Société Française des Antioxydants

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Comment évaluer l activité antioxydante? Formation SFA Page 1

Mesure de l Activité Antioxydante dans l Industrie & chez l Homme Mardi 7 Novembre 2017, Paris Cette formation s inscrit dans le cadre de la formation continue organisée par la SFA La Société Française des Antioxydants organise une nouvelle journée de formation sur le thème: «Stress Oxydant et Antioxydants - Comment évaluer l activité antioxydante?». Cette journée aura lieu à Paris le mardi 7 novembre 2017. Les objectifs de cette journée de formation sont les suivants: Présenter les dernières avancées scientifiques et perspectives sur le stress oxydant et les antioxydants Discuter la subtilité d utilisation des antioxydants en tant que compléments alimentaires Présenter de façon détaillée l ensemble des méthodes permettant d évaluer l activité antioxydante dans différentes matrices Discuter les méthodes de mesure de stress oxydant chez l homme et présenter les controverses liées à ces méthodes Lors de cette journée, une partie importante sera consacrée à la présentation des méthodes d évaluation des antioxydants dans les matrices alimentaires (polyphénols, catéchines, acides phénoliques ). Nouveauté 2017 : Méthodes d évaluation de l activité antioxydante chez l homme Présentation des méthodes de mesure d altération des protéines (glycation / carbonylation ), altération des lipides (lipopéroxydation) et ADN (8-OH-guanosine ). Présentation des méthodes d évaluation de la capacité antioxydante A l heure actuelle, il existe différentes méthodes d évaluation de la capacité antioxydante et du stress oxydant. Cependant, ces méthodes ne sont pas standardisées et peuvent fortement varier d un laboratoire à un autre. La Société Française des Antioxydants a invité le Pr Gynette Deby-Dupont, du Centre de l Oxygène, Recherche et Développement (CORD) de Liège pour présenter un état des lieux des différentes méthodes de mesures d'activités antioxydantes. L existence de différentes sociétés sur le marché, proposant leurs services avec des méthodes variables, engendre des différences significatives en termes de résultats pour un même produit. La SFA proposera des stratégies pour avoir des méthodes globales crédibles et validées par le comité scientifique. Comment évaluer l activité antioxydante dans les produits cosmétiques, agro-alimentaires, compléments alimentaires? Et chez l Homme? Suite à la présentation de rappels physico-chimiques, le Pr Gynette Deby-Dupont répondra aux questions suivantes: Quelles sont les différentes méthodes de dosage des antioxydants existantes dans l industrie? o Présentation des méthodes chimiques (ORAC, TRAP, FRAP, test au DPPH, test à l ABTS, CUPRAC, DCFH-DA, FOX ) o Présentation des méthodes basées sur l utilisation de cellulles (CAA, enzymes antioxydantes, facteurs redox ) o Présentation des méthodes sur anticatalytiques (SIEFED, EquiNox2) Comment évaluer l activité antioxydante? Formation SFA Mardi 7 Novembre 2017, Paris Page 2

o o Présentation des méthodes combinées (AMADEOX) Présentation d autres méthodes (Lipopéroxydation, DPV, hémolyse des globules rouges, acide ascorbique, composés phénoliques totaux, séparation et dosage des flavonols, des anthocyanidines, des isoflavones, des acides phénoliques ) Inventaire des avantages et inconvénients de chacune des méthodes Présentation de cas pratiques o Evaluation dans les produits cosmétiques o Evaluation dans les produits alimentaires o Evaluation dans les compléments alimentaires Présentation des méthodes de dosage chez l homme o Que signifie «stress oxydant» chez l homme? o Y a-t-il des marqueurs valables du stress oxydant chez l homme? o Quelles sont les méthodes d évaluation et leurs limites? o Existe-t-il un standard sur le marché? o Comment conduire une étude clinique? Exemples choisis. o Quels conseils pour les labos de biologie? Venez avec votre projet! Vous avez un produit cosmétique, un ingrédient ou complément alimentaire? Vous souhaitez en doser la capacité antioxydante? Venez avec votre projet, nous en discuterons et vous proposerons la meilleure méthode adaptée. Dans l attente de vous rencontrer très prochainement. Pr Gynette Deby-Dupont Société Française des Antioxydants Comment évaluer l activité antioxydante? Formation SFA Mardi 7 Novembre 2017, Paris Page 3

