TP n 9. Pathologie ganglionnaire. Localisation ganglionnaire d un d. lymphome. Métastases ganglionnaires d un d. carcinome peu différenci
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- Augustin Pinette
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1 Enseignement d Anatomopathologie DCEM /2012 TP n 9 Pathologie ganglionnaire Localisation ganglionnaire d un d lymphome Métastases ganglionnaires d un d carcinome peu différenci rencié et d un d carcinome différenci rencié
2 Lymphome Diotime : Lames microscopes 30 (HES) Lames microscopes 31 et 32 (Immunohistochimie) Lames virtuelles 2008 : HES lymphome, CD20 et CD3, DuoCISH BCL2 et CMYC
3 Lymphome Définition = prolifération tumorale maligne lymphoïde Atteinte privilégiée des organes hématopoïétiques Hétérogénéité histologique d importance clinique et thérapeutique Tumeurs chimiosensibles (globalement 50% de guérison)
4 Outils diagnostiques Morphologiques Cytologie Histologie : HES, Giemsa Immunohistochimiques Anticorps Moléculaires Cytogénétiques tiques Southern Blot PCR, RT-PCR Hybridation in situ Cytogénétique tique conventionnelle et moléculaire FISH interphasique
5 Intérêt de l él étude immunohistochimique Etude indispensable pour Affirmer le diagnostic de lymphome Classer le lymphome (classification de l OMS) et établir le sous-type histologique Estimer son pronostic et guider le traitement
6 Principes de la classification des lymphomes Lymphomes Hodgkiniens Lymphomes non Hodgkiniens - de phénotype B - de phénotype T
7 Lymphome Hodgkinien Clinique 2,4 pour habitants / an forme cervico-médiastinale forme disséminée (sujet âgé) Morphologie Cellule de Reed Sternberg, cellule de Hodgkin, Réaction cellulaire = fibrose, polynucléaires, cellules épithélioïdes, plasmocytes, lymphocytes
8 Lymphome Hodgkinien Phénotype cellule de Reed Sternberg CD30+, CD15+ en général g CD20-,, CD3- Physiopathologie association à l'ebv (30-40% en Occident) synthèse se de cytokines expliquant la réaction r tissulaire = IL5 et éosinophiles, TGF-β et fibrose Traitement association radiothérapie rapie et chimiothérapie guérison de 90 à 95% des formes localisées
9 Lymphome Hodgkinien de type scléro ro-nodulaire Masse médiastinale +/- ganglions cervicaux Fibrose annulaire Cellule de Reed Sternberg
10 Lymphome Hodgkinien de type scléro ro-nodulaire La fibrose annulaire est soulignée par la coloration de la trame conjonctive par une coloration de type Rouge sirius hémalun.
11 Lymphome Hodgkinien PNE Réaction cellulaire - Polynucléaires éosinophiles (PNE) - Cellules épithélioïdes - Plasmocytes - Lymphocytes C épithélioïde Lymphocytes
12 Lymphome Hodgkinien Phénotype de la cellule de Reed Sternberg CD30 CD30+, CD15+, LMP+/- LMP CD15
13 Lymphomes non Hodgkiniens Définition : prolifération clonale de lymphocytes B ou T correspondant aux différents stades de maturation des cellules lymphoïdes B ou T normales Hétérogénéité morphologique corrélée à une hétérogénéité clinique et pronostique Cette hétérogénéité reflète des mécanismes différents de lymphomagénèse impliquant un ou plusieurs oncogènes
14 Lymphomes non Hodgkiniens Exemples de translocations impliquant un oncogène ne et les gènes g des immunoglobulines dans les lymphomes B Lymphome de Burkitt t(8;14)(q24;q32) MYC/IGH Lymphome folliculaire t(14;18)(q32;q21) IGH/BCL2 Lymphome du manteau t(11;14)(q13;q32) CCND1/IGH La détection des translocations chromosomiques dans les lymphomes présente un intérêt diagnostique, pronostique et peut dans certains cas orienter la prise en charge thérapeutique.
