LABORATOIRE 2 : HISTOLOGIE DU TISSU NERVEUX Buts Visualiser les tissus nerveux de l organisme. Comprendre l anatomie microscopique d un neurone et d un nerf. Établir des liens entre l anatomie et la physiologie nerveuse. Matériel Microscope Volume de référence Lame préparée de la moelle épinière Lame préparée d une coupe d un nerf À lire : Marieb, Biologie humaine, pages 225, 271 et 278 À faire : Marieb, Cahier d activités, page 131 #26, page 121 #7, page 132 #28 Le microscope Pour utiliser adéquatement le microscope, il faut réaliser dans l ordre les opérations suivantes : 1- Avant toute utilisation, vérifier qu il ne manque aucune pièce au microscope, sinon le signaler immédiatement. 2- S assurer que l objectif le plus faible est mis en place. 3- Appuyer sur l interrupteur de sorte que le témoin lumineux, placé sur le côté droit du statif (pied), s allume. 4- Régler la luminosité grâce au bouton de réglage, à gauche sur le pied. 5- Placer le condensateur en butée supérieure et ouvrir le diaphragme de champ (s il n est pas déjà ouvert). 6- Placer la préparation sur la platine, la lamelle au-dessus de la lame, bien au centre du trou. Anatomie et physiologie 1 Système nerveux 33
7- À l aide de la vis macrométrique, monter au plus haut la platine. Regarder dans les oculaires tout en tournant la vise macrométrique de façon à ajuster votre mise au point grossière. Compléter ensuite votre mise au point fine avec la vise micrométrique. Toujours bien centrer la structure observée. 8- Pour avoir une vision stéréoscopique, éloigner et rapprocher les 2 oculaires au maximum. Déplacer les oculaires en mouvement de va et vient jusqu à ce que vous n observiez qu un seul champ visuel. 9- On procède ensuite à l ajustement des oculaires. a) Premièrement, regarder dans l oculaire droit, en fermant l œil gauche. Mettre au focus l échelle présente dans cet oculaire (micromètre oculaire). Ensuite, faire une mise au point sur la préparation avec la vis micrométrique. b) Deuxièmement, regarder dans l oculaire gauche, en fermant œil droit. Faire une mise au point sur la préparation, en tournant la bague de cet oculaire. 10-On commence toujours l observation en utilisant le plus faible grossissement (objectif 4X). L observation est alors possible à plus fort grossissement, après avoir pris soin de bien centrer son sujet d étude. Pour passer à un plus fort grossissement, tourner la bague dentée du revolver afin de mettre en bonne position l objectif désiré dans l axe optique. Refaire la mise au point en utilisant uniquement la vis micrométrique et recentrer la structure. La mise au point se fait de la même manière pour les autres objectifs. 11-Pour faire une observation avec l objectif 100X, on doit utiliser l huile à immersion. Faire une mise au point à 400X. Passer au grossissement 1000X sans utiliser d huile et faire la mise au point selon la procédure habituelle. Glisser ensuite de côté l objectif 100X et déposer sur la préparation microscopique une goutte d huile à immersion. Remettre en position l objectif 100X et refaire la mise au point fine à l aide de la vis micrométrique. Anatomie et physiologie 1 Système nerveux 34
Étude microscopique En vous servant du microscope et de votre volume, situez et identifiez les structures microscopiques en gras dans le texte. 1- Étude de la moelle épinière À faible grossissement (40X) vous pouvez distinguer entièrement la coupe de la moelle épinière (volume référence, p.271). Observez la pie-mère, la méninge la plus interne qui va recouvrir complètement le système nerveux central (SNC). Sur la face antérieure (côté abdominal) on distingue le sillon médian antérieur, plus large et plus prononcé que son vis-à-vis, le sillon médian postérieur (côté dorsal). Antérieurement, on peut distinguer l émergence des racines antérieures des nerfs rachidiens. L information motrice efférente va quitter la moelle épinière par cette voie pour se rendre aux effecteurs. Dorsalement, on peut distinguer l émergence des racines postérieures des nerfs rachidiens. L information sensitive afférente provenant des récepteurs va pénétrer dans la moelle épinière par cette