MANUEL DE PRELEVEMENT DU LBM

MANUEL DE PRELEVEMENT DU LBM LORRAINE- CHAMPAGNE-ARDENNE DE L EFS GRAND EST Date : 09/05/2017 Rédacteur Vérificateur Approbateur Hugues FOUANI Marie-helene SUMYUEN (03/05/2017) Benedicte BASCH (09/05/2017) Eric TOULMONDE (05/05/2017)

Sommaire 1. OBJET ET DOMAINE D APPLICATION...2 2. REFERENTIELS...2 3. LE LABORATOIRE DE BIOLOGIE MEDICALE LORRAINE CHAMPAGNE-ARDENNE...2 4. EXIGENCES RELATIVES AUX DEMANDES D EXAMEN...2 4.1. ITEMS DEVANT FIGURER SUR LES DEMANDES D EXAMENS : DE FAÇON LISIBLE ET BIEN ORTHOGRAPHIÉE...2 4.2. RENSEIGNEMENTS CLINIQUES UTILES ET PERTINENTS EN IMMUNO-HÉMATOLOGIE...2 5. EXIGENCES RELATIVES AUX ECHANTILLONS PRIMAIRES...2 5.1. MODALITÉS DE PRÉLÈVEMENT...2 5.2. FACTEURS AYANT UNE INFLUENCE SUR LA QUALITÉ DU PRÉLÈVEMENT ET/OU DES RÉSULTATS D EXAMENS...2 6. EXIGENCES RELATIVES AUX CONDITIONS DE CONSERVATION ET D ACHEMINEMENT DES ECHANTILLONS...2 7. GESTION DES NON-CONFORMITES...2 7.1. NON-CONFORMITÉS À RÉCEPTION...2 7.2. AUTRES NON-CONFORMITÉS DÉTECTÉES...2 8. MODALITE DE PRESCRIPTION D EXAMENS COMPLEMENTAIRES...2 9. TRANSMISSION DES RESULTATS...2 9.1. RÉALISATION DES EXAMENS ET DÉLAI DE RENDU DES RÉSULTATS...2 9.2. MODALITÉS DE COMMUNICATION DES RÉSULTATS...2 10. PRESTATION DE CONSEILS...2 11. SOUS-TRAITANCE...2 12. MANAGEMENT DE LA QUALITE...2 12.1. GESTION DES RÉCLAMATIONS...2 12.2. SERVICE À LA CLIENTÈLE...2 13. ANNEXE...2 13.1. ANNEXE 1 : Liste des examens réalisés au LBM Lorraine Champagne-Ardenne...2 13.2. ANNEXE 2 : Examens réalisés et sites du LBM Lorraine Champagne-Ardenne...2 13.3. ANNEXE 3 : Sous-traitance au LBM Lorraine Champagne-Ardenne...2 13.4. ANNEXE 4 : Liste des examens réputés urgents...2 13.5. ANNEXE 5 : Modèle de formulaire de demande d examens...21 Rédacteur Vérificateur Approbateur Hugues FOUANI Marie-helene SUMYUEN (03/05/2017) Benedicte BASCH (09/05/2017) Eric TOULMONDE (05/05/2017)

1. OBJET ET DOMAINE D APPLICATION Ce manuel de prélèvement a pour objectif de présenter les analyses réalisées par le laboratoire de biologie médicale multisite Lorraine Champagne-Ardenne de L EFS GRAND EST et de recenser les exigences relatives à toute demande d examen adressée à l un de nos sites. Le manuel présente les modalités de fonctionnement du laboratoire et de transmission des comptes rendus de résultats d examens. Les exigences relatives aux demandes d examens concernent les échantillons primaires et leurs documents associés ; leur respect conditionne l obtention de résultats fiables et la garantie du lien patient-échantillon, indispensable à la qualité des résultats d examens, à la prestation de conseils et à la sécurité transfusionnelle. Ce document dans sa version en vigueur est disponible sur le site internet www.efs-lbm.fr/alca et diffusé aux clients à chaque mise à jour. 2. REFERENTIELS - Arrêté du 26 avril 2002 modifiant l'arrêté du 26 novembre 1999 relatif à la bonne exécution des analyses de biologie médicale. - Arrêté du 20 juin 2003 fixant la présentation de la fiche de prélèvement de biologie médicale - Circulaire DGS/DHOS/AFSSAPS n 03/582 du 15 décembre 2003 relative à la réalisation de l acte transfusionnel. - Norme NF EN ISO 15189 : Laboratoire d analyses de biologie médicale Exigences particulières concernant la qualité et la compétence. - Ordonnance n 2010-49 du 13 janvier 2010 relative à la biologie médicale et les textes associés. - Décret 2002-660 du 30 avril 2002 relatif aux conditions de transmission de prélèvements biologiques aux laboratoires d'analyses de biologie médicale. - Décret 2011-2119 du 30 décembre 2011 relatif aux modalités de transmission d'un échantillon biologique entre laboratoires de biologie médicale. - Recommandations HAS (Novembre 2014) : Transfusion de globules rouges homologues : produits, indications, alternatives. - Loi N 2013-442 du 30 mai 2013 portant réforme de la biologie médicale. - Décret N 2016-46 du 26 janvier 2016 relatif à la biologie médicale. - Tous les documents COFRAC relatifs à l accréditation, applicables au LBM. ALC/LAB/IHE/PRA/FI/017 Manuel de prélèvement du LBM Lorraine - Champagne-Ardenne 3/21

