Manuel de Prélèvement du Laboratoire de Biologie Médicale IHG - Bourgogne Franche Comté

Manuel de Prélèvement du Laboratoire de Biologie Médicale IHG - Bourgogne Franche Comté Immuno-Hématologie Erythrocytaire de l EFS BFC et Immuno-Génétique de Dijon Rédaction Vérification Approbation Veronique LACHAUME 27/04/2017 Patrick JOUBAUD (05/05/2017) Mohamed yousri SLIMANE (05/05/2017) ÉTABLISSEMENT FRANÇAIS DU SANG - - DATE DE DIFFUSION : 05/05/2017 - RÉF : BFC/LAB/MO/001 - VERSION N : 7 efs.sante.fr 1/33

1_OBJET 1.1 Présentation du document. Ce document dans sa version la plus récente est disponible sur le site efs.sante.fr et comporte : L annuaire des sites Immuno-Hématologie Erythrocytaire (IHE) et Immuno Génétique (IG) du Laboratoire de Biologie Médicale Immuno Hématologie Immuno Génétique (LBM IHG) de l EFS BFC. Les exigences auxquelles doivent répondre les demandes d examens adressées aux sites IHE de l EFS BFC et IG de Dijon du LBM IHG de l EFS BFC. Ces exigences concernent les échantillons primaires et leurs documents associés quand ils sont transmis par les établissements de santé ou par les laboratoires de biologie médicale Le respect de ces exigences conditionne l obtention d un résultat analytique fiable, les prestations de conseil et la garantie du lien patient-échantillon primaire indispensable à la sécurité et aux soins prodigués au patient et à l assurance de la qualité des résultats d examens. Les consignes transfusionnelles sont assurées 24/24H 1.2 Présentation des différents sites IHE et IG du laboratoire IHG de l EFS BFC. Les sites IHE effectuent tous les examens qui permettent, notamment, d assurer la sécurité transfusionnelle des patients et le suivi des femmes enceintes et de leur fœtus ou nouveau-né. Le site IG de Dijon effectue des examens d immunogénétique principalement dans le cadre de la transplantation d organes et de tissus (suivi pré-/post- transplantation), ainsi que dans la recherche de phénotype HLA facteur de risque associé de certaines maladies. Pour chaque examen biologique, une fiche signalétique a été établie en annexe précisant : le principe de l'examen, la qualité et la quantité d'échantillons nécessaires, les renseignements cliniques indispensables, les conditions de transport et de réception des échantillons biologiques, le délai moyen de rendu de résultats à partir de la réception des échantillons biologiques. La nécessité de fournir une «attestation de consultation et consentement en vue d un examen des caractéristiques génétiques d une personne». Afin de faciliter la transmission des informations indispensables à la prise en charge et à la réalisation des examens, les sites mettent à disposition des prescriptions 2_PERSONNEL CONCERNE L ensemble du personnel et les clients du LBM IHG 3_DOCUMENTS DE REFERENCE ET/OU ASSOCIÉS Les documents référencés ci-dessous sont disponibles sur le site efs.sante.fr dont le lien est : https://www.efs.sante.fr/region/bourgogne-franche-comte, sélectionner le laboratoire d'immuno-hématologie érythrocytaire et d'immunogénétique, d autres documents de référence sont mentionnés dans le chapitre 4.2 BFC/LAB/FI/004 Liste détaillée des examens du LBM IHG BFC/LAB/FO/001 Prescription d'examens à transmettre au LBM IHG BFC/LAB/FO/005 Ecoute client au LBM IHG (réclamation, satisfaction, discussion) BFC/LAB/FO/021 Attestation de consultation et consentement en vue de l examen des caractéristiques génétiques d une personne efs.sante.fr 2/33

4_DESCRIPTION 4.1 Annuaire des sites 4.1.1.Immuno-Hématologie Erythrocytaire Les examens sont réalisés 24 heures sur 24 et 7 jours sur 7. Des périodes d astreintes des biologistes sont définies de 18h à 9h du lundi au vendredi, et du vendredi 18h au lundi 9h ainsi que les jours fériés, les examens alors réalisés permettent d assurer exclusivement la sécurité transfusionnelle et obstétricale ainsi que la délivrance des PSL. SITE D AUXERRE - IHE 2, Bd de Verdun BP 98 89011 AUXERRE CEDEX 03.86.42.03.74 03.86.42.03.65 SITE DE NORD FRANCHE COMTE - IHE 100, route de Moval 03.84.98.33.68 90400 TREVENANS 03.84.98.33.69 SITE DE BESANÇON - IHE 8, rue du Docteur Jean-François-Xavier Girod. BP1937 25020 BESANCON CEDEX SITE DE CHALON SUR SAÔNE - IHE 4 rue Capitaine Drillien CS 80120 71321 CHALON SUR SAONE CEDEX SITE DE DIJON- IHE 2 rue Angélique Ducoudray BP 47834 21078 DIJON CEDEX SITE DE NEVERS - IHE 1, Avenue Patrick Guillot B.P. 649 58033 NEVERS CEDEX 03.81.61.56.15 03.81.61.56.18 03.85.42.74.93 03.85.42.74.99 03.80.70.60.11 03.80.70.60.04 03.86.61.82.04 03.86.61.82.01 SITE DE SENS - IHE 1, Avenue Pierre de Coubertin 03.86.86.10.68 89100 SENS 03.86.86.19.10 4.1.2.Immuno-Génétique Les examens d immunogénétique sont réalisés du lundi au vendredi de 8h à 18h. Une astreinte dédiée à la réalisation des examens d Immunogénétique dans le cadre de l urgence de transplantation d organes est organisée et assurée par les techniciens habilités. Parallèlement, une astreinte de biologistes est organisée pour assurer la résolution des cas complexes. SITE DE DIJON - IG 2 rue Angélique Ducoudray BP 47834 21078 DIJON CEDEX 03.80.70.60.12 03.80.70.60.20 4.2 Exigences relatives au prélèvement et demandes d examens Rappel des exigences relatives au prélèvement d échantillons sanguins destinés aux examens réalisés par les sites IHE de l EFS BFC et IG de Dijon ainsi qu aux documents devant accompagner les échantillons biologiques. efs.sante.fr 3/33

