Association de Biologie Praticienne 70 avenue des Gobelins 75013 PARIS - Tél : 01 43 31 94 87 - Fax : 01 43 37 39 92 Email : secretariatabp@orange.fr Enregistrée à la Préfecture de la Région de l Ile de France, délégation à la formation professionnelle, sous le N 11750 397 375 SIRET : 321 609 489 00034 - APE 913 E Dr Annick DATRY Service de Parasitologie et Mycologie Hôpital Pitié Salpêtrière 47 bd de l Hôpital 75013 Paris Tél : 01.42.16.01.11 Email : annick.datry@psl.aphp.fr Paris, le 9 décembre 2011 Cher confrère, Concerne : Résultats des confrontations de Biologie Médicale : Série 3 Mycologie octobre 2011 Nombre de réponses reçues : 234 sur 275 participants 1) Echantillon 1 (bouchon bleu) Il s agit d un prélèvement de squames de grandes plaques d alopécie chez un enfant tunisien. 1.1 - Résultats Microsporum langeronii 1.2 - Techniques d identification Le prélèvement a été ensemencé sur milieu de Sabouraud-chloramphénicol-gentamycine-actidione. Examen macroscopique +++ Examen microscopique : prélever un fragment de la colonie que l on dilacère dans 2 gouttes de lactophénol ou bleulactophénol, ou utiliser la technique du scotch. On recherche au microscope les éléments caractéristiques des dermatophytes : filaments, microconidies, macroconidies et ornementations particulières 1.3 - Caractéristiques morphologiques : - Voir annexe 1 1.4 - Thérapeutique recommandée Chez l enfant, on utilise principalement la griséofulvine per os, à raison de 15 à 20 mg/kg/j et pendant une durée de 6 semaines, associé à un traitement local par un imidazolé en lotion. 1.5 - Commentaires concernant les réponses - Réponses exactes : Microsporum langeronii, 159 fois - Réponses inexactes ou incomplètes : - Microsporum canis, 29 fois - Trichophyton rubrum, 15 fois - Trichophyton schoenleinii, 7 fois - Trichophyton tonsurans, 5 fois - Trichophyton soudanense, 5 fois - Trichophyton verrucosum, 3 fois - Trichophyton mentagrophytes, 3 fois - Microsporum distortum, 2 fois - Trichophyton violaceum, 2 fois - Microsporum ferrugineum, 1 fois - Microsporum gypseum, 1 fois - Dermatophyte sp, 1 fois - Microsporum sp, 1 fois - Réponse non retournée, 29 fois Réponses inexactes ou incomplètes : voir diagramme en annexe 5
2) Echantillon 2 (bouchon vert) Il s agit d un prélèvement d une lésion sous-unguéale disto-latérale du gros orteil. 2.1 - Résultats Scopulariosis brevicaulis 2.2 - Techniques de laboratoire utilisées Ensemencement sur milieu de Sabouraud chloramphenicol gentamycine Examen macroscopique+++ Examen microscopique : prélever un fragment de colonie que l on dilacère dans 2 gouttes de lactophénol ou bleulactophénol, ou utiliser la technique du scotch. Observer les filaments, les conidiophores et les annellospores 2.3 - Caractéristiques morphologiques : - voir annexe 2 2.4 - Thérapeutique recommandée Le traitement est difficile. La terbinafine n est pas toujours efficace. 2.5 - Commentaires concernant les réponses - Réponses exactes : Scopulariopsis brevicaulis et Scopulariopsis sp, 255 fois - Réponses inexactes ou incomplètes : - Trichophyton mentagrophytes, 5 fois - Crysosporium sp, 4 fois - Penicillium sp, 2 fois - Trichophyton schoenleini ; 2 fois - Trichosporon sp, 2 fois - Cladosporium sp, 1 fois - Microsporum gypseum, 1 fois - Scedosporium, 1 fois - Trichophyton rubrum, 1 fois - Trichophyton violaceum, 1 fois Réponse non retournée, 29 fois Réponses inexactes ou incomplètes : voir diagramme en annexe 5 3) Echantillon 3 (à Ensemencer) Urines à ensemencer provenant d une patiente neutropénique fébrile. 