgE spécifiques Mélange de pollens de graminées(gx3): 23 Mélange de pollens d arbres (TX9): 24 Mélange de pollens de mauvaises herbes (WX3): <0.1 Mélange de spores de moisissures (MX1): <0.1 Acariens de maison D.pter(D1): 33.5 Epithélium de chat (E1): 8.34 Epithélium de cheval (E3): <0.1 Epithélium de chien (E5): 0.9 Froment (F4): <0.1 Arachide (F13): <0.1 Soja (F14): <0.1 Blanc d oeuf (F1): <0.1 Lait (F2): <0.1 Poisson (F3): <0.1 Conclusion/diagnostic 1. Polypose nasale récidivante chronique 2. Sensibilisation à IgE (anamnésique suspicion d'allergie) au pollen des arbres, des graminées et les squames de chat et de chien. La pertinence clinique de sensibilisation à IgE à d'autres allergènes respiratoires connus n'est pas claire. 3. Syndrome d allergie orale 4. En fonction de la dose, des symptômes d allergie alimentaire plus graves pour la noisette. Remarque: Tests cutanés avec des allergènes des voies respiratoires et des poisons sont réalisés avec des extraits d ALK- Abello ; les résultats sont exprimés en index HEP (positif à partir de 0,5) : Acarien de maison D.pter; graminées mélange-5; arbres mélange-3; pollen d armoise, épithélium de chat, épithélium de chien, épithélium de cheval, poils de lapin, poils de cobaye, poils d hamster, des spores des moisissures Aspergillus fumigatus, Cladosporium herbarum et Alternaria alternata. Sur demande: venin de guêpes et d abeilles. Les tests cutanés avec des allergènes alimentaires sont réalisés avec des extraits d ALK Abello et des parties de produits frais (test prick to prick aux aliments natifs), les résultats sont exprimés en index HEP (positif à partir de 0,5). Lait de vache, blanc d oeuf, soja, arachide, noisette, amande, noix, noix de cajou, pomme, cabillaud, crevettes. Dosages d IgE spécifiques (Siemens) réalisés dans le laboratoire de référence de SKML à Winterswijk, Paysbas et tous les titres sont exprimés en. Nég <0,1 NB : le texte original a été rédigé en néerlandais par les allergologues hollandais et traduit pas l ISP. FORM 43/124/F v4 7/21

Tableau 1. Dosage des IgE totales () dans l échantillon 2014-7 globalement et par méthode. IgE totales 2014-07 045 Non-Isotopic - Abbott Quantia (6K42-01) 289.3 1 046 Siemens Dimension Vista - nephelometry 376.0 381.0 2 N labs* 048 Non-Isotopic - Siemens Immulite 409.0 27.4 6.7 33 049 Non-Isotopic-Siemens-ADVIA Centaur 328.1 336.2 355.7 3 061 Non-Isotopic-Thermo/Thermo/Immunocap 342.0 22.2 6.5 75 064 Non-Isotopic- Diasys IgE FS 320.0 1 081 Non-Isotopic-Beckman Coulter-Access 362.6 400.9 417.3 424.0 451.0 088 Non-Is. -Roche-Elecsys/ Mod E / cobas e 391.9 23.6 6.0 14 Global results (all methods and all measuring systems) 361.0 48.9 13.5 134 5 *: Quand N<6, les statistiques ne sont pas calculées et les valeurs individuelles sont indiquées en italique. N=33 N=75 N=14 IGE 300 350 400 450 500 048 061 088 Figure 1. Distribution des résultats () par méthode (en abscisse). Représentation en boîtes à moustaches (si n 6). Le test de Wilcoxon indique que la méthode 61 (Thermo) est significativement différente (p<0,01) des méthodes 48 (Siemens) et 88 (Roche) alors que les méthodes 48 et 88 ne sont pas significativement différentes (p=0.156). Commentaire. Quelle que soit la méthode, les IgE sont augmentées. Cliniquement, les différences observées n ont pas de pertinence. FORM 43/124/F v4 8/21