3. LE LABORATOIRE DE BIOLOGIE MEDICALE LORRAINE-CHAMPAGNE-ARDENNE Le laboratoire réparti sur 6 sites est spécialisé dans les analyses d Immuno-hématologie érythrocytaire (IHE) nécessaires pour assurer la sécurité transfusionnelle et participer au suivi de l allo-immunisation fœto-maternelle. Biologiste responsable du laboratoire : Dr Éric TOULMONDE E-Mail : eric.toulmonde@efs.sante.fr Site de Nancy-Lobau 85-87 Boulevard Lobau 54064 NANCY Cedex Tél. : 03 83 17 65 86 Fax : 03 83 32 68 18 Site de Nancy- Brabois Avenue de Bourgogne 54500 VANDOEUVRE lès NANCY Biologistes : Dr Odile DENJEAN Dr Dominique BAUMGART Tél. : 03 83 44 71 34 Fax : 03 83 44 60 46 E-mail : odile.denjean@efs.sante.fr E-mail :dominique.baumgart@efs.sante.fr Site de Metz Adresse postale : Hôpital de Mercy 1 allée du Château CS 55002 57085 METZ CEDEX 03 Adresse géographique : CHR Metz / Thionville Hôpital de Mercy 1 allée du Château 57530 ARS LAQUENEXY Biologiste : Dr Véronique PIROUX Site de Troyes Hôpital des Hauts-Clos 101 avenue Anatole France CS 80080 10089 TROYES Cedex Biologiste: Dr Marie-Hélène SUMYUEN Site de Reims 45, rue Cognacq Jay 51092 REIMS CEDEX Biologistes : Dr Eric TOULMONDE Dr Sofia MIKOU Site de Charleville-Mézières 45, avenue de Manchester 08000 CHARLEVILLE MEZIERES Biologiste : Dr Hugues FOUANI Tél. : 03 87 65 02 45 Fax : 03 87 62 96 06 E-Mail : veronique.piroux@efs.sante.fr Tél. : 03 25 75 97 58 Fax : 03 25 75 97 64 E-Mail : marie-helene.sumyuen@efs.sante.fr Tél. : 03 28 54 49 55 Fax : 03 28 54 49 79 E-Mail : eric.toulmonde@efs.sante.fr E-Mail : sofia.mikou@efs.sante.fr Tél. : 03 28 54 49 62 Fax : 03 28 54 49 60 E-Mail : hugues.fouani@efs.sante.fr Les sites sont ouverts et la continuité de service organisée 24h/24 et 7j/7. Pour assurer la permanence des soins, les biologistes médicaux interviennent selon un planning d astreinte défini. Durant les périodes d absence, les biologistes médicaux sont amenés à se remplacer pour assurer leur activité respective. ALC/LAB/IHE/PRA/FI/017 Manuel de prélèvement du LBM Lorraine - Champagne-Ardenne 4/21

4. EXIGENCES RELATIVES AUX DEMANDES D EXAMEN Chaque prélèvement doit être accompagné d une demande d examens, tenant lieu de contrat à minima sauf contrat particulier. La demande d examen est constituée d une prescription médicale associée à une fiche de prélèvement; ces deux documents peuvent être fusionnés, du moment que les items et renseignements décrits ci-après soient inclus. 4.1. ITEMS DEVANT FIGURER SUR LES DEMANDES D EXAMENS : DE FAÇON LISIBLE ET BIEN ORTHOGRAPHIÉE Identification du patient : - Le nom de naissance, complété s il y a lieu du nom d usage. - Le(s) prénom(s). - La date de naissance. - Le sexe. - Le cas échéant un code d identification unique. Identification du prescripteur ainsi que de l établissement demandeur : établissement de soins avec nom du service, UF et numéro de téléphone (et si possible fax) ou laboratoire avec adresse et numéro de téléphone (et si possible fax). La date de la prescription. La nature des examens à effectuer. Le degré d urgence. Le nombre et la nature des échantillons transmis. Le nom, prénom, qualité, signature et numéro d identification professionnelle du préleveur. La date et l heure de prélèvement. 4.2. RENSEIGNEMENTS CLINIQUES UTILES ET PERTINENTS EN IMMUNO-HÉMATOLOGIE Antécédents transfusionnels et date de la dernière transfusion. Antécédents obstétricaux, parité ; en cas de grossesse en cours : date des dernières règles et terme. Notion d injection d immunoglobulines anti-rh1 (Rhophylac ), dose et date de l injection, date et résultat de la dernière RAI avant injection. Notion de greffe de cellules souches hématopoïétiques (CSH), date de la greffe. Contexte clinique : pré-transfusionnel, post-transfusionnel, préopératoire, bilan d anémie hémolytique. Origine géographique ou ethnique du patient en cas de phénotype érythrocytaire rare. Pour le nouveau-né (0 à 4 mois): Identité complète de la mère et renseignements immuno-hématologiques (Groupe sanguin ABO RH1- phénotype RH-KEL1, résultats et date de la dernière RAI, notion d injection d immunoglobulines anti-rh1). Traitement par anticorps monoclonaux interférent avec la RAI ex : Daratumumab (Darzalex ) Administration de macromolécule Notion d hyperprotidémie chez le patient ALC/LAB/IHE/PRA/FI/017 Manuel de prélèvement du LBM Lorraine - Champagne-Ardenne 5/21