Références (liste non exhaustive): Code de la Santé Publique (CSP). Décret n 2002-660 du 30 avril 2002 relatif aux conditions de transmission de prélèvements biologiques aux LABM et modifiant le Décret n 76-1004 du novembre 1976 Arrêté du 26 Novembre 1999, relatif à la bonne exécution des analyses de biologie médicale. Arrêté du 26 avril 2002, relatif aux bonnes pratiques de laboratoire en immunohématologie érythrocytaire. Arrêté du 20 juin 2003 fixant la présentation de la fiche de prélèvement de biologie médicale prévue au 2ème alinéa de l article 20-5 du Décret n 76-1004 du novembre 1976. Circulaire DGS/DHOS/AFSSAPS N 03/582 du 15 Décembre 2003 relative à la réalisation de l acte transfusionnel. Norme NF EN ISO 15189 version 2012 et SH REF 02 en vigueur Recommandations de l Agence de la BioMédecine. Standards de l European Federation for Immunogenetics. Une attention toute particulière doit être portée à la qualité de l identification des échantillons biologiques et de l ensemble des documents qui doivent y être joints. Dans un souci didactique, nous rappelons les éléments importants à prendre en compte dans la documentation associée citée en début de ce manuel. 4.2.1.Exigences concernant le prélèvement Contenant Le prélèvement doit être réalisé dans un tube stérile à usage unique de préférence sous vide avec EDTA, ACD, citrate ou sec selon les examens demandés (Cf tableau en annexe) et de diamètre adaptable aux automates (normes européennes). Le tube doit être conçu pour éviter tout risque de contamination ou de pollution. En pratique nous acceptons des tubes type vacutainer de 5 ou 7 ml. Pour les nouveaux nés de moins de 6 mois, un volume minimal de 0,5 ml de sang prélevé de préférence sur tube de 5 (ou éventuellement de 7 ml) permettra la réalisation des examens d immuno hématologie en méthode automatisée. Acte de prélèvement Définition : Acte de soins qui consiste à prélever un échantillon biologique en vue d'examen. Personnes autorisées : Infirmières diplômées d état, Sage femmes, Techniciens de laboratoire après l obtention du certificat de prélèvement, médecins, biologistes médicaux. Objectifs : Réaliser un prélèvement de qualité dans des conditions d hygiène et de sécurité pour le patient et le personnel. Indications : Prescription médicale. Préalables : Préparation du patient : Aucune préparation du patient n'est nécessaire (jeûne par exemple). Des dispositions analytiques étant prévues en cas d échantillon lactescent ou hémolysé. Installer la personne confortablement. Le prélèvement doit être effectué sur un sujet au repos. Vérifier son identité (nom de naissance (nom de famille), prénom, nom marital (nom d'usage), sexe, date de naissance) en la faisant décliner par le patient chaque fois que possible. Vérifier la prescription médicale. Procéder à l interrogatoire nécessaire (selon la prescription, selon les questionnaires pré-analytiques à compléter). Choisir le matériel adapté au type de prélèvement (tubes, aiguilles, dispositifs de prélèvement à usage unique) et au malade. Vérifier la date de péremption des consommables. Déroulement de l acte pour une ponction veineuse : Réaliser un lavage simple des mains ou une désinfection par friction avec un produit hydro alcoolique. Le port des gants est recommandé. Réaliser l antisepsie en respectant le temps de contact, poser le garrot afin de favoriser une vasodilatation veineuse et réaliser le prélèvement : efs.sante.fr 4/33

Ponctionner la veine avec l aiguille de façon tangentielle, enfoncer le tube de façon à percer le bouchon. Cas particulier : En cas de prélèvement sur cathéter, il est nécessaire de purger le cathéter avant le remplissage du premier tube. Maintenir le tube (ponction veineuse sous vide). Attention : Lors du prélèvement, toujours maintenir le bras incliné vers le bas, le tube doit toujours se trouver en dessous du point de ponction. Desserrer le garrot dès que le sang s écoule dans le tube (sa pose ne doit pas dépasser 1 minute). Attendre l arrêt de l écoulement du sang dans le tube pour changer de tube. Retirer l aiguille à la fin du prélèvement en appliquant une compresse sèche sur le point de ponction. Homogénéiser les tubes avec anticoagulant par retournements lents tout en maintenant une pression ferme pendant 1 minute ou plus suivant le cas puis mettre un pansement sec sur le point de ponction. Incidents possibles : Hématome causé par un garrot trop serré, des veines difficiles, un mauvais geste du patient ; Malaise. Rappel : si deux déterminations de groupe ABO-RH-K ou tissulaire sont prescrites (en général dans un contexte transfusionnel et/ou d urgence), il est obligatoire de réaliser deux prélèvements par ponction veineuse, de préférence par deux préleveurs différents ou par défaut à des moments différents. Eliminer les déchets d activités de soins à risques infectieux (DASRI) issus du prélèvement, en toute sécurité dans les collecteurs adaptés. Identification des tubes L étiquetage des tubes contenant le sang, doit être fait au moment du prélèvement sanguin par la personne qui l a effectué. En pratique il doit être réalisé immédiatement après le prélèvement,. L étiquetage doit être conçu pour éviter toute erreur sur l identité de la personne et doit mentionner de façon lisible et bien orthographiée (ou imprimée) les items d'identification référencés dans le tableau des non conformités. Attention : Ne transmettre aucune étiquette "libre" ou "enroulée" autour d'un tube. Ne pas coller 2 étiquettes sur le même tube, ni une étiquette enroulée sur 2 tubes. Le collage de l étiquette doit être particulièrement soigneux : L étiquette doit être parfaitement verticale, L étiquette doit être collée au ras du bouchon, Ne pas cacher l intérieur du tube en collant l étiquette ; le technicien a besoin de pouvoir voir l état de l échantillon Si une étiquette code-barres est apposée sur le tube, elle ne doit pas masquer les renseignements énoncés cidessus. La transmission de sérums ou plasmas décantés au laboratoire ne permettra pas la réalisation des examens demandés. 4.2.2.Exigences concernant la prescription Pour toute demande d'examens venant d un médecin libéral ou d un Etablissement n utilisant pas les pochettes de transmissions d examens fournies par l EFS BFC, joindre impérativement l ordonnance ou sa photocopie. La prescription médicale (Cf " Prescription d'examens à transmettre au LBM EFS BFC Immuno Hématologie Erythrocytaire et Immunogénétique ") doit comporter de façon lisible et bien orthographiée (ou imprimée) tous les items de la prescription. Pour les examens des caractéristiques génétiques d une personne (recherche d un typage HLA facteur de risque associé à une pathologie, HLA et maladie), le typage ne pourra être réalisé que si la demande est accompagnée d une «attestation de consultation et consentement en vue de l examen des caractéristiques génétiques d une personne» dûment complétée. 4.2.3.Exigences relatives à la demande d examen Une pochette de demande d examen par patient et par détermination de groupe sanguin ou tissulaire : ATTENTION : Si les 2 déterminations de groupes sont dans une même pochette : 1 seule sera réalisée, sauf s il existe des heures de prélèvements ou d autres critères sur les tubes permettant de différencier les 2 déterminations. Les sites du laboratoire IHG de l EFS BFC mettent gracieusement à la disposition des prescripteurs des supports pré-imprimés. La demande de fourniture doit être faite directement auprès des sites concernés. efs.sante.fr 5/33

