Conflits d intérêt: Aucun

La combinaison de variants génétiques influençant la production de cytokines proinflammatoires prédit le risque de survenue de carcinome hépatocellulaire chez des patients ayant une cirrhose virale C Arige Tarhuni, Erwan Guyot, Pierre Rufat, Angela Sutton, Nathalie Charnaux, Nathalie Ganne-Carrié, Jean-Claude Trinchet, Richard Moreau, Abdel Mansouri, Pierre Nahon INSERM U773, Centre de recherche de Bichat-Beaujon, Paris Université Paris 7-Denis Diderot, Paris, France Université Paris 13, Bobigny, France Unité d Hépatologie, Hôspital Jean Verdier, Bondy, France

Conflits d intérêt: Aucun

Single Nucleotide Polymorphisms Foie normal? ALCOOL VIRUS? Cirrhose

Single Nucleotide Polymorphisms Foie normal ALCOOL VIRUS cytokines Pro-inflammatoires Cirrhose

VHC Macrophage IL6 IL1β TNFα CHC

SNPs VHC Macrophage SNPs SNPs IL6 IL1β TNFα CHC

SNPs fonctionnels des gènes du TNF-α, IL-1ß et IL6 maladies du foie Cytokine Région Position Allèle 1,2 Conséquences Fonctionnelles (allèle 2) Pathologies TNFα Promoteur -238 G,A Augmentation du TNFα TNFα Promoteur -308 G,A Augmentation du TNFα TNFα Promoteur - 863 C,A Augmentation du TNFα IL-6 +174 C,G Augmentation de l IL-6 IL-1β Promoteur - 511 C,T Augmentation de l IL-1 IL-1β Promoteur - 31 C,T Augmentation de l IL-1 Maladie alcoolique du foie Hépatite B Li HQ et Al Hépatite B Hépatite C Jeng J et Al Carcinogénèse virale B et C Hépatite B Kim J et Al Carcinogénèse virale B Maladie alcoolique du foie Gleeson D et Al Maladie alcoolique du foie Carcinogénèse virale C Carcinogénèse virale C Sutton et al Etudes longitudinales dans des cohortes bien définies

Patients et Méthodes 253 patients caucasiens avec une cirrhose virale C prouvée histologiquement sans consommation d alcool sans co-infection VIH/VHB Recrutement: 1999-2007 Suivie et dépistage du CHC 95 mois Décès CHC Date de point : 1/08/2011 lié au CHC non lié au CHC extra-hépatique TNFα-238G/A TNFα-308G/A TNFα-863C/A IL6+174C/G IL1β-31C/T IL1β-511C/T QPCR ET RFLP Kaplan meier

Caractéristiques de la cohorte N = 253 patients Age = 57,2 ± 0,8 ans Hommes = 139 (55%) Score Child-Pugh = 5,2 ± 0,06 Suivi moyen= 95 ± 3 mois CHC = 91 (35,9%) RVS = 61 (24,1%) Décès = 85 (33,5%) Lié au CHC: 54 Non lié au CHC: 23 Extra-hepatique: 8

Temps (mois) IL 6 C/G (n=85 ) Patients sans CHC % Survie % IL6+174 C/G p=0,7 IL6 G/G (n=37) p=0,8 IL 6 C/G (n=85 ) IL6 G/G (n=37) TNFα A/A (n=48) TNFα-863 C/A p=0,5 TNFα C/A (n=64 ) p=0.5 TNFα A/A (n=48) TNFα C/A (n=64 ) GA-238TNFα (n=81 ) GA-238TNFα (n=81 ) TNFα-238 G/A p=0,2 2A-238TNFα (n=30) p=0,1 2A-238TNFα (n=30) IL1ß T/T (n=37) IL1ß T/T (n=37) IL1ß C/T (n=118 ) IL1β-511 C/T p=0.1 IL1ß C/C (n=98) p=0,2 IL1ß C/C (n=98) IL1ß C/T (n=118 )