Le laboratoire de biologie médicale Lorraine Champagne-Ardenne met à disposition un formulaire de demande d examens disponible sur le site internet www.efs-lbm.fr/alca où figurent tous les items obligatoires et dont l utilisation est recommandée (Annexe 5). Pour les examens devant être traités en urgence, il est indispensable de mentionner la notion d urgence sur la demande d examens. Il est également possible de téléphoner au laboratoire et l informer de l urgence pour adapter en conséquence la prise en charge de la demande. Les demandes faites oralement ainsi que les ajouts ou modifications d une prescription d examen reçue au laboratoire, devront faire l objet d une régularisation par fax. 5. EXIGENCES RELATIVES AUX ECHANTILLONS PRIMAIRES 5.1. MODALITÉS DE PRÉLÈVEMENT Les modalités de prélèvement doivent répondre aux exigences réglementaires du GBEA. Le prélèvement doit être réalisé sur sang veineux (sauf indication contraire), avec un tube standard de prélèvement à usage unique, de préférence sous vide. Le tube doit être conçu pour éviter tout risque de contamination ou de pollution. Les analyses réalisées par le laboratoire ne nécessitent aucune préparation particulière du patient. Une attention particulière doit être portée à l identification du prélèvement : Une étiquette d identification est apposée sur le(s) tube(s) par la personne qui a prélevé, immédiatement après le prélèvement et en présence du patient. L'étiquette apposée sur les tubes doit comporter : - De façon lisible et bien orthographiée l'identité complète du patient, strictement identique à celle figurant sur le bon de demande d examen. - Des critères de différenciation en cas de plusieurs demandes simultanées. - La date et l'heure du prélèvement (si la taille du tube ne le permet pas, ces informations seront transcrites sur la demande d examens). Un soin particulier doit être apporté au collage de l étiquette. Le technicien doit pouvoir vérifier l état de l échantillon (centrifugé ou non, hémolysé, laqué...). L étiquette ne doit pas cacher l intérieur du tube. «Attention : ne pas coller 2 étiquettes sur le même tube» 5.2. FACTEURS AYANT UNE INFLUENCE SUR LA QUALITÉ DU PRÉLÈVEMENT ET/OU DES RÉSULTATS D EXAMENS Les caractéristiques des tubes à utiliser en fonction des examens demandés (nature des additifs, volume) sont précisés dans l annexe 1. Tous les prélèvements doivent être transmis sur tubes primaires non décantés. Les antécédents transfusionnels de moins de 4 mois peuvent interférer sur la qualité du rendu des résultats et doivent être impérativement signalés. Les prélèvements hémodilués ou fortement hémolysés ne seront pas traités en dehors du contexte d incident transfusionnel. Les échantillons biologiques transmis pour exploration complémentaire doivent être accompagnés de résultats préliminaires (antigrammes, résultats réactionnels). ALC/LAB/IHE/PRA/FI/017 Manuel de prélèvement du LBM Lorraine - Champagne-Ardenne 6/21