Tableau 2. Dosage des IgE spécifiques () de l allergène d1 dans l échantillon 2014-7.. d1 dermatophagoides pteronyssinus 2014-07 002 PHARMACIA THERMO/FLUORESCENT 18.10 1.78 9.8 87 005 SIEMENS IMMULITE 2000/CHEMILUMINESCENCE N labs 25.70 1.63 6.3 40 Global results (all methods and all measuring systems) 19.00 5.30 27.9 127 N=87 N=40 d1 Dermatophag pt 15 20 25 30 002 005 Figure 2. Représentation en boîte à moustaches des dosages par méthode d IgE () spécifiques de l allergène d1 pour l échantillon 2014-7. Le test de Wilcoxon indique une différence significative (p<0,01) pour les méthodes 002 et 005. Commentaire. Pour les deux méthodes, des IgE spécifiques à l allergène e1 ont été détectés. FORM 43/124/F v4 9/21

Tableau 3. Dosage des IgE spécifiques () de l allergène e5 dans l échantillon 2014-7. e5 Dog dander 2014-07 002 PHARMACIA THERMO/FLUORESCENT 1.33 0.13 9.8 87 005 SIEMENS IMMULITE 2000/CHEMILUMINESCENCE N labs 1.14 0.09 7.5 40 Global results (all methods and all measuring systems) 1.25 0.15 12.2 127 002 N=87 005 N=40 Figure 3. Représentation en boîte à moustaches des résultats () pour les méthodes 002 et 005. Le test de Wilcoxon indique que les méthodes 2 et 5 sont significativement différentes (p=0.02). Commentaire. Pour les deux méthodes, des anticorps IgE spécifiques ont été détectés. FORM 43/124/F v4 10/21

Tableau 4. Dosage des IgE spécifiques () de l allergène T3 dans l échantillon 2014-7 t3 Betula verrucosa 2014-07 002 THERMO THERMO/FLUORESCENT 9.65 0.76 7.8 83 005 SIEMENS IMMULITE 2000/CHEMILUMINESCENCE N labs 39.90 2.15 5.4 37 Global results (all methods and all measuring systems) 10.00 21.27 212.7 120 n=83 n=37 t3 Betula verrucosa 10 20 30 40 002 005 Figure 4. Représentation en boîte à moustaches des résultats () pour les méthodes 002 et 005. Le test de Wilcoxon indique que les méthodes 2 et 5 sont significativement différentes (p<0.01). Commentaire. Pour les deux méthodes, des anticorps IgE spécifiques ont été détectés. FORM 43/124/F v4 11/21

