Etude de l intégrité d un contenant pharmaceutique A3P Journées de la sous-traitance 20 & 21 Mars 2013 LILLE Marion STYLEMANS Pharmacien Responsable/ Directeur Laboratoire Microbiologie Sylvie VINCENT Sénior Analyste Microbiologie Sylviane LUBERA Technicienne Microbiologie
Généralités Milieu des années 90 test d intégrité = test de stérilité Mais évolution => test d intégrité = test de stérilité + validation des systèmes de fermeture Test d intégrité des contenants pharmaceutiques (ou contrôle de l étanchéité) : nécessité pour le maintien de la qualité du produit jusqu à péremption Réalisé à différents stades de la vie du produit (développement, production, libération de lot, études de stabilité, ) 2
Aspects réglementaires Contrôle de l intégrité = exigence réglementaire USP <661>, <671>, <1207> PE chapitres 5.1.1 et 3.2.2.1 Norme ISO 11607 «Emballages des dispositifs médicaux stérilisés au stade terminal» Annexe 1 des BPF ICH Q6A: mise en place de test d intégrité pour les seringues Dossier d enregistrement Module 3: «l intégrité doit être contrôlée» Nombreuses bibliographies décrivant les tests d intégrité PDA Technical Pharmaceutical Package Integrity report n 27 Guidance for industry (Container and Closure system Inegrity : Testing in lieu of sterility testing) Commission SFSTP 3
Présentation des méthodes Difficulté = choix de la méthode à appliquer Différents paramètres à prendre en compte: Nature de produit Contenant: flacons, ampoules, poches, blisters, seringues, Contenu: poudre, lyophilisat, liquides Type de contaminant à identifier (échanges gazeux, liquides ou microbiens) Méthode quantitative /destructive Sensibilité recherchée Stade de la vie du produit Exemple de méthodes: Méthode microbiologique, colorimétrique, par infra rouge, par rayon X, par mise sous vide, 4
Présentation des méthodes Méthode Microbiologique par immersion Principe Perte d intégrité si trouble observé et confirmation par identification 5
Présentation des méthodes Méthode Colorimétrique par immersion Principe Perte d intégrité si coloration observée (confirmation possible par lecture spectroscopique UV-Visible) 6
Problématique Etude de l intégrité d un contenant par les méthodes microbiologique et colorimétrique par immersion: Contenant: flacons en polypropylène de 500mL, fermeture avec bouchon à pas de vis Contenu: solution de PBS (solution incolore) Stade de la vie du produit: en développement Objectif :valider la méthode analytique du test d intégrité des flacons avec un sensibilité de test la meilleure possible et déterminer le couple de serrage causant la perte d intégrité 7
PRÉSENTATION DE RÉSULTATS DE L ATELIER 8
Essais préliminaires Informations nécessaires: Numéro du flacon Force de serrage recommandée par le fournisseur: 3,4 N.m± 0,05 Gamme de 10 forces de serrage à tester => doivent encadrer la valeur recommandée par le fournisseur: Valeur basse (en N.m) Valeur à atteindre (en N.m) Valeur haute(en N.m) Intervalle 1 0,18 0,20 0,22 +/- 0,02 2 0,28 0,30 0,32 +/- 0,02 3 0,38 0,40 0,42 +/- 0,02 4 0,48 0,50 0,52 +/- 0,02 5 0,98 1 1,02 +/- 0,02 6 1,95 2 2,05 +/- 0,05 7 2,95 3 3,05 +/- 0,05 8 3,70 3,75 3,80 +/- 0,05 9 3,95 4 4,05 +/- 0,05 10 4,45 4,5 4,55 +/- 0,05 9
Etude de la sensibilité Méthode microbiologique Protocole: préparation des témoins de sensibilité et d étanchéité Simulation de la présence de fuite: les témoins de sensibilité sont des flacons présentant au niveau du bouchon un capillaire de diamètre calibré (0,5µm, 1µm et 2µm). Le témoin d étanchéité est préparé de la même façon que les témoins de sensibilité excepté le fait que le capillaire est perlé au bout pour empêcher l'entrée du colorant. Ce témoin d étanchéité est réalisé dans le but de valider les conditions de manipulation. Pour vérifier la reproductibilité de la méthode, tester chaque témoins de sensibilité (0,5µm, 1µm et 2µm) en triplicate sur 3 jours en parallèle d un témoin d étanchéité du capillaire. 10