6. EXIGENCES RELATIVES AUX CONDITIONS DE CONSERVATION ET D ACHEMINEMENT DES ECHANTILLONS Après le prélèvement, la conservation des échantillons doit éviter toute altération de leur qualité : ne pas secouer les tubes (risque d hémolyse), les conserver au réfrigérateur (à 5 +/- 3 C) *. Le transport des échantillons vers le laboratoire s effectue à température ambiante le plus rapidement possible en assurant leur intégrité, le respect de la confidentialité et de la sécurité des personnels. Les délais d acheminement doivent être compatibles avec les délais de stabilité des prélèvements (Annexe 1). * Remarque : - Pour la recherche et titrage des Agglutinines Froides la conservation se fait strictement à température ambiante Le conditionnement des tubes échantillons primaires envoyés au laboratoire doit respecter les exigences réglementaires et être réalisé dans un emballage étanche avec une demande d examen par sachet. Les échantillons transmis par voie routière doivent être conditionnés et étiquetés conformément aux exigences réglementaires relatives au Transport de Marchandises Dangereuses : version en vigueur de l accord européen relatif au transport international des marchandises dangereuses par route (ADR) et à la version en vigueur consolidée de l arrêté du 29 mai 2009 relatif aux transports de marchandises par voies terrestres (arrêté TMD). 7. GESTION DES NON-CONFORMITES La détection au laboratoire d une non-conformité de la demande d examen peut être réalisée à différents niveaux : lors de la réception et vérification pré-analytique, lors de l enregistrement informatique et lors de la confrontation des résultats avec les antériorités. 7.1. NON-CONFORMITÉS À RÉCEPTION NON-CONFORMITES CONCERNANT LA DEMANDE D EXAMEN Nature de la non-conformité Absence de la demande d examens Absence (ou non lisibilité) de nom de naissance, prénom, date de naissance, sexe et le cas échéant nom d usage Double étiquetage Absence d heures de prélèvement ou de critères permettant de différencier les 2 déterminations de groupes sanguins demandées simultanément Absence (ou non lisibilité) de l analyse prescrite Absence de date de prélèvement Absence (ou non lisibilité) du nom du préleveur Absence du nom du prescripteur/ service prescripteur Absence des renseignements cliniques pertinents relatifs aux examens Absence de l heure de prélèvement Refus de la demande (Dans ce cas, une seule détermination sera effectuée) Non Non Non Non Non Si nécessaire doivent être demandés par le biologiste. Non ALC/LAB/IHE/PRA/FI/017 Manuel de prélèvement du LBM Lorraine - Champagne-Ardenne 7/21

Absence d échantillon biologique NON-CONFORMITES CONCERNANT L ECHANTILLON BIOLOGIQUE Nature de la non-conformité Absence (ou non lisibilité) de nom de naissance, prénom, date de naissance, sexe et le cas échéant nom d usage Double étiquetage Discordance entre l identité sur la demande d examen et l échantillon biologique Échantillons non adaptés, volume insuffisant Prélèvement hémolysé (sauf si Incident Transfusionnel ou contexte clinique d hémolyse) Sérum ou plasma décanté Conditions d acheminement ou délai de validité de l échantillon non respectés Refus de la demande Dans certains cas de demande d examen en urgence et selon le contexte clinique, le refus d une demande nonconforme peut faire l objet d une dérogation argumentée par le biologiste. 7.2. AUTRES NON-CONFORMITÉS DÉTECTÉES Une remise en cause du lien patient/échantillon primaire peut survenir à l occasion de la confrontation des résultats avec l antériorité, après une enquête interne qui permet d éliminer une cause liée au laboratoire. La discordance avec l historique pourra faire évoquer : - Une erreur de patient pour l échantillon concerné, - Une erreur de patient lors d un prélèvement antérieur, - Un patient réellement différent (homonymie, usurpation d identité). La discordance est tracée dans le logiciel médicotechnique et de nouveaux prélèvements et demandes d examens sont nécessaires. Toutes les anomalies sont tracées informatiquement et le prescripteur est prévenu par téléphone, fax ou via le compte rendu des anomalies constatées, du motif de refus de la demande ou des réserves éventuelles. Les non-conformités n entrainant pas un refus de la demande devront si nécessaire et sur demande du laboratoire faire l objet de la part du client, d une régularisation rapide des informations nécessaires (par coursier, fax ou téléphone) et compatible avec un délai raisonnable d exécution et de rendu des résultats. ALC/LAB/IHE/PRA/FI/017 Manuel de prélèvement du LBM Lorraine - Champagne-Ardenne 8/21

8. MODALITE DE PRESCRIPTION D EXAMENS COMPLEMENTAIRES Le biologiste du LBM multisite Lorraine Champagne-Ardenne de l EFS GRAND EST se réserve le droit d adapter la prescription conformément aux recommandations de bonnes pratiques, ou lorsqu il l estime approprié pour le suivi du patient dans le respect de la nomenclature des actes de biologie médicale et le respect des délais de stabilité des analyses (Annexe 1). Le laboratoire peut donc être amené à conseiller et réaliser des examens complémentaires nécessaires pour : Assurer la sécurité transfusionnelle : - Lorsque la recherche d anticorps anti érythrocytaire est positive, une épreuve directe de compatibilité est réalisée pour la délivrance de PSL. - En l absence de groupage ABO-RH-KEL1 valide, cette analyse est réalisée dans un contexte pré transfusionnel avéré, dans un contexte prénuptial, pré ou péri natal et pour la validation de l identification d anticorps anti érythrocytaires. - L identification de la RAI est réalisée en cas de dépistage positif. - L élution d anticorps peut être réalisée si besoin lors de la découverte d un TDA positif (type IgG) Permettre l interprétation des examens réalisés : - Le phénotype étendu est réalisé en l absence de résultats valides dans les cas d allo immunisation antiérythrocytaires et pour la validation de l identification d anticorps anti érythrocytaire. - Un TDA peut être effectué dans le cadre de la détection d auto-anticorps ou de réalisation de phénotypes étendus Assurer le suivi Immuno-hématologique des grossesses : - Un titrage est réalisé en cas d identification d allo-anticorps. S assurer de l identité du patient. En cas de prélèvement en quantité insuffisante pour la réalisation d examens complémentaires, le prescripteur en est informé sur le compte rendu et une nouvelle demande d examen sera demandée. 9. TRANSMISSION DES RESULTATS 9.1. RÉALISATION DES EXAMENS ET DÉLAI DE RENDU DES RÉSULTATS Les demandes d examens sont prises en charge et réalisées (hors contexte d urgence) dans les délais spécifiés dans l annexe 1. En cas d urgence, la réalisation de l examen se fait dès réception des échantillons et les résultats sont communiqués le plus rapidement possible. La liste des examens réputés urgents est indiquée dans l annexe 4. Pour certains examens, il existe une transmission d échantillons entres sites du LBM multisite Lorraine - Champagne- Ardenne afin de répondre aux demandes des clients si le site qui a pris en charge le prélèvement ne réalise pas l examen demandé (Annexe 2). ALC/LAB/IHE/PRA/FI/017 Manuel de prélèvement du LBM Lorraine - Champagne-Ardenne 9/21