Stress Oxydant & Antioxydants Comment Evaluer l Activité Antioxydante? Mardi 7 Novembre 2017, Paris Programme 9h15 9h30 Accueil des Participants Introduction de la Journée Session 1: Stress Oxydant et Etat Redox: Rappels Physico-Chimiques Source et Rôle des Radicaux Libres et du Stress Oxydant Quelles sont les caractéristiques d une molécule antioxydante? Comment agit un antioxydant? Le rôle subtil des antioxydants, leur «double visage», positif et négatif Pourquoi parler d état redox et d équilibre redox? Comment utiliser les antioxydants de façon subtile dans certaines pathologies? o Antioxydants et cancer o Antioxydants et anti-inflammatoires Quel rôle stratégique pour la mitochondrie dans la régulation de l état redox? Quel rôle stratégique pour le microbiote dans la régulation de l état redox? Biodisponibilité des Antioxydants et Mécanisme d absorption: Paradoxe des polyphenols ingérés et la quantité de polyphénols retrouvée dans le plasma o Quelles molécules pour améliorer la biodisponibilité des antioxydants? Session 2: Dosage des Antioxydants dans l Industrie Présentation des différentes méthodes et cas pratiques 10h00 Présentation du tableau général des méthodes les plus utilisées, leurs principales caractéristiques, leurs principaux avantages et inconvénients (partie 1) Les méthodes chimiques o Méthodes spectrophotométriques, fluorimétriques et chimioluminescence ORAC: Oxygen Radical Absorbance TRAP : Total-Radical trapping AntioxidantParameter assay DPPH ZBTS + FRAP CUPRAC o DCFH-DA o FOX o Autres: O2, OH, ONOO-, HOCl o Méthodes par chimioluminescence sans amplificateur avec amplificateur Comment évaluer l activité antioxydante? Formation SFA Mardi 7 Novembre 2017, Paris Page 4

o Techniques de détermination d une activité antioxydante sur la lipoperoxydation Mesure de la lipoperoxydation par la méthode FOX TBARS : Réaction de l acide thiobarbiturique avec la MDA 10h30 Pause café 11h00 Présentation du tableau général des méthodes les plus utilisées, leurs principales caractéristiques, leurs principaux avantages et inconvénients (partie 2) Les méthodes basées sur l utilisation de cellules (cell-based assays) o CAA : cellular antioxidant activity o Expression d enzymes antioxydantes vs inhibition des enzymes pro-oxydantes o Activation vs répression de facteurs redox de transcription Les méthodes anticatalytiques o méthode SIEFED o méthode EquiNox2 Méthodes combinées o AMADEOX Lipoperoxydation : détection des radicaux lipidiques par ESR Point sur d autres méthodes o Techniques électrochimiques : DPV: differential pulse voltametry o Test d hémolyse des globules rouges o Acide ascorbique (Vitamine C) o Composés phénoliques totaux o Séparation et dosage des flavonols / des anthocyanidines / des isoflavones / des acides phénoliques 12h30 Pause déjeuner 14h00 Présentation de cas pratiques pour les industriels Comment doser l activité antioxydante dans les produits alimentaires? Comment doser l activité antioxydante dans les compléments alimentaires? Comment doser l activité antioxydante dans les produits cosmétiques? 15h30 Pause café Session 3: Evaluation de la capacité antioxydante chez l homme Que signifie «stress oxydant» chez l homme? Y a-t-il des marqueurs valables du stress oxydant chez l homme? Quelles sont les méthodes d évaluation et leurs limites? Existe-t-il un standard sur le marché? Comment conduire une étude clinique? Exemples choisis. Quels conseils pour les laboratoires de biologie? 17h30 Discussion et Réflexions Vous avez des questions? Venez avec votre projet! Nous en discuterons et nous vous donnerons toutes les clés afin de lancer votre gamme en toute sérénité. 18h00 Conclusion et Fin de la Formation Comment évaluer l activité antioxydante? Formation SFA Mardi 7 Novembre 2017, Paris Page 5