Les données d identification du patient portées sur les échantillons doivent être strictement identiques à celles de la demande d examens. Le prescripteur doit être clairement identifié, sa signature est recommandée mais non exigée sur ce document. 4.2.4.Exigences concernant la fiche de suivi médical (en cas de non utilisation des modèles de demande d examen mises à disposition par l EFS BFC) Examens IHE : Une prescription est obligatoire, de préférence utiliser notre document " Prescription d'examens à transmettre au LBM EFS BFC Immuno Hématologie Erythrocytaire et Immunogénétique ". Cette fiche permet de signaler des informations utiles voire indispensables à la bonne réalisation des examens : Antécédents de transfusions récentes ou lointaines (renseignement obligatoire) et date de la dernière transfusion. Antécédents de «réactions transfusionnelles» et leur date. Antécédents de RAI positive (renseignement obligatoire) Données cliniques et traitement pouvant interférer avec les résultats et notamment patient drépanocytaire, présence d une hémolyse, d un ictère néonatal et/ou d une anémie, patient immuno déprimé ou traité par daratumumab (renseignements obligatoires). En cas de grossesse, ces renseignements sont obligatoires : o date des dernières règles, ou terme ou âge de la grossesse, o en cas d injection dans les six derniers mois d immunoglobulines anti-rh1 (Rhophylac) : - date d injection, voie d administration et posologie de la dose injectée, - RAI avant injection : date et résultat. Remarque : Lors de l identification d anticorps anti-rh1, en l absence de date (ou de notion) d une injection d immunoglobulines anti-rh1, et / ou d absence de résultat de RAI négative avant toute injection d immunoglobulines anti-rh1, et en l attente des renseignements manquants la nature immune de l anticorps anti RH1 sera généralement présumée avec des consignes transfusionnelles adaptées. Pour un examen à réaliser sur le sang d un nouveau-né, il est indispensable de nous communiquer les renseignements suivants : - L identité complète de la mère : prénom, nom de naissance (nom de famille), nom marital ou d usage s il existe, date de naissance - groupe sanguin ABO.RH1 et phénotype RH.KEL1 de la mère (copie de la carte de groupe sanguin), - la date et le résultat de la dernière RAI de la mère (copie du résultat). Contexte : préciser si examen pré- transfusionnel ou pré- opératoire. Le degré d'urgence. Cas particulier : Lors d une détermination du groupe sanguin (immuno-hématologie) demandée par le prescripteur sans précision de technique, le consentement éclairé du patient est considéré comme implicite et permettra, si accord du client la réalisation d un génotypage RHD et/ou RHCE en biologie moléculaire dans l intérêt des soins prodigués au patient (suspicion d un variant antigénique). Examens IG : Certains renseignements sont utiles voire indispensables à la bonne réalisation des examens. Le contexte de l examen : Pré- ou post-transplantation d organe Recherche d un typage HLA particulier facteur de risque associé à une pathologie Examens dans un cadre familial : préciser le lien avec le patient. Effet Indésirable Receveur Transfusion plaquettes inefficace (TPI) Ou la présence d évènements immunisants : Greffe (organe, cellules souches) Grossesse Transfusion (suivi à J0, J14-J20 et J30) Toute autre information pertinente doit être notée sur la prescription. efs.sante.fr 6/33

4.2.5.Autres documents nécessaires Pour toute demande d identification d anticorps irréguliers, il est impératif de nous transmettre une copie de la carte ou un duplicata de compte-rendu de groupe sanguin, une photocopie du panel d hématies utilisé et le résultat des réactions observées. Pour toute demande d identification de RAI suite à une injection de Rhophylac, nous transmettre une copie de la carte ou un duplicata de compte-rendu de groupe sanguin du patient ainsi que la date d'injection, la posologie et le résultat des recherches d'agglutinines irrégulières (RAI) avant injection. 4.2.6.Facturation Tous les examens sont systématiquement facturés aux LBM ou aux ES. Sur demande, une note d honoraire peut être jointe au compte-rendu d examens. 4.3 Exigences concernant le stockage et le transport des échantillons biologiques Le transport des échantillons doit être effectué le plus rapidement possible en assurant leur intégrité et la sécurité des personnels, il doit respecter les exigences réglementaires. En pratique pour les patients hospitalisés, les échantillons biologiques sont acheminés dans un emballage étanche laissant apparaitre le nom et l adresse du laboratoire destinataire, soit par les différentes navettes existantes au sein de ces établissements ou mandatées, soit par pneumatique. Lorsque les échantillons biologiques sont adressés par un laboratoire et expédiés par transporteur, il est obligatoire d insérer les échantillons au sein d une boite étanche, tapissée d'un matériau absorbant et l ensemble placé dans un emballage extérieur résistant. Cf décret n 2002-660 du 30 avril 2002. En fonction du délai d'acheminement des échantillons biologiques, le laboratoire se réserve le droit de choisir la technique la plus appropriée ou de contacter le prescripteur. Le volume d échantillon prélevé nécessaire à la réalisation des examens est revu annuellement au cours de la revue de direction du laboratoire. Le délai de rendu de résultat est défini entre la réception des tubes et le résultat disponible. Toutes les demandes d'examens et leurs échantillons biologiques sont réceptionnés 24h/24h et 7j/7j à l'exception des échantillons arrivant par la poste. Pour tout envoi d échantillons par la poste, tenir compte du fait que l'efs BFC ne réceptionne pas de courrier le samedi. Pour les examens d immuno-hématologie (IHE) : l acheminement des échantillons doit s effectuer le plus rapidement possible et doit permettre la réalisation des examens demandés au plus tard dans les 7 jours après la date du prélèvement. La température d acheminement des échantillons n a pas d impact sur le résultat rendu. Quelles que soient les conditions de transport, l absence d hémolyse à réception des échantillons est un critère d acceptation. Pour les examens d immunogénétique (IG) : l acheminement des échantillons doit se faire de préférence à température ambiante et doit permettre la réalisation des examens demandés au plus tard dans les 7 jours après la date du prélèvement. Pour le test de Kleihauer : l échantillon doit être conservé et transporté entre 2 et 8 C afin d être réalisé dans les 48 heures qui suivent le prélèvement. En cas d urgence, les échantillons doivent être acheminés immédiatement, par coursier, la notion d urgence ainsi que les renseignements cliniques devant être précisée sur la demande d examens. 4.4 Examens transmis Les échantillons biologiques seront transmis au LBM spécialisé pour l examen demandé : Dosage pondéral : Le CNRHP (Centre National de Référence d Hémobiologie périnatale) est le seul laboratoire français de référence pour le suivi de la femme enceinte (circulaire DHOS/DGS/ N 156 du 29 mars 2004). Accréditation Cofrac Examens médicaux, n 8-2542, liste des sites et portée disponibles sous www.cofrac.fr efs.sante.fr 7/33