9.2. MODALITÉS DE COMMUNICATION DES RÉSULTATS Chaque demande d examen donne lieu à un compte rendu de résultats validé et interprété par le biologiste médical avant d être transmis au prescripteur. Les résultats peuvent être communiqués au médecin prescripteur par : Courrier sous enveloppe transmis par coursier Courrier postal Fax en cas d urgence ou sur demande Échange de données informatisées (EDI) Note : le choix d un mode de transmission par Échange de Données Informatisées (EDI) nécessite l établissement d une convention de preuve entre le LBM multisite Lorraine-Champagne-Ardenne de l EFS GRAND EST et le Client destinataire du compte-rendu des résultats, définissant les garanties apportées par le système de transmission électronique en termes de : Mode de transmission Confidentialité Authenticité Non-répudiation Intégrité, etc. Ce mode de transmission des résultats est privilégié et sera développé en priorité, de façon à répondre aux exigences du Décret n 2016-46 du 26 janvier 2016 relatif à la biologie médicale. La responsabilité de la diffusion des comptes rendus de résultats d examen par la personne identifiée est partagée entre l EFS GRAND EST et le client. Le LBM multisite Lorraine-Champagne-Ardenne de l EFS GRAND EST s engage à communiquer les résultats dans des conditions de confidentialité permettant de sauvegarder le secret professionnel. Aucun résultat ne sera communiqué par téléphone par le personnel technique ou administratif : seul le biologiste est habilité à la communication des résultats. 10. PRESTATION DE CONSEILS Les biologistes du LBM multisite Lorraine-Champagne-Ardenne de EFS GRAND EST s engagent à fournir au client une prestation de conseil adaptée concernant : la prescription d examens, le contenu des résultats d examen et les avis, interprétations figurant dans le compte-rendu. Par ailleurs, l EFS GRAND EST s engage à assurer un conseil transfusionnel 24h/24 et 7j/7, pris en charge par une équipe de médecins et de biologistes habilités. ALC/LAB/IHE/PRA/FI/017 Manuel de prélèvement du LBM Lorraine - Champagne-Ardenne 10/21

11. SOUS-TRAITANCE Dans certains cas décrits en Annexe 3, le LBM multisite Lorraine-Champagne-Ardenne peut avoir recours à une soustraitance de la réalisation des examens. Pour ces cas de figure décrits, le prescripteur du client est réputé être informé et être d accord avec la possibilité de sous-traitance de ces examens. Le prescripteur du client est en charge de l information préalable du patient et du recueil de son accord par rapport à la sous-traitance des examens. Le laboratoire multisite Lorraine-Champagne-Ardenne communique au sous-traitant les éléments cliniques pertinents dont il a connaissance mais conserve la responsabilité des examens de biologie médicale réalisés par le sous-traitant. À ce titre, l envoi de l échantillon est tracé et le compte rendu d examen du sous-traitant comportant les avis, interprétations et conseils est transmis au prescripteur du client par le laboratoire de l EFS GRAND EST. Les modalités de transmission sont les mêmes que celles précédemment définies. 12. MANAGEMENT DE LA QUALITE Le LBM multisite Lorraine-Champagne-Ardenne est accrédité depuis le 01/05/2015 par le COFRAC (Accréditation N 8-3422 portée et liste des sites disponible sur www.cofrac.fr ); il s engage à appliquer et respecter les bonnes pratiques professionnelles en accord avec les exigences de la norme d accréditation NF EN ISO 15189 et à satisfaire aux exigences des autorités règlementaires et des organisations de reconnaissance et d agrément. Tous les examens sont effectués selon des procédures encadrées avec des contrôles de qualité interne et des évaluations externes de la qualité. 12.1. GESTION DES RÉCLAMATIONS Le laboratoire a développé un processus de recueil des informations de ses clients et d expression de leurs attentes. Les réclamations peuvent être recueillies par chaque membre du personnel du LBM multisite Lorraine-Champagne- Ardenne Elles sont traitées de manière à apporter une réponse au client et, le cas échéant, permettre une amélioration de la prestation rendue. 12.2. SERVICE À LA CLIENTÈLE De façon à assurer aux clients une totale transparence de nos activités, ces derniers ont la possibilité de visiter les laboratoires sur demande écrite adressée au responsable du laboratoire. ALC/LAB/IHE/PRA/FI/017 Manuel de prélèvement du LBM Lorraine - Champagne-Ardenne 11/21

