Pour l'obtention du Doctorat en Médecine

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1 L'EXPRESSION DE LA PROTEINE HER2/neu DANS LES TUMEURS UROTHELIALES DE LA VESSIE A propos d'une série de 34 cas THESE Présentée et soutenue publiquement le :.. PAR Mme Siham SHYEN Née le 24 Mars 1985 à Rabat Pour l'obtention du Doctorat en Médecine MOTS CLES Carcinome urothéliale Vessie HER2/neu - Immunohistochimie. JURY Mr. M. ABBAR PRESIDENT Professeur d'urologie Mr. A. AL BOUZIDI RAPPORTEUR Professeur d'anatomie Pathologique Mr. A. AMEUR Professeur d'urologie Mme. S. TELLAL Professeur Agrégé de Biochimie JUGES

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3 UNIVERSITE MOHAMMED V- SOUISSI FACULTE DE MEDECINE ET DE PHARMACIE - RABAT DOYENS HONORAIRES : : Docteur Abdelmalek FARAJ : Professeur Abdellatif BERBICH : Professeur Bachir LAZRAK : Professeur Taieb CHKILI : Professeur Mohamed Tahar ALAOUI : Professeur Abdelmajid BELMAHI ADMINISTRATION : Doyen : Professeur Najia HAJJAJ Vice Doyen chargé des Affaires Académiques et Estudiantines Professeur Mohammed JIDDANE Vice Doyen chargé de la Recherche et de la Coopération Professeur Naima LAHBABI-AMRANI Vice Doyen chargé des Affaires Spécifiques à la Pharmacie Professeur Yahia CHERRAH Secrétaire Général : Monsieur Mohammed BENABDELLAH PROFESSEURS : Décembre Pr. TOUNSI Abdelkader Pathologie Chirurgicale Février, Septembre, Décembre Pr. ARCHANE My Idriss* Pathologie Médicale 3. Pr. BENOMAR Mohammed Cardiologie 4. Pr. CHAOUI Abdellatif Gynécologie Obstétrique 5. Pr. CHKILI Taieb Neuropsychiatrie Janvier et Décembre Pr. HASSAR Mohamed Pharmacologie Clinique

4 Février Pr. AGOUMI Abdelaziz Parasitologie 8. Pr. BENKIRANE ép. AGOUMI Najia Hématologie 9. Pr. EL BIED ép. IMANI Farida Radiologie Février Mars et Novembre Pr. ARHARBI Mohamed Cardiologie 11. Pr. SLAOUI Abdelmalek Anesthésie Réanimation Mars Pr. LAMDOUAR ép. BOUAZZAOUI Naima Pédiatrie Mars, Avril et Septembre Pr. EL KHAMLICHI Abdeslam Neurochirurgie 14. Pr. MESBAHI Redouane Cardiologie Mai et Octobre Pr. BENOMAR Said* Anatomie Pathologique 16. Pr. BOUZOUBAA Abdelmajid Cardiologie 17. Pr. EL MANOUAR Mohamed Traumatologie-Orthopédie 18. Pr. HAMMANI Ahmed* Cardiologie 19. Pr. MAAZOUZI Ahmed Wajih Chirurgie Cardio-Vasculaire 20. Pr. SBIHI Ahmed Anesthésie Réanimation 21. Pr. TAOBANE Hamid* Chirurgie Thoracique Mai et Novembre Pr. ABROUQ Ali* Oto-Rhino-Laryngologie 23. Pr. BENOMAR M hammed Chirurgie-Cardio-Vasculaire 24. Pr. BENSOUDA Mohamed Anatomie 25. Pr. BENOSMAN Abdellatif Chirurgie Thoracique 26. Pr. CHBICHEB Abdelkrim Biophysique 27. Pr. JIDAL Bouchaib* Chirurgie Maxillo-faciale 28. Pr. LAHBABI ép. AMRANI Naïma Physiologie Novembre Pr. ALAOUI TAHIRI Kébir* Pneumo-phtisiologie 30. Pr. BALAFREJ Amina Pédiatrie 31. Pr. BELLAKHDAR Fouad Neurochirurgie 32. Pr. HAJJAJ ép. HASSOUNI Najia Rhumatologie 33. Pr. SRAIRI Jamal-Eddine Cardiologie Décembre Pr. BOUCETTA Mohamed* Neurochirurgie 35. Pr. EL OUEDDARI Brahim El Khalil Radiothérapie 36. Pr. MAAOUNI Abdelaziz Médecine Interne 37. Pr. MAAZOUZI Ahmed Wajdi Anesthésie -Réanimation 38. Pr. NAJI M Barek * Immuno-Hématologie 39. Pr. SETTAF Abdellatif Chirurgie Novembre et Décembre Pr. BENJELLOUN Halima Cardiologie 41. Pr. BENSAID Younes Pathologie Chirurgicale

5 42. Pr. EL ALAOUI Faris Moulay El Mostafa Neurologie 43. Pr. IHRAI Hssain * Stomatologie et Chirurgie Maxillo-Faciale 44. Pr. IRAQI Ghali Pneumo-phtisiologie 45. Pr. KZADRI Mohamed Oto-Rhino-laryngologie Janvier, Février et Décembre Pr. AJANA Ali Radiologie 47. Pr. AMMAR Fanid Pathologie Chirurgicale 48. Pr. CHAHED OUAZZANI ép.taobane Houria Gastro-Entérologie 49. Pr. EL FASSY FIHRI Mohamed Taoufiq Pneumo-phtisiologie 50. Pr. EL HAITEM Naïma Cardiologie 51. Pr. EL MANSOURI Abdellah* Chimie-Toxicologie Expertise 52. Pr. EL YAACOUBI Moradh Traumatologie Orthopédie 53. Pr. ESSAID EL FEYDI Abdellah Gastro-Entérologie 54. Pr. LACHKAR Hassan Médecine Interne 55. Pr. OHAYON Victor* Médecine Interne 56. Pr. YAHYAOUI Mohamed Neurologie Décembre Pr. BENHMAMOUCH Mohamed Najib Chirurgie Pédiatrique 58. Pr. DAFIRI Rachida Radiologie 59. Pr. FAIK Mohamed Urologie 60. Pr. FIKRI BEN BRAHIM Noureddine Médecine Préventive, Santé Publique et Hygiène 61. Pr. HERMAS Mohamed Traumatologie Orthopédie 62. Pr. TOULOUNE Farida* Médecine Interne Décembre 1989 Janvier et Novembre Pr. ABIR ép. KHALIL Saadia Cardiologie 64. Pr. ACHOUR Ahmed* Chirurgicale 65. Pr. ADNAOUI Mohamed Médecine Interne 66. Pr. AOUNI Mohamed Médecine Interne 67. Pr. AZENDOUR BENACEUR* Oto-Rhino-Laryngologie 68. Pr. BENAMEUR Mohamed* Radiologie 69. Pr. BOUKILI MAKHOUKHI Abdelali Cardiologie 70. Pr. CHAD Bouziane Pathologie Chirurgicale 71. Pr. CHKOFF Rachid Pathologie Chirurgicale 72. Pr. FARCHADO Fouzia ép.benabdellah Pédiatrique 73. Pr. HACHIM Mohammed* Médecine-Interne 74. Pr. HACHIMI Mohamed Urologie 75. Pr. KHARBACH Aîcha Gynécologie -Obstétrique 76. Pr. MANSOURI Fatima Anatomie-Pathologique 77. Pr. OUAZZANI Taïbi Mohamed Réda Neurologie 78. Pr. SEDRATI Omar* Dermatologie 79. Pr. TAZI Saoud Anas Anesthésie Réanimation 80. Pr. TERHZAZ Abdellah* Ophtalmologie Février Avril Juillet et Décembre Pr. AL HAMANY Zaîtounia Anatomie-Pathologique 82. Pr. ATMANI Mohamed* Anesthésie Réanimation 83. Pr. AZZOUZI Abderrahim Anesthésie Réanimation 84. Pr. BAYAHIA ép. HASSAM Rabéa Néphrologie