Cas Clinique 2014-8 Anamnèse Un homme de 25 ans qui dans son enfance a souffert d'eczéma atopique. Quand il était bébé et jeune enfant, il a à plusieurs reprises fait des réactions anaphylactiques (objectivées médicalement et traitées) après avoir mangé du lait de vache, de l'arachide ou du blanc d oeuf. Les résultats des tests de détection des IgE spécifiques étaient autrefois fortement positifs pour ces aliments. Depuis, il suit un régime alimentaire. Il souffre d allergie persistante des voies respiratoires (rhinites et asthme) surtout pendant la saison des pollens par temps sec et ensoleillé et aussi par exposition à des animaux à fourrure, tels que les chats et les chiens. Il a des symptômes compatibles avec un syndrome d allergie orale (pomme, noisette, amande, noix, cerise). Il a récemment bu accidentellement du lait de vache sans développer de réaction allergique. L anamnèse allergique ne révèle rien de plus. Tests cutanés: - avec des allergènes respiratoires: Positifs pour les acariens de maison (1,4); les pollens d arbres (1,2); les pollens de graminées (1,2); l épithélium de chat (1,2); l épithélium de chien (1,4); l épithélium de cheval (1,3); Cladosporium (0,8) et Alternaria (0,8); négatifs pour le reste. - avec des allergènes alimentaires: Positifs pour le lait de vache (0,8), les arachides (2,2), le blanc d oeuf (2), la noisette (1,2); l amande (1,1); la pomme (1,1); négatifs pour le reste. IgE spécifiques Mélange de pollens de graminées(gx3): <0,1 Mélange de pollens d arbres(tx9): <0,1 Mélange de pollens de mauvaises herbes (WX3): 8.15 Mélange de spores de moisissures (MX1): 8.58 Acarien de maison D.pter (D1): <0,1 Epithélium de chat (E1): <0,1 Epithélium de cheval (E3): 53.3 Epithélium de chien (E5): <0,1 Froment (F4): 0.4 Arachide (F13): >100 Soja (F14): 1.64 Blanc d oeuf (F1): >100 Lait (F2): 69.5 Poisson(F3): <0,1 Sérologie: IgE spécifiques de la caséine: 3,4 ku/l IgE spécifiques d alfa-lactalbumine et bêta-lactoglobuline: négatif pour les deux BAT (basophil activation test) avec du lait de vache: pas de stimulation (marqueur CD63) IgE spécifiques de ngal d1: 44,2 ku/l IgE spécifiques de rara h2: 19,6 ku/l Provocation Administration par étapes de lait de vache jusqu à 200 cc: pas de réaction Conclusion/diagnostic 1. Allergie aux pollens d arbres et de graminées et aux squames de chat. 2. Sensibilisation à IgE aux allergènes respiratoires en général (la pertinence clinique est inconnue selon l anamnèse) 3. Syndrome d allergie orale (pomme et noix) 4. Sensibilisation à IgE résiduelle faible pour la caséine; il est maintenant tolérant au lait de vache. 5. Forte allergie anamnésique aux œufs et aux arachides. Les tests cutanés et la sensibilisation à IgE pour ses composants alimentaires confirment cette hypothèse. Une confirmation par des tests de provocation suivra. Remarque: Tests cutanés avec des allergènes des voies respiratoires et des poisons sont réalisés avec des extraits d ALK-Abello ; les résultats sont exprimés en index HEP (positif à partir de 0,5) : Acarien de maison D.pter; graminées mélange-5; arbres mélange-3; pollen d armoise, épithélium de chat, épithélium de chien, épithélium de cheval, poils de lapin, poils de cobaye, poils d hamster, des spores des moisissures Aspergillus fumigatus, Cladosporium herbarum et Alternaria alternata.sur demande: venin de guêpes et d abeilles. Tests cutanés avec des allergènes alimentaires sont réalisés avec des extraits d ALK Abello et des parties de produits frais (test prick to prick aux aliments natifs), les résultats sont exprimés en index HEP (positif à 0,5). Lait de vache, blanc d oeuf, soja, arachide, noisette, amande, noix, noix de cajou, pomme, cabillaud, crevettes. Dosages d IgE spécifiques (Siemens) réalisés dans le laboratoire de référence de SKML à Winterswijk, Pays-bas et tous les titres sont exprimés en. Nég <0,1 NB : le texte original a été rédigé en néerlandais par les allergologues hollandais et traduit pas l ISP. FORM 43/124/F v4 12/21

Tableau 5. Dosage des IgE totales () dans l échantillon 2014-8 IgE totales 2014-08 045 Non-Isotopic - Abbott Quantia (6K42-01) 4309.6 1 046 Siemens Dimension Vista - nephelometry 5180.0 5630.0 2 048 Non-Isotopic - Siemens Immulite 5058.0 699.8 13.8 33 049 Non-Isotopic-Siemens-ADVIA Centaur > 3000.0 > 3000.0 5538.6 3 061 Non-Isotopic-Thermo/Thermo/Immunocap 4652.0 592.3 12.7 75 064 Non-Isotopic- Diasys IgE FS 4831.0 1 081 Non-Isotopic-Beckman Coulter-Access > 3000.0 5149.3 5432.8 5885.0 6278.0 088 Non-Is. -Roche-Elecsys/ Mod E / cobas e 5304.0 356.6 6.7 14 N labs Global results (all methods and all measuring systems) 4879.5 720.5 14.8 134 5 *Quand N<6, les statistiques ne sont pas calculées et les valeurs individuelles sont indiquées en italique. n=33 n=75 n=14 IGE 3500 4000 4500 5000 5500 6000 6500 048 061 088 Figure 5. Distribution des résultats () par méthode (en abscisse). Représentation en boîtes à moustaches (si n 6). Le test de Wilcoxon indique que les méthodes 048,061 et 088 ne sont pas significativement différentes (p>0.01). Commentaire : Quelle que soit la méthode, la teneur en IgE totale est supérieure aux valeurs de référence. FORM 43/124/F v4 13/21

