Histologie A1- Module Sciences Morphologiques Nathalie Bourgès-Abella Ecole Nationale Vétérinaire de Toulouse Le sang - les globules blancs ou leucocytes
Les leucocytes Chien, May Grünwald Giemsa, x1000
Les leucocytes Rappel: coloration du frottis sanguin May Grünwald - Giemsa (MGG) May Grünwald (éosinate de bleu de méthylène): 5 min Eau (robinet ou ppi) Giemsa R (bleu et violet de méthylène+éosinate d azur) 1/10 e : 5-10 min Eau robinet Sécher Avantages MGG/ colorations rapides: Coloration polychromatique = éventail de teintes plus grand Basophile: bleu violacé Azurophile: rouge pourpre Eosinophile: rose orangé Neutrophile: grisâtre à brunâtre
Les leucocytes Granulocytes (anciens «polynucléaires») G. Neutrophiles (GNN) G. Eosinophiles (GNE) G. Basophiles (GNB) Agranulocytes (leucocytes mononuclées) Lymphocytes Monocytes
Le granulocyte neutrophile: morphologie Microscopie photonique: Mammifères (cas général) Diamètre: 12 à 18 µm
Le granulocyte neutrophile: morphologie
Le granulocyte neutrophile: variations morphologiques liées à l espèce Granulation hétérophile ou pseudoéosinophile liées au sexe Corpuscule de Barr (1-10% femelles) liées à l âge granulocyte non segmenté ou band cell
Le granulocyte neutrophile: variations morphologiques GNN Rat Corpuscule de Barr
Le granulocyte neutrophile: variations morphologiques Les jeunes granulocytes: Band cells
Le granulocyte neutrophile: morphologie Microscopie électronique spécifiques (homme, lapin)
Le granulocyte neutrophile: morphologie Composition chimique des granulations du granulocyte neutrophile (GNN) GNN Activité Granulation primaire Granulation secondaire (azurophile) (spécifique) bactéricidie myeloperoxydase lactoferrine lysozyme (1/3) lysozyme (2/3) protéines cationiques défensines lytique hydrolases acides collagenase hydrolases neutres
Le granulocyte neutrophile: morphologie Composition chimique des granulations du GNN Contenu et fonctions des granulations du GNN In «Tizard I.R., Vet. Immunology, an introduction, 7th ed., 2004, Elsevier (USA)»
Le granulocyte neutrophile: données numériques Chien Chat Cheval de sang Bovin Leucocytes x10 9 /l 11,5 (6-17) 12,5 (5,5-19,5) 9,05 (5,4-14,3) 8,00 (4,0-12,0) GNN matures % 70 (60-77) 59 (35-75) 53 (22-72) 28 (15-45) /µl 3000-11500 2500-12500 2260-8580 600-4000 Autres espèces: cf tableaux
Le granulocyte neutrophile: cytophysiologie Les différents compartiments des GNN dans l organisme Moelle osseuse Sang Tissus Production Maturation Réserve diabase GNN marginés GNN circulants (12 heures) diapédèse Fonctions et mort du GNN (2 à 3 jours) Ponction veineuse
Le granulocyte neutrophile: données numériques Chien Chat STRESS Leucocytes GNN x10 9 /l /µl 11,5 (6-17) 3000-11500 Leucocytose 12,5 (5,5-19,5) 2500-12500 adrénaline glucocorticoïdes GNN GNN Lymphocytes GNN
Le granulocyte neutrophile: cytophysiologie Diapédèse et chimiotactisme Vue simplifiée des protéines et de leurs ligands engagés dans l adhésion du GNN à l endothélium In «Tizard I.R., Vet. Immunology, an introduction, 7th ed., 2004, Elsevier (USA)» In «Wheater et al., Histologie fonctionnelle, 4ème ed.,2001, de Boeck Université»
Le granulocyte neutrophile: cytophysiologie Endocytose Opsonisation d une bactérie par Ac et complément In «Tizard I.R., Vet. Immunology, an introduction, 7th ed., 2004, Elsevier (USA)»