En cas de retard dans la réalisation des examens, de changement de méthode ou de modalités de transmission d examens non énoncés ci-dessus, chaque laboratoire s engage à prévenir ses clients notamment s il y a un impact pour le patient. Des professionnels qualifiés assurent les conseils en matière de choix des examens et d'utilisation des prestations du laboratoire, notamment quant à la fréquence des prescriptions et le type de spécimen requis. Le cas échéant, ils fournissent les prestations de conseil et les avis et interprétations en fonction des résultats des examens. Une défaillance pouvant survenir à toute étape de la chaîne analytique, le laboratoire a donc mis en place une procédure de suivi de la qualité tout au long de la réalisation du processus incluant la conduite à tenir en cas de répétition des analyses et/ou le rappel des comptes rendus erronés afin de gérer au mieux ces incidents. Les responsables des laboratoires sont à la disposition des prescripteurs à l'occasion de réunions ayant pour objet le recours aux prestations du laboratoire et la délivrance de conseils sur des sujets scientifiques particuliers. Le laboratoire dispose de politiques permettant d assurer la protection des données personnelles des patients au travers de modes de conservation, d archivage et d accès aux dossiers médicaux conformes aux réglementations en vigueurs. ALC/LAB/IHE/PRA/FI/017 Manuel de prélèvement du LBM Lorraine - Champagne-Ardenne 12/21

13.ANNEXE 13.1. ANNEXE 1 : Liste des examens réalisés au LBM Lorraine-Champagne-Ardenne EXAMEN PRINCIPE COMMENTAIRES NOMBRE ET TYPE DE TUBES NECESSAIRES DELAI DE STABILITE DELAI DE RENDU DES RESULTATS (Hors urgences) Groupage sanguin ABO-RH1/ Phénotype RH-KEL1*** Groupe sanguin ABO-RH1: Détermination par hémagglutination des antigènes érythrocytaires et des anticorps sériques naturels du système ABO (Beth-Vincent et Simonin) chez l'adulte, détermination des antigènes érythrocytaires (Beth-Vincent) chez le nouveau-né de moins de 6 mois Phénotype RH-KEL 1: détermination par hémagglutination des antigènes érythrocytaires RH2 (RhC), RH3 (RhE), RH4 (Rhc) RH5 (Rhe) KEL1 (kell) Un groupage sanguin ABO-RH1/ Phénotypage RH-KEL1 valide est réalisé sur deux prélèvements effectués à des moments différents ou par deux préleveurs à raison d une détermination par prélèvement. Les prélèvements devront être différenciés de manière non équivoque. 1 tube EDTA 5 ml ou microtube * 7 jours 24h Phénotype érythrocytaire étendu*** Détermination d au moins un antigène de groupe sanguin autre que ceux évoqués dans les analyses précédentes par hémagglutination Cet examen peut être effectué à l initiative du biologiste dans le cadre de certaines pathologies (drépanocytose, thalassémies) ou à l occasion de l identification d anticorps irréguliers 1 tube EDTA 5 ml ou microtube * 7 jours 48h Recherche d anticorps Irréguliers (RAI) *** Détermination par hémagglutination de la présence d anticorps anti-érythrocytaire dans le plasma/sérum à l'aide d'une gamme d'hématies tests définie réglementairement. Cet examen comporte un dépistage suivi d une identification s il est positif. La durée de validité de la RAI pour une transfusion est de 3 jours. L étape d identification peut nécessiter la réalisation d allo ou d auto-adsorptions ou d élutions qui seront suivies de nouvelles étapes d identification et facturées. En cas d envoi dans un laboratoire spécialisé, le client sera informé et un nouveau prélèvement pourra être nécessaire. 1 tube EDTA ** 5 ml ou microtube * (+ 1 tube SEC en cas d incident transfusionnel) 7 jours 24h (hors identification d anticorps antiérythrocytaire complexe) ALC/LAB/IHE/PRA/FI/017 Manuel de prélèvement du LBM Lorraine - Champagne-Ardenne 13/21

