Lymphocytes T innés Immunothérapies anti-tumorales ciblant les lymphocytes T Vγ9Vδ2 humains Emmanuel Scotet Equipe 1 / Modalités d ac3va3on et Fonc3ons des lymphocytes T γδ humains Dir. M. Bonneville - INSERM UMR892 CRCNA /IRT UN, Nantes
Les lymphocytes T de l immunité transi6onnelle
Les lymphocytes T γδ : senseurs du stress et des infec6ons Lymphocytes T γδ retrouvés chez tous les vertébrés Enrichissement dans les territoires épithéliaux en contact avec l environnement extérieur Bonneville M. et al. Nat. Rev. Immunol., 2010
Caractéris6ques des lymphocytes T Vγ9Vδ2 périphériques humains Expression prédominante du TCR Vγ9Vδ2 (> 90% des T γδ périphériques) Expansion postnatale (s6mula6on par Ag de stress / environm.) Réac6vités contre de nombreux types de cellules infectées ou tumorales Allison et al., Nature, 2001 2 % CD3 LT Vγ9Vδ2 PBMCs humains TCR Vδ2 Reconnaissance et lyse d une cellule tumorale
Ac6va6on spécifique des LT Vγ9Vδ2 par des métabolites des voies de synthèse des isoprénoïdes PBMCs humains < 1 39 Aminobisphosphonates Alkylamines IFN-γ PAg synthétiques Grade clinique Innate Pharma (Marseille) BrHPP TCR Vδ2
Ra6onnel des stratégies immunothérapeu6ques ciblant les LT Vγ9Vδ2 Forte conserva6on inter- individuelle chez les primates Fréquence élevée chez les individus «pré- immuns» Disponibilité de composés synthé6ques peu coûteux ac6vant sélec6vement ceze sous- popula6on de lymphocytes T (grade GMP): Ø Phosphoan:gènes solubles : BrHPP (Phosphos6m TM, Innate Pharma) / chdmapp (Picos6m TM, Innate Pharma) Ø Aminobisphosphonates : Pamidronate (Aredia, Novar3s), Zoledronate (Zometa, Novar3s),.. Fonc6ons effectrices in vitro (CTL, IFN- γ ), réac6vités an6- tumorales et an6- infec6euses.
Stratégies immunothérapeu6ques ciblant les LT Vγ9Vδ2 Agonistes spécifiques GMP-grade Br O OH P OH O P O - OH O O Phosphoantigènes solubles Ø BrHPP / Phosphostim TM (mrcc, colon, myélomes, HCC,..) Ø c-hdmapp / Picostim TM + IL-2 Aminobisphosphonates Ø Pamidronate / Aredia (myélomes, lymphomes,..) Ø Zoledronate / Zometa (prostate) Faisabilité Toxicité limitée (effets de l IL-2) Expansions spécifiques in vitro / in vivo des LT Vγ9Vδ2 (PBMC) < Efficacité antitumorale encourageante CD3 4% 80 % TCR Vγ9 = mais... Activité cytolytique limitée des LT Vγ9Vδ2 contre certaines cellules tumorales fraîches Epuisement progressif des réponses in vivo après traitements répétés Statut fonctionnel des LT dont Vγ9Vδ2 chez les patients
Optimisation des stratégies immunothérapeutiques ciblant les LT Vγ9Vδ2 humains dans le traitement des cancers? Ø Indications / Types de tumeurs (solides vs circulantes) / Stades / Métastases. Ø Positionnement avec autres thérapies (ex. chimiothérapie immunogène). Ø Patients / Critères Vγ9Vδ2 (ex. statut, fréquences, phénotype, réponses ex vivo) Ø Activation - Amplification in vitro / in vivo. (ex. cycles, toxicité, APC) Ø Survie - Migration à la tumeur des LT Vγ9Vδ2 / Immunosuppression (ex. Tregs).
Ø Amélioration de la réactivité anti-tumorale des LT Vγ9Vδ2 ü Cytokines pro-cytotoxiques (ex. IL-21) ü mabs / Effet ADCC (ex. CD20) ü Meilleure sensibilisation des cibles tumorales à la reconnaissance LT Vγ9Vδ2 Ø Nouvelles molécules sensibilisantes (mabs anti-cd277) Ø Administrations locales (ex. cancer de l ovaire, glioblastome) Ø Combinaisons des traitements sensibilisants + Transfert adoptif LT
Ø Amélioration de la réactivité anti-tumorale des LT Vγ9Vδ2 ü Cytokines pro-cytotoxiques (ex. IL-21) ü mabs / Effet ADCC (ex. CD20) ü Meilleure sensibilisation des cibles tumorales à la reconnaissance LT Vγ9Vδ2 Ø Nouvelles molécules sensibilisantes (mabs anti-cd277) Ø Administrations locales (ex. cancer de l ovaire, glioblastome) Ø Combinaisons des traitements sensibilisants + Transfert adoptif LT
Données récentes : BTN3/CD277 (cible): acteur obligatoire dans la réponse des LT Vγ9Vδ2 induite par les PAg A1 A2 A3 mab anti-btn3 IgV IgV IgV > 95 % homologie IgC IgC IgC mb i.c. Glycoprotéines de Type I Famille des Butyrophilines Molécules B7 PAg B30.2 B30.2 3 isoformes de BTN3 BTN3A1 BTN3A2 BTN3A3 Harly et al., Blood 2012 Domaine B30.2 - SPRY/PRY Palakodeti et al., Journal of Biological Chemistry 2012
mabs an6- CD277 / Sensibilisa6on des tumeurs à la lyse par les LT Vγ9Vδ2 Anticorps «agonistes» monoclonaux murins (IgG1) / D. Olive INSERM UMR891 Marseille Production grade clinique? Toxicité / pharmacodynamique/-cinétique?
mabs an6- CD277 / Sensibilisa6on de cellules tumorales circulantes fraîches et résistantes aux traitements par NBP 100 75 ** Exposition (< 1h) mab anti-btn3 (CD277) Lyse (%) 50 Service Hématologie CHU de Nantes (Pr S. Legouill) 25 0 Ctrl NBP a-cd277 mab Leucémie Lymphoïde Chronique Lymphome Zone Marginale Lymphome Manteau
Ø Amélioration de la réactivité anti-tumorale des LT Vγ9Vδ2 ü Cytokines pro-cytotoxiques (ex. IL-21) ü mabs / Effet ADCC (ex. CD20) ü Meilleure sensibilisation des cibles tumorales à la reconnaissance LT Vγ9Vδ2 Ø Nouvelles molécules sensibilisantes (mabs anti-cd277) Ø Administrations locales (ex. cancer de l ovaire, glioblastome) Ø Combinaisons des traitements sensibilisants + Transfert adoptif LT
Immunothérapie Vγ9Vδ2 / Préclinique 3- Human Vγ9Vδ2 T cells ex vivo amplifica6on or in vivo (hupbmc) 2- Tumor sensi:za:on NBP / α- CD277 mabs 1 Preclinical animal models NSG (NOD.Cg- Prkdc scid Il2rg tm1wjl /SzJ) mice Xenograned GFP+Luc+ tumors PBS Human tumor cells