Le granulocyte neutrophile: cytophysiologie Activité biologique des GNN Systèmes bactéricide O2 dépendant: «l explosion respiratoire» (respiratory burst) survient dans sec. qui suivent la liaison avec la bactérie consommation d O2 par GNN augmentée de x 100 Contre: bactéries, virus, champignons voie des pentoses Production de substances oxydantes et de leurs dérivés bactéricides H 2 O 2 et ClO - dans le GNN In «Tizard I.R., Vet. Immunology, an introduction, 7th ed., 2004, Elsevier (USA)» NOX: NADPH Oxydase Systèmes bactéricide O2 indépendant: libération d enzymes lytiques (hydrolases acides, lysozyme) et de peptides antimicrobiens (protéines cationiques, lactoferrine) contenues dans granulations
Les leucocytes
Le granulocyte éosinophile: morphologie Microscopie photonique Mammifères (cas général) Diamètre: 12 à 18 µm noyau bilobé granulations éosinophiles
Le granulocyte éosinophile: variations morphologiques Variations liées à l espèce Cheval Chat Chien Bovin
GNE: morphologie
GNE: morphologie Microscopie électronique In «Wheater et al., Histologie fonctionnelle, 4ème ed.,2001, de Boeck Université»
GNE: composition biochimique des granulations Cellule Eosinophile Activité protéine majeure basique (MBP) coeurantiparasitaire antiinflammatoire Granulation primaire -matricehistaminase arylsulfatase B phospholipases B et D Granulation secondaire spécifique (cristalloïde) Eosinophil cationic protéin (ECP) E. peroxydase (EPO) E. derived neurotoxin (EDN)
GNE: données numériques Chien Chat Cheval de sang Bovin % 4 (2-10) 5,5 (2-12) 3,5 (0-10) 9,0 (0-20) /µl 100-1250 0-1500 0-1000 0-2400 Autres espèces :«intervalles de référence en hémato. vétérinaire» sur moodle
GNE: Cytophysiologie Activation: présence de GNE caractéristique de Réaction d Hypersensibilité Type I Par cellules Th2 et mastocytes (cf cours d Immunologie) Régulation de la mobilisation, le chimiotactisme et l activation des GNE In «Tizard I.R., Vet. Immunology, an introduction, 7th ed., 2004, Elsevier (USA)» Par eotaxines (histamine, acide acétique imidiazole, leucotriène B4, PAF)
GNE: histophysiologie Destruction de parasites (Helminthes) Mechanisms involved in the self-cure reaction against intestinal helminths In «Tizard I.R., Vet. Immunology, 6th ed, 2000»
GNE: histophysiologie Fonctions de phagocytose et de bactéricidie activité réduite/gnn bactéricidie fait intervenir la peroxydase éosinophile: Br- OBr- (respiratory burst)
Le granulocyte basophile: morphologie Microscopie photonique Mammifères (cas général) Diamètre: 14 à 15 µm
Le granulocyte basophile: variations morphologiques Cheval Chien Chat
GNB: morphologie Microscopie électronique In «Wheater et al., Histologie fonctionnelle, 4ème ed.,2001, de Boeck Université»
GNB: morphologie Microscopie électronique GNB mastocyte (moelle osseuse)
Le granulocyte basophile: morphologie GNB/Mastocyte Homologies: Précurseur médullaire commun (CD34) Nature de certaines granulations Rôle dans hypersensibilité immédiate Différences: GNB: - différenciation MO, forme mature et fonctionnelle circulante - Durée de vie <2sem Mastocyte: - maturation et localisation tissulaire - forme circulante rare - durée de vie longue
Le granulocyte basophile: morphologie Composition chimique des granulations du GNB: mélange complexe de molécules vasoactives similaire à celle des mastocytes Activité Médiateurs de l inflammation propriétés vasoactives propriété anti-coagulante Granulation Histamine sérotonine héparine Facteurs chimiotactiques ECF-A NCF LTB4