6 85. Pr. BELKOUCHI Abdelkader Chirurgie Générale 86. Pr. BENABDELLAH Chahrazad Hématologie 87. Pr. BENCHEKROUN BELABBES Abdelatif Chirurgie Générale 88. Pr. BENSOUDA Yahia Pharmacie galénique 89. Pr. BERRAHO Amina Ophtalmologie 90. Pr. BEZZAD Rachid Gynécologie Obstétrique 91. Pr. CHABRAOUI Layachi Biochimie et Chimie 92. Pr. CHANA El Houssaine* Ophtalmologie 93. Pr. CHERRAH Yahia Pharmacologie 94. Pr. CHOKAIRI Omar Histologie Embryologie 95. Pr. FAJRI Ahmed* Psychiatrie 96. Pr. JANATI Idrissi Mohamed* Chirurgie Générale 97. Pr. KHATTAB Mohamed Pédiatrie 98. Pr. NEJMI Maati Anesthésie-Réanimation 99. Pr. OUAALINE Mohammed* Médecine Préventive, Santé Publique et Hygiène 100. Pr. SOULAYMANI ép.bencheikh Rachida Pharmacologie 101. Pr. TAOUFIK Jamal Chimie thérapeutique Décembre Pr. AHALLAT Mohamed Chirurgie Générale 103. Pr. BENOUDA Amina Microbiologie 104. Pr. BENSOUDA Adil Anesthésie Réanimation 105. Pr. BOUJIDA Mohamed Najib Radiologie 106. Pr. CHAHED OUAZZANI Laaziza Gastro-Entérologie 107. Pr. CHAKIR Noureddine Radiologie 108. Pr. CHRAIBI Chafiq Gynécologie Obstetrique 109. Pr. DAOUDI Rajae Ophtalmologie 110. Pr. DEHAYNI Mohamed* Gynécologie Obstétrique 111. Pr. EL HADDOURY Mohamed Anesthésie Réanimation 112. Pr. EL OUAHABI Abdessamad Neurochirurgie 113. Pr. FELLAT Rokaya Cardiologie 114. Pr. GHAFIR Driss* Médecine Interne 115. Pr. JIDDANE Mohamed Anatomie 116. Pr. OUAZZANI TAIBI Med Charaf Eddine Gynécologie Obstétrique 117. Pr. TAGHY Ahmed Chirurgie Générale 118. Pr. ZOUHDI Mimoun Microbiologie Mars Pr. AGNAOU Lahcen Ophtalmologie 120. Pr. AL BAROUDI Saad Chirurgie Générale 121. Pr. ARJI Moha* Anesthésie Réanimation 122. Pr. BENCHERIFA Fatiha Ophtalmologie 123. Pr. BENJAAFAR Noureddine Radiothérapie 124. Pr. BENJELLOUN Samir Chirurgie Générale 125. Pr. BENRAIS Nozha Biophysique 126. Pr. BOUNASSE Mohammed* Pédiatrie 127. Pr. CAOUI Malika Biophysique 128. Pr. CHRAIBI Abdelmjid Endocrinologie et Maladies Métabolique 129. Pr. EL AMRANI ép. AHALLAT Sabah Gynécologie Obstétrique 130. Pr. EL AOUAD Rajae Immunologie 131. Pr. EL BARDOUNI Ahmed Traumato Orthopédie 132. Pr. EL HASSANI My Rachid Radiologie

7 133. Pr. EL IDRISSI LAMGHARI Abdennaceur Médecine Interne 134. Pr. EL KIRAT Abdelmajid* Chirurgie Cardio- Vasculaire 135. Pr. ERROUGANI Abdelkader Chirurgie Générale 136. Pr. ESSAKALI Malika Immunologie 137. Pr. ETTAYEBI Fouad Chirurgie Pédiatrique 138. Pr. HADRI Larbi* Médecine Interne 139. Pr. HDA Ali* Médecine Interne 140. Pr. HASSAM Badredine Dermatologie 141. Pr. IFRINE Lahssan Chirurgie Générale 142. Pr. JELTHI Ahmed Anatomie Pathologique 143. Pr. MAHFOUD Mustapha Traumatologie Orthopédie 144. Pr. MOUDENE Ahmed* Traumatologie Orthopédie 145. Pr. MOSSEDDAQ Rachid* Neurologie 146. Pr. OULBACHA Said Chirurgie Générale 147. Pr. RHRAB Brahim Gynécologie Obstétrique 148. Pr. SENOUCI ép. BELKHADIR Karima Dermatologie 149. Pr. SLAOUI Anas Chirurgie Cardio-vasculaire Mars Pr. ABBAR Mohamed* Urologie 151. Pr. ABDELHAK M barek Chirurgie - Pédiatrique 152. Pr. BELAIDI Halima Neurologie 153. Pr. BARHMI Rida Slimane Gynécologie Obstétrique 154. Pr. BENTAHILA Abdelali Pédiatrie 155. Pr. BENYAHIA Mohammed Ali Gynécologie -Obstétrique 156. Pr. BERRADA Mohamed Saleh Traumatologie -Orthopédie 157. Pr. CHAMI Ilham Radiologie 158. Pr. CHERKAOUI Lalla Ouafae Ophtalmologie 159. Pr. EL ABBADI Najia Neurochirurgie 160. Pr. HANINE Ahmed* Radiologie 161. Pr. JALIL Abdelouahed Chirurgie Générale 162. Pr. LAKHDAR Amina Gynécologie Obstétrique 163. Pr. MOUANE Nezha Pédiatrie Mars Pr. ABOUQUAL Redouane Réanimation Médicale 165. Pr. AMRAOUI Mohamed Chirurgie Générale 166. Pr. BAIDADA Abdelaziz Gynécologie Obstétrique 167. Pr. BARGACH Samir Gynécologie Obstétrique 168. Pr. BELLAHNECH Zakaria Urologie 169. Pr. BEDDOUCHE Amoqrane* Urologie 170. Pr. BENAZZOUZ Mustapha Gastro-Entérologie 171. Pr. CHAARI Jilali* Médecine Interne 172. Pr. DIMOU M'barek* Anesthésie Réanimation 173. Pr. DRISSI KAMILI Mohammed Nordine* Anesthésie Réanimation 174. Pr. EL MESNAOUI Abbes Chirurgie Générale 175. Pr. ESSAKALI HOUSSYNI Leila Oto-Rhino-Laryngologie 176. Pr. FERHATI Driss Gynécologie Obstétrique 177. Pr. HASSOUNI Fadil Médecine Préventive, Santé Publique et Hygiène 178. Pr. HDA Abdelhamid* Cardiologie 179. Pr. IBEN ATTYA ANDALOUSSI Ahmed Urologie 180. Pr. IBRAHIMY Wafaa Ophtalmologie

