Faculté de médecine m de Sousse Cours de biochimie clinique (Introduction) 2 ème année médecine 2008 / 2009 Docteur LIMEM Khalifa
Plan I Définition II sa place en médecine III les différentes étapes d une analyse biochimiques 1 demande d examens biochimiques 2 recueil des échantillons biologiques 3 analyse des échantillons biologiques 4 analyses au lit du malade 5 sources d erreurs 6 interprétation des résultats IV utilité des paramètres biologiques
I / Définition
Biochimie clinique Branche de la médecine où les méthodes de la Biochimie sont appliquées à l étude des maladies. Valeur informative des analyses dans la démarche diagnostique et le suivi des maladies. S intègre dans la décision clinique
II/ sa place en médecine
Devant un patient le médecin doit suivre une Stratégie adéquate pour faire un diagnostic et Démarrer un traitement.
Fiche des résultats
III/ les différentes étapes d une analyse biochimiques
Question clinique Étapes d une analyse
Le médecin doit toujours avoir à l esprit qu en demandant un examen Biochimique, il pose une question au laboratoire Si non Travail inutile!
1 demande d examens biochimiques
La formulation de la demande doit comporter Nom Sexe Age. Service N Nom du Médecin - Tél Diagnostic Caractéristiques cliniques Examens demandés Nature du prélèvement Heure du prélèvement Traitement médicamenteux
2 recueil des échantillons biologiques
Recueil des échantillons biologiques Différents types d échantillons sont utilisés
Échantillons Sanguins
Échantillons dangereux Doivent être étiquetés avec un autocollant coloré!
Erreurs d échantillonnage Technique de prélèvement Stase Insuffisant Erreurs de temps Récipient incorrect Site de prélèvement inadapté Conservations incorrecte
3 analyse des échantillons biologiques
Analyse des échantillons biologiques Les mesures biochimiques varient pour deux raisons: Variation analytique Variation biologique
Variations analytique - Une méthode analytique doit être : * Précise * Exacte * Sensible *spécifique * Peu coûteuse * Simple et rapide
Précision et exactitude :
Pour une technique donnée les résultats d une série de test pour un même échantillon se distribue autours d une moyenne. - Écart type - C.V Pas de comparaison des résultats si méthodes analytiques différentes.
4 - Tests effectués hors du laboratoire Au lit du malade dans les services hospitaliers Au cabinet du médecin praticien à domicile Disponibilité immédiate des résultats apaiser les inquiétudes
Il faut s assurer de la fiabilité du test. Ces tests doivent rester toujours sous la responsabilité du biologiste. L examen le plus couramment effectué : la Glycémie. Instrument de poche disponible dans le commerce
Problème analytique des tests délocalisés Défaut d étalonnage de l appareil Défaut de nettoyage Non utilisation de contrôle de qualité Mauvaise conservation des réactifs ou des bandelettes Entretien régulier du matériel Contrôle de qualité simple croisé avec le laboratoire central
5 - Sources d erreurs au cours des analyses Peuvent survenir à différentes phases du processus analytique. Phase pré analytique: -Prélèvement - Fausse identification - Conservation Phase analytique Phase post analytique
6 interprétation des résultats
INTERPRETATION Après des efforts considérables et des dépenses importantes les résultats apparaissent : Des chiffres sur papier
La plupart des résultats sont quantitatives concentration exprimée en mmol/l en g/l en UI/L pour les enzymes et en K Pa ou mmhg pour les gaz
Interprétation des résultats (1) comprendre ce que ces chiffres signifient et d une importance cruciale. - Est il normal? Trois questions à poser - Est il significativement différent des résultats précédents? - Est il compatible avec les données cliniques?
Interprétation des résultats (2) est il normal? Un résultats individuel Doit être validé par comparaison avec la valeur attendue chez des individus homologues et en bonne santé
Notion d intervalle de référence Distribution des valeurs obtenues à partir d une population donnée «courbe de Gauss» 95% des valeurs de la population sont retrouvées dans l intervalle : M ± ET Les intervalles de références varient en fonction de la méthodologie ou du recrutement des populations de référence
Courbe de Gauss
Est il différent des résultats précédents? Différence significative? Cela dépend de la précision de la méthode et de la variabilité biologique.
Si la différence entre deux résultats dépasse 2.8 fois l écart type du paramètre potentiellement significative sur le plan clinique
Est il compatible avec les données cliniques? S il n est pas compatible, on doit chercher une explication Prés analytique Analytique Post analytique Envoyer un autre prélèvement et répéter l analyse
IV - Utilité des paramètres biologiques en clinique Dans quelle mesure il contribue à la décision clinique?
La distribution des résultats pathologiques Peut présenter un chevauchement avec la Distribution des valeurs de référence Ce qui va compliquer l interprétation!
2 questions : 1- Le résultat permet-il de différencier un sujet atteint De la maladie pour laquelle ce test a été effectué D un individu sain? 2- Quelle est la probabilité q un résultat «anormal» Indique que l individu est vraiment malade?
Pour répondre à ces questions Des paramètres sont déterminés Sensibilité Spécificité Valeurs prédictives
Spécificité Incidence des résultats négatifs chez les sujets dépourvus d une pathologie donnée. Vrais négatifs «VN» VN Sp = x 100 VN+ FP
sensibilité Incidence des résultats positifs chez les patients présentant la pathologie en question. Vrais positifs «V.P» VP Se = x 100 Vp + FN
La valeur diagnostique idéale : Sp = 100% Se =100 % Ceci n est jamais atteint car quand Sp augmente Se diminue et inversement
La haute sensibilité est primordiale dans les situations de dépistages. Exemple :Maladies héréditaires handicapantes. Les faux positifs = investigations complémentaires
La haute spécificité est primordiale dans les essais thérapeutiques Faire les essais sur les vrais malades pour tirer des conclusions valables.
Mais aussi On désire connaitre la probabilité d une maladie Quand le test est positif! Et la probabilité d absence de La maladie quand le test est absent!
Valeur prédictive positive Probabilité de la maladie chez les sujets présentant Un test positif VP VP + FP
Valeur prédictive négative Probabilité de l absence de la maladie Chez les sujets présentant un test négatif VN VN + FN
La VPP d un test dépend de 3 facteurs : 1- la prévalence de la maladie 2- la sensibilité du test 3- la spécificité du test
a= sensibilité b = spécificité p = prévalence Formule de Bayes: Pa VPP = Pa + (1- p)(1-b)