16ème Journée annuelle du GEMHEP Paris, INTS 29 Novembre 2011 Evaluation de 2 stratégies de dépistage de l hépatite C sans ponction veineuse Test de diagnostic rapide versus test combiné antigène-anticorps réalisé en laboratoire Sylvie LARRAT MCU-PH Laboratoire de Virologie CHU de Grenoble
Contexte Plan national de lutte contre les hépatites B et C 2009-2012 1 «créer les conditions d un recours accru au dépistage des personnes à risque et notamment des usagers de drogues» 2700 à 4400 nouvelles infections VHC estimées /an chez IDU Etude INVS Coquelicot 3 : 59.8% des IDU ont anticorps anti-vhc (10.8% anti-vih) 27 % se déclarent séronégatifs à tort pour le VHC (2 % pour le VIH) Usagers de drogues nécessité de dépistages réguliers Insertion dans le système de santé Accès veineux difficile = frein au dépistage Prélèvements alternatifs sang capillaire ou fluide oral 1: http://www.sante-sports.gouv.fr/img/pdf/plan_hepatites_2009_2012.pdf 2:Bruandet B, 2005, Bull Epidemiol Hebd 3: Jauffret Roustide M, 2006, Bull Epidemiol Hebd
Bibliographie Nombreuses études sur le fluide oral performances variables o 3 ème génération: Se = 72% à 100% et Sp = 92,5% à 100% 1, 2, 3, 4 Quelques études sur sang capillaire déposé sur buvards o 3 ème génération: Se = 97,2% à 100% et Sp = 98% à 100% 4, 5, 6,7 Intérêt d une détection précoce: test combiné Ag + Ac anti- VHC fenêtre sérologique d environ 1 mois 8 o Sujets VIH positifs (retard à l apparition des Ac anti-vhc 10 ) Gain de 50 jours 11 / tests de 3 ème génération o Traitement rapide de l hépatite C aiguë chez les UD IV 24 semaines :RVS (70%) 9 o transmissions secondaires 1. Cameron SO. J Viral Hepat. 1999. 2. Van Doornum. J Med Virol. 2001. 3. Sherman KE.Am J Gastroenterol. 1994. 4. Judd A. J Med Virol. 2003. 5. McCarron B. J Viral Hepat. 1999. 6. Croom HA. J Clin Virol. 2006. 7. Tuaillon. Hepatology. 2010. 8. Laperche S. J Clin Microbiol. 2005. 9. Dore GJ. Gastroenterology, 2010. 10. Thomson EC, AIDS, 2009. 11. Schnuriger A, J Clin Microbiol. 2006
Objectif Tester les performances analytiques de deux stratégies de dépistage du VHC sur des prélèvements alternatifs Fluide oral Sang capillaire bout du doigt 20 min Test combiné Ag-Ac Biorad «4 ème génération» Test Oraquick HCV RT-PCR Roche TNAi Ampliprep Taqman HCV
Population de l étude Patients du CHU de Grenoble Prévalence VHC: 56.2% (INVS Coquelicot: 59.8% et 54% à Bristol 1 ) Age (moy +/-SD) Sexe (M/F) VIH VHB Patients VHC positifs (n=113) 54 +/-11 68/45 N=12 <20 cop/ml N=5 m= 43 +/-20 cop/ml N=1 <12 UI/ml N=1 57 UI/ml Patients VHC négatifs (n=88) 39 +/-16 36/52 N=14 <20 cop/ml N=8 m= 8150 +/- 22 700 cop/ml N=11 <12 UI/ml N=5 m= 6.1 +/- 6.4 log UI/ml VHC VHC Genotype N=50 <15 UI/ml N=63 m= 5.6 +/- 1.2 log UI/ml 73% G1; 3% G2; 11% G3, 14% G4 NA 1: Hope VD, 2011, J Viral Hepat
Résultat 1: performances analytiques sensibilité spécificité PPV NPV Sang capillaire Oraquick HCV ceia BioRad CO: 0.20 97.4% 98.2% 100% 100% 100% 100% 96.7% 97.8% Oraquick HCV 94.6% 100% 100% 93.5% Fluide oral OQ + 5invalides ceia BioRad CO:0.10 92% 71.7% 97.7% 94.3% 98.1% 90.5% 94.2% 72.2% SC: FG: 1 FN commun ancien IDU: HCV résolue spontanément faible DO +2 FN Oraquick Co-inf VIH ARN VHC<0 +1 FN ceia BioRad ARN VHC>0 Oraquick: 6 FN dont 5 ARN VHC<0 et 4 co-inf VIH
Résultat 2 : RT-PCR et influence des co-facteurs Sur les patients VHC +, sang capillaire Optical Density 0.5 1 1.5 2 2.5 p<0.001 P<0.01 HIV - HIV + Influence du statut VIH RT-PCR: ARN VHC: N=63 patients VHC RNA + 60 détectés en DBS 2 faux négatifs <3 log UI/ml + non détection des détectables <15 UI/ml (id Tuaillon et al, Hepatology, 2010)
Résultat 3 : stockage des prélèvements Stockage DBS avant ceia Biorad 2,520 2,310 2,100 4 avant RT-PCR -8 1,890 1,680 3,5 Optical Density 1,470 1,260 1,050 0,840 0,630 H C V R N A (lo g IU / m L ) 3 2,5 2 0,420 0,210 0,000 0 3 6 9 12 Storage time, days 3j stockage TA spécificité 1,5 1 0 5 9 13 Strage time, days 9j stockage TA ou +4 C sensibilité
Conclusion Sur fluide oral: Mauvaises performances du ceia BioRad adapté Performances correctes du Oraquick HCV mais < aux données fabricant (94.6% vs 99.2% 1 et 98.1% 2 ) + pb de migration (sens =92%) Prélèvement pénible pour bcp de patients Bonnes performances des deux tests sur sang capillaire Oraquick légèrement inférieures à données fabricant Attention stockage des buvards à TA +4 C (sens: 97.4% vs 100% 1 et 99.7% 2 ) Possibilité ARN VHC sur buvard (stockage >5j: congeler) Différence NS entre les 2 techniques pas d infection récente Deuxième partie de l étude: Comparaison des deux stratégies pour le dépistage sur des populations à risque (centres de substitution, prisons, etc ) 1: Lee et al., 2010, Journal of Clinical Virology 2: Lee et al., 2011, Journal of Virological Methods
Remerciements Laboratoire de Virologie: Cécile Bourdon, Pr P. Morand ; Dr M.Baccard Cécile Garnaud et Sophie Mathieu Service d hépato-gastro-entérologie : Pr JP. Zarski ; Pr V. Leroy et le Dr MN. Hilleret CISIH : Dr P.Leclercq ; Dr Blanc CIC: Jean Louis Quesada Financement: ANRS ; Roche diagnostics ; Roche pharma et Schering -Plough