8 182. Pr. BENOMAR ALI Neurologie 183. Pr. BOUGTAB Abdesslam Chirurgie Générale 184. Pr. ER RIHANI Hassan Oncologie Médicale 185. Pr. EZZAITOUNI Fatima Néphrologie 186. Pr. KABBAJ Najat Radiologie 187. Pr. LAZRAK Khalid (M) Traumatologie Orthopédie 188. Pr. OUTIFA Mohamed* Gynécologie Obstétrique Décembre Pr. AMIL Touriya* Radiologie 190. Pr. BELKACEM Rachid Chirurgie Pédiatrie 191. Pr. BELMAHI Amin Chirurgie réparatrice et plastique 192. Pr. BOULANOUAR Abdelkrim Ophtalmologie 193. Pr. EL ALAMI EL FARICHA EL Hassan Chirurgie Générale 194. Pr. EL MELLOUKI Ouafae* Parasitologie 195. Pr. GAMRA Lamiae Anatomie Pathologique 196. Pr. GAOUZI Ahmed Pédiatrie 197. Pr. MAHFOUDI M barek* Radiologie 198. Pr. MOHAMMADINE EL Hamid Chirurgie Générale 199. Pr. MOHAMMADI Mohamed Médecine Interne 200. Pr. MOULINE Soumaya Pneumo-phtisiologie 201. Pr. OUADGHIRI Mohamed Traumatologie Orthopédie 202. Pr. OUZEDDOUN Naima Néphrologie 203. Pr. ZBIR EL Mehdi* Cardiologie Novembre Pr. ALAMI Mohamed Hassan Gynécologie Obstétrique 205. Pr. BEN AMAR Abdesselem Chirurgie Générale 206. Pr. BEN SLIMANE Lounis Urologie 207. Pr. BIROUK Nazha Neurologie 208. Pr. BOULAICH Mohamed O.RL Pr. CHAOUIR Souad* Radiologie 210. Pr. DERRAZ Said Neurochirurgie 211. Pr. ERREIMI Naima Pédiatrie 212. Pr. FELLAT Nadia Cardiologie 213. Pr. GUEDDARI Fatima Zohra Radiologie 214. Pr. HAIMEUR Charki* Anesthésie Réanimation 215. Pr. KADDOURI Noureddine Chirurgie Pédiatrique 216. Pr. KANOUNI NAWAL Physiologie 217. Pr. KOUTANI Abdellatif Urologie 218. Pr. LAHLOU Mohamed Khalid Chirurgie Générale 219. Pr. MAHRAOUI CHAFIQ Pédiatrie 220. Pr. NAZZI M barek* Cardiologie 221. Pr. OUAHABI Hamid* Neurologie 222. Pr. SAFI Lahcen* Anesthésie Réanimation 223. Pr. TAOUFIQ Jallal Psychiatrie 224. Pr. YOUSFI MALKI Mounia Gynécologie Obstétrique Novembre Pr. BENKIRANE Majid* Hématologie 226. Pr. KHATOURI Ali* Cardiologie 227. Pr. LABRAIMI Ahmed* Anatomie Pathologique

9 Novembre Pr. AFIFI RAJAA Gastro - Entérologie 229. Pr. AIT BENASSER MOULAY Ali* Pneumo-phtisiologie 230. Pr. ALOUANE Mohammed* Oto- Rhino- Laryngologie 231. Pr. LACHKAR Azouz Urologie 232. Pr. LAHLOU Abdou Traumatologie Orthopédie 233. Pr. MAFTAH Mohamed* Neurochirurgie 234. Pr. MAHASSINI Najat Anatomie Pathologique 235. Pr. MDAGHRI ALAOUI Asmae Pédiatrie 236. Pr. MANSOURI Abdelaziz* Neurochirurgie 237. Pr. NASSIH Mohamed* Stomatologie Et Chirurgie Maxillo Faciale 238. Pr. RIMANI Mouna Anatomie Pathologique 239. Pr. ROUIMI Abdelhadi Neurologie Janvier Pr. ABID Ahmed* Pneumo-phtisiologie 241. Pr. AIT OUMAR Hassan Pédiatrie 242. Pr. BENCHERIF My Zahid Ophtalmologie 243. Pr. BENJELLOUN DAKHAMA Badr.Sououd Pédiatrie 244. Pr. BOURKADI Jamal-Eddine Pneumo-phtisiologie 245. Pr. CHAOUI Zineb Ophtalmologie 246. Pr. CHARIF CHEFCHAOUNI Al Montacer Chirurgie Générale 247. Pr. ECHARRAB El Mahjoub Chirurgie Générale 248. Pr. EL FTOUH Mustapha Pneumo-phtisiologie 249. Pr. EL MOSTARCHID Brahim* Neurochirurgie 250. Pr. EL OTMANYAzzedine Chirurgie Générale 251. Pr. GHANNAM Rachid Cardiologie 252. Pr. HAMMANI Lahcen Radiologie 253. Pr. ISMAILI Mohamed Hatim Anesthésie-Réanimation 254. Pr. ISMAILI Hassane* Traumatologie Orthopédie 255. Pr. KRAMI Hayat Ennoufouss Gastro-Entérologie 256. Pr. MAHMOUDI Abdelkrim* Anesthésie-Réanimation 257. Pr. TACHINANTE Rajae Anesthésie-Réanimation 258. Pr. TAZI MEZALEK Zoubida Médecine Interne Novembre Pr. AIDI Saadia Neurologie 260. Pr. AIT OURHROUIL Mohamed Dermatologie 261. Pr. AJANA Fatima Zohra Gastro-Entérologie 262. Pr. BENAMR Said Chirurgie Générale 263. Pr. BENCHEKROUN Nabiha Ophtalmologie 264. Pr. BOUSSELMANE Nabile* Traumatologie Orthopédie 265. Pr. BOUTALEB Najib* Neurologie 266. Pr. CHERTI Mohammed Cardiologie 267. Pr. ECH-CHERIF EL KETTANI Selma Anesthésie-Réanimation 268. Pr. EL HASSANI Amine Pédiatrie 269. Pr. EL IDGHIRI Hassan Oto-Rhino-Laryngologie 270. Pr. EL KHADER Khalid Urologie 271. Pr. EL MAGHRAOUI Abdellah* Rhumatologie 272. Pr. GHARBI Mohamed El Hassan Endocrinologie et Maladies Métaboliques 273. Pr. HSSAIDA Rachid* Anesthésie-Réanimation

10 274. Pr. MANSOURI Aziz Radiothérapie 275. Pr. OUZZANI CHAHDI Bahia Ophtalmologie 276. Pr. RZIN Abdelkader* Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale 277. Pr. SEFIANI Abdelaziz Génétique 278. Pr. ZEGGWAGH Amine Ali Réanimation Médicale PROFESSEURS AGREGES : Décembre Pr. ABABOU Adil Anesthésie-Réanimation 280. Pr. AOUAD Aicha Cardiologie 281. Pr. BALKHI Hicham* Anesthésie-Réanimation 282. Pr. BELMEKKI Mohammed Ophtalmologie 283. Pr. BENABDELJLIL Maria Neurologie 284. Pr. BENAMAR Loubna Néphrologie 285. Pr. BENAMOR Jouda Pneumo-phtisiologie 286. Pr. BENELBARHDADI Imane Gastro-Entérologie 287. Pr. BENNANI Rajae Cardiologie 288. Pr. BENOUACHANE Thami Pédiatrie 289. Pr. BENYOUSSEF Khalil Dermatologie 290. Pr. BERRADA Rachid Gynécologie Obstétrique 291. Pr. BEZZA Ahmed* Rhumatologie 292. Pr. BOUCHIKHI IDRISSI Med Larbi Anatomie 293. Pr. BOUHOUCH Rachida Cardiologie 294. Pr. BOUMDIN El Hassane* Radiologie 295. Pr. CHAT Latifa Radiologie 296. Pr. CHELLAOUI Mounia Radiologie 297. Pr. DAALI Mustapha* Chirurgie Générale 298. Pr. DRISSI Sidi Mourad* Radiologie 299. Pr. EL HAJOUI Ghziel Samira Gynécologie Obstétrique 300. Pr. EL HIJRI Ahmed Anesthésie-Réanimation 301. Pr. EL MAAQILI Moulay Rachid Neuro-Chirurgie 302. Pr. EL MADHI Tarik Chirurgie-Pédiatrique 303. Pr. EL MOUSSAIF Hamid Ophtalmologie 304. Pr. EL OUNANI Mohamed Chirurgie Générale 305. Pr. EL QUESSAR Abdeljlil Radiologie 306. Pr. ETTAIR Said Pédiatrie 307. Pr. GAZZAZ Miloudi* Neuro-Chirurgie 308. Pr. GOURINDA Hassan Chirurgie-Pédiatnique 309. Pr. HRORA Abdelmalek Chirurgie Générale 310. Pr. KABBAJ Saad Anesthésie-Réanimation 311. Pr. KABIRI EL Hassane* Chirurgie Thoracique 312. Pr. LAMRANI Moulay Omar Traumatologie Orthopédie 313. Pr. LEKEHAL Brahim Chirurgie Vasculaire Périphérique 314. Pr. MAHASSIN Fattouma* Médecine Interne 315. Pr. MEDARHRI Jalil Chirurgie Générale 316. Pr. MIKDAME Mohammed* Hématologie Clinique 317. Pr. MOHSINE Raouf Chirurgie Générale 318. Pr. NABIL Samira Gynécologie Obstétrique 319. Pr. NOUINI Yassine Urologie 320. Pr. OUALIM Zouhir* Néphrologie 321. Pr. SABBAH Farid Chirurgie Générale 322. Pr. SEFIANI Yasser Chirurgie Vasculaire Périphérique