15 Mise en évidence d une d translocation chromosomique Cytogénétique conventionnelle et moléculaire Southern blot PCR ADN FISH interphasique mise en évidence de la conséquence d une translocation: - transcrits: RT-PCR (compétitive, ou quantitative) (ex: transcrit de fusion API2-MLT, Cycline D1) - protéine: immunohistochimie (ex: cycline D1, ALK )
16 Mise en évidence d une d translocation chromosomique par hybridation in situ fluorescente : FISH FISH sur cellules en métaphases cytogénétique classique moléculaire FISH interphasique - appositions de cellules tumorales - coupes tissulaires fixées et inclus en paraffine
17 Sondes split-signal ou break-apart Exemple Sonde BCL2 18q21 Profil normal: 2 signaux de fusion = colocalisation des 2 signaux Profil anormal: 1 colocalisation des 2 signaux correspondant à l allèle normal 1 signal vert et 1 signal rouge séparés (split) témoignant d une translocation du gène Ventura et al,journal of Molecular Diagnoics 2006
18 Révélation possible par Hybridation In Situ Chromogénique: CISH Masse tumorale intracardiaque chez une femme de 18 ans Histologie: lymphome à grandes cellules Phénotype: CD20+, CD10+, MIB 100%, BCL2- CISH: réarrangement de cmyc absence de réarrangement de BCL2 Diagnostic: Lymphome de Burkitt BCL2 Colocalisation des 2 signaux: absence de réarrangement cmyc 1 signal de fusion + 1 signal bleu et un signal rouge séparés= réarrangement
19 Principes de la classification histopathologique des lymphomes non-hodgkiniens Les lymphomes de faible grade de malignité - lymphomes à petites cellules - évolution lente : 4 à 10 ans - risque de transformation en lymphome de haut grade de malignité Les lymphomes de haut grade de malignité - regroupent essentiellement les lymphomes diffus B à grandes cellules - présentation extraganglionnaire possible (digestive, cutanée, ORL ) - guérison dans 40 à 50% des cas Importance pronostique de la classification histopathologique des lymphomes non-hodgkiniens
20 Répartition des lymphomes NH LNH B de la zone marginale 3% LNH B type LLC 8% LNH B zone marginale du MALT 8% LNH B folliculaire 22% autres 6% LNH anaplasique T/nul 2% LNH B à cellules du manteau 6% Lymphomes T périphériques 7% LNH lymphoblastique T 2% Lymphome Diffus à grandes cellules B 35% LNH B de Burkitt 1%
21 Importance de l étude immunohistochimique pour établir un diagnostic de certitude Prolifération tumorale à grandes cellules CD45 (antigène leucocytaire commun), cytokératine (CK) CD45+, CK- CD45-, CK+ CD45-, CK- Prolifération lymphoïde Prolifération carcinomateuse Autre diagnostic: mélanome, sarcome CD20+ Lymphome B CD3+ Lymphome T - Différenciée: glandulaire ou épidermoïde - Indifférenciée
22 Localisation ganglionnaire d un lymphome diffus à grandes cellules B
23 Structure histologique d un d ganglion normal Follicule lymphoïde Zone interfolliculaire Sinus périphérique
24 Lymphome ganglionnaire Lymphome Follicule lymphoïde résiduel Capsule ganglionnaire
25 Lymphome ganglionnaire Cellules lymphoïdes réactionnelles Cellules lymphoïdes tumorales
26 Lymphome diffus à grandes cellules
27 Etude immunohistochimique Lymphome diffus à grandes cellules de phénotype B CD20 CD3
28 Métastase ganglionnaire d un carcinome peu différencié Diotime : Lames microscopes 28 (HES) et 29 (IHC cytokératine) Lame virtuelle 2007 : n 31 (HES) Lame virtuelle 2008 : IHC cytokératine
29 Métastase ganglionnaire d un carcinome peu différencié
30 Métastase ganglionnaire d un carcinome peu différencié Tumeur Vaisseaux
31 Métastase ganglionnaire d un carcinome peu différencié
32 Métastase ganglionnaire d un carcinome peu différencié Mitoses
33 Etude immunohistochimique Métastase ganglionnaire d un carcinome peu différencié Cytokératine
34 Métastase ganglionnaire d un carcinome papillaire de la thyroïde Diotime : Lames microscopes 26 (HES) et 27 (IHC thyroglobuline) Lames virtuelles 2008 : méta carcinome différencié (HES) Et IHC thyroglobuline
35 Métastase ganglionnaire d un carcinome papillaire de la thyroïde
36 Métastase ganglionnaire d un carcinome papillaire de la thyroïde
37 Métastase ganglionnaire d un carcinome papillaire de la thyroïde
38 Etude immunohistochimique Thyroglobuline
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