Modifications depuis la version précédente 16/01/2018 03 correction mineure étiquette a decoller 22/09/2017 02 correction mineure 03/04/2017 01 Création du document But et objet Définir les conditions de prélèvement d une hémoculture. Exigences à appliquer NF EN ISO 15189 (version 2012)\5 Exigences techniques\5. 4 Processus préanalytiques Responsabilités Décret de compétence de la profession d infirmier N 2004-802 du 29 juillet 2004 relatif aux parties IV et V du code de la santé publique. Exercice de la profession Section 1 Actes professionnels. - Article R 4311-2 alinéa 4, R 4311-7 alinéa 35 : Rôle sur prescription ou application d un protocole. Définitions L hémoculture est un prélèvement de sang veineux qui est mis en culture et qui permet d isoler les micro-organismes (bactéries ou levures), de les identifier, de déterminer leur sensibilité aux antimicrobiens et d adapter un traitement. Actions et méthodes Principaux sites de prélèvements pour hémocultures Les hémocultures doivent être prélevées dans la mesure du possible - avant tout traitement antibiotique - avant tout autres tubes de prélèvements sanguins afin de minimiser le risque de contamination. - Dans l idéal, immédiatement après des frissons, en cas de fièvre ou d hypothermie. Le prélèvement pour hémoculture s effectue prioritairement par ponction veineuse périphérique. Il peut se faire à travers un dispositif intra-vasculaire dans 2 situations : - soit lors du diagnostic d infection d un dispositif intra-vasculaire laissé en place et dans ce cas il est nécessaire de pratiquer dans le même temps une hémoculture sur site périphérique (technique d hémocultures différentielles) - soit lorsqu il est impossible de prélever en périphérie. Dans ce cas préciser le site de prélèvement sur le bon de demande. Seule la version informatique est valable et maîtrisée Imprimé le : 03/04/2018 18:00 Page 1/5
Conditions de réalisation FLACONS DISPONIBLES - Flacon BD BACTEC Plus Aérobic / F (bouchon bleu et étiquette grise) : résines KDVE inhibant les antibiotiques pour la recherche des espèces bactériennes aérobies. Ce flacon est adapté aux adultes : remplir avec 8-10 ml de sang. - Flacon BD Bactec Lytic/10 Anaérobic / F (bouchon violet et étiquette violette) pour la recherche des espèces bactériennes anaérobies. Ce flacon est adapté aux adultes : remplir avec 8-10 ml de sang. - Flacon BD Bactec Peds Plus / F (bouchon argenté et étiquette rose) aérobie : ce flacon est adapté à la pédiatrie (remplir avec 1 à 3 ml de sang). Il contient aussi des résines inhibant les antibiotiques - Flacon BD Bactec Mycosis IC/F / (bouchon gris et étiquette verte) pour la recherche des levures. Ce flacon est adapté aux adultes : remplir avec 8-10 ml de sang. - Flacon BD Bactec Myco/F Lytic (bouchon rouge et étiquette rouge) pour la recherche des mycobactéries. Ce flacon est adapté aux adultes : remplir avec 8-10 ml de sang. Stocker les flacons à l'abri de la lumière directe, à température ambiante (2 à 25 C). REALISATION Diagnostic des bactériémies et fongémies Une hémoculture classique est composée d 1 flacon aérobie et d 1 flacon anaérobie (Vérifier les dates de péremption des flacons). Le diagnostic d une bactériémie nécessite qu au moins deux hémocultures soient réalisées sur 24 H. L intervalle recommandé entre ces 2 prélèvements est de 30 à 60 minutes si une antibiothérapie doit être rapidement prescrite. Cependant les hémocultures peuvent être réalisées : - 2x2 en un temps, avec un intervalle de 5 minutes. - En train continu» Il est inutile de réaliser plus de 3 hémocultures réparties sur les 24 heures le premier jour ou par un «train d hémocultures». Selon le contexte clinique, des hémocultures pour recherche de levures et/ou Mycobactéries peuvent être ajoutées. Seule la version informatique est valable et maîtrisée Imprimé le : 03/04/2018 18:00 Page 2/5