Génotypage érythrocytaire (autre que le système ABO) : Le Laboratoire de Biologie Moléculaire de l EFS Ile de France site de Créteil est accrédité pour le génotypage érythrocytaire (systèmes RH KEL FY JK MNS). Nous lui transmettons avec votre accord les échantillons de patient, ayant des auto-anticorps rendant difficile sa prise en charge transfusionnelle ou présentant en technique d hémagglutination, des antigènes d expression affaiblie, afin d identifier le variant suspecté (antigène affaibli généralement sans risque d allo immunisation, ou antigène partiel avec risque d allo immunisation en cas de transfusion incompatible). Accréditation Cofrac Examens médicaux, n 8-2098, liste des sites et portée disponibles sous www.cofrac.fr Difficultés d identification d anticorps irréguliers et groupes sanguins rares : Le CNRGS (Centre National de Référence pour les Groupes Sanguins) est le seul laboratoire français de référence pour les examens d immuno-hématologie érythrocytaire concernant les difficultés de groupage et d identification d anticorps irréguliers, Accréditation Cofrac Examens médicaux, n 8-1950, liste des sites et portée disponibles sous www.cofrac.fr 4.5 Gestion des anomalies et des non conformités Les examens transmis ne pourront être réalisés que dans la mesure où la qualité des échantillons biologiques et les délais de transports sont adéquats. Le laboratoire effectue à réception un contrôle de conformité des échantillons biologiques et demandes d examens, en respectant les conditions d acceptation des échantillons et prescriptions, décrites ci-dessous : NON CONFORMITES CONCERNANT LA DEMANDE D EXAMENS Nature de la non-conformité Absence de demande d examens Absence (ou non lisibilité) d identité totale ou partielle (nom de naissance, prénom, date de naissance, sexe et le cas échéant nom usuel ou marital) Discordance sur une même prescription entre données informatiques et manuscrites Absence (ou non lisibilité) du nom ou de l identifiant unique du prescripteur ou du prestataire de soins (service) Absence (ou non lisibilité) de critères permettant l identification univoque du préleveur Double étiquetage Absence de date de prélèvement (ou erronée) Heure de prélèvement absente ou erronée, par exemple : postérieure à l heure de réception au laboratoire) Nature des examens non précisée Absence des renseignements cliniques pertinents relatifs aux examens Absence d heures de prélèvement ou de critères permettant de différencier les 2 déterminations demandées simultanément Refus de la demande (sauf si régularisation rapide) (sauf si régularisation rapide) (sauf si régularisation rapide) (sauf si régularisation rapide pouvant être régularisée par téléphone) (sauf si régularisation rapide ou examens transmis pour sous-traitance) (sauf si régularisation rapide ou date exacte présente sur le tube) NON Si postérieure : heure de prélèvement mise par défaut à 00h01 (sauf si régularisation rapide) NON (si nécessaires doivent être demandés par le biologiste) Traitement d une seule détermination. Refus de la deuxième détermination efs.sante.fr 8/33

Absence du document «Attestation consultation et consentement en vue d un examen des caractéristiques génétiques d une personne» (sauf si régularisation sous 1 mois maximum) NON CONFORMITES CONCERNANT L'ECHANTILLON BIOLOGIQUE Nature de la non-conformité Absence d échantillon biologique Absence (ou non lisibilité) d identité totale ou partielle (nom de naissance, prénom, date de naissance, sexe et le cas échéant nom usuel ou marital) Double étiquetage Discordance entre identité sur la demande et sur l échantillon Absence de date de prélèvement (ou erronée) Echantillon hémolysé avec intensité > 1+ : Refus de la demande (Sauf pour le sexe si présent sur la demande) (sauf si date exacte sur la demande) (sauf si Incident Transfusionnel ou contexte clinique d'hémolyse) Sérum / plasma décanté ou échantillon non adapté Le responsable du laboratoire peut déroger à ces critères. L observation de non conformité de la prescription ou de l échantillon biologique peut entraîner le refus de la demande ou sa mise en attente pour complément d information, en fonction de son niveau de gravité. Dans tous les cas, que la demande soit refusée ou acceptée (non conformité levée), le prescripteur est informé. Toutes les non conformités sont tracées informatiquement. Une remise en cause du lien patient / échantillon primaire peut survenir à l occasion de la confrontation des résultats avec l antériorité, après une enquête interne qui permet d éliminer une cause liée au laboratoire. La discordance avec l historique pourra faire évoquer : Une erreur de patient pour l échantillon concerné, Une erreur de patient lors d un prélèvement antérieur, Un patient réellement différent (homonymie, usurpation d identité). Dans ces cas, la discordance est tracée dans le logiciel médico-technique et de nouveaux échantillons biologiques et demandes d examens sont nécessaires. 4.6 Annulation de demande d examen Maitrise des dépenses de santé En IHE, des annulations de demandes de groupe sanguin, en cas de déterminations de groupe ABO-RH-K connues dans notre LMT, pourront être effectuées selon les décisions prises par les CSTH des établissements de soins. De plus, lors de la prescription d une évaluation du titre d'anticorps froids (agglutinines froides), cet examen ne sera pas effectué si le TDA C3d est négatif sauf contexte clinique particulier. La mention d'annulation ou de non réalisation de l examen figurera sur le compte-rendu émis. En IG, l annulation de demande d examens est convenue et décrite dans les Règles de Collaboration Externes avec les différents services cliniques. efs.sante.fr 9/33