Le granulocyte basophile: données numériques Chien Chat Cheval de sang Bovin % rares rares 0,5 (0-4) 0,5 (0-2) /µl - - 0-290 0-200 Autres espèces :«intervalles de référence en hémato. vétérinaire» sur moodle Basophilie = pathologie
GNB/mastocytes: histophysiologie Intervention dans Hypersensibilité immédiate (cf cours Immunologie) Médiateurs solubles libérés suite à la dégranulation du mastocyte In «Tizard I.R., Vet. Immunology, 6th ed, 2000» In: «Diseases of Immunity, Snyder P.W., Diseases of immunity. In Mc Gavin M.D., Zachary J.F., Pathologic basis of Veterinary Disease, 4th ed.,2007, MosbyElsevier»:
Les lymphocytes: morphologie Petits lymphocytes microscopie photonique Grands lymphocytes granulations azurophiles In «Wheater et al., Histologie fonctionnelle, 4ème ed.,2001, de Boeck Université»
Les lymphocytes: morphologie
Le lymphocyte: données numériques Chien Chat Cheval de sang Bovin % 20 (12-30) 32 (20-55) 39 (17-68) 58 (45-75) /µl 1000-4800 1500-7000 1500-7700 2500-7500 Autres espèces :«intervalles de référence en hémato. vétérinaire» sur moodle
Les lymphocytes: données numériques Chien Chat Leucocytes x10 9 /l 11,5 (6-17) 12,5 (5,5-19,5) Lymphocytes /µl 1000-4800 1500-7000 AGE lymphocytose 2-6 mois 1-3 mois (0-1 mois: svt inversion formule) STRESS adrénaline glucocorticoïdes GNN (L ) GNN L L
Les lymphocytes: cytophysiologie Immunité spécifique à médiation cellulaire: L T à médiation humorale: L B. Cf Cours d Immunologie
Les monocytes: morphologie cytoplasme gris «ciel d orage» Microscopie photonique (coloration MGG) Mammifères (cas général) Diamètre: 25 à 30 µm vacuoles
Les monocytes: morphologie
Le monocyte: morphologie Microscopie photonique Le macrophage alvéolaire Monocyte: In «Wheater et al., Histologie fonctionnelle, 4ème ed.,2001, de Boeck Université»
Le monocyte: données numériques Chien Chat Cheval de sang Bovin % 5,2 (3-10) 3 (1-4) 4,5 (0-7) 4,0 (2-7) /µl 150-1350 0-850 0-1000 25-840 Autres espèces :«intervalles de référence en hémato. vétérinaire» sur moodle Monocyte sanguin macrophage tissulaire
Le monocyte: les différents compartiments
Le macrophage: cytophysiologie Pinocytose Rhophéocytose Phagocytose (ex: goutellette lipidique) (ex: virus) (ex: hématie) l endocytose Phagosome Lysosome Fusion des lysosomes avec le phagosome Exocytose des déchets phagolysosome
Activité sécrétoires Le macrophage: cytophysiologie
Les plaquettes sanguines: morphologie Microscopie photonique In «Wheater et al., Histologie fonctionnelle, 4ème ed.,2001, de Boeck Université» Chien, Chat: présence de formes géantes Chat: agrégats plaquettaires (! Num plqs)
Microscopie électronique Les plaquettes sanguines: morphologie In «Wheater et al., Histologie fonctionnelle, 4ème ed.,2001, de Boeck Université»
forme géante Chien Chat
Les plaquettes sanguines: données numériques Chien Chat Cheval de sang Bovin x10 9 /l 300 (200-500) 450 (300-800) 225 (100-350) 500 (100-800) Autres espèces :«intervalles de référence en hémato. vétérinaire» sur moodle Temps de demi-vie: environ 5 jours (CN) Lieu de séquestration: rate (30 à 40% de la masse plaquettaire totale) Destruction: SPM
Les plaquettes sanguines: cytophysiologie L Hémostase: ensemble des phénomènes qui assurent in vivo l arrêt des hémorragies en cas de brèches vasculaires (Cf cours Armelle Diquélou, Médecine Interne ENVT)