Distributions génotypiques et caractéristiques des patients en fonction du TNFα -308 G/A TNF α -308 AA (n=37 ;14,6%) TNF α -308 GA (n=120 ;47,4%) TNF α-308 GG (n=96; 38 %) P Age (ans) 59,0 ±0,8 57,9 ± 0,8 55,6 ± 0.8 0,3 Sexe masculin 21 (56,8 %) 67 (55,8%) 51 (53,1 %) 0,7 BMI (kg/m 2 ) 28,1±0,5 28,8±0,4 29,8±0,4 0,6 Diabète 7(21,9) 29 (30,9) 20 (27,0) 0,8 Génotype VHC 1 26 (70,3) 84 (70,0) 79(75,0) 0,6 Score de Child-Pugh 5,3 ± 0,05 5,3 ± 0,05 5,2 ± 0,06 0,5 RVS 9 (24,3%) 25 (20,8%) 27 (28,1%) 0,4 CHC 18 (48,7%) 51 (42,5%) 22 (22,9 %) 0,001 Décès 15 (40,5%) 46 (38,3%) 24 (25,0%) 0,04

L allèle A du TNFα -308 favorise le développement du CHC et la mortalité globale CHC Décès Patients sans CHC (%) p<0,0001 TNFα G/A (n=120 ) TNFα A/A (n=37) Survie (%) p=0,002 TNFα G/A (n=120 ) TNFα A/A (n=37) Temps (mois) Temps (mois)

Distributions génotypiques et caractéristiques des patients pour le IL 1 β - 31 C/T IL1 ß-31 TT (n =97; 38,3 %) IL1 ß -31 CT (n=113; 44,7%) IL1ß-31 CC (n=43 ; 17%) P Age (ans) 57,6 ± 0,8 57,6 ± 0,8 55,5 ± 0,8 0,6 Sexe masculin 55 (56,7%) 60 (53,1 %) 24 (55,8%) 0,8 BMI (kg/m 2 ) 31,2±0,47 27,7±0,39 28,9 ± 0,35 0,5 Diabète 21 (28,0) 27 (28,7) 8 (25,8) 0,9 Génotype VHC 1 74 (76,2) 85 (75,2) 30 (69,8) 0,1 Score Child-Pugh 5,2 ± 0,04 5,3 ± 0,05 5,3 ± 0,09 0,6 RVS 22 (22,7%) 29 (25,7%) 10 (23,2%) 0,8 CHC 45 (46,4%) 37 (37,7%) 9 (20,9 %) 0,002 Décès 40(41,2%) 34(30,1%) 11 (25,6%) 0,04

L allèle T de l IL 1β - 31 est un facteur de risque du développement du CHC CHC Décès Patients sans CHC (%) Logrank=0.004 IL1ß C/T (n=113) IL1ß T/T (n=97) p=0,004 Survie (%) p=0,3 IL1ß C/T (n=113) IL1ß T/T (n=97) Temps (mois) Temps (mois)

Constitution de 4 groupes selon les génotypes du TNFα et de l IL1ß Faible producteurs de TNF α Faible producteurs de IL1ß Groupe 1 TNFα-308 GG IL1ß-31 CC ou CT Forts producteurs TNF α Forts producteurs IL1ß Groupe 4 TNFα -308 GA ou AA IL1ß-31 TT

Constitution de 4 groupes selon les génotypes du TNFα et de l IL1ß Faible producteurs de TNF α Faible producteurs de IL1ß Groupe 1 TNFα-308 GG IL1ß-31 CC ou CT Groupe 2 TNFα-308 GG IL1ß-31 TT Groupe 3 TNFα -308 GA ou AA IL1ß-31 CC ou CT Forts producteurs TNF α Forts producteurs IL1ß Groupe 4 TNFα -308 GA ou AA IL1ß-31 TT