En cas de doute sur la pertinence de la réalisation d un examen, le laboratoire demande la confirmation de l examen au prescripteur. La mention d'annulation figurera sur le compte-rendu émis pour l examen annulé et en cas de prescription redondante un duplicata de l examen précédent sera joint au compte-rendu. 4.7 Stockage des échantillons biologiques et prescriptions complémentaires 4.7.1.Stockage au LBM IHG Après réalisation des examens, les échantillons biologiques sont conservés à 5+/-3 C au moins 3 jours, à compter de la date de réception au laboratoire. 4.7.2.Prescriptions complémentaires Les délais de prescriptions d'examens complémentaires après réalisation d un examen ne peuvent en général excéder 3 jours (durée de stockage cité ci-dessus). Il est nécessaire d'avoir une prescription complémentaire écrite. Le laboratoire se réserve le droit de refuser une prescription complémentaire Le biologiste médical modifie, si nécessaire la prescription sur le fondement des éléments cliniques du patient et en fonction de la question posée par le prescripteur. Cette modification se fait, sauf urgence ou indisponibilité, après accord du prescripteur (article L6211-8 du CSP) et est tracée dans le LMT du laboratoire. Le biologiste médical adapte la prescription aux recommandations de bonnes pratiques, sauf avis contraire du prescripteur (article L6211-9 du CSP). En cas d échantillon avéré insuffisant pour réaliser des examens complémentaires, un résultat sera rendu mentionnant la nécessité de renvoyer de nouveaux échantillons. Ces derniers seront traités comme une nouvelle demande, sauf s il s agit d échantillons issus du même prélèvement sanguin. 4.7.3.Répétition des examens en raison de problème analytique Si nécessaire, les examens sont repris à l aide de techniques complémentaires. 4.8 Transmission des comptes rendus d examens Dans tous les cas, aucun résultat n est transmis par téléphone. Le prescripteur (ou service de soin) est informé oralement d un examen dont le résultat est considéré critique ou nécessitant une alerte, qui sera systématiquement confirmé par un compte rendu d examen. Les résultats d examens sont transmis au prescripteur dans le respect des dispositions réglementaires permettant de sauvegarder le secret professionnel : par fax à la demande du client par pneumatique par courrier interne ou postal 4.9 Management de la qualité L EFS BFC est certifié ISO 9001 version 2008 pour l ensemble de ses activités (Certificat n FR003283-3 du 24 novembre 2014). Le LBM IHG de l EFS BFC est accrédité : Accréditation Cofrac Examens médicaux, n 8-2617, liste des sites et portée disponibles sous www.cofrac.fr Le site d immunogénétique du LBM IHG de Dijon est accrédité selon les normes européennes EFI (N 06-FR- 026.974). Tous les examens sont réalisés conformément aux modes opératoires écrits, mis à jour au fur et à mesure de l évolution des techniques et selon les préconisations des fournisseurs quant à l'utilisation de leurs réactifs et matériel. La politique de contrôle qualité interne de chaque examen fait l objet d une description détaillée quant aux matériaux de contrôles, à leurs conditions de passage, aux règles d acceptabilité et à la conduite à tenir en cas d anomalie. efs.sante.fr 10/33

4.9.1.Audits La conformité des activités du LBM IHG par rapport aux différents référentiels cités 3 est régulièrement évaluée par des audits internes (régionaux ou nationaux) et/ou externes (Cofrac, EFI). Toute non-conformité relevée donne lieu à une analyse des causes suivie d actions. 4.9.2.Ecoute client Dans un souci d efficacité et d amélioration continue de la qualité, le laboratoire a mis en place une démarche d écoute client à travers laquelle toutes les réclamations, discussion pertinentes et observations des clients sont prises en compte et traitées dans la mesure du possible (formulaire de déclaration disponible sur le site internet). Une enquête de satisfaction est réalisée périodiquement. 4.9.3.Service à la clientèle De façon à assurer aux clients une totale transparence de nos activités, ces derniers ont la possibilité de visiter les sites IHE ou IG du LBM IHG sur demande écrite adressée au responsable du site IHE ou IG. En cas de retard dans la réalisation des examens, de changement de méthode ou de modalités de transmission d examens non énoncée ci-dessus, chaque laboratoire s engage à prévenir ses clients s il y a un impact pour le patient. Des professionnels qualifiés assurent les conseils en matière de choix des examens et d'utilisation des prestations du laboratoire, notamment quant à la fréquence des prescriptions et le type d échantillon primaire requis. Le cas échéant, ils fournissent les prestations de conseil et les avis et interprétations en fonction des résultats des examens. Les responsables des sites IHE ou IG du laboratoire sont à la disposition des prescripteurs à l'occasion de réunions ayant pour objet le recours aux prestations du laboratoire et la délivrance de conseils sur des sujets scientifiques particuliers. 4.10 Protection des données L accès aux données informatiques de l EFS BFC nécessite une authentification avec un nom d utilisateur et un mot de passe défini pour chaque utilisateur. Le personnel du laboratoire est soumis au secret professionnel sur les informations recueillies dans l exercice de ses fonctions, tant en interne qu en externe. Il s y engage en signant un certificat d engagement de confidentialité et d intégrité. Les intrusions informatiques extérieures (Internet) sont évitées par l utilisation d un serveur dédié "Pare-feu" et par un logiciel anti-virus installé sur tous les postes de l entreprise raccordés au réseau, ainsi que sur les serveurs de fichiers. efs.sante.fr 11/33

5_ANNEXE IMMUNO HEMATOLOGIE ERYTHROCYTAIRE Cf conditions de conservation et transport des échantillons Examens Synonymes abreviations - Nomenclature Principe / indication de l'examen Echantillon biologique Réalisation Délai de rendu de resultats (à partir de la réception des échantillons) Techniques utilisees Remarques Groupe sanguin ABO.RH1 Phénotype RH.KEL1 Groupe, Groupe sanguin, GS ABO.RH1 Phénotype Rhésus Kell RH.KEL1 Conforme NABM Le groupe sanguin d'un patient est déterminé en vue d'une transfusion potentielle ou dans le cadre d'une grossesse. Groupe ABO.RH1 : Déterminer le groupe sanguin ABO et le phénotype RH1(D) Phénotype RH.KEL1 : Déterminer les antigènes érythrocytaires RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e), KEL1 (K), 1 tube vacutainer EDTA de 5 ou 7 ml Volume minimum : 0,5 ml admis seulement pour les nouveaux nés jusqu à 6 mois < 3 heures (sauf difficultés analytiques) Urgence vitale (avec demande de sang associée) : résultat possible en 1 heure Technique microplaque ou microfiltration sur automate (selon le site). Technique manuelle par microfiltration ou en tubes (selon le site). - La recherche de l antigène RH1 faible n est plus réalisée chez les patients RH :-1. - La détermination de l antigène RH1 est réalisée en technique microfiltration chez les nouveaux nés. - En fonction du contexte clinico-biologique, un génotypage RHD et/ou RHCE pourra compléter cet examen efs.sante.fr 12/33