EXAMEN PRINCIPE COMMENTAIRES NOMBRE ET TYPE DE TUBES NECESSAIRES DELAI DE STABILITE DELAI DE RENDU DES RESULTATS (Hors urgences) Epreuve Directe de Compatibilité (EDC) *** Compatibilité in vitro entre les concentrés de globules rouges à transfuser et le plasma/sérum du patient par hémagglutination. L EDC n est jamais réalisée sans RAI valide. Document à associer : demande de PSL (nombre et qualification). En cas d analyse réalisée pour un nouveau-né de moins de 4 mois, joindre un échantillon sanguin de la mère, ou préciser le lien mère enfant. 1 tube EDTA ** 5 ml ou microtube * 3 jours 24h Test direct à l antiglobuline (TDA) ou Test de coombs direct*** Mise en évidence de la sensibilisation in vivo des globules rouges par des anticorps de nature IgG ou des fractions du complément, par hémagglutination. Examen indiqué dans le cadre des anémies hémolytiques, d un incident transfusionnel, du suivi des incompatibilités fœto-maternelles. Il peut être effectué à l initiative du biologiste dans le cadre d auto-anticorps ou de réalisation de phénotypes étendus. 1 tube EDTA 5 ml ou microtube * 3 jours 24h Elution d anticorps à partir de globules rouges*** L élution permet en cas de sensibilisation des hématies du patient par des auto-anticorps ou des allo-anticorps de dissocier, par la chaleur ou l acide, les liaisons antigène-anticorps et de recueillir les éventuels anticorps fixés sur ces hématies Cet examen est mis en œuvre en cas : - d incompatibilité fœto-maternelle par allo Ac maternel de nature IgG. - de bilan d incident post transfusionnel. - à l initiative du biologiste si besoin lors de la découverte d un TDA positif (type IgG). 1 tube EDTA 5 ml ou microtube * 7 jours 24h ALC/LAB/IHE/PRA/FI/017 Manuel de prélèvement du LBM Lorraine - Champagne-Ardenne 14/21

EXAMEN PRINCIPE COMMENTAIRES NOMBRE ET TYPE DE TUBES NECESSAIRES DELAI DE STABILITE DELAI DE RENDU DES RESULTATS (Hors urgences) Technique d adsorption d anticorps L épreuve d adsorption utilise les propres hématies du patient (auto adsorption) ou des hématies de phénotype connu (allo adsorption). Elle est réalisée dans le cas de RAI positive avec présence d auto anticorps, pour rechercher d éventuels allo anticorps masqués, ou en cas de RAI complexe pour éliminer des allo anticorps déjà connus et permettre ainsi l identification d éventuels autres anticorps anti- érythrocytaires. L auto-adsorption ne peut être réalisée en cas de transfusion récente. Une adsorption est obligatoirement suivie d une RAI sur le sérum adsorbé. 2 à 3 tubes EDTA 5 ml 7 jours 48h Titrage des allo anticorps (autres que les anticorps naturels ou immuns anti A ou anti B) Titrage des anticorps de nature IgG actifs en technique Coombs indirect à l aide d un pool d hématies. Titrage obligatoire d un allo-anticorps antiérythrocytaire d intérêt obstétrical dans le cadre du suivi d une grossesse. Titrage effectué comparativement avec l échantillon antérieur conservé en sérothèque. En fonction de la nature de l anticorps et de son titrage un dosage pondéral de l anticorps peut être nécessaire (Cf. Annexe 3) 1 tube EDTA 5 ml 7 jours 72h ALC/LAB/IHE/PRA/FI/017 Manuel de prélèvement du LBM Lorraine - Champagne-Ardenne 15/21

EXAMEN PRINCIPE COMMENTAIRES NOMBRE ET TYPE DE TUBES NECESSAIRES DELAI DE STABILITE DELAI DE RENDU DES RESULTATS (Hors urgences) Microtitration d une réactivité anti-rh1(d) Titrage par microfiltration des anticorps de nature IgG actifs en technique Coombs indirect à l aide d un pool d hématies. Intérêt : Déterminer si l Anti-RH1 dosé est uniquement un Anti-RH1 passif (résiduel) consécutif à une injection d Ig anti-rh1. 1 tube EDTA 5 ml 7 jours 7 jours Titrage des anti-a et/ou anti-b naturels et/ou immuns Détermination du titre des anticorps anti-a et anti-b par hémaglutination. Réalisé dans le cadre d un bilan d allogreffe de cellules souches hématopoïétiques, de transplantation rénale ABO incompatible, d hypo ou agammaglobulinémie. 1 tube EDTA 5 ml + 1 tube SEC 5ml 7 jours 72h Test de Kleihauer Test basé sur la résistance de l hémoglobine fœtale (Hb F) à une solution acide et sur la numération au microscope des hématies fœtales Ce test sert chez la femme enceinte à adapter les doses d Ig anti-rh1 et /ou évaluer l hémorragie fœto-maternelle. Sur sang de cordon, il sert à confirmer l origine fœtale du prélèvement 1 tube EDTA 5 ml 3 jours 72h EXAMEN PRINCIPE COMMENTAIRES NOMBRE ET TYPE DE DELAI DE DELAI DE ALC/LAB/IHE/PRA/FI/017 Manuel de prélèvement du LBM Lorraine - Champagne-Ardenne 16/21