Tableau 6. Dosages des IgE spécifiques () de l allergène f1 dans l échantillon 2014-8. f1 Egg white 2014-08 002 PHARMACIA THERMO/FLUORESCENT 49.90 5.89 11.8 83 005 SIEMENS IMMULITE 2000/CHEMILUMINESCENCE N labs Global results (all methods and all measuring systems) 53.50 123 40 Tableau 7. Valeurs individuelles par méthode pour le dosage des IgE spécifiques de l allergène f1 dans le sérum 2014-8. Méthode No.labs PHARMACIA THERMO/FLUORESCENT (002) Results : 67.2-66.3-62.8-61.1-60.9-60.6-58.5-58.3-49.9 5.893 11.8 83 58-57.3-57.3-57.3-57.2-57 - 57-56.8-56 - 55.9-54.8-54.5-54.2-53.7-53.5-53.4-53.4-53.3-53.3-52.8-52.7-52.6-52.1-52 - 52-51.7-51.7-51.5-51 - 51-50.5-50 - 50-49.9-49.7-49.5-49.5-49.2-49.2-48.9-48.7-48.2-48 - 47.9-47.8-47.7-47.3-46.8-46.7-46.6-46.5-46.4-46.3-46 - 46-45.7-45.5-45.4-45.3-45.2-44.69-44.6-44.1-43.5-43.3-43.1-43 - 42.1-39.6-39.5-38.8-38.7-38.6-37.5-33.9 SIEMENS IMMULITE 2000/CHEMILUMINESCENCE (005) Results : 46.8-69.1 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100-40 Etant donné le grand nombre de valeurs censurées pour la méthode 005, le test de Wilcoxon n a pu être appliqué. Commentaire. Pour les deux méthodes, des IgE spécifiques ont été détectées conformément à la clinique. FORM 43/124/F v4 14/21

Tableau 8. Dosage des IgE spécifiques () de l allergène f13 dans l échantillon 2014-8 globalement et par méthode. f13 Peanut - 2014-08 METHOD Median 002 PHARMACIA THERMO/FLUORESCENT 61.75 10.53 17.0 78 005 SIEMENS IMMULITE 2000/CHEMILUMINESCENCE N labs Global results (all methods and all measuring systems) 67.50 111 33 Tableau 9. Valeurs individuelles par méthode pour le dosage des IgE spécifiques de l allergène f13 dans le sérum 2014-8. f13 Peanut ( ) Survey 2014/3 2014-08 Méthode No.labs PHARMACIA THERMO/FLUORESCENT (002) Results : 44.5-45.3-46.6-46.6-47.6-48 - 49.3-61.75 10.526 17.0 78 49.5-49.5-49.7-50.2-50.6-51.3-52.1-52.6-52.7-52.8-53.1-53.1-54 - 54.7-54.8-55.5-55.6-55.8-56.3-57 - 57.9-58.6-58.85-59 - 59.4-59.5-59.7-59.8-60 - 60.3-60.8-61.7-61.8-62.6-62.7-62.8-63 - 63.1-63.8-64 - 64.1-64.3-64.9-65 - 65.1-65.8-66.3-66.6-67.5-67.6-67.8-68.2-68.5-68.5-69.1-70 - 70.3-70.3-71.1-71.5-72.6-73.2-73.3-73.6-74.7-74.8-76.2-76.9-82.7-90.1 - > 100 - SIEMENS IMMULITE 2000/CHEMILUMINESCENCE (005) Results : 74.2-75.1-81.7-90.1-93.5-96.1 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100 - > 100-33 Etant donné le grand nombre de valeurs censurées pour la méthode 005, le test de Wilcoxon n a pu être appliqué. Commentaire. Pour les deux méthodes, des IgE spécifiques ont été détectées conformément à la clinique. FORM 43/124/F v4 15/21

Tableau 10. Dosage des IgE spécifiques () de l allergène f2 dans l échantillon 2014-8 globalement et par méthode. f2 Milk 2014-08 N labs* 002 PHARMACIA THERMO/FLUORESCENT 27.60 3.41 12.4 85 005 SIEMENS IMMULITE 2000/CHEMILUMINESCENCE 66.30 4.45 6.7 39 050 OTHER 27.10 1 Global results (all methods and all measuring systems) 29.40 25.65 87.2 125 N=85 N=39 f2 Milk 20 30 40 50 60 70 002 005 Figure 6. Représentation en boîtes à moustaches de la dispersion des valeurs () par méthode (abscisse) pour le dosage d IgE spécifiques de l allergène f2 dans l échantillon 2014-8 Le test de Wilcoxon indique que les 2 méthodes ont générés des résultats significativement différents (p<0.01). Commentaire : Quelle que soit la méthode, des IgE spécifiques de l allergène f2 ont été détectées dans l échantillon conformément à la clinique. FORM 43/124/F v4 16/21