Examens Phénotype érythrocytaire étendu Synonymes abreviations - Phénotype étendu Nomenclature Conforme NABM Principe / indication de l'examen Déterminer au moins un antigène de groupe sanguin autre que RH.KEL1. Le phénotype étendu est réalisé au cours de l étape d identification d anticorps irréguliers (au minimum la détermination des antigènes antithétiques correspondants aux anticorps identifiés) à l'initiative du biologiste. Echantillon biologique 1 tube vacutainer EDTA de 5 ou 7 ml Volume minimum : 0,5 ml admis seulement pour les nouveaux nés jusqu à 6 mois. Réalisation Délai de rendu de resultats (à partir de la réception des échantillons) Routine : < 48h Urgence : Examen non effectué en urgence sauf cas particulier Techniques utilisees Technique microfiltration manuelle ou sur automate (selon le site). Remarques En fonction du contexte clinico-biologique, un génotypage pourra compléter ou remplacer cet examen (voir examen transmis) Test direct à l antiglobuline Coombs direct, TDA Conforme NABM Mise en évidence de la sensibilisation in vivo des globules rouges. Deux antiglobulines sont utilisées : une anti-igg et l autre à spécificité anti-c3d 1 tube vacutainer EDTA de 5 ou 7 ml Volume minimum dans les tubes 0,5 ml, admis seulement pour les nouveaux nés jusqu à 6 mois < 3 heures (sauf difficultés analytiques) Urgence : résultat possible en 1 heure Technique manuelle ou automatisée par microfiltration Un TDA positif en IgG voire négatif en cas d ictère néonatal ou d hémolyse pourra être suivi d'une élution efs.sante.fr 13/33

Examens Recherche d anticorps antiérythrocytaires : Dépistage- Identification Synonymes abreviations - Recherche d anticorps irréguliers, Allo anticorps antiérythrocytaire, RAI Nomenclature Conforme NABM Principe / indication de l'examen Déterminer la présence d'un anticorps anti-érythrocytaire dans le plasma d'un patient en vue d'une transfusion, dans le cadre d'une grossesse, ou en posttransfusionnel. Si l étape de dépistage est positive, une identification doit être effectuée. Si la présence d'un autoanticorps est soupçonnée, un TDA sera réalisé et facturé Echantillon biologique 1 tube vacutainer EDTA de 5 ou 7 ml Volume minimum : 0,5 ml admis seulement pour les nouveaux nés jusqu à 6 mois. Réalisation Délai de rendu de resultats (à partir de la réception des échantillons) En Routine -Si dépistage négatif : < 3 h -Si dépistage positif : 24 h à plusieurs jours selon les difficultés En urgence vitale, minimum 1 heure après réception des échantillons pour le dépistage Techniques utilisees Technique manuelle ou automatisée par microfiltration Remarques L étape d identification peut nécessiter la réalisation d'allo ou d'auto-adsorptions ou d élutions qui seront suivies de nouvelles étapes de dépistage et d identification sur l adsorbat ou l éluât qui seront facturées. Un groupe ABO.RH1 et RH.KEL1 ainsi qu un phénotype érythrocytaire étendu pourront être réalisés et facturés. Documents à joindre à une demande de RAI : - Si seule l étape d identification est demandée : joindre le résultat détaillé de l étape de dépistage ainsi que le panel de dépistage utilisés, la copie de la carte ou un duplicata de compte-rendu de groupe sanguin et la fiche de prescription ("Prescription d'examens à transmettre au LBM EFS BFC Immuno Hématologie Erythrocytaire et Immunogénétique" ou tout autre document mentionnant les renseignements exigés) correctement remplie en cas d'identification d'un anti-rh1 passif. -En cas d'identification d'un anti-rh1 et si absence de RAI négative de moins de 10 jours avant l'injection du Rhophylac, un microtitrage (comparatif à un étalon anti- RH1) peut être réalisé pour conclure à la présence d'un anti-rh1 immun ou passif et sera facturé B95, il pourra être complété par un TIA en milieu salin non facturé. -En cas de grossesse, mentionner l âge de la grossesse, le terme ou la date des dernières règles. -Dans le cas d une femme enceinte ou en péri natal : noter impérativement sur la demande d examen une éventuelle injection de Rhophylac (préciser la date de l injection ainsi que la date et le résultat de la RAI avant l injection). efs.sante.fr 14/33

Examens Adsorption d anticorps antiérythrocytaires Elution d anticorps antiérythrocytaires Synonymes abreviations - Pas de synonyme Elution Nomenclature Conforme NABM Conforme NABM Principe / indication de l'examen Adsorber des auto-anticorps ou des allo-anticorps sur des hématies autologues ou homologues. L'adsorption d'anticorps anti-érythrocytaire est le plus souvent réalisée en cas de présence d autoanticorps pouvant masquer la présence d allo-anticorps ou dans le cadre de l identification d'un mélange complexe d'anticorps irréguliers. Echantillon biologique Auto-adsorptions : 5 tubes vacutainer EDTA de 5 ou 7 ml Allo-adsorptions : 3 tubes EDTA de 5 ou 7 ml. Documents à joindre : Prescription de PSL le cas échéant Eluer et identifier un éventuel auto-anticorps fixé sur les hématies du patient ou allo-anticorps fixé sur les hématies transfusées. L'élution est le plus souvent réalisée dans le cadre d un TDA positif de type IgG, d'une identification, d un TDA négatif en cas d ictère néonatal ou d hémolyse, d'un mélange d'anticorps irréguliers ou d'un effet indésirable receveur. 1 tube vacutainer EDTA de 5 ou 7 ml Réalisation Délai de rendu de resultats (à partir de la réception des échantillons) De 12 à 24 heures selon les difficultés analytiques. De 12 à 24 heures (sauf cas particulier). Techniques utilisees Technique manuelle en tube Technique manuelle en tube (élution acide). Documents à joindre : Pour les nouveaux nés, copie du résultat du groupe sanguin et de la dernière RAI de la mère Remarques Cet examen est suivi d'une nouvelle étape de dépistage et d'identification si le dépistage est positif. Cet examen peut être réalisé à l initiative du biologiste. Cet examen est suivi d'une étape de dépistage sur éluât et d'une identification si le dépistage est positif. Cet examen peut être réalisé à l initiative du biologiste efs.sante.fr 15/33