voie. Au centre de la moelle épinière se trouve un canal, le canal épendymaire, où va circuler le liquide céphalo-rachidien. Vous pouvez également distinguer la substance blanche, qui va entourer la substance grise en forme de papillon. Cette substance blanche contient des fibres nerveuses (axones avec gaine de myéline) qui transportent les influx nerveux vers l encéphale (voies sensitives) ou de l encéphale vers les nerfs rachidiens (voies motrices). Ces voies nerveuses qui montent ou descendent dans la matière blanche de la moelle épinière porte le nom de faisceaux nerveux. La substance grise, au centre de la moelle, a la forme d un papillon. Les ailes du papillon sont plus courtes et plus épaisses au niveau antérieur (côté abdominal), ce sont les cornes antérieures. Elles renferment les corps cellulaires de neurones multipolaires moteurs qui vont jouer un rôle important pour les réponses nerveuses réflexes et motrices. Au niveau postérieur (côté dorsal), les ailes du papillon sont plus étroites et rejoignent souvent la périphérie de la moelle épinière au niveau des racines postérieures des nerfs rachidiens, ce sont les cornes postérieures. Elles renferment aussi des corps cellulaires de neurones, mais ils sont moins nombreux. Anatomie et physiologie 1 Système nerveux 35
http://atv2.ac-rennes.fr/pedagogie/svt/photo/histo_ani/moelle/histo_moelle.htm Vous devez faire un schéma d ensemble de la moelle épinière à faible grossissement (40X) en identifiant toutes les structures qui sont en caractères gras. Anatomie et physiologie 1 Système nerveux 36
2- Étude du neurone Comme nous venons de le voir au niveau de la moelle épinière, les corps cellulaires se retrouvent en grande quantité dans les cornes antérieures de la substance grise. Faites un grossissement de cette partie de votre coupe (400X) et observez un neurone. Le corps cellulaire a une forme en étoile, on y retrouve un noyau assez gros et un nucléole à l intérieur du noyau. Le noyau et le nucléole vont contenir le matériel génétique de la cellule. Les prolongements cellulaires épais sont appelés des dendrites et celui qui plus long et plus étroit se nomme l axone. Autour du neurone se trouvent les cellules de la névroglie et de petits capillaires sanguins. Vous devez faire un schéma d ensemble du neurone à fort grossissement (400 ou 1000X) et identifier toutes les structures qui sont en caractères gras. Anatomie et physiologie 1 Système nerveux 37
3- Étude du nerf Le nerf est un lieu de passage commun pour des centaines de fibres nerveuses ou axones avec myéline. À faible grossissement (40X), déterminez le nombre de faisceaux nerveux de ce nerf. Un faisceau nerveux est un regroupement de fibres nerveuses, et l ensemble de ces faisceaux forme le nerf. L épinèvre est une enveloppe de tissu conjonctif qui va former la paroi externe du nerf et qui permet de regrouper les faisceaux. Chacun des faisceaux est lui-même entouré d une enveloppe appelée périnèvre. Vous pouvez distinguez, entre les faisceaux, des artérioles et des veinules (ces dernières ayant une paroi plus mince). En observant un faisceau à fort grossissement (1000X), vous pourrez distinguer les fibres nerveuses en coupe transversale. Elles vous apparaîtront en forme de petites structures plus ou moins circulaires. Au centre de la fibre se retrouve l axone, qui est entouré d une couche isolante appelée la gaine de myéline. La gaine de myéline est entourée d une membrane provenant des cellules qui produisent la myéline et que l on nomme le neurilemme (ou gaine de Schwann). Chacune des fibres nerveuses est ellemême entourée de tissu conjonctif appelé endonèvre. http://atv2.ac-rennes.fr/pedagogie/svt/photo/histo_ani/nerf/histo_nerf.htm Vous devez faire un schéma d ensemble du nerf à faible grossissement (40X) et identifier toutes les structures qui sont en caractères gras, de même qu un détail de la fibre nerveuse (100X) en identifiant les structures s y rapportant. Évaluation : Vous devez compléter les dessins et les faire vérifier avant de quitter le laboratoire. Un test théorique suivra cette séance de laboratoire Anatomie et physiologie 1 Système nerveux 38