Etude de la sensibilité Méthode microbiologique Préparation d un témoin de stérilité: flacon rempli d un milieu de culture puis fermé et incubé 14jour => vérifier l asepsie du procédé de fermeture des flacons (absence de faux positifs) Préparation d un témoin de fertilité: flacon rempli d un milieu de culture et ajout d un inoculum de B.diminuta. Le flacon est ensuite fermé puis incubé. => Vérifier la fertilité secondaire du milieu de culture (absence de faux négatifs) 11
Etude de la sensibilité Méthode microbiologique Critères de validité La durée d immersion doit être de minimum de 2h Les 3 flacons témoin d étanchéité (jour 1, jour 2 et jour 3) doivent être négatifs Les 3 flacons témoin de stérilité (jour 1, jour 2 et jour 3) doivent être négatifs Les 3 flacons témoin de fertilité (jour 1, jour 2 et jour 3) doivent être positifs La présence de B.diminuta dans les témoins de sensibilité ( 0,5µm, 1µm et 2µm) doit être confirmée par identification La mesure de la fermeture des flacons doivent être compris dans l intervalle recommandé Critère d acceptation: La sensibilité sera validée si 100% des témoins de sensibilité dont le diamètre du capillaire est le plus petit diamètre reproductible sont positifs (présence d une croissance microbienne) 12
Etude de la sensibilité Méthode colorimétrique Critères de validité La durée d immersion doit être de minimum de 30 min Les 3 flacons témoin d étanchéité (jour 1, jour 2 et jour 3) doivent être négatifs La présence de Bleu de méthylène dans les témoins de sensibilité ( 0,5µm, 1µm et 2µm) doit être confirmée par analyse spectroscopique UV-Visible La mesure de la fermeture des flacons doivent être compris dans l intervalle recommandé Critère d acceptation: La sensibilité sera validée si 100% des témoins de sensibilité dont le diamètre du capillaire est le plus petit diamètre reproductible sont positifs (présence de Bleu de méthylène dans le flacon). 13
Test d intégrité - Méthodes microbiologique et colorimétrique Différentes forces de serrage sont testée: définies lors des essais préliminaires (cible basse, valeur intermédiaire et cible haute) Pour chaque valeur de force de serrage, 3 flacons sont testés et ces essais sont répétés 3 fois. Témoins positifs: le nombre de témoins de sensibilité et la taille du diamètre du capillaire utilisé dépend des résultats de l étude de sensibilité: en générale, 2 témoins de sensibilité sont testés par série. Témoins négatifs: 1 témoin d étanchéité est réalisé par série en parallèle des témoins de sensibilité. Les témoins de sensibilité et d étanchéité sont préparés de la même façon que lors de l étude de la sensibilité. 14
Test d intégrité - Méthodes microbiologique Critères de validité: Au moins un témoin de sensibilité doit être positif (remarque: en cas de témoin de sensibilité négatif, il faut vérifier que le capillaire n est pas bouché par un agrégat de micro organisme entraînant ainsi un faux négatif) La durée d immersion doit être de minimum de 2h Les 3 flacons témoin d étanchéité doivent être négatifs Les 3 flacons témoin de stérilité doivent être négatifs Les 3 flacons témoin de fertilité doivent être positifs La présence de B.diminuta doit être confirmée par identification La mesure de la fermeture des flacons doivent être compris dans l intervalle recommandé Critère d acceptation: Le maintien de l étanchéité du système flacon/bouchon est démontré par l absence de croissance microbienne dans les flacons 15
Test d intégrité - Méthodes colorimétrique Critères de validité: Au moins un témoin de sensibilité doit être positif La durée d immersion à vide doit être de minimum 30 min Les 3 flacons témoin d étanchéité doivent être négatifs La mesure de la fermeture des flacons doivent être compris dans l intervalle recommandé Critère d acceptation: Le maintien de l étanchéité du système flacon/bouchon est démontré par l absence de bleu de méthylène en lecture visuelle et lecture au spectrophotomètre. 16
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