Examens Synonymes abreviations - Nomenclature Principe / indication de l'examen Echantillon biologique Réalisation Délai de rendu de resultats (à partir de la réception des échantillons) Techniques utilisees Remarques Tester in vitro le plasma d'un patient avec les hématies d un CGR : Demande non urgente : 2 à 3 heures, délai > 3 heures en cas d immunisation complexe. Epreuve directe de compatibilité EDC Cross match érythrocytaire Conforme NABM - à transfuser (chez un receveur présentant ou ayant présenté une alloimmunisation antiérythrocytaire ou chez un patient drépanocytaire) - déjà transfusé (bilan d effet indésirable receveur) 1 tube vacutainer EDTA de 5 ou 7 ml Demande Urgence Vitale (Contact téléphonique) : minimum 1 heure à réception de l échantillon sanguin pour une immunisation simple Technique en microfiltration manuelle ou automatisée selon le site R.A.S. Documents à joindre : Demande de produits sanguins précisant le nombre de concentrés de globules rouges souhaités. Document de groupe sanguin (carte de groupe sanguin ou compte rendu des 2 déterminations) et résultats des anticorps connus ou d une RAI de moins de 3 jours. efs.sante.fr 16/33

Examens Recherche et évaluation du titre d agglutinines froides Dépistage et évaluation du titre d anticorps immuns (et naturels) anti-a ou anti-b Synonymes abreviations - A F. Agglu froides Pas de synonyme Nomenclature B20 pour chaque titrage réalisé Principe / indication de l'examen Mise en évidence et évaluation du titre d'agglutinines froides dans le plasma d un patient. Echantillon biologique 1 tube vacutainer EDTA de 5 ou 7 ml Volume minimum dans le tube : 3 ml Réalisation Délai de rendu de resultats (à partir de la réception des échantillons) Dans les 7 jours Techniques utilisees Technique manuelle en tube Documents à joindre : Copie de la carte de groupe sanguin du patient - Diagnostic clinique suspecté Conforme NABM Evaluer le titre des anticorps anti-a et/ou anti-b naturels et/ou immuns dans le suivi de : Incompatibilité ABO mère / enfant Transfusion de plaquettes non ABO isogroupe Allogreffe de cellules souches hématopoïétiques Hypogammaglobulinémie ou agammaglobulinémie 1 tube vacutainer EDTA de 5 ou 7 ml Volume minimum dans le tube : 3 ml Dans les 7 jours En urgence (greffe) : dans les 3 heures Technique manuelle en micro-filtration Remarques En l'absence de résultat de TDA récent (1 semaine), il sera réalisé avant toute recherche d'agglutinines froides Généralement A F réalisée que si le TDA est positif en C3d. Cet examen peut être réalisé à l initiative du responsable du laboratoire après accord du prescripteur. Documents à joindre : Dans le cas d un test direct à l antiglobuline positif chez un nouveau né : groupe sanguin et RAI de la mère au moment de l accouchement, groupe sanguin de l enfant (ou échantillons afin de réaliser ces examens). efs.sante.fr 17/33

Examens Synonymes abreviations - Nomenclature Principe / indication de l'examen Echantillon biologique Réalisation Délai de rendu de resultats (à partir de la réception des échantillons) Techniques utilisees Remarques Evaluation du titre des anticorps antiérythrocytaires autres que anti- A et anti-b Titrage d anticorps Conforme NABM Evaluation du titre de l'anticorps. Titrage obligatoire d'un allo anticorps irrégulier antiérythrocytaire ayant un intérêt obstétrical, dans le cadre du suivi de grossesse. 1 tube vacutainer EDTA de 5 ou 7 ml Dans les 7 jours Technique manuelle en tube Cet examen peut être réalisé à l initiative du responsable du laboratoire. Informations à transmettre : Age de la grossesse ou date des dernières règles Test de Kleihauer Pas de synonyme Conforme NABM - Recherche d hématies fœtales dans le sang de la mère dans le cadre de la prophylaxie d une immunisation anti-rh1 chez une femme RH:-1 après accouchement ou interruption thérapeutique / médicale de grossesse - Recherche de pureté de sang fœtal en cas de prélèvement in utero 1 tube vacutainer EDTA de 5 ou 7 ml Dans les 3 jours Coloration de l hémoglobine fœtale, sur lame et examen microscopique Réalisé par le site IHE de Dijon. En cas de test positif, l échantillon est transmis pour quantification au laboratoire d hématologie du CHU Documents à joindre : Phénotype RH1 du nouveau né, groupe sanguin de la mère et contexte clinique efs.sante.fr 18/33

Examens Bilan d effet indésirable receveur Synonymes abreviations - Accident ou incident transfusionnel, choc transfusionnel Nomenclature Cf examens concernés Principe / indication de l'examen Condition de réalisation et bilans définis avec les hémovigilants. Echantillon biologique -2 tubes vacutainer EDTA de 5 ou 7 ml +/-1 tube sec de 5 ml ou 7 ml pour la recherche d'anticorps anti- HLA (Cf laboratoire IG B6) Réalisation Délai de rendu de resultats (à partir de la réception des échantillons) Dans les 24 à 48 heures Documents à joindre : Description, date et heure de l incident Techniques utilisees Selon les examens réalisés Remarques En plus des échantillons biologiques : transmettre tous les PSL incriminés dans l'épisode transfusionnel. Examens Materiel, prelevement, transport Réception Délai de rendu de resultats Examens transmis Biologie moléculaire (RH.KEL1, FY, JK, MNS) 1 tube vacutainer EDTA de 5 ou 7 ml par examen.. Du lundi au jeudi avant 13 heures. Dès réception des résultats de l'efs Ile de France site de Créteil Remarques : Un antigène RH1 confirmé partiel en biologie moléculaire sera rendu négatif et la nature «partiel» ou «affaibli» sera notée en mention biologique sur la carte de groupe efs.sante.fr 19/33

Examens Materiel, prelevement, transport Réception Délai de rendu de resultats Dosage pondéral 1 tube vacutainer EDTA de 5 ou 7 ml. Du lundi au jeudi avant 13 heures. Dès réception des résultats du CNRHP Difficultés de groupages ou d'identification d'anticorps irréguliers - RAI : 15 ml sur tube sans additif (sec) + 15 ml sur EDTA (20 ml si suspicion d auto anticorps) -Phénotypes : 2 tubes de 5 ml sur EDTA -Génotype : 1 tube de 5 ml sur EDTA -Variants ABO et RH : 3 tubes de 5 ml sur EDTA + 10 ml sur tube sans additif Du lundi au jeudi avant 13 heures. Dès réception des résultats du CNRGS.. Kleihauer >19 HF/10 000 HA 1 tubes EDTA Tous les jours Dès réception des résultats du CHU efs.sante.fr 20/33