Diagnostic bactériologique d une endocardite ou une suspicion d infection sur matériel implanté (pace-maker, prélèvement endovalvulaire) - 3 couples d hémocultures (un flacon aérobie et un flacon anaérobie) échelonnées sur une durée de 24 heures, espacées d une heure minimum avant toute prise d antibiotique. Cocher sur le bon d examen «endocardite» ce qui amènera le laboratoire à conserver les hémocultures pendant 14 jours - Les hémocultures peuvent être répétées plus tard en cas de négativité et après mise sous antibiotique pour en vérifier la négativation (bactériémie à Staphylocoque à 48hr et jusqu à négativation par exemple), à discuter au cas par cas Diagnostic des infections microbiennes liées à un dispositif intra-vasculaire (cathéter, chambre implantable) - Prélever en même temps (< 10 min) deux hémocultures (2 fois 2 flacons), l une par ponction veineuse périphérique et l autre sur le matériel après avoir purgé le cathéter. - Ces prélèvements doivent être correctement identifiés par site et envoyés en même temps au laboratoire de bactériologie (à spécifier sur le bon de prescription : coche «hémoculture différentielle»). Diagnostic des infections disséminées à mycobactéries - Réaliser 2 à 3 prélèvements sanguins successifs en utilisant les flacons MycoF/lytic. - Les prélèvements sont répétés en cas de négativité de la culture dans un délai de 2 à 3 semaines. Services de pédiatrie - Habituellement une seule hémoculture par jour sur flacon pédiatrique, sauf prescription particulière du clinicien. Technique de prélèvement 1. Préparer un plan de travail propre et dégagé ainsi que le matériel nécessaire: kit de prélèvement spécifique stérile, flacons, compresses stériles, collecteur PCT 2. Se désinfecter les mains selon les recommandations du Guide de l Hygiène en vigueur au CHU de Rennes 3. Vérifier la date de péremption du flacon 4. Retirer la capsule de protection du flacon et vérifier l absence de fissure, de contamination, de turbidité excessive, de bouchon protubérant ou en dépression 5. Désinfecter les bouchons des flacons avec des compresses stériles imbibées d un antiseptique en phase alcoolique (compresses laissées en place). L utilisation d iode n est pas recommandée. 6. Pratiquer une antisepsie large et rigoureuse du site du prélèvement selon les recommandations du Guide de l Hygiène en vigueur au CHU de Rennes. 7. Se désinfecter les mains selon les recommandations du Guide de l Hygiène en vigueur au CHU de Rennes. 8. Mettre des gants stériles et réaliser la ponction. 9. Commencer par l hémoculture si autres prélèvements sanguins (tubes). 10. Bien remplir chaque flacon (8 à 10mL de sang). Commencer par le flacon aérobie, puis anaérobie. Seule la version informatique est valable et maîtrisée Imprimé le : 03/04/2018 18:00 Page 3/5
11. Chez l enfant, 1 à 2 flacons en fonction du poids de l enfant ou des indications (ex : recherche d espèces anaérobies strictes) ou 1 seul flacon pédiatrique. 12. Agiter doucement (2 à 3 allers-retours ) les flacons d hémoculture immédiatement après le prélèvement. 13. Se désinfecter les mains, selon les recommandations du Guide de l Hygiène en vigueur au CHU de Rennes, après retrait des gants. Acheminement du prélèvement et traçabilité Identifier les flacons et le bon de prescription en collant une étiquette patient : - sur le flacon (sans masquer le code barre) - sur le bon de prescription (case en bas à gauche) Seule la version informatique est valable et maîtrisée Imprimé le : 03/04/2018 18:00 Page 4/5
Coller les codes à barres des flacons précisément sur les cases appropriées du bon de prescription (Etiquette flacon Bactec) Remplir le bon de prescription : - cocher : date et heure de prescription, numéro de l hémoculture, sang périphérique ou sur KT, hémoculture différentielle O/N - noter les noms du prescripteur et du préleveur + qualité du préleveur - noter les renseignements cliniques : la température et/ ou l indication, le site de prélèvement, le traitement antibiotique etc - cocher «endocardite» si c est le cas Mettre les flacons dans un contenant anti-choc si flacon en verre, en particulier si acheminement par pneumatique Acheminer dans la demi-journée au laboratoire Conserver à température ambiante Assurer une traçabilité Documentation et renvois LBM EN 000180 Manuel de prélèvement Guide de l hygiène Enregistrements Rédaction : Caroline PIAU Vérification sur le fond : Vincent CATTOIR, Anne GOUGEON JOLIVET Vérification sur la forme : Olivier COURMARCEL (en délégation de Nathalie BERNARD) Approbation : Samer KAYAL Seule la version informatique est valable et maîtrisée Imprimé le : 03/04/2018 18:00 Page 5/5