11 323. Pr. TAOUFIQ BENCHEKROUN Soumia Pédiatrie 324. Pr. TAZI MOUKHA Karim Urologie Décembre Pr. AL BOUZIDI Abderrahmane* Anatomie Pathologique 326. Pr. AMEUR Ahmed* Urologie 327. Pr. AMRI Rachida Cardiologie 328. Pr. AOURARH Aziz* Gastro-Entérologie 329. Pr. BAMOU Youssef * Biochimie-Chimie 330. Pr. BELGHITI Laila Gynécologie Obstétrique 331. Pr. BELMEJDOUB Ghizlene* Endocrinologie et Maladies Métaboliques 332. Pr. BENBOUAZZA Karima Rhumatologie 333. Pr. BENZEKRI Laila Dermatologie 334. Pr. BENZZOUBEIR Nadia* Gastro Enterologie 335. Pr. BERADY Samy* Médecine Interne 336. Pr. BERNOUSSI Zakiya Anatomie Pathologique 337. Pr. BICHRA Mohamed Zakarya Psychiatrie 338. Pr. CHOHO Abdelkrim * Chirurgie Générale 339. Pr. CHKIRATE Bouchra Pédiatrie 340. Pr. EL ALAMI EL FELLOUS Sidi Zouhair Chirurgie Pédiatrique 341. Pr. EL ALJ Haj Ahmcd Urologie 342. Pr. EL BARNOUSSI Leila Gynécologie Obstétrique 343. Pr. EL HAOURI Mohamed * Dermatologie 344. Pr. EL MANSARI Omar* Chirurgie Générale 345. Pr. ES-SADEL Abdelhamid Chirurgie Générale 346. Pr. FILALI ADIB Abdelhai Gynécologie Obstétrique 347. Pr. HADDOUR Leila Cardiologie 348. Pr. HAJJI Zakia Ophtalmologie 349. Pr. IKEN Ali Urologie 350. Pr. ISMAEL Farid Traumatologie Orthopédie 351. Pr. JAAFAR Abdeloihab* Traumatologie Orthopédie 352. Pr. KRIOULE Yamina Pédiatrie 353. Pr. LAGHMARI Mina Ophtalmologie 354. Pr. MABROUK Hfid* Traumatologie Orthopédie 355. Pr. MOUSSAOUI RAHALI Driss* Gynécologie Obstétrique 356. Pr. MOUSTAGHFIR Abdelhamid* Cardiologie 357. Pr. MOUSTAINE My Rachid Traumatologie Orthopédie 358. Pr. NAITLHO Abdelhamid* Médecine Interne 359. Pr. OUJILAL Abdelilah Oto-Rhino-Laryngologie 360. Pr. RACHID Khalid * Traumatologie Orthopédie 361. Pr. RAISS Mohamed Chirurgie Générale 362. Pr. RGUIBI IDRISSI Sidi Mustapha* Pneumo-phtisiologie 363. Pr. RHOU Hakima Néphrologie 364. Pr. RKIOUAK Fouad* Endocrinologie et Maladies Métaboliques 365. Pr. SIAH Samir * Anesthésie Réanimation 366. Pr. THIMOU Amal Pédiatrie 367. Pr. ZENTAR Aziz* Chirurgie Générale 368. Pr. ZRARA Ibtisam* Anatomie Pathologique Janvier Pr. ABDELLAH El Hassan Ophtalmologie 370. Pr. AMRANI Mariam Anatomie Pathologique

12 371. Pr. BENBOUZID Mohammed Anas Oto-Rhino-Laryngologie 372. Pr. BENKIRANE Ahmed* Gastro-Entérologie 373. Pr. BENRAMDANE Larbi* Chimie Analytique 374. Pr. BOUGHALEM Mohamed* Anesthésie Réanimation 375. Pr. BOULAADAS Malik Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale 376. Pr. BOURAZZA Ahmed* Neurologie 377. Pr. CHERRADI Nadia Anatomie Pathologique 378. Pr. EL FENNI Jamal* Radiologie 379. Pr. EL HANCHI Zaki Gynécologie Obstétrique 380. Pr. EL KHORASSANI Mohamed Pédiatrie 381. Pr. EL YOUNASSI Badreddine* Cardiologie 382. Pr. HACHI Hafid Chirurgie Générale 383. Pr. JABOUIRIK Fatima Pédiatrie 384. Pr. KARMANE Abdelouahed Ophtalmologie 385. Pr. KHABOUZE Samira Gynécologie Obstétrique 386. Pr. KHARMAZ Mohamed Traumatologie Orthopédie 387. Pr. LEZREK Mohammed* Urologie 388. Pr. MOUGHIL Said Chirurgie Cardio-Vasculaire 389. Pr. NAOUMI Asmae* Ophtalmologie 390. Pr. SAADI Nozha Gynécologie Obstétrique 391. Pr. SASSENOU Ismail* Gastro-Entérologie 392. Pr. TARIB Abdelilah* Pharmacie Clinique 393. Pr. TIJAMI Fouad Chirurgie Générale 394. Pr. ZARZUR Jamila Cardiologie Janvier Pr. ABBASSI Abdelah Chirurgie Réparatrice et Plastique 396. Pr. AL KANDRY Sif Eddine* Chirurgie Générale 397. Pr. ALAOUI Ahmed Essaid Microbiologie 398. Pr. ALLALI fadoua Rhumatologie 399. Pr. AMAR Yamama Néphrologie 400. Pr. AMAZOUZI Abdellah Ophtalmologie 401. Pr. AZIZ Noureddine* Radiologie 402. Pr. BAHIRI Rachid Rhumatologie 403. Pr. BARAKAT Amina Pédiatrie 404. Pr. BENHALIMA Hanane Stomatologie et Chirurgie Maxillo Faciale 405. Pr. BENHARBIT Mohamed Ophtalmologie 406. Pr. BENYASS Aatif Cardiologie 407. Pr. BERNOUSSI Abdelghani Ophtalmologie 408. Pr. BOUKALATA Salwa Radiologie 409. Pr. CHARIF CHEFCHAOUNI Mohamed Ophtalmologie 410. Pr. DOUDOUH Abderrahim* Biophysique 411. Pr. EL HAMZAOUI Sakina Microbiologie 412. Pr. HAJJI Leila Cardiologie 413. Pr. HESSISSEN Leila Pédiatrie 414. Pr. JIDAL Mohamed* Radiologie 415. Pr. KARIM Abdelouahed Ophtalmologie 416. Pr. KENDOUSSI Mohamed* Cardiologie 417. Pr. LAAROUSSI Mohamed Chirurgie Cardio Vasculaire 418. Pr. LYACOUBI Mohammed Parasitologie 419. Pr. NIAMANE Radouane* Rgumatologie 420. Pr. RAGALA Abdelhak Gynécologie Obstétrique