3.1 - Résultats Candida lusitaniae 3.2 - Techniques de laboratoire utilisées Ensemencer les urines sur milieux de Sabouraud - chloramphénicol et sur Sabouraud chloramphénicol-actidione à 35 C et pousse en 24-48 heures. 3.3 - Caractéristiques morphologiques : - voir annexe 3 3.4 - Thérapeutique recommandée La thérapeutique de première intention doit être le fluconazole à la posologie de 400 mg/jour en une prise unique. 3.5 - Commentaires concernant les réponses - Réponses exactes : Candida lusitaniae 87 fois
- Réponses inexactes ou incomplètes: - Candida famata, 7 fois - Candida guillermondi, 3 fois - Aspergillus fumigatus, 2 fois - Candida tropicalis, 2 fois - Cryptococcus neoformans, 2 fois - Cryptococcus laurenti, 2 fois - Aspergillus niger, 1 fois - Candida sp, 1 fois - Cryptococcus sp, 1 fois - Exophiala sp, 1 fois - Geotrichum candidum, 1 fois - Penicillium sp, 1 fois - Staphylococcus warneri, 1 fois - Absence de culture ou d éléments mycéliens, 121 fois Réponse non retournée, 29 fois Réponses inexactes ou incomplètes : voir diagramme en annexe 5 ANNEXE 1 : Microsporum langeronii C est la variété africaine de Microsporum audounii que l on rencontre surtout chez des enfants d origine maghrébine ou africaine. Diagnostic mycologique Les colonies poussent en 5 à 8 jours et sont duveteuses, planes, à duvet ras. Leur couleur est beige-rosé à grisâtre au recto et chamois au verso. L examen microscopique montre : - des filaments épais en raquette - de très grosses chlamydospores terminales en «citron» caractéristiques - parfois des microsporidies piriformes - des macrosporidies absentes ou très rares comme celles de M. audounii (aspect en «bissac» à paroi très épaisse et échinulée) - organes pectinés et organes nodulaires rares. ANNEXE 2 : Scopulariopsis brevicaulis Ce genre fait partie des annellosporés. Les espèces de Scopulariopsis sont des champignons cosmopolites vivant dans le sol. Parmi les 16 espèces de Scopulariopsis reconnues, seule S. brevicaulis doit être connue en raison de sa pathogénicité pour l ongle. C est presque toujours l ongle du gros orteil qui est atteint et favorisé par des microtraumatismes répétés. L atteinte est souvent sous-unguéale latéro-distale. L ongle est très épaissi avec une couleur jaunâtre à brune. Diagnostic mycologique Sur Sabouraud à 27 C, la croissance est très rapide. L examen macroscopique montre des colonies planes, poudreuses avec un centre plus duveteux de couleur beige à brun au recto et incolore à beige au verso. L examen microscopique montre : - des filaments hyalins de 3 à 5 µm de large - des conidiophores courts souvent ramifiés en pinceau - des annellospores isolées ou par groupes de 2 ou 3, cylindriques (9-25 x 2,5-3,5 µm)