TUBES NECESSAIRES STABILITE RENDU DES RESULTATS (HORS URGENCES) Recherche et titrage d Agglutinines Froides Mise en évidence et titrage éventuel d agglutinines froides dans le plasma /sérum du patient Cet examen peut être effectué à l initiative du biologiste, en cas de difficulté de groupage ou de RAI. 1 tube EDTA 5 ml 3 jours 24 h * Microtube toléré chez les très jeunes enfants, sauf indication contraire liée aux contraintes techniques de chaque site (0.6 ml minimum). *** En cas d association de plusieurs de ces examens le nombre maximum de tubes à prélever est de 2. ALC/LAB/IHE/PRA/FI/017 Manuel de prélèvement du LBM Lorraine - Champagne-Ardenne 17/21

13.2. ANNEXE 2 : Examens réalisés et sites du LBM Lorraine-Champagne-Ardenne Examen Nancy-Brabois Nancy-Lobau Metz Troyes Reims Charleville-Mézières Cotation Code NABM Groupage sanguin ABO-RH1 B34 1140 Phénotype RH x x x x x x (RH2, RH3, RH4, RH5) et Kell (KEL1) B34 1145 Phénotype étendu FY1 FY2 JK1 JK2 MNS3 MNS4 x T x x x x B15 par antigène (max 5 Ag) 1146 Phénotype étendu (autres antigènes) x T x x x T B15 par antigène (max 5 Ag) 1146 RAI Dépistage x x x x x x B39 1141 RAI Identification x x x x x x B65 1131 Epreuve Directe de Compatibilité x x x x x x Test Direct à l Antiglobuline (test de coombs direct) Titrage des allo anticorps (autres que les anticorps naturels ou anti A ou anti B) dans le cadre d'un suivi de grossesse B35/ unité de sang 1152 x x x x x x B15/spécificité 1154 x T T T x T B20 1149 Microtitration d une réactivité anti-rh1 x T T T T T B20 1149 Recherche et titrage d Agglutinines Froides x x x x x T HN Titrage des anti-a et/ou anti-b naturels et/ou immuns x T T T T T B15/spécificité 1151 Elution d anticorps x x x x x x B20 1155 Adsorption d anticorps x x x x x x B20 1156 Test de Kleihauer T x x x B70 2109 X : Réalisé sur site T : Transmission intersites : Examen non pris en charge par le site ALC/LAB/IHE/PRA/FI/017 Manuel de prélèvement du LBM Lorraine - Champagne-Ardenne 18/21

13.3. ANNEXE 3 : Sous-traitance au LBM Lorraine-Champagne-Ardenne Liste des cas de figure dans lesquels une sous-traitance peut être envisagée et à quels laboratoires il sera fait appel dans ces cas-là : Certains examens peuvent être transmis au : Centre national de référence du groupe sanguin (CNRGS, numéro d accréditation n 8-1950, portée disponible sur www.cofrac.fr) en cas d identification d agglutinines irrégulières de type anti public, anti HTLA, mélanges complexes... ou de suspicion de phénotype variant ou rare. Cet envoi est indispensable pour l enregistrement du patient sur un fichier national et/ou une demande de CGR à la banque de sang rare. Centre national de référence pour l hémobiologie périnatale, pour le dosage pondéral d anticorps dans le cadre suivi de certaines femmes enceintes présentant un allo anticorps d incidence obstétricale. Pour la réalisation d un dosage pondéral d anticorps: un prélèvement d un (1) tube EDTA doit nous être transmis. Les demandes de génotypage fœtal sur plasma maternel sont également adressées au CNRHP ; un consentement de la patiente associé aux documents de prescription et disponible auprès des différents sites de notre LBM doit nous être transmis avec un prélèvement de 3 tubes EDTA (5 ml x3) LBM de l EFS Nord de France, pour le dosage pondéral d anticorps dans le cadre suivi de certaines femmes enceintes présentant un allo anticorps d incidence obstétricale et pour les sites recevant des demandes d Immunologie plaquettaire. LBM de l EFS Ile de France (numéro d accréditation n 8-2520) pour la réalisation de la biologie moléculaire des groupes sanguins. ALC/LAB/IHE/PRA/FI/017 Manuel de prélèvement du LBM Lorraine - Champagne-Ardenne 19/21

13.4. ANNEXE 4 : Liste des examens réputés urgents EXAMEN CONTEXTE Groupage sanguin ABO-RH1/Phénotype RH-KEL1 Urgence transfusionnelle RAI dépistage Urgence transfusionnelle RAI identification Urgence transfusionnelle Epreuve Directe de Compatibilité (EDC) Urgence transfusionnelle Test Direct à l Antiglobuline (TDA) Urgence transfusionnelle chez le nouveau-né <4 mois Titrage des anti-a et/ou anti-b naturels et/ou immuns Greffe rénale ABO incompatible ALC/LAB/IHE/PRA/FI/017 Manuel de prélèvement du LBM Lorraine - Champagne-Ardenne 20/21

13.5. ANNEXE 5 : Modèle de formulaire de demande d examens ALC/LAB/IHE/PRA/FI/017 Manuel de prélèvement du LBM Lorraine - Champagne-Ardenne 21/21