Cas Clinique 2014-9 Anamnèse Femme de 26 ans. Elle a un eczéma atopique intermittent léger. Elle a des symptômes allergiques respiratoires (rhinite et asthme), surtout au printemps par temps sec et ensoleillé et également lors de l exposition à des animaux à fourrure tels que les chats et les chevaux. Elle a eu il y quelques années, une réaction anaphylactique (objectivée et traitée médicalement) avec un urticaire généralisé, un gonflement du visage et de la gorge, mais également une chute de la pression artérielle qui a été détectée et traitée. La réaction s'est produite lors de la consommation de poisson (pangasius). Auparavant, elle mangeait régulièrement du poisson (différentes espèces) sans plaintes. Ensuite, elle a encore eu une telle réaction après avoir mangé des bâtons de poisson (cabillaud). La consommation de mollusques ne provoque chez elle aucun symptôme. Elle présente des symptômes compatibles avec un syndrome d allergie orale (pomme, kiwi). L anamnèse allergique ne révèle rien de plus. Tests cutanés: - avec des allergènes des voies respiratoires: Positifs pour le pollen de bouleau (1,2); pour le pollen d armoise (1,1); l épithélium de chat (1,1); l épithélium de cheval (1,1); négatif pour le reste. - avec des allergènes alimentaires: Positifs pour la noisette (1,2); la pomme (1,1); négatifs pour le reste. Positifs pour le cabillaud (0,8); le thon (0,7); le pangasius (1); la carpe (1,4) (tous ces poissons étaient négatifs chez les personnes contrôles) IgE spécifiques Mélange de pollens de graminées (GX3): <0,1 Mélange de pollens d arbres(tx9): 31.1 Mélange de pollens de mauvaises herbes (WX3): 0.64 Mélange de spores de moisissures (MX1): <0,1 Acarien de maison D.pter(D1): <0,1 Epithélium de chat (E1): 14.2 Epithélium de cheval(e3): 1.78 Epithélium de chien (E5): 2 Froment (F4): <0,1 Arachide (F13): <0,1 Soja (F14): <0,1 Blanc d oeuf (F1): <0,1 Lait (F2): <0,1 Poisson (F3): 6.53 Conclusion/diagnostic 1. Symptômes allergiques des voies respiratoires avec une sensibilisation à IgE aux pollens d arbres, d armoise et aux squames des chats et des chevaux. 2. Syndrome d allergie orale (pomme, kiwi) 3. Une anamnèse de 2 chocs anaphylactiques pendant ou après avoir mangé du poisson. Une sensibilisation à IgE a été montrée pour le cabillaud, le thon, le pangasius et la carpe. Remarques: Tests cutanés avec des allergènes des voies respiratoires et des venins sont réalisés avec des extraits venant d ALK- Abello; les résultats sont exprimés en indice HEP (Positif à partir de 0,5): Acariens de maison D.pter; mélange de pollens de graminées-5; mélange de pollens d arbre-3; pollen d armoise; Epithélium de chat, de chien, de cheval, poils de lapin, de cobaye, d hamster, spores d Aspergillus fumigatus, de Cladosporium herbarum, d Alternaria alternata. Sur indication: venin d abeille et de guêpe. Les tests cutanés avec des allergènes alimentaires sont réalisés avec des extraits d ALK-Abello et des parties de produits frais (test de scarification); les résultats sont exprimés en indice HEP (positif à partir de 0,5). Lait de vache, blanc d oeuf, soja, arachide, noisette, amande, noix, noix de cajou, pomme, cabillaud, crevette. Détermination des IgE spécifiques (Siemens) réalisée dans le laboratoire de SKML à Winterswijk; tous les titres sont exprimés en. Nég = < 0,1 FORM 43/124/F v4 17/21

