Les animaux dans la recherche biomédicale: TD Licence L2S3 Année universitaire : 2013/2014 Irina Korichnev 1
Adresse: Laboratoire de Physiologie cellulaire et moléculaire (JE 2530) UPJV 33, Rue St Leu 80039, Amiens cedex Email: irina.koritchneva@u-picardie.fr 2
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Licence L2S3 TD Bioéthique Objectif des TD Illustrer de manière pratique les notions abordées en cours Evaluer un article scientifique? réflexion, compréhension et esprit de synthèse
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Title: Impact de la malnutrition précoce sur la réaction inflammatoire chronique et ses répercussions pour l'effet de l'indométacine chez le rat Wistar 6
Question de la bioéthique L'étude est-elle justifiée? Est-elle éthique?
Définitions L'indométacine est un dérivé d'acide indole-acétique se rapportant à la classe de médicaments anti-inflammatoires non-stéroïdien, couramment utilisée pour réduire la douleur. NN est une alimentation équilibrée BRD est une alimentation de base régionale (riche en glucides et pauvre en protéines, lipides, vitamines et minéraux) L'adjuvant de Freund est un mélange lipidique qui est ajouté à l antigène de manière à provoquer une réaction immunitaire. L albumine est la principale protéine du sang La protéine C réactive (en anglais C-reactive protein, CRP) est une protéine de phase aiguë synthétisée principalement par le foie 8
Question de la bioéthique L'objectif Méthode Les résultats La conclusion L'objectif de la présente étude était de déterminer si la dénutrition précoce modifie la réponse inflammatoire chronique, de façon à étudier son influence sur la réponse pharmacologique à l'indométacine. 9
Méthode 1 La progéniture de rats nourris dès le premier jour de la gestation à terme ou tout au long de la période de lactation ont reçu une alimentation équilibrée (NN) ou un régime de base régionale (BRD) du nord-est du Brésil. En fonction de leur catégories, la progéniture a été divisé en trois groupes: NN; base régionale alimentation pendant la gestation (BRD-g, sousalimentés pendant la gestation); base régionale alimentation pendant la gestation et la lactation (BRDgl, sous-alimentés pendant la gestation et la lactation). 10
Méthode 2 A 2 mois, l'adjuvant de Freund (0,2 ml) a été inoculé dans la surface plantaire de la patte arrière (jour 0) des animaux. Un groupe d animaux a reçu par voie orale une solution saline (0,9%) pendant 28 jours. Un autre groupe a été soumis à la même procédure, mais a reçu de l indométhacine (2 mg / kg) à la place d'une solution saline. Les trois sous-groupes: NN traités par indométacine (NNI); BRD-g traité avec indométhacine (BRDI-g); BRD-gl traités par indométacine (BRDI-gl). Le volume de la patte arrière a été calculé aux jours 0 (patte initiale volume), 7, 14 et 28. Les chercheurs ont également évalué: le gonflement de la patte arrière, l'albumine du sang, la protéine C réactive (CRP), et le nombre de leucocytes ont été évalués en tant que marqueurs de l'inflammation. 11
Les résultats 1 - Biochemical and haematological parameters of control and undernourished adult male Wistar rat offspring -Paramètres biochimiques et hématologiques de groupe contrôle et des rats sous-alimentés. - Influence of early undernutrition on severity of inflammatory response -Influence de la dénutrition précoce sur la gravité de réponse inflammatoire -Influence of undernutrition on the anti-inflammatory effect of indomethacin - Influence de la dénutrition sur l effet anti-inflammatoire de l indométacine 12
Les résultats 2 Tableau 1. Caractéristiques de la progéniture de rats Wistar nourris (NN) et des groupes sous-alimentées qui a reçu un régime de base régional (BRD) pendant la gestation (BRD-g) ou dans la période de gestation et de lactation (BRD-gl) (Valeurs moyennes et les écarts types, dix animaux par groupe). 13
Les résultats 3 Tableau 2. Total et différentielle des leucocytes et des niveaux sanguins d'albumine et de protéine C-réactive (CRP) (Valeurs moyennes et les écarts types, cinq animaux par groupe). 14
Les résultats 4 Fig. 1. Évolution dans le temps du gonflement de la patte arrière aux jours 0 (avant), 7, 14, 21 et 28 jours après l'injection de l'adjuvant complet de Freund (0,2 ml) dans progéniture de rat nourri ou sous-alimentées. Les valeurs sont des moyennes (cinq animaux par groupe), avec des écarts types représentés par des barres verticales. * (significativement différent, P, 0,05). 15
Les résultats 5 Fig. 2. Effet du traitement avec de l'indométhacine sur l oedème de la patte arrière de rat Wistar nourri et mal nourris. Les valeurs sont des moyennes (cinq animaux par groupe), avec des écarts types représentés par des barres verticales. * Les valeurs moyennes étaient significativement différentes de celles du groupe témoin correspondant (alimentation équilibrée () v alimentation équilibrée traités avec l'indométhacine (); base régionale alimentation pendant la gestation () v base régime alimentaire régionale traités par indométacine pendant la gestation (); base régionale alimentation pendant la gestation et la lactation () v alimentation de base régionale traités par indométacine pendant la gestation et la lactation ()) (P, 0,05). 16
Les résultats 6 Réduction de gonflement de la patte arrière et les taux sanguins de sérum-albumine et CRP ont été trouvés dans la progéniture de BRD-g et BRD-gl. Cependant, aucune différence n'a été observée dans le nombre de leucocytes. (NN, BRD-g et BRD-gl), l'effet anti-inflammatoire de l'indométacine a été plus faible dans les groupes BRDI-g et BRDI-gl que dans le groupe NNI. 17
La conclusion La dénutrition précoce atténue la réponse inflammatoire chronique et l'effet antiinflammatoire de l'indométhacine. 18
Justification La réponse inflammatoire: les résultats expérimentaux indiquent que la malnutrition aiguë affecte les réponses systémiques inflammatoires. La réponse inflammatoire systémique représente une réponse coordonnée physiologique contre les infections 19
Bioethical considerations The procedures in the handling of animals followed the recommendations of the Brazilian College of Animal Experimentation (BRAZIL, 1979). The experimental protocol and all procedures of the project were reviewed and approved by the Ethics Committee on Animal Experimentation of the Federal University of Pernambuco (protocol no.: 230760070027/2008-19). Les considérations bioéthiques Les procédures décrites dans la manipulation des animaux suite à la recommandation du Collège Brésilien de l'expérimentation animale (BRESIL, 1979). Le protocole expérimental et les procédures du projet ont été examinés et approuvés par le Comité d'éthique sur l'expérimentation animale de la Federal Université de Pernambuco (protocole no:. 230760070027/2008-19).
Question de la bioéthique L'étude est-elle justifiée? Est-elle éthique?
Pour aller plus loin : Joly Jean et Boujard Daniel 2010 Biologie pour psychologues, cours et exercices. Edition : Dunod. 253p Benoit-Browaeys 1995 La bioéthique. Edition : Les Essentiels Milan. 63p 22