Centre d Affaires Emergence Opéra 5 rue de Helder - 75009 Paris Métro Opéra Ligne 3 / Ligne 7 / Ligne 8 Lieu de la formation Inscription Académiques Industriels 595 HT / 714 TTC 995 HT / 1194 TTC Pour vous inscrire, merci d utiliser le formulaire en ligne disponible sur www.sfa-site.com ou en cliquant ici. A qui s adresse cette formation? Vous êtes ingénieur de recherche, chercheur, assistant chercheur, formulateur, laborantins ou bien chef d entreprise? Vous souhaitez connaitre de A à Z les radicaux libres, leur mode de fonctionnement et les méthodes d évaluation? Cette formation est faite pour vous! Moyens pédagogiques Support de présentations remis aux participants Présentation proposée par l intervenant via des power point Session de questions-réponses avec l ensemble des participants Formation continue Cette journée s inscrit dans le cadre de la formation continue organisée par Takayama pour la Société Française des Antioxydants et vous permet de bénéficier de votre Droit Individuel à la Formation. Numéro de formation continue : 11 75 53593 75 Compte-rendu Chaque participant recevra un compte-rendu présentant les différentes méthodes et les informations pratiques sur celles-ci. Vous trouverez le sommaire du compte-rendu à la page suivante. Si vous ne pouvez pas participer à cette journée de formation, vous pouvez obtenir le compte-rendu en format PDF en cliquant ici. Société Française des Antioxydants Tel: 00 33 1 55 04 77 55 Email: isanh1@isanh.com Contact Comment évaluer l activité antioxydante? Formation SFA Mardi 7 Novembre 2017, Paris Page 6

Sommaire du compte-rendu remis aux participants et disponible en format PDF Evaluation du Pouvoir Antioxydant - Introduction... 2 Méthodes de dosage du pouvoir antioxydant (partie 1)... 4 Méthodes de dosage du pouvoir antioxydant (partie 2)... 25 Evaluation du pouvoir antioxydant cas pratiques... 37 Evaluation du stress oxydant in vivo... 56 Annexes Polyphenols Flavonoïdes... 68 Préparation d un échantillon végétal... 81 Extraction et analyse des polyphénols... 83 Tableau résumé des méthodes... 84 - ABTS + - AAPH (apparenté au test à l ABTS) - CUPRAC - DCFH2-DA (méthode ex vivo sur cellules) - DPPH : 2,2-diphényl-1-picrylhydrazyl (test colorimétrique) - DPPP (diphényl-1-pyrènephosphine) - FRAP - Glutathion/DTNB - Hémolyse des globules rouges - HOSC - Lipoperoxydation (mesures visant la -) - ORAC - Phosphomolybenum assay - SOD/NBT/Xanthine oxydase (méthode «ex vivo-like») - TAC ( total antioxidant capacity ) - TEAC : ferryl myoglobin/abts assay - TRAP - Voltamétrie cyclique, Differential pulse voltametry (DPV) - Disponibilité commerciale de trousses de dosage du pouvoir antioxydant. - Dosage des (poly)phénols totaux Articles sélectionnés... 110 Pour accéder au bon de commande du compte-rendu, cliquez ici. Comment évaluer l activité antioxydante? Formation SFA Mardi 7 Novembre 2017, Paris Page 7