- les spores produites en chaîne sont globuleuses à base tronquée et large, à sommet plus ou moins pointu (5-8 x 5-7µm). La paroi est lisse au début et devient rapidement verruqueuse. - il est nécessaire de faire plusieurs prélèvements pour s assurer que ce saprophyte est bien pathogène. Par ailleurs sa pousse étant plus rapide que celle des dermatophytes, il peut masquer un onyxis du à un dermatophyte. ANNEXE 3 : Candida lusitaniae On isole cette levure de plus en plus souvent en milieu hospitalier dans des prélèvements digestifs ou pulmonaires et aussi à partir du sang et des urines. Diagnostic mycologique L examen macroscopique montre des colonies crémeuses, blanches et lisses. L examen microscopique montre des levures ovoïdes (2-6) x (3-10) µm. Sur milieu PCB, on voit un pseudomycelium bien développé grêle ou incurvé avec de courtes chaînes de blastospores. Le diagnostic d espèces est basé sur l assimilation des sucres : - galactose, saccharose, maltose, cellobiose, tréhalose positifs - lactose, raffinose négatifs. La levure est sensible à l actidione. ANNEXE 4 : Illustrations en images Echantillon 1 (bouchon bleu) Microsporum langeronii Microsporum langeronii teigne tondante à grandes plaques M. langeronii : culture sur milieu de Sabouraud M. langeronii : aspect microscopique
Echantillon 2 (bouchon vert) Scopulariopsis brevicaulis Scopulariosis brevicaulis culture sur milieu de sabouraud Scopulariosis brevicaulis culture sur milieu de Sabouraud Scopulariopsis brevicaulis : aspect microscopique
Echantillon3 Candida lusitaniae Candida lusitaniae : Aspect macroscopique des levures en culture Candida lusitaniae : Aspect microscopique des levures (formes blastospores)
Candida lusitaniae : levures, blastospores et pseudomycélium ANNEXE 5 : Diagrammes Echantillon 1 (bouchon bleu) Microsporum langeronii MYCOSES Nbre de réponse 234 sur 275 % Identification des mycoses Microsporum langeronii 159 67,95 Microsporum canis 29 12,39 Trichophyton rubrum 15 6,41 Trichophyton schoenleinii 7 2,99 Trichophyton soudanense 5 2,14 Trichophyton tonsurans 5 2,14 Trichophyton mentagrophytes 3 1,28 Trichophyton verrucosum 3 1,28 Microsporum distortum 2 0,85 Trichophyton violaceum 2 0,85 Microsporum sp 1 0,43 Dermatophyte sp 1 0,43 Microsporum ferrugineum 1 0,43 Microsporum gypseum 1 0,43 Total 234,00 100,00
Echantillon 2 (bouchon vert) Scopulariopsis brevicaulis MYCOSES Nbre de réponse 234 sur 275 % Identification des mycoses Scopulariopsis brevicaulis 255 92,73 Trichophyton mentagrophytes 5 1,82 Crysosporium sp 4 1,45 Penicillium sp 2 0,73 Trichophyton schoenleini 2 0,73 Trichosporon sp 2 0,73 Microsporum gypseum 1 0,36 Cladosporium sp 1 0,36 Scedosporium 1 0,36 Trichophyton rubrum 1 0,36 Trichophyton violaceum 1 0,36 Total 275,00 100,00
Echantillon 3 : Candida lusitaniae Nbre de réponse 234 % Identification MYCOSES sur 275 des mycoses Candida lusitaniae 87 37,18 Candida famata 7 2,99 Candida guillermondi 3 1,28 Aspergillus fumigatus 2 0,85 Candida tropicalis 2 0,85 Cryptococcus laurenti 2 0,85 Cryptococcus neoformans 2 0,85 Cryptococcus sp 2 0,85 Aspergillus niger 1 0,43 Candida sp 1 0,43 Exophiala sp 1 0,43 Geotrichum candidum 1 0,43 Penicillium sp 1 0,43 Staphylococcus warneri 1 0,43 Absence de culture ou d éléments mycéliens 121 51,71 Total 234,00 100,00 Les résultats et les commentaires sont rédigés par le Dr Annick DATRY, Email : annick.datry@psl.aphp.fr Les échantillons sont préparés par Mme Martine PALOUS, Technicienne de Laboratoire, 01 42 16 01 11 Les statistiques, les graphiques et la mise en page sont réalisés par Sadi SEHRINE, Email : sadi.sehrine@psl.aphp.fr