SYSTEM fr Total -hcg 7K78 49-3678/R3 B7K782 Total -hcg Faire attention aux modifications R vision de juin 2010 ( -hcg totale) Service Clients : Retrouvez le contact de votre Service Clients Abbott sur www.abbottdiagnostics.com Suivre scrupuleusement les instructions de cette notice. La fiabilit des r sultats du dosage ne peut pas tre garantie si ces instructions ne sont pas strictement respect es. L gende des symboles utilis s R f rence Dispositif m dical de diagnostic in vitro Cupules r actionnelles Godets- chantillons Num ro de lot Septum Date d'expiration Conserver entre 2 et 8 C Consulter les instructions d'utilisation Bouchons de remplacement Lot de r actifs Num ro de s rie Fabricant L explication compl te des symboles utilis s pour la d nomination des composants se trouve la partie REACTIFS. 1
DENOMINATION ARCHITECT -hcg totale DOMAINE D'APPLICATION ARCHITECT -hcg totale est un dosage immunologique microparticulaire par chimiluminescence (CMIA) pour la d termination quantitative et qualitative de la gonadotrophine chorionique humaine (mol cule enti re et sous-unit s b ta libres)( -hcg) dans le s rum et le plasma humains pour le diagnostic pr coce d'une grossesse. RESUME ET EXPLICATION DU TEST La gonadotrophine chorionique humaine (hcg) est une sialoglycoprot ine d'un poids mol culaire d'environ 46 000 daltons. 1 L'hCG est initialement s cr t e par les cellules trophoblastiques du placenta, peu de temps apr s l'implantation de l'ovule f cond dans la paroi ut rine. 2,3 L'augmentation rapide des taux s riques d'hcg apr s la conception constitue un excellent marqueur permettant un diagnostic pr coce et le suivi de la grossesse. Physiologiquement, l'hcg joue un r le dans le maintien du corps jaune, permettant de ce fait la synth se de la progest rone et des estrog nes n cessaires l'endom tre. Dans le cas de grossesses sans complications, le placenta assume la production de ces hormones. Le taux s rique d'hcg augmente jusqu' un pic, puis diminue et se stabilise. L'hCG circule sous forme de mol cule intacte dans le s rum des femmes saines qui pr sentent une grossesse sans complications. Les sousunit s sont rapidement cliv es puis limin es par les reins. 4 L'hormone placentaire hcg est proche de l'hormone lut inisante (LH), de l'hormone folliculostimulante (FSH) et de l'hormone thyr ostimulante (TSH). Chacune de ces glycoprot ines est constitu e de deux sousunit s diff rentes (alpha et b ta) li es de fa on non covalente et comportant des cha nes lat rales d'hydrates de carbone. Les sousunit s alpha de ces glycoprot ines sont tr s voisines. A l'inverse, les sous-unit s b ta leur conf rent leurs sp cificit s biologique et immunochimique. 5,6 La composition des sous-unit s b ta de l'hcg et de la LH en acides amin s pr sente une tr s importante homologie et la diff renciation immunochimique se fait par les r sidus d'acides amin s sp cifiques de la sous-unit b ta de l'hcg. 7 La disponibilit de m thodes de dosage de l hcg s rique quantitatives sensibles a montr que des mesures d'hcg taient utiles pour pr voir les avortements spontan s 8,9 et pour aider au diagnostic des grossesses extra-ut rines 8,10,11 ainsi que des grossesses multiples. 8 PRINCIPES BIOLOGIQUES DE LA METHODE ARCHITECT -hcg totale est un dosage immunologique en deux tapes, utilisant la technologie de dosage immunologique microparticulaire par chimiluminescence (CMIA) avec des protocoles de dosage flexibles, appel e Chemiflex, pour la d termination de la concentration en hcg (mol cule enti re et sous-unit s b ta libres) dans le s rum et le plasma humains. Dans un premier temps, l' chantillon et les microparticules paramagn tiques recouvertes d'anticorps anti- -hcg sont mis en pr sence. L'hCG pr sente dans l' chantillon se lie aux microparticules recouvertes d'anticorps anti- -hcg. Apr s lavage, le conjugu d'anticorps anti- -hcg marqu l'acridinium est ajout dans un deuxi me temps. Les solutions de pr activation et d'activation sont ensuite ajout es au m lange r actionnel. La r action chimiluminescente qui en r sulte est mesur e en unit s relatives de lumi re (URL). Il existe une relation directe entre la quantit d'hcg pr sente dans l' chantillon et les URL d tect es par le syst me optique ARCHITECT i. Pour de plus amples informations concernant l'analyseur et la technologie du dosage, se r f rer au Chapitre 3 du Manuel Technique REACTIFS Kit de r actifs, 100 tests / 500 tests REMARQUE : Les conditionnements varient en fonction de la commande. REMARQUE : Certains conditionnements ne sont pas disponibles dans tous les pays ou utilisables sur tous les ARCHITECT i Systems. Contactez votre distributeur local. Kit de r actifs ARCHITECT -hcg totale (7K78) 1 ou 4 flacon(s) (6,6 ml / 27,0 ml) de microparticules recouvertes d'anticorps anti- -hcg (souris, monoclonal) dans du tampon TRIS contenant des stabilisants de prot ines (bovines). Conservateurs : agents antimicrobiens. 1 ou 4 flacon(s) (2,1 ml / 7,4 ml) de conjugu d'anticorps anti- -hcg (souris, monoclonal) marqu l'acridinium dans du tampon MES contenant des stabilisants de prot ines (bovines). Concentration minimale : 2,9 μg/ml. Conservateur : agent antimicrobien. Diluant de dosage Diluant manuel multi-dosages ARCHITECT i (7D82-50) 1 flacon (100 ml) de diluant manuel multi-dosages ARCHITECT i contenant une solution saline tamponn e au phosphate. Conservateur : agent antimicrobien. Autres r actifs Solution de pr activation ARCHITECT i Solution de pr activation contenant 1,32 % (m/v) d'eau oxyg n e. Solution d'activation ARCHITECT i Solution d'activation contenant 0,35 N d'hydroxyde de sodium. Tampon de lavage ARCHITECT i REMARQUE : La taille du flacon et le volume varient en fonction de la commande. Tampon de lavage contenant une solution saline tamponn e au phosphate. Conservateurs : agents antimicrobiens. PRECAUTIONS ET RESTRICTIONS D'EMPLOI Pour diagnostic in vitro Suivre scrupuleusement les instructions de cette notice. La fiabilit des r sultats du dosage ne peut pas tre garantie si ces instructions ne sont pas strictement respect es. Mesures de s curit ATTENTION : Ce produit n cessite la manipulation d chantillons humains. Il est recommand de consid rer tous les produits d origine humaine comme s ils taient potentiellement infectieux et de les manipuler selon les r gles OSHA Standard on Bloodborne Pathogens. 12 Les produits contenant ou susceptibles de contenir des agents infectieux doivent tre manipul s selon les r gles de bios curit de niveau 2 13 ou autres r gles de bios curit en vigueur 14,15. Pour de plus amples informations sur les mesures de s curit appliquer lors du fonctionnement de l analyseur, se r f rer au Chapitre 8 du Manuel Technique Pr cautions d'emploi Ne pas utiliser les kits de r actifs au-del de leur date d'expiration. Ne pas m langer des r actifs provenant de kits diff rents. Avant de charger le kit de r actifs ARCHITECT -hcg totale dans l'analyseur pour la premi re fois, le flacon de microparticules doit tre homog n is afin de remettre en suspension les microparticules qui se sont d pos es pendant le transport. Pour de plus amples informations sur l'homog n isation des microparticules, se r f rer au paragraphe Proc dure du dosage de la partie PROCEDURE de cette notice. 2
Des septums DOIVENT tre utilis s afin d'emp cher l' vaporation et la contamination des r actifs et d'assurer leur int grit. La fiabilit des r sultats du dosage ne peut pas tre garantie si les septums ne sont pas utilis s conform ment aux instructions de cette notice. Afin d' viter toute contamination, porter des gants propres lors de l'application d'un septum sur un flacon de r actif d bouch. Une fois qu'un septum a t plac sur un flacon de r actif ouvert, ne pas retourner le flacon afin d' viter toute fuite de r actif et de ne pas fausser les r sultats du dosage. Apr s un certain temps, il se peut que des liquides r siduels s chent la surface du septum. Il s'agit de sels secs qui n'ont aucune incidence sur la performance du dosage. Pour de plus amples informations sur les pr cautions d'emploi lors du fonctionnement de l'analyseur, se r f rer au Chapitre 7 du Manuel Technique Conditions de conservation Le kit de r actifs ARCHITECT -hcg totale doit tre conserv entre 2 et 8 C et peut tre utilis imm diatement apr s sa sortie du r frig rateur (2 8 C). Les r actifs sont stables jusqu' leur date d'expiration s'ils sont conserv s et manipul s selon les indications du fabricant. Le kit de r actifs ARCHITECT -hcg totale peut tre conserv bord de l'architect i pendant 30 jours au maximum. Au-del de ce d lai, le kit de r actifs doit tre jet. Pour de plus amples informations sur le suivi du temps de conservation bord, se r f rer au Chapitre 5 du Manuel Technique Les r actifs peuvent tre conserv s l'int rieur ou l'ext rieur de l'architect i. Si les r actifs sont retir s de l'analyseur, les conserver entre 2 et 8 C (munis de septums et de bouchons de remplacement) en position verticale. Pour les r actifs conserv s l'ext rieur de l'analyseur, il est recommand de les laisser dans leurs portoirs et emballage d'origine afin de les maintenir dans une position verticale. Si le flacon de microparticules (muni d'un septum) ne reste pas dans une position verticale pendant sa conservation au r frig rateur l'ext rieur de l'analyseur, le kit de r actifs doit tre jet. Apr s avoir retir des r actifs de l'analyseur, il faut initialiser une lecture du carrousel r actifs afin d'actualiser le temps de stabilit des r actifs dans l'analyseur. Indications d alt ration des r actifs Un contr le dont la valeur se situe en dehors des limites sp cifi es peut indiquer une alt ration des r actifs ou des erreurs de technique. Les r sultats des chantillons analys s dans la m me s rie peuvent ne pas tre valides et n cessiter une r analyse. Une recalibration du dosage peut tre n cessaire. Pour de plus amples informations sur le d pannage, se r f rer au Chapitre 10 du Manuel Technique FONCTIONNEMENT DE L'APPAREIL Le protocole de dosage de routine ARCHITECT -hcg totale (dosage n 651) doit tre install sur l'architect i 2000 partir du CD-ROM de dosages ARCHITECT i avant l'analyse. Il en est de m me pour les protocoles de dosage de routine et/ou URGENT ARCHITECT -hcg totale (respectivement dosage 651 et 030) sur l'architect i avec fonction de traitement d' chantillons URGENTS. Pour de plus amples informations sur l'installation du fichier de dosage, se r f rer au Chapitre 2 du Manuel Technique Le protocole de dosage de routine ARCHITECT -hcg totale (en deux tapes 18-4) est disponible sur les analyseurs ARCHITECT i. Le protocole de dosage URGENT ARCHITECT -hcg totale (en deux tapes 4-4) est disponible sur l'architect i avec fonction de traitement d' chantillons URGENTS. Pour de plus amples informations sur l'impression des param tres de dosage, se r f rer au Chapitre 5 du Manuel Technique Pour de plus amples informations sur le fonctionnement de l'analyseur, se r f rer au Manuel Technique L'unit de r sultat par d faut du dosage ARCHITECT -hcg totale est la mui/ml*. Pour l'enregistrement des r sultats, il est possible de s lectionner l'unit alternative, la UI/l, en r glant le param tre de dosage "Unit s de concentration r sultat" sur UI/l. Le facteur de conversion utilis par le syst me est de 1. * UI = Unit s Internationales (IU = International Units) PRELEVEMENT ET PREPARATION DES ECHANTILLONS POUR L'ANALYSE Le dosage ARCHITECT -hcg totale peut tre effectu sur du s rum humain (y compris le s rum pr lev sur des tubes s parateurs de s rum) ou du plasma pr lev sur h parinate de lithium, h parinate de sodium ou EDTA potassique. Aucun autre anticoagulant n'a t valid pour une utilisation avec le dosage ARCHITECT -hcg totale. Suivre les instructions du fabricant pour le traitement des tubes de pr l vement de s rum ou de plasma. L'ARCHITECT i n'est pas configur pour d tecter le type d' chantillon utilis. Il revient par cons quent l'utilisateur de v rifier les types d' chantillons utilis s dans le dosage ARCHITECT -hcg totale. Une centrifugation inad quate ou la pr sence de fibrine ou de particules en suspension dans l' chantillon peut entra ner des r sultats erron s. Abbott recommande d'utiliser du plasma pour analyser des chantillons URGENTS. Le plasma ne n cessitant pas le temps de coagulation