Les Forts producteurs de TNF α et IL1ß ont un risque accru de développer un CHC TNFα IL1ß Patients sans CHC (%) Logrank= Logrank=0.0001 p<0,0001 N=63 (25,0%) N=33 (13,0%) months N=93 (36,7%) N=64 (25,3%) Groupe 1 Groupe 2 Groupe 3 Groupe 4 Temps de suivi (mois) TNFα IL1ß

Analyses multivariées Cox univarié Age 1,04 [1,02-1,06] Sexe masculin 2,4 [1,6-4,9] BMI 1,05 [1,02-1,09] P =0,0008 Diabète 2,1 [1,3-3,3] P =0.003 Absence de RVS 2,5 [1,4-5,0] P =0,003 Thrombopénie 1,006 [1,002-1,01] P =0,003 Il 1β- 31 1 ou 2 allèles T 1,7 [1,1-2,6] P =0,008 TNF-308 1 ou 2 allèles A 3,2 [1,9-5,2] Cox multivarié 1,04 [1,02-1,06] 2,5 [1,6-5,0] 1,05 [1,01-1,08] P =0,006 2,5 [1,2-4,1] P =0,01 1,006 [1,003-1,009] P =0,002 3,6 [2,1-6,0]

Analyses multivariées Cox univarié Age 1,04 [1,02-1,06] Sexe masculin 2,4 [1,6-4,9] BMI 1,05 [1,02-1,09] P =0,0008 Diabète 2,1 [1,3-3,3] P =0.003 Absence de RVS 2,5 [1,4-5,0] P =0,003 Thrombopénie 1,006 [1,002-1,01] P =0,003 Il 1β- 31 1 ou 2 allèles T 1,7 [1,1-2,6] P =0,008 TNF-308 1 ou 2 allèles A 3,2 [1,9-5,2] Cox multivarié 1,04 [1,02-1,06] 2,5 [1,6-5,0] 1,05 [1,01-1,08] P =0,006 2,5 [1,2-4,1] P =0,01 1,006 [1,003-1,009] P =0,002 3,6 [2,1-6,0] Score: âge*0,04446 1,02345*sexe + BMI*0,04882 0,00854*plaquettes + TNF-308 A allèle* 1,28515 0,77915*RVS

Intégration des données génétiques dans un modèle de prédiction du risque d apparition du CHC Patients sans CHC (%) p<0,0001 Risque faible (n=44) Risque Intermédiaire (n=166) Risque élevé (n=43) CHC<5% 5%<CHC<40% CHC>40% Temps de suivi (mois) Incidence CHC 3 ans Incidence CHC 6 ans Risque faible Risque intermédiaire Fort risque 0/44 (0,0%) 9/166 (5,4%) 8/43 (18,6%) 0/44 (0,0%) 32/166 (19,2%) 26/43 (60,4%)

Intégration des données génétiques dans un modèle de prédiction du risque d apparition du CHC Patients sans CHC (%) p<0,0001 Risque faible (n=44) Risque Intermediaire (n=166) Risque élevé (n=43) =41% Age=48.6 yrs IMC=25.7 kg/m 2 Pl=189 10 3/ mm 3 RVS=52% TNF-308 1ou2A=23% Risque faible Risque élevé Temps de suivi (mois) =77% Age=69.0 yrs IMC=32,1 kg/m 2 Pl=113 10 3/ mm 3 RVS=14% TNF-308 1ou2A=97%

Conclusions L hétérogénéité génétique modulant la production des cytokines pro-inflammatoires influence le risque d apparition de CHC chez des patients ayant une cirrhose virale C. Les patients ayant une supposée forte production de TNFα et IL1β selon les génotypes sont particulièrement exposés à la survenue du CHC et à une mortalité globale accrue.

Conclusions L allèle A du TNFα -308 favorise l émergence du CHC Sélection des patients à haut risque Marqueur génétique de prédiction du risque de CHC Le génotypage extensif de larges cohortes prospectives est nécessaire afin de préciser la place de ce marqueur dans des scores polygéniques de prédiction du risque de CHC