Tableau 11. Dosage des IgE totales dans l échantillon 2014-9. IgE totales- 2014-09 045 Non-Isotopic - Abbott Quantia (6K42-01) 286.1 1 046 Siemens Dimension Vista - nephelometry 278.0 278.0 2 048 Non-Isotopic - Siemens Immulite 291.0 33.4 11.5 33 049 Non-Isotopic-Siemens-ADVIA Centaur 261.5 264.0 286.0 3 061 Non-Isotopic-Pharmacia-Cap/Thermo/Immunocap 250.0 17.8 7.1 75 064 Non-Isotopic- Diasys IgE FS 328.0 1 081 Non-Isotopic-Beckman Coulter-Access 243.7 270.5 278.1 286.0 298.4 088 Non-Is. -Roche-Elecsys/ Mod E / cobas e 276.5 7.4 2.7 14 N labs Global results (all methods and all measuring systems) 262.0 24.8 9.5 134 *Quand N<6, les statistiques ne sont pas calculées et les valeurs individuelles sont indiquées en italique. 5 n=33 n=75 n=14 IGE 200 250 300 350 048 061 088 Figure 7. Distribution des résultats () par méthode (en abscisse). Représentation en boîtes à moustaches (si n 6). Le test de Wilcoxon indique que la méthode 61 (Thermo) est significativement différente (p<0,01) des méthodes 48 (Siemens) et 88 (Roche). Les méthodes 48 et 88 ne sont pas significativement différentes (p=0,08). Commentaire. Quelque soit la méthode, les taux sériques d IgE totales sont supérieurs à la normale. FORM 43/124/F v4 18/21

Tableau 12. Dosage des IgE spécifiques () de l allergène e5 dans l échantillon 2014-9 e5 Dog dander 2014-09 002 THERMO THERMO/FLUORESCENT 1.17 0.11 9.8 87 005 SIEMENS IMMULITE 2000/CHEMILUMINESCENCE N labs 2.66 0.18 6.8 40 Global results (all methods and all measuring systems) 1.24 1.02 81.9 127 002 N=87 005 N=40 Figure 8. représentation en boîtes à moustaches de la dispersion des valeurs () par méthode (abscisse) pour le dosage d IgE spécifiques de l allergène e5 dans l échantillon 2014-9. Le test de Wilcoxon indique que les 2 méthodes ont générés des résultats significativement différents (p<0.01). Commentaire. Pour les deux méthodes, des IgE spécifiques ont été détectées. FORM 43/124/F v4 19/21

Tableau 13. Dosage des IgE spécifiques () de l allergène f3 dans l échantillon 2014-9 f3 fish cod 2014-09 002 THERMO THERMO/FLUORESCENT 1.48 0.17 11.3 72 005 SIEMENS IMMULITE 2000/CHEMILUMINESCENCE N labs 7.21 0.78 10.8 32 Global results (all methods and all measuring systems) 1.61 3.80 236.5 104 N=72 N=32 f3 fish cod 1 2 3 4 5 6 7 8 002 005 Figure 9. Représentation en boîtes à moustaches de la dispersion des valeurs () par méthode (abscisse) pour le dosage d IgE spécifiques de l allergène f3 dans l échantillon 2014-9. Le test de Wilcoxon indique que les 2 méthodes ont générés des résultats significativement différents (p<0.01). Commentaire. Pour les deux méthodes, de faibles taux IgE spécifiques ont été détectés. FORM 43/124/F v4 20/21

Tableau 14. Dosage des IgE spécifiques de l allergène w6 dans l échantillon 2014-9 w6 Artemisia vulg. 2014-09 002 PHARMACIA THERMO/FLUORESCENT 0.61 0.05 8.5 70 005 SIEMENS IMMULITE 2000/CHEMILUMINESCENCE N labs 1.15 0.11 9.7 29 050 OTHER 0.59 0.64 2 Global results (all methods and all measuring systems) 0.64 0.30 47.5 101 002 N=70 005 N=29 Figure 10. représentation en boîtes à moustaches de la dispersion des valeurs () par méthode (abscisse) pour le dosage d IgE spécifiques de l allergène w6 dans l échantillon 2014-9. Le test de Wilcoxon indique que les 2 méthodes ont générés des résultats significativement différents (p<0.01). Commentaire. Les deux méthodes ont détecté des IgE spécifiques de l allergène w6. Ce rapport ne peut être reproduit, publié ou distribué sans l'accord de l'isp FIN Institut Scientifique de Santé Publique, Bruxelles 2014. Ce rapport ne peut pas être reproduit, publié ou distribué sans l accord de l ISP. FORM 43/124/F v4 21/21