requis pour le s rum, la probabilit de pr sence de fibrine ou d'autres particules dans l' chantillon est r duite. Manipuler les chantillons de patients avec pr caution afin d' viter toute contamination crois e. Il est recommand d'utiliser des pipettes ou des embouts usage unique. Pour obtenir des r sultats optimaux, v rifier l'absence de bulles dans tous les chantillons. Si des bulles sont pr sentes, les liminer l'aide d'un b tonnet avant l'analyse. Utiliser un b tonnet neuf pour chaque chantillon afin d' viter toute contamination crois e. Pour obtenir des r sultats optimaux, les chantillons de s rum et de plasma ne doivent pas contenir de fibrine, ni de globules rouges ou autres particules en suspension. S'assurer que le caillot s'est compl tement form dans les chantillons de s rum avant de les centrifuger. Certains chantillons, en particulier ceux provenant de patients sous traitement anticoagulant ou thrombolytique, peuvent pr senter des temps de coagulation lev s. Si l' chantillon est centrifug avant la formation compl te du caillot, la pr sence de fibrine peut entra ner des r sultats erron s. Si le dosage est effectu plus de 24 heures apr s le pr l vement, s parer le s rum ou le plasma du caillot, du s parateur de s rum ou des globules rouges. Les chantillons peuvent tre conserv s au maximum pendant 7 jours entre 2 et 8 C avant d' tre analys s. Si le dosage est effectu plus de 7 jours apr s le pr l vement, les chantillons devront tre congel s une temp rature inf rieure ou gale -10 C. Les chantillons conserv s congel s une temp rature inf rieure ou gale -10 C pendant 12 mois n'ont pas pr sent de diff rence de performance. Eviter les cong lations et d cong lations r p t es. Les chantillons doivent tre homog n is s AVEC SOIN apr s d cong lation, en les passant au Vortex une vitesse FAIBLE ou en les retournant d licatement, puis centrifug s avant emploi, de fa on liminer les globules rouges ou les particules en suspension et obtenir des r sultats coh rents. Lorsque des chantillons sont exp di s, ils doivent tre conditionn s et tiquet s conform ment la l gislation r gissant le transport des chantillons cliniques et des substances infectieuses. Les chantillons peuvent tre exp di s r frig r s dans des conditions thermiques contr l es ou bien congel s (carboglace). Avant l'exp dition, il est recommand de s parer les chantillons du caillot, du s parateur de s rum ou des globules rouges. 3
PROCEDURE Mat riel fourni 7K78 Kit de r actifs ARCHITECT -hcg totale Mat riel n cessaire mais non fourni Analyseur ARCHITECT i CD-ROM de dosages ARCHITECT i 7K78-01 Calibrateurs ARCHITECT -hcg totale 7K78-10 Contr les ARCHITECT -hcg totale 7D82-50 Diluant manuel multi-dosages ARCHITECT i Pour de plus amples informations sur le mat riel requis pour les proc dures de maintenance, se r f rer au Chapitre 9 du Manuel Technique Pipettes ou embouts de pipette (facultatif) pour la distribution des volumes sp cifi s dans l' cran Demande de patient ou Demande de contr le. Proc dure du dosage Avant de charger le kit de r actifs ARCHITECT -hcg totale sur l'analyseur pour la premi re fois, le flacon de microparticules doit tre homog n is afin de remettre en suspension les microparticules qui se sont d pos es pendant le transport : Retourner le flacon de microparticules 30 fois. Examiner le flacon pour s'assurer que les microparticules sont remises en suspension. Si des microparticules restent encore coll es au flacon, continuer retourner ce dernier jusqu' ce qu'elles soient compl tement remises en suspension. Une fois les microparticules remises en suspension, retirer et jeter le bouchon. Retirer un septum de la pochette en portant des gants propres. Placer soigneusement le septum dans l'ouverture du flacon. Si les microparticules ne sont pas remises en suspension, NE PAS LES UTILISER. Contacter le Service Clients Abbott. Programmer les analyses. Charger le kit de r actifs ARCHITECT -hcg totale sur l'architect i. V rifier que tous les r actifs requis sont pr sents. S'assurer que chaque flacon r actif est recouvert d'un septum. Le volume minimum requis