6_ANNEXE IMMUNOGENETIQUE Cf exigences concernant le stockage et le transport des échantillons biologiques B1. Groupages tissulaires dans le cadre d un bilan d Auto-Immunité (BAI) Groupe tissulaire, Groupe HLA, Typage HLA Phénotype HLA de classe I : Groupe HLA-A, -B ; code 1180, cotation B380 Phénotype HLA de classe II : Groupe HLA-DR, -DQ ; code 1181, cotation B700 PRINCIPE DE L'EXAMEN Déterminer le groupe HLA de classe I (A, B) ou de classe II (DR, DQ) dans le cadre d un bilan d autoimmmunité. Phénotype HLA de classe I : 1 tube vacutainer ACD de 6 ml (bouchon jaune pâle) Phénotype HLA de classe II : 1 tube vacutainer EDTA de 7ml (bouchon violet) RENSEIGNEMENTS CLINIQUES INDISPENSABLES Contexte de la prescription. (de la réception des tubes à la signature du compte-rendu par le biologiste) Routine (du lundi au vendredi) : Classe I : 5 jours Classe II : 10 jours Classe I : typage en LCT Classe II : typage en biologie moléculaire par PCR R-SSO Luminex. B2. Greffe d organe : Bilan pour inscription sur liste d attente : a) Bilan initial Bilan pré-greffe d organe (rénal, cardiaque, hépatique ou autre) : 1 ère détermination de groupe tissulaire + recherche des anticorps anti-hla Typage HLA de classe I : Groupe HLA-A, -B code G173, cotation BHN1080 Typage HLA de classe II : Groupe HLA-DR, -DQ Recherche d anticorps anti-hla de classe I et II, conservation en sérothèque : codes et cotations cf chapitre B6. PRINCIPE DE L'EXAMEN Déterminer le groupe HLA de classe I (A, B) et de classe II (DR, DQ) ainsi que la présence éventuelle d anticorps anti-hla dans le cadre du bilan initial dans le cadre d une inscription sur la liste d attente de greffe. 1 tube vacutainer ACD de 6 ml (bouchon jaune pâle) Bilan initial pré-greffe 1 tube vacutainer EDTA de 7ml (bouchon violet) BOURGOGNE FRANCHE COMTÉ DATE DE DIFFUSION : 05/05/2017 - RÉF : BFC/LAB/MO/001 - VERSION N : 7 efs.sante.fr 21/33

2 tubes vacutainer secs de 7ml (bouchon jaune foncé ou rouge) RENSEIGNEMENTS CLINIQUES INDISPENSABLES Degré d urgence pour une inscription sur la liste d attente de greffe cardiaque. (de la réception des tubes à la signature du compte-rendu par le biologiste) Routine (du lundi au vendredi) : 21 jours Urgence, prendre contact avec le biologiste : 1 journée (technique sensible uniquement) Typage Classe I : Typage en LCT Typage Classe II : Typage en biologie moléculaire par PCR R-SSO Luminex Recherche d anticorps anti-hla classe I (dépistage et identification) : LCT + technique sensible (Luminex) Recherche d anticorps anti-hla classe II (dépistage et identification) : technique sensible (Luminex) REMARQUES En cas de mise en évidence d anticorps anti-hla de classe IgM, une recherche d auto-ac est préconisée lors du crossmatch pré-greffe. Selon les recommandations de l agence de la biomédecine, en l absence d évènement immunisant, une seule recherche d anticorps anti-hla par LCT par an est effectuée. b) Bilan de confirmation Bilan pré-greffe d organe (rénale, cardiaque, hépatique ou autre) 2 ème détermination de groupe tissulaire + recherche des anticorps anti-hla Typage HLA de classe I : Groupe HLA-A, -B code G173, cotation BHN1080 Typage HLA de classe II : Groupe HLA-DR,-DQ Recherche d anticorps anti-hla classe I et II, conservation en sérothèque : codes et cotations cf chapitre B6. PRINCIPE DE L'EXAMEN Confirmer le groupe tissulaire de classe I (A, B) ou de classe II (DR, DQ) ainsi que la présence éventuelle d anticorps anti-hla dans le cadre d un bilan de confirmation pour une inscription sur liste d attente d organe. 1 tube vacutainer EDTA de 7ml (bouchon violet) Bilan de confirmation pré-greffe 2 tubes vacutainer secs de 7ml (bouchon jaune foncé ou rouge) RENSEIGNEMENTS CLINIQUES INDISPENSABLES Degré d urgence pour une inscription sur la liste d attente de greffe cardiaque. (de la réception de tubes à la signature du compte-rendu par le biologiste) Routine (du lundi au vendredi) : 21 jours efs.sante.fr 22/33

Typage Classe I : Typage en biologie moléculaire par PCR R-SSO luminex Typage Classe II : Typage en biologie moléculaire par PCR R-SSO luminex. Recherche d anticorps anti-hla classe I (dépistage+ identification) : LCT + technique sensible (Luminex) Recherche d anticorps anti-hla classe II (dépistage+ identification) : technique sensible (Luminex) REMARQUES En cas de mise en évidence d anticorps anti-hla de classe IgM, une recherche d auto-ac est préconisée lors du crossmatch pré-greffe. Selon les recommandations de l agence de la biomédecine, en l absence d évènement immunisant, une seule recherche d anticorps anti-hla par LCT par an est effectuée. B3. Typage HLA pour un don d organe a) Donneur en état de mort encéphalique Groupe HLA de classe I et II dans le cadre d un Prélèvement Multiples d Organes (PMO). En journée : code G033, cotation BHN3300 En astreinte : code G034, cotation BHN5500 PRINCIPE DE L'EXAMEN: Réaliser le typage HLA classe I et II d un donneur potentiel en vue d un prélèvement multiple d organes. Bilan PMO 6 tubes vacutainer ACD de 6ml (bouchon jaune pâle) 24 heures sur 24, 7j/7. (à partir de la réception des prélèvements) En urgence : Entre 4 et 6 heures. REMARQUES Prévenir le laboratoire. En dehors des heures d ouverture du laboratoire, joindre l astreinte de transplantation. Sérologie : plaques de typage monoclonales (LCT) Biologie moléculaire : PCR-SSP b) Donneur vivant (familial) SYNONYMES ABREVIATIONS NOMENCLATURE Groupe HLA de classe I et II dans le cadre don intrafamilial ; Typage HLA d un donneur vivant Typage HLA de classe I : cotation BHN 380 Typage HLA de Classe II : code G175, cotation BHN250 par locus PRINCIPE DE L'EXAMEN: Réaliser le typage HLA d un donneur potentiel en vue d un don d organe. Typage HLA de classe I et II d un 1 tube vacutainer ACD de 6ml (bouchon jaune pâle) donneur intrafamilial 1 tube vacutainer EDTA de 7ml (bouchon violet) efs.sante.fr 23/33