13 421. Pr. REGRAGUI Asmaa Anatomie Pathologique 422. Pr. SBIHI Souad Histo Embryologie Cytogénétique 423. Pr. TNACHERI OUAZZANI Btissam Ophtalmologie 424. Pr. ZERAIDI Najia Gynécologie Obstétrique Avril Pr. ACHEMLAL Lahsen* Rhumatologie 426. Pr. AFIFI Yasser Dermatologie 427. Pr. AKJOUJ Said* Radiologie 428. Pr. BELGNAOUI Fatima Zahra Dermatologie 429. Pr. BELMEKKI Abdelkader* Hematologie 430. Pr. BENCHEIKH Razika O.R.L 431. Pr. BIYI Abdelhamid* Biophysique 432. Pr. BOUHAFS Mohamed El Amine Chirurgie Pédiatrique 433. Pr. BOULAHYA Abdellatif* Chirurgie Cardio-Vasculaire 434. Pr. CHEIKHAOUI Younes Chirurgie Cardio-Vasculaire 435. Pr. CHENGUETI ANSARI Anas Gynécologie Obstétrique 436. Pr. DOGHMI Nawal Cardiologie 437. Pr. ESSAMRI Wafaa Gastro-Entérologie 438. Pr. FELLAT Ibtissam Cardiologie 439. Pr. FAROUDY Mamoun Anesthésie Réanimation 440. Pr. GHADOUANE Mohammed* Urologie 441. Pr. HARMOUCHE Hicham Médecine Interne 442. Pr. HNAFI Sidi Mohamed* Anesthésie Réanimation 443. Pr. IDRISS LAHLOU Amine Microbiologie 444. Pr. JROUNDI Laila Radiologie 445. Pr. KARMOUNI Tariq Urologie 446. Pr. KILI Amina Pédiatrie 447. Pr. KISRA Hassan Psychiatrie 448. Pr. KISRA Mounir Chirurgie Pédiatrique 449. Pr. KHARCHAFI Aziz* Médecine Interne 450. Pr. LMIMOUNI Badreddine* Parasitologie 451. Pr. MANSOURI Hamid* Radiothérapie 452. Pr. NAZIH Naoual O.R.L 453. Pr; OUANASS Abderrazzak Psychiatrie 454. Pr. SAFI Soumaya* Endocrinologie 455. Pr. SEKKAT Fatima Zahra Psychiatrie 456. Pr. SEFIANI Sana Anatomie Pathologique 457. Pr. SOUALHI Mouna Pneumo-Phtisiologie 458. Pr. ZAHRAOUI Rachida Pneumo-Phtisiologie ENSEIGNANTS SCIENTIFIQUES PROFESSEURS 1. Pr. ALAMI OUHABI Naima Biochimie 2. Pr. ALAOUI KATIM Pharmacologie 3. Pr. ALAOUI SLIMANI Lalla Naïma Histologie Embryologie 4. Pr. ANSAR M'hammed Chimie Organique et Pharmacie Chimique 5. Pr. BOUKLOUZE Abdelaziz Applications Pharmaceutiques 6. Pr. BOURJOUANE Mohamed Microbiologie 7. Pr. DRAOUI Mustapha Chimie Analytique

14 8. Pr. EL GUESSABI Lahcen Pharmacognosie 9. Pr. ETTAIB Abdelkader Zootechnie 10. Pr. FAOUZI Moulay El Abbes Pharmacologie 11. Pr. HMAMOUCHI Mohamed Chimie Organique 12. Pr. REDHA Ahlam Biochimie 13. Pr. TELLAL Saida* Biochimie 14. Pr. TOUATI Driss Pharmacognosie 15. Pr. ZELLOU Amina Chimie Organique * Enseignants Militaires

15 Dédicaces

16 A mes chers affectueux parents ABBESS SHYEN et SEMLANI LALA MALIKA Aux deux êtres qui m ont prodiguée tant d amour, d affection et de bonheur, qui ont fait tant de sacrifice pour mon éducation, mes études et mon bien être, qui m ont comblé par leur soutien et leur générosité durant toute mon existence et qui continuent toujours à m entourer de leur ample affection. Vos sacrifices et votre dévouement sans limites furent pour moi un constant encouragement. Aucun mot, aucune phrase ne peut exprimer mes sentiments profonds d amour, de respect et de reconnaissance que je porte pour vous et toutes les encres du monde ne me suffisent pour vous exprimer mon immense gratitude. Seul dieu tout puissant pourra vous récompenser. Mon plus vif espoir est de vous voir à mes cotés le plus longtemps possible. Que ce modeste travail puisse être le résultat de vos efforts et de vos sacrifices et un début de mes récompenses envers vous. Puisse dieu vous protège et vous accorde une bonne santé et une longue vie.

17 A mes chers beaux parents ABEDLKADER EJJAKI et ZAHRA ABDOUN Vos encouragements, vos conseils, votre soutien et votre présence à mes côtés m ont toujours apporté confiance et réconfort. Vous êtes pour moi un modèle de droiture et de loyauté. Je ne saurais exprimer ma reconnaissance et ma gratitude envers vous. Puisse ce travail être le témoignage de ma profonde affection. Que dieu vous protège, vous comble de bonheur, de santé et de longue vie.

18 A Mon Adorable et tendre Mari l architecte HICHAM EJJAKI Aucun mot ne saurait exprimer mes sentiments les plus profonds envers toi. Tes sacrifices, ton soutien, ta gentillesse sans égale, ton profond attachement, ton aide et tes conseils m ont encouragé et m ont permis de réussir mon travail. Que ce travail soit témoigne de ma reconnaissance et de mon amour sincère et fidèle. Que dieu te protège et te comble de bonheur, de santé et de succès.

19 A mes chers frère et sœur AMINE et ASMAE SHYEN L amour que je porte pour vous est sans égal. Votre aide, vos encouragements et vos sacrifices m ont été d un grand soutien. Je vous dédie cette thèse en témoignage de mon adoration, de l affection et des sentiments de fraternité qui nous unissent. Mille merci pour tout! Que dieu vous protège, vous comble de bonheur, de santé, de succès et de prospérité dans votre vie et vous aide dans la réalisation de vos projets. Je vous aime beaucoup. A mes adorables SELMA HAMDAOUI et LAILA EJJAKI Vos encouragements et votre soutien m ont souvent été d une grande aide. Votre sympathie et gentillesse m ont toujours apporté un grand réconfort. Je vous dédie ce travail en vous souhaitant tout le bonheur du monde.

20 A mon cher cousin HAMZA ABOURAFIQ Je te dédie ce travail en te souhaitant une vie pleine de succès, de réussite et de bonheur. A ma très chère grande mère lala GHITA Tu m as toujours comblé avec ta tendresse, ton affection et tes prières. Avec tout l amour et le respect que je te dois, je te dédie ce travail. Puisse le tout puissant te donner santé, bonheur et longue vie afin que je puisse te combler à mon tour.

21 A toute ma famille et celle de mon mari Votre énorme tendresse et votre profonde affection me touche beaucoup. Ainsi, aucune dédicace ne pourrait exprimer ma grande reconnaissance et ma haute considération envers vous. Veuillez trouver ici l expression de ma grande adoration et ma profonde gratitude. Je vous dédie ce travail en vous souhaitant l accomplissement de tous vos désirs. A mes chères amies Que ce travail puisse être l expression de mon affection et de mon respect.

22 Remerciements

23 A mon Maître et Président de thèse Monsieur le Professeur MOHAMMED ABBAR Professeur d urologie Permettez-moi, cher maître, de vous exprimer mes sincères remerciements avec de meilleurs vœux de prospérité et de bonheur. C est un grand honneur que vous nous faite en acceptant de présider le jury de ma thèse avec plaisir et sans conditions et c est une gratitude indéniable. Nous vous remercions pour l aide constante et efficace que nous avons trouvé en vous. Vous qualités humaines et professionnelles seront pour nous un exemple à suivre dans l exercice de notre métier. Votre bienveillance, votre sérieux, votre modestie, votre attitude pertinente et votre compétence ont semé sur mon chemin, en préparant ma thèse, béatitude et confiance. Veuillez trouver ici, l expression de notre profonde gratitude et respect et notre sincère estime.

24 A mon Maître et Rapporteur de thèse Monsieur le Professeur ABDERRAHMANE AL BOUZIDI Professeur d anatomie pathologique Cher maître, qu il me soit permis de vous témoigner toute ma gratitude et mon profond respect d avoir bien voulu assurer la direction de ce travail, qui grâce à votre esprit didactique et rigoureux et vos conseils précieux a pu être mené à bien. Vous étiez toujours accueillant et animé de vivacité, de bonté, d altruisme et de générosité. Vous m avez toujours reçue avec grand plaisir. Grâce à vos conseils, à votre abnégation, à votre honnêteté, à votre conscience professionnelle et votre savoir-faire, j ai préparé ma thèse à bon escient et à l aise. Permettez-moi donc de vous formuler ma gratitude indéniable en vous remerciant infiniment. Je vous prie, Monsieur, de trouver ici, le témoignage de ma reconnaissance éternelle, de mon profond respect et ma haute considération.

25 A mon Maître et Juge de thèse Monsieur le Professeur AHMED AMEUR Professeur d urologie Vous nous faites un grand honneur en acceptant de prendre part au jugement de notre travail, nous vous en sommes infiniment reconnaissants. Nous tenons à vous exprimer notre vive gratitude et notre profonde estime en reconnaissance de la bienveillante attention que vous nous avez accordé tout au long de ce travail. Votre gentillesse, vos qualités humaines, votre modestie et la simplicité de votre contact ont toujours été d un grand apport. Veuillez trouver ici, l expression de notre profonde reconnaissance et de notre admiration pour vos hautes qualités morales, humaines et professionnelles.

26 A mon Maître et Juge de thèse Madame le Professeur SAIDA TELLAL Professeur agrégé de biochimie Cher Maître, nous vous remercions vivement de nous fait l honneur de prendre part au jugement de notre travail. Ce geste encourageant m a facilité la tâche et m a donné plus d ardeur et de confiance. Nous avons été touchés par votre bienveillance, votre gentillesse, votre modestie et la cordialité de votre accueil. Veuillez trouvez ici, l expression de notre grande gratitude, vive reconnaissance et notre haute considération.

27 A madame le docteur HAFSA CHAHDI Service d anatomie pathologique Vous n avez épargné aucun effort pour me soutenir tout au long de ce travail, vous m avez beaucoup aidé à son élaboration par vos précieux conseils et vous avez veillé soigneusement à chaque étape de sa réalisation. L amabilité, la gentillesse, la sympathie et la modestie émanant de votre personne m ont particulièrement touché. Veuillez trouver ici, l expression de notre profonde gratitude et vive reconnaissance.

28 Au docteur KARIM SBAI IDRISSI Laboratoire de Médecine sociale et santé publique, Faculté de Médecine et de Pharmacie de Rabat Nous sommes très reconnaissants de l aide que vous nous avez apportée en réalisant l analyse statistique des résultats de notre travail. Qu il soit permis ici de vous exprimer notre vif et sincère remerciement.

29 A toute l équipe du service d urologie et celle du service d anatomie pathologique de L hôpital militaire d instruction Mohammed V de Rabat Nous vous remercions vivement pour votre générosité, votre accueil et votre simplicité. Nous avons été touchés sincèrement par votre bienveillance et vos qualités humaines. C est pour nous l occasion de vous exprimer notre admiration et notre respectueuse considération.

30 Sommaire

31 I. INTRODUCTION... 1 II. Rappels... 4 A- Classification en stade des tumeurs de la vessie... 5 B- Classification en grade des tumeurs de la vessie... 7 C- Évolution des tumeurs urothéliales de la vessie... 7 D- Gène et protéine her2/neu... 9 III. MATERIEL ET METHODES IV. RESULTATS V. DISCUSSION VI. CONCLUSION VII. RESUMES VIII. BIBLIOGRAPHIE... 58

32 Liste des abréviations

33 pt ptnm IHC FISH CISH G FIG CIS PCR : Pathology tumour : Pathology tumour node metastasis : Immunohistochimie : Hybridation in situ par fluorescence : Chromogénic in situ hybridization : Grade : Figure : Carcinome in situ : Polymerase chaine reaction HER2 : Humain epidermal growth factor receptor 2 AFAQAP : Association francaise pour l assurance qualité en anatomie pathologique FDA : Food and drug administration GEFPICS : Groupe d étude sur les facteurs pronostiques en immunohistochimie dans les cancers du sein OMS HMIM V : Organisation mondiale de santé : l Hôpital Militaire d Instruction Mohamed V

34 Introduction 1

35 Les tumeurs de la vessie représentent le 4ème cancer chez l homme et le 8ème chez la femme [1]. En 2000, l incidence mondiale du cancer de la vessie (regroupant les tumeurs superficielles et infiltrantes) a été estimée à cas, la mortalité par cancer de vessie à cas et la prévalence, tous sexes confondus, à 1 million [1]. En France, les tumeurs de la vessie représentent avec près de nouveaux cas par an, et 3,5 % des décès par cancer (7/ habitants), tout sexe confondu, la deuxième pathologie tumorale urologique, après le cancer de la prostate. Au moment de leur découverte, environ 75% des tumeurs urothéliales sont diagnostiquées à un stade superficiel (respectant le muscle) et donc a priori curable [2]. 20% de ces tumeurs sont diagnostiquées au stade d infiltration du muscle et 5% au stade métastatique [2]. Après résection trans-urétrale éventuellement associée à un traitement adjuvant (immunothérapie ou chimiothérapie endovésicale), l évolution naturelle des lésions superficielles est caractérisée par leur aptitude à la récidive et à la progression. Les tumeurs de bas grade récidivent généralement sur le même mode et progressent peu, alors que les tumeurs de haut grade vont récidiver plus précocement et surtout progresser [1]. Bien que l on dispose de critères anatomocliniques standardisés, les données histologiques se révèlent malheureusement insuffisantes pour évaluer le risque de récidive ou de progression chez un patient donné. De ce fait de nouveaux marqueurs sont nécessaires pour prédire le pronostic. 2

36 Grâce au progrès de la biologie moléculaire et de la génétique, il est actuellement possible d identifier les anomalies moléculaires impliquées dans les phénomènes de la carcinogénèse tumorale vésicale [1]. L amélioration de la compréhension de la biologie moléculaire des tumeurs de la vessie a permis de définir les différentes voies de signalisation, impliquées à la fois dans la cancérogenèse, mais aussi dans la progression tumorale et d isoler, dans ces voies, certaines molécules-clés servant à la fois de marqueurs pronostiques mais aussi de cibles thérapeutiques potentielles. Epidermal growth fibroblast receptor (EGFR) (HER-1) et HER-2/neu sont les récepteurs aux facteurs de croissance les plus étudiés dans les tumeurs de la vessie (TV) [3]. Ils font partie d une famille des protéines transmembranaires à activité tyrosine kinase comprenant quatre membres: EGFR, c-erbb2 ou HER2/neu, ErbB3 et erbb4. Evaluée par méthode immunohistochimique, l expression de la protéine HER2 serait corrélée au stade et à la différenciation tumorale [1]. Notre étude s inscrit dans ce cadre. 3

37 Rappels 4

38 A.CLASSIFICATION EN STADE DES TUMEURS DE LA VESSIE (Fig n 1): Le terme de tumeur superficielle de la vessie est un terme clinique qui regroupe les tumeurs n infiltrant pas le plan musculaire, c est-à-dire les tumeurs ne franchissant pas la basale (pta) et les tumeurs infiltrant le chorion (pt1) superficiel (pt1a) ou profond (pt1b), quelque soit leur grade [1]. Le carcinome in situ (CIS) est inclus dans les tumeurs superficielles de la vessie. Les tumeurs infiltrantes regroupant, celles qui envahissent le muscle (pt2), partie superficielle (pt2a) ou profonde (pt2b), celles qui envahissent la graisse périvésicale (pt3), envahissement microscopique (pt3a), envahissement extravésical macroscopique (pt3b), et enfin tumeurs avec infiltration des structures périvésicales (pt4). 5

39 Fig n 1: Représentation schématique des stades pt, selon la classification ptnm (OMS 2004) 6

40 B. CLASSIFICATION EN GRADE DES TUMEURS DE LA VESSIE : Le grade représente le degré de différenciation de la tumeur. La classification de l OMS 1973 est utilisée comme référence [1]. Elle distingue trois grades : Grade 1 : Epaisseur augmentée de l urothélium associée à une augmentation discrète de la taille des noyaux. Les mitoses sont rares et souvent en situation basale. Grade 2 : Atypies plus franches au sein de l urothélium, mitoses plus diffuses dans les différentes couches mais l urothélium conserve un aspect organisé. Grade 3 : Désorganisation architecturale évidente avec atypies cytologiques marquées et mitoses nombreuses, présentes à tous les niveaux. C. ÉVOLUTION DES TUMEURS DE LA VESSIE (Tableau n I) : L évolution naturelle en l absence de traitement en plus de la résectiondes tumeurs superficielles de la vessie montre, quelque soit leur grade, que 50 à 80 % des cas vont récidiver, et 5 à 30 % vont progresser en infiltrant le muscle et devenir alors potentiellement métastatiques et létales pour le malade [1]. Les papillomes ont le risque le plus faible de récidive [1]. Les tumeurs urothéliales de bas grade (G1, Tumeur de faible potentiel de malignité : LMPT) ont un risque de récidive de près de 35% et un taux de progression de 2,1 % [1], les 7

41 tumeurs de grade intermédiaire G2 récidivent dans 70 % des cas et progressent dans 12 % des cas [1]. En l absence de traitement adjuvant (immuno ou chimiothérapie endovésicale) les carcinomes de haut grade (G3 et CIS) ont une évolution totalement différente avec une récidive dans 23 à 74 % des cas selon les séries et une progression avec une mortalité de près de 65 % [1]. La taille initiale de la tumeur (> 5 cm), la multifocalité et l association à du CIS sont également des facteurs de récidive et de progression [1]. Tableau n I : Évolution des tumeurs de vessie [1]. Grade Récidive Progression Mortalité spécifique G1 15 à 60% 5 à 10% 1 à 15% G2 60 % 15 à 20% 20% G3 60 à 80% 20 à 35% 10% 8

42 D. GENE ET PROTEINE HER2 : Le gène qui code pour la protéine HER2 est un proto-oncogène appelé c- erbb2 ou HER2neu. Il est situé sur le chromosome 17q21. Il code pour la protéine HER2 de 185 KDa. Il existe deux copies du gène par cellule mais son expression est variable d un tissu à l autre. Aucun ligand n a encore été identifié pour HER2. HER2 existe sous forme d hétérodimères avec un autre membre de la famille des récepteurs erbb tyrosine kinase. Cette dimérisation nécessite l action d un ligand spécifique. Ainsi l action de l EGF conduira à la formation d un hétérodimère HER1/HER2. La liaison des neurégulines spécifiques de HER3 et 4 formera des dimères HER3/HER2 ou HER4/ HER2. Ces dimères présentent une grande affinité au ligand dont le monomère autre que HER2 est spécifique. Cette liaison entraîne une émission très forte de signaux dans la cellule. HER2 se comporte comme un amplificateur des signaux de croissance cellulaire des récepteurs erbb. On comprend ainsi mieux son rôle dans la cancérogenèse par un mécanisme d amplification de la croissance cellulaire (fig n 2) [4]. 9

43 Normal Amplification / Surexpression récepteur HER2 protéine ARNm de HER Cytoplasme membrane Cytoplasmique Noyau ADN de HER2 4 1 = nombre de copies du gène 2 = transcription ARNm 3 = expression protéine -récepteur de surface 4 = relarguage du domaine extracellulaire du récepteur Fig n 2 : Indicateurs d une surproduction de HER2 10

44 HER2 /neu est une protéine d actualité, qui est la cible thérapeutique d un anticorps monoclonal humanisé, le Trastuzumab (Herceptin ) utilisé dans le traitement des cancers du sein métastasés. La détection de la surexpression de HER2 fait appel en routine à l immunohistochimie (IHC) et la détection de l amplification de HER2 fait appel à des méthodes de biologie moléculaire dont le chef de fil est l hybridation in situ par fluorescence (FISH) qui permettent l orientation thérapeutique (fig n 3). 11

45 DETECTION DE HER2 SUREXPRESSION PROTEINE HER2 AMPLIFICATION GENE HER2 IMMUNOHISTOCHIMIE (IHC) Taux sériques (ELISA) PCR FISH CISH Fig n 3 : Détection de l HER2 12

46 Nous nous proposons d analyser le statut de la protéine HER2 par technique immunohistochimique en considérant une série prospective de 34 cas de carcinomes urothéliaux superficiels et infiltrants de la vessie, colligés au service d anatomie pathologique et d urologie de l hôpital militaire d instruction Mohamed V de Rabat durant la période janvier 2007-décembre 2007, sur lesquels une étude immuno-histochimique à l aide de l anticorps anti-her2 a été effectuée. Le but de l étude est de comparer la surexpression de l Her2/neu avec le grade et le stade histologique, et d évaluer l incidence de la surexpression de l HER2/neu sur le pronostic des tumeurs de la vessie, ainsi que le rôle de la détection de cette surexpression dans la sélection des patients candidats à une chimiothérapie au Trastuzumab (Herceptin ). 13

47 Materiel et méthodes 14

48 A. MATERIEL : Les cas nous ont été adressés du service d urologie de l hôpital militaire d instruction Mohamed V de Rabat. Ce matériel consiste en 34 cas de tumeur urothéliale de la vessie diagnostiqués entre Janvier 2007 et Décembre 2007, correspondant soit à des résections endoscopiques des tumeurs vésicales, soit à des pièces de cystéctomie. Une étude IHC a été réalisée sur ces 34 cas de tumeur urothéliale de la vessie : la recherche de la surexpression de la protéine HER2 par immunohistochimie avec mise en évidence de la protéine à l'aide d'un anticorps spécifique anti-her2 (Herceptest, Dako, approuvé FDA). B. METHODES : Pour ces 34 cas une fiche d exploitation a été établie, elle comporte les données suivantes: Le sexe L âge au diagnostic ; Le grade: classification OMS Le stade (ptnm OMS 2004) La présence de métastases ganglionnaires ; Le statut HER2/neu. 15

49 1. Technique standard: La fixation : Le prélèvement devrait être immergé dans le fixateur pas plus de 30 min après l intervention chirurgicale (afin d éviter la dégradation des antigènes ou des artéfacts dus au séchage). Fixateur utilisé: le formol tamponné à 10 %. Le rapport (en volume) tissue/fixateur est d au moins 1/10. Temps de fixation 6 à 24 h. L inclusion s est faite en paraffine: blocs de 10/10/4mm après coloration standard (Hematoxyline Eosine), l analyse au microscope optique permet de sélectionner le bloque qui doit subir l immunomarquage. On choisit la zone la plus indifférenciée où il y a le plus de mitoses. 16

50 2. Protocole de la Technique IHC : Herceptest de DAKO 2-a) Materiel : Contenu du kit : Matériaux et reactifs fournis (kit) :(tableau n II) Tableau n II: contenu du Kit Description Agent bloquant des peroxydases endogènes (H2O2 0à 3%) Anticorps anti HER2 Contrôle négatif (Ig G1 de souris) Réactif de visualisation, conjugué peroxydase Tampon de dilution pour DAB+ Chromogène DAB+ liquide Tampon de lavage (TBS Tweené, x10) Solution de démasquage (x10) Conditionnement 2 x 11 ml 1 x 12 ml 1 x 12 ml 2 x 11 ml 15 x 11 ml 3 x 3 ml 2 x 1 ml 1 x 1 ml Lames de contrôle (2 lignées HT-29 et CAMA-1) 3 x 5 17

51 Matériaux utilisés - Hydroxyde d ammonium à 15mol/l dilué à 37 mol/l - Coloration de contraste: Hématoxyline. (Dako code S3309) - Lamelles - Eau distillée ou déionisée (Eau de lavage) - Four de séchage, capable de maintenir une température de 60 C ou moins. - Ethanol, absolu et à 95 - Microscope optique (grossissement 4-40X) - Milieu de montage, Dako Faramount, code S3025 ou Glycergel, code C Tissus Positifs et Négatifs pour utiliser comme contrôle du procédé. - Lames, SuperFrost Plus, ou enduite avec poly-l-lysine, ou Dako Silanized Slides, (code S3003) Conservation - Stocker entre 2 et 8 C. 18

52 Préparation des réactifs - Tampon de lavage A diluer au 1/10 en eau distillée La solution ainsi reconstituée est stable un mois à + 4 C - Solution de démasquage A diluer au 1/10 en eau distillée La solution ainsi reconstituée est stable un mois à + 4 C - Solution de DAB+ Transférer 1 ml de tampon de dilution dans un tube Ajouter 1 goutte de DAB+ concentrée. Agiter. - Lames de contrôle Chaque lame de contrôle contient trois lignées cellulaires 2-b) Procédure de la technique d immunohistochimie du laboratoire: Précautions : Tous les réactifs sont équilibrés à température ambiante (20-25 C) avant l immunomarquage. De même, toutes les incubations sont effectuées à température ambiante. Ne pas laisser sécher les coupes de tissu, car une fois sèches, les coupes de tissu peuvent présenter des colorations non spécifiques importantes. 19