dans le godet- chantillon est calcul par le syst me et imprim sur le rapport Liste des demandes. Ne pas pr lever plus de 10 r pliques partir du m me godet- chantillon. Afin de minimiser les pertes par vaporation, v rifier que le volume d' chantillon ad quat est pr sent dans le godet- chantillon avant d'effectuer le dosage. Echantillon prioritaire : 75 μl pour le premier dosage -hcg totale plus 25 μl pour chaque dosage -hcg totale suppl mentaire effectu sur le m me godet- chantillon Echantillon de routine maintenu jusqu' 3 heures dans l'analyseur : 150 μl pour le premier dosage -hcg totale plus 25 μl pour chaque dosage -hcg totale suppl mentaire effectu sur le m me godet- chantillon Echantillon de routine maintenu plus de 3 heures dans l'analyseur : un volume suppl mentaire est requis. Pour de plus amples informations sur l' vaporation et les volumes des chantillons, se r f rer au Chapitre 5 du Manuel Technique En cas d'utilisation de tubes primaires ou aliquots, utiliser la jauge chantillon afin de s'assurer que le volume d' chantillon de patient est suffisant. Pour obtenir les volumes requis des calibrateurs et des contr les ARCHITECT -hcg totale, tenir les flacons la verticale et distribuer 4 gouttes de chacun des calibrateurs ou 3 gouttes de chacun des contr les dans les godets- chantillons respectifs. Charger les chantillons Pour de plus amples informations sur le chargement des chantillons, se r f rer au Chapitre 5 du Manuel Technique Appuyer sur la touche LANCER. L'ARCHITECT i effectue les op rations suivantes : D place l' chantillon jusqu'au point d'aspiration Charge une cupule r actionnelle (CR) dans la couronne r actionnelle Aspire et distribue l' chantillon dans la CR D place la CR d'une position et distribue les microparticules dans la CR Homog n ise, incube et lave le m lange r actionnel Ajoute le conjugu dans la CR Homog n ise, incube et lave le m lange r actionnel Ajoute les solutions de pr activation et d'activation Mesure l' mission chimiluminescente pour d tecter la pr sence et la quantit d'hcg dans l' chantillon. Evacue le contenu de la CR dans la poubelle pour d chets liquides et d charge la CR dans la poubelle pour d chets solides Calcule le r sultat Pour de plus amples informations sur les demandes d'analyse des chantillons de patients, des calibrateurs et des contr les, ainsi que sur les proc dures g n rales de fonctionnement, se r f rer au Chapitre 5 du Manuel Technique Pour obtenir une performance optimale, il est important de suivre les proc dures de maintenance de routine d crites au Chapitre 9 du Manuel Technique Si votre laboratoire requiert une maintenance plus fr quente, se conformer ces exigences. Proc dures de dilution des chantillons Les chantillons dont la concentration en hcg totale est sup rieure 15 000,00 mui/ml sont annot s >15,000.00" et peuvent tre dilu s l'aide du protocole de dilution automatique ou de la proc dure de dilution manuelle. Si l'on utilise le protocole de dilution automatique, le syst me effectue une dilution de l' chantillon au 1/15 me, puis calcule automatiquement la concentration de l' chantillon dilu et enregistre le r sultat. Les dilutions manuelles doivent tre effectu es de la mani re suivante : La dilution recommand e pour le dosage -hcg totale est de 1/15 me. Des dilutions sup rieures 1/75 me ne sont pas recommand es. Pour une dilution au 1/15 me, ajouter 20 μl d' chantillon de patient 280 μl de diluant manuel multi-dosages ARCHITECT i (7D82-50). Saisir le facteur de dilution dans l' cran Demande de patient ou Demande de contr le. Le syst me utilisera ce facteur de dilution afin de calculer automatiquement la concentration de l' chantillon avant la dilution. Cette concentration constituera le r sultat enregistr. Le r sultat (avant l'application du facteur de dilution) doit tre sup rieur 467,00 mui/ml. Si le facteur de dilution n'est pas saisi, le r sultat rendu sera celui de l' chantillon dilu. Ce r sultat (avant l'application du facteur de dilution) doit tre sup rieur 467,00 mui/ml. REMARQUE : Un r sultat inf rieur 7 000,00 mui/ml (protocole de dilution automatique au 1/15 me) imprim ou affich l' cran indique que l' chantillon doit tre r analys avec une dilution inf rieure ou sans dilution. Le r sultat et l'interpr tation ne devront pas tre enregistr s. Pour de plus amples informations sur les demandes de dilution, se r f rer au Chapitre 5 du Manuel Technique 4
Calibration Pour effectuer une calibration du dosage ARCHITECT -hcg totale, analyser les calibrateurs A, B, C, D, E et F en double. Un chantillon de chacun des niveaux de contr les -hcg totale doit tre analys afin de pouvoir valuer la calibration du dosage. S'assurer que les valeurs des contr les du dosage se situent dans les limites de concentration sp cifi es dans la notice des contr les. Les calibrateurs doivent tre charg s en position prioritaire. Limites des calibrateurs : 0,00 15 000,00 mui/ml. Les protocoles de dosage de ROUTINE et URGENTS doivent tre calibr s s par ment mais ne requi rent l'utilisation que d'un seul kit de r actifs. Lorsque la calibration du dosage ARCHITECT -hcg totale a t accept e et m moris e, tous les chantillons suivants peuvent tre analys s sans effectuer de nouvelle calibration, sauf si : un kit de r actifs portant un nouveau num ro de lot est utilis les valeurs des contr les se situent en dehors des limites sp cifi es Pour de plus amples informations sur la proc dure de calibration d'un dosage, se r f rer au Chapitre 6 du Manuel Technique PROCEDURES DU CONTROLE DE QUALITE Le contr le de qualit minimum recommand pour le dosage ARCHITECT -hcg totale consiste analyser un chantillon de chaque niveau de contr les une fois toutes les 24 heures, chaque jour d'utilisation. Si les proc dures du contr le de qualit de votre laboratoire exigent une utilisation plus fr quente des contr les pour v rifier les r sultats d'analyse, se conformer ces exigences. S'assurer que les valeurs des contr les du dosage se situent dans les limites de concentration sp cifi es dans la notice des contr les. Comme la composition de l'analyte et/ou des matrices peut varier, il se peut que les contr les de qualit externes et les chantillons utilis s pour les tudes de performance ne donnent pas des r sultats identiques pour tous les dosages d'hcg. Les contr les de qualit non-abbott et les panels de performance peuvent contenir des concentrations lev es de sous-unit s b ta libres de l'hcg. Les contr les de qualit non-abbott et les panels de performance peuvent g n rer des r sultats diff rents lorsque l'on compare un dosage de la mol cule d'hcg enti re un dosage mesurant l'hcg enti re et les fractions libres. Chaque laboratoire doit d terminer pour chaque contr le s'il est appropri pour des dosages immunologiques sp cifiques et le valider avant de l'utiliser. V rification des performances du dosage Pour de plus amples informations sur les protocoles de v rification des performances du dosage mentionn es dans la notice, se r f rer l'annexe B du Manuel Technique Le dosage ARCHITECT -hcg totale appartient au groupe 1. RESULTATS Le dosage ARCHITECT -hcg totale utilise une m thode de traitement des donn es par l'ajustement de la courbe logistique 4 param tres (4PLC, pond ration en Y) pour cr er une courbe de calibration. Autres unit s de r sultat L'unit de r sultat par d faut du dosage ARCHITECT -hcg totale est la mui/ml. En cas de s lection de l'unit alternative UI/l, le facteur de conversion utilis par le syst me est de 1. Formule de conversion : (Concentration en mui/ml) x (1) = UI/l Annotations La rubrique "Annotations" peut contenir des informations sur certains r sultats. Une description des annotations qui peuvent appara tre dans cette rubrique est fournie au Chapitre 5 du Manuel Technique Interpr tation des r sultats Pour ce qui est de l'interpr tation qualitative des r sultats du dosage ARCHITECT -hcg totale, les chantillons ayant des concentrations en hcg inf rieures ou gales 5,00 mui/ml seront signal s comme "NEGATIF" dans la rubrique "Interpr tation" sur l' cran des r sultats d'analyses ou sur la bande des r sultats. Les chantillons dont la concentration en hcg est sup rieure ou gale 25,00 mui/ml