53 Si la procédure de marquage doit être interrompue, les lames peuvent être conservées dans un bain de tampon après l incubation avec l anticorps primaire jusqu à une heure à température ambiante (20-25 C) sans que cela affecte les résultats de la performance du marquage. Procédures : Section des tissus - Epaisseur de la coupe 4-5 mm (l intensité de marquage augmente/diminue si des coupes plus épaisses/plus fines sont utilisées). - Monter sur lames prétraitées et sécher une nuit (12 à 18 h) à c. - 2 lames par patient sont nécessaires : (1x Her2, 1xcontrole négatif). Déparaffinage : Placer les lames sur une plaque à 55 c pendant min (la paraffine fond). Les lames de tissu doivent être déparaffinées afin d éliminer le médium couvrant et elles doivent être réhydratées. Eviter toute élimination incomplète de la paraffine : les résidus de médium couvrant conduisent à des colorations non spécifiques importantes. Cette étape doit être menée à température ambiante (20-25 C) (tableau n III). 1. Placer les lames dans un bain de xylène et laisser incuber pendant 5 (±1) minutes. Changer le bain et répéter l opération une fois. 20

54 2. Eliminer l excès de liquide en tapotant et placer les lames dans de l éthanol absolu pendant 3 (±1) minutes. Changer le bain et répéter l opération une fois. 3. Eliminer l excès de liquide en tapotant et placer les lames dans l éthanol à 95% pendant 3 (±1) minutes. Changer le bain et répéter l opération une fois. 4. Eliminer l excès de liquide en tapotant et placer les lames dans l eau distillée ou dé ionisée pendant 30 secondes minimum. Tableau n III : Déparaffinage et réhydratation Xylène Alcool 100 % Alcool 90 % Alcool 70 % Eau distillée 2 x 5 min 2 x 3 min 2 x 3 min 2 x 3 min 5 min Etapes de pré-traitement : Démasquage antigénique à la chaleur : Commencer la procédure d immunomarquage comme Etape 1, démasquage de l épitope (tableau n IV). - Démasquage à la chaleur obligatoire - Bain marie - Réservoirs Dako ou en métal ou en verre type Pyrex. - Solution de démasquage : solution fournie dans le kit Herceptest. 21

55 - Température : c - Contrôle de la température : grâce à un thermomètre calibré - Temps : 40 min - Refroidissement : 20 min Tableau n IV : Démasquage antigénique - Immerger les lames dans la solution de démasquage préalablement chauffée à 98 C au bain marie - Sortir le bac et le laisser refroidir sur la paillasse - Rinçage en eau distillée 40 min 20 min 5 min Immunomarquage : Réaliser selon les étapes suivantes : 1) Agent bloquant : Péroxydase(5min) 2) Ac primaires : (30min) 3) Ac secondaire : (30min) 4) Chromogéne : (1goutte chromogéne +1cc DAB substrate).(10 min) 5) Rincer la lame en Eau de robiner+eau distulé. Faire une contre coloration légère avec l hématoxyline aqueuse Déshydrater, sécher et monter en utilisant des réactifs propres. 22

56 2. Interprétation du Marquage L interprétation de l immuno marquage est validée par deux pathologistes expérimentés (à l aide d un microscope bi-tête). Chacun des deux pathologistes propose un score. En cas de concordance, le score proposé est retenu. En cas de discordance, une discussion a lieu aboutissant à un consensus sur un score qui sera alors retenu. Ainsi, pour la détermination de l expression de la protéine HER2, seules les caractéristiques et l intensité de la coloration de la membrane sont pris en compte en utilisant l échelle présentée sur le tableau n V. L évaluation des lames est faite sous microscope optique. Pour l évaluation de la coloration et des intensités immunocytochimiques, un grossissement de 10x convient. L utilisation d un objectif avec un grossissement de x est utile pour la confirmation des intensités. La coloration cytoplasmique doit être considérée comme non spécifique et ne peut être incluse dans l évaluation de l intensité de la coloration membranaire(21). Afin d aider à la distinction des colorations 0, 1+, 2+ et 3+ on s est rapporté à "Atlas for Interprétation of HercepTest Staining" de Dako pour des images représentatives des intensités de coloration utilisées pour scorer l herceptest dans le cancer du sein. Les résultats obtenus sont classés comme négatifs (score 0 et 1+), faiblement positifs (score 2+) et fortement positifs (score 3+) (tableau n V). 23

57 Les figures (n 4, 5, 6, 7, 8 et 9) de certains cas de notre série illustrent ces degrés d expression de la protéine HER2 Tableau n V : intensité et motifs de la coloration 24

58 Fig. n 4 : Carcinome urothélial papillaire de grade 2 (HE,Gx25) 25

59 Fig n 5 : Infiltration du muscle vésical par un carcinome urothélial (HE,Gx25) 26

60 Fig n 6 : Score 0 : aucune coloration observée de la membrane (Gx100) 27

61 Fig n 7 : Score 1 : coloration faible à peine perceptible de la membrane (Gx100). 28

62 Fig n 8 : Score 2 : coloration membranaire modérée et complète (Gx400) 29

63 Fig. n 9 : Score 3 : coloration membranaire forte et complète (G x400). 30

64 Pour chaque opération d immunomarquage, les lames doivent être examinées en suivant l ordre présenté dans le tableau VI afin de déterminer la validité de chaque opération et permettre une évaluation semi-quantitative de l intensité de la coloration des échantillons de tissu. Tableau n VI : Ordre d évaluation des lames 31

65 Résultats 32

66 1. DONNEES DEMOGRAPHIQUES : Ces données étaient disponibles pour les 34 patients. A. Age : L'âge médian au moment du diagnostic est de 60 ans (intervalle de 31 à 82 ans). B. Sexe : Trente deux des patients étaient de sexe masculin (94%) et deux de sexe féminin (6%). 2. DONNEES ANATOMOPATHOLOGIQUES D un point de vue technique l expression de la protéine HER2/neu est très hétérogène sur les lames rendant son interprétation difficile. A. Le grade :(tableau n VII) Sur les 34 cas : 6 sont de grade G1, 16 cas sont de grade G2 et 12 sont de grade G3. Tableau n VII : Grading des 34 cas de tumeurs urothéliales de la vessie G1 G2 G3 Nombre de cas Pourcentage : % 17 % 47 % 35 % 33

67 B. Le stade (tableau n VIII) : Sur les 34 cas de carcinome de type urothélial, 23 sont des tumeurs superficielles (67%). Tableau n VIII : Stadification des 34 cas de tumeurs urothéliales de la vessie pta pt1 pt2 pt3 pt4 Nombre de cas Pourcentage 41% 26% 20% 5,8% 5,8% C. Métastases ganglionnaires : Sur les 34 cas, 3 patients ont eu des métastases ganglionnaires (8,8%). D. Expression de l HER2 (tableau n IX) : Tableau n IX : Expression de la protéine HER2 Score o Score 1 Score 2 Score 3 Nombre de cas Pourcentage % 41% 14,7% 14,7% 29% 34

68 3. CORRELATIONS : La corrélation entre le statut HER/neu et les autres facteurs pronostiques classiques a été effectué ont utilisant le test statistique de la loi de x2de Pearson dont les résultats sont interprétés de la façon suivante : -5%>P-value 1% test significatif rejet 5%; acceptable à 1% -1%>P-value 1%test très significatif -1%>P-value test hautement significatif A. Corrélation HER2/stade ptnm Stade pta : 14 cas (tableau n X) Tableau n X: Corrélation de l expression de l HER2 avec le stade pta Score 0 Score 1 Score 2 Score 3 Nombre de cas Pourcentage% 42,8% 7% 21,4% 28,5% Stade pt1 : 9 cas (tableau n XI) Tableau n XI: Corrélation de l expression de l HER2 avec le stade pt1 Score 0 Score 1 Score 2 Score 3 Nombre de cas Pourcentage% 44,4% 22,2% 22,2% 11,1% 35