seront signal s comme "POSITIF". Pour les chantillons dont la concentration en hcg est sup rieure 5,00 mui/ml et inf rieure 25,00 mui/ml, seule la concentration sera enregistr e. Aucune interpr tation ne sera indiqu e pour ces r sultats. LIMITES DE LA METHODE Ce dosage est capable de d tecter la mol cule enti re (intacte) d'hcg ainsi que les sous-unit s -hcg libres. En vue d' tablir un diagnostic, les r sultats du dosage de l'hcg doivent toujours tre utilis s en association avec d'autres donn es, telles que les ant c dents m dicaux du patient, les sympt mes, les r sultats d'autres examens, les donn es cliniques, etc. Les mesures d'hcg seules ne permettent pas de distinguer une grossesse extraut rine d'une grossesse normale. 10,11 Les r sultats de ce dosage ou de tout autre kit de diagnostic devront tre utilis s et interpr t s uniquement dans le contexte du tableau clinique g n ral. Lorsque les taux d'hcg ne correspondent pas aux donn es cliniques, les r sultats doivent tre confirm s par une autre m thode de dosage de l'hcg, celle-ci pouvant tre la recherche qualitative dans l'urine. 29 L'absence d'hcg urinaire peut indiquer un r sultat s rique faussement lev. Les r sultats peuvent aussi tre confirm s par une s rie de dilutions de l' chantillon. En r gle g n rale (mais pas toujours), les chantillons contenant des substances interf rentes fournissent des r sultats non lin aires une fois dilu s. Le dosage ARCHITECT -hcg totale a t valid uniquement pour le diagnostic pr coce d'une grossesse. Il n'a pas t valid pour les autres usages tels que le d pistage de marqueurs tumoraux, le suivi de marqueurs tumoraux, etc... et ne doit pas tre utilis d'autres fins. Occasionnellement, les taux d'hcg peuvent tre constamment lev s en raison, entre autres, des facteurs suivants : 20,21,28,29,31,32 - anticorps h t rophiles - liaisons prot iques non sp cifiques - substances similaires l hcg - n oplasmes trophoblastiques ou non trophoblastiques Comme dans toute r action immunochimique, des interf rences inconnues provenant de m dicaments ou de substances endog nes peuvent avoir une incidence sur les r sultats. Des taux lev s d'hcg ont t associ s des tats pathologiques (par exemple des n oplasmes trophoblastiques et non trophoblastiques) 16,17 et les r sultats de ce dosage ne doivent pas tre utilis s dans le diagnostic de ces tats pathologiques. Des cas de patientes ayant subi inutilement un traitement m dical ou chirurgical (par exemple une chimioth rapie ou une hyst rectomie) en raison de l'utilisation de dosages d'hcg pour le diagnostic d' tats pathologiques ont t d crits. Des substances interf rentes (telles que les anticorps h t rophiles, les prot ines non sp cifiques ou les substances similaires l hcg) peuvent provoquer des r sultats faussement abaiss s ou lev s. Ces substances interf rentes peuvent tre la cause de r sultats erron s dans tout le domaine de mesure du dosage, et pas seulement des concentrations faibles, et peuvent faire croire la pr sence d'hcg alors qu'il n'y en a pas. La d tection de tr s faibles concentrations d'hcg n'exclut pas la possibilit d'une grossesse. 21 De faibles quantit s d'hcg peuvent appara tre chez des femmes non enceintes et apparemment en bonne sant. 26,27 Les valeurs d'hcg doublant toutes les 48 heures environ au cours d'une grossesse normale, 21 les patientes pr sentant des taux d'hcg tr s faibles doivent subir un nouveau pr l vement au bout de 48 heures pour une r analyse. 5
Les chantillons de femmes postm nopaus es peuvent fournir des r sultats faiblement positifs en raison de faibles concentrations en hcg sans relation avec la grossesse. Si l'on obtient un r sultat faiblement positif, les bonnes pratiques de laboratoire recommandent de repr lever la patiente apr s 48 heures et de r analyser l' chantillon ou bien d'effectuer l'analyse par une autre m thode de dosage de l'hcg. Comme ce dosage pr sente un degr de sensibilit lev, les chantillons trouv s positifs les premiers jours apr s la conception peuvent tre ult rieurement trouv s n gatifs en raison de l'arr t naturel de la grossesse. La grossesse s'interrompt naturellement dans 22 % des grossesses non reconnues cliniquement et dans 31 % de toutes les grossesses. 30 Les bonnes pratiques de laboratoire recommandent de repr lever la patiente apr s 48 heures suppl mentaires et de r analyser l' chantillon si les r sultats taient faiblement positifs. Les chantillons provenant de patients auxquels ont t administr es des pr parations d'anticorps monoclonaux de souris des fins diagnostiques ou th rapeutiques peuvent contenir des anticorps humains anti-souris (HAMA). De tels chantillons peuvent donner des r sultats faussement lev s ou abaiss s lorsqu'ils sont analys s avec des kits de dosage utilisant des anticorps monoclonaux de souris. 18,19 Ces chantillons ne doivent pas tre analys s par le dosage ABBOTT ARCHITECT -hcg totale. Les anticorps h t rophiles pr sents dans le s rum humain peuvent r agir avec les immunoglobulines des r actifs, interf rant ainsi avec les dosages immunologiques in vitro. 20,21,32 Les patients r guli rement en contact avec des animaux ou des produits contenant du s rum d'origine animale peuvent tre sujets cette interf rence et fournir de ce fait des valeurs anormales. Pour tablir un diagnostic, de plus amples informations peuvent tre n cessaires. RESULTATS ATTENDUS L'hormone hcg tant normalement synth tis e et s cr t e par les cellules du placenta et de son pr curseur, les taux de cette hormone chez les femmes saines et non enceintes sont faibles, voire non d celables. 16 Les concentrations en hcg mesur es dans le s rum de femmes non enceintes indiqu es dans la litt rature sont inf rieures 5 mui/ml. 22 La concentration en hcg dans le s rum maternel augmente rapidement en d but de grossesse. Des taux d'hcg compris entre 5 et 25 mui/ml peuvent indiquer un d but de grossesse. 2,23 Les taux d'hcg atteignent en g n ral un maximum au cours du premier trimestre, pour diminuer lentement pendant le reste de la grossesse. Des chantillons provenant de 200 femmes enceintes ont t class s en 4 groupes, bas s sur le nombre de semaines d'am norrh e (1 10, 11 15, 16 22, 23 40), puis analys s avec le dosage ARCHITECT -hcg totale. Les r sultats sont r sum s dans le tableau ci-apr s. Limites Nombre de (mui/ml) semaines 2,5e per- 97,5e perd'am norrh e n Min Max centile centile 1 10 50 <1,20 >225 000,00 201,64 >225 000,00 11 15 50 16 995,65 >225 000,00 22 536,49 >225 000,00 16 22 50 6 860,23 >225 000,00 8 006,62 50 238,60 23 40 50 1 583,40 65 911,38 1 599,80 49 412,65 Il est recommand chaque laboratoire d' tablir ses propres valeurs attendues. CARACTERISTIQUES SPECIFIQUES Reproductibilit Le dosage ARCHITECT -hcg totale a t con u de mani re obtenir une reproductibilit <10 % (CV total). Une tude bas e sur le protocole EP5-T2 24 du Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, anciennement NCCLS) a t effectu e pour le dosage ARCHITECT -hcg totale. Un panel constitu de 3 chantillons base de s rum humain trait a t analys en double, en utilisant 2 lots de r actifs, 2 fois par jour, pendant 20 jours. Les donn es de cette tude sont r sum es dans le tableau suivant.* Echant. Lot Conc. du de Appa- moyenne Intra-s rie Total panel r actifs reil n (mui/ml) E.T. CV (%) E.T CV (%) 1 1 1 80 21,07 0,984 4,7 1,027 4,9 1 1 2 80 24,97 0,880 3,5 1,115 4,5 1 2 1 80 25,22 1,027 4,1 1,134 4,5 1 2 2 80 24,75 0,819 3,3 1,096 4,4 2 1 1 80 735,93 14,917 2,0 18,144 2,5 2 1 2 80 772,66 12,161 1,6 14,671 1,9 2 2 1 80 750,99 13,812 1,8 16,065 2,1 2 2 2 80 754,87 11,762 1,6 12,592 1,7 3 1 1 80 5 063,95 84,801 1,7 107,073 2,1 3 1 2 80 5 116,40 72,066 1,4 86,052 1,7 3 2 1 80 4 976,44 98,439 2,0 109,379 2,2 3 2 2 80 5 052,13 59,656 1,2 79,602 1,6 * Donn es indicatives ; les r sultats obtenus peuvent tre diff rents d'un laboratoire l'autre. R cup ration Le dosage ARCHITECT -hcg totale a t con u de mani re fournir une r cup ration moyenne de 100 ± 10 % lorsque les chantillons analyser sont surcharg s avec des concentrations connues d'hcg. Une concentration d'hcg connue (1 000,45 mui/ml) a t ajout e 8 fractions aliquotes de s rum humain. La concentration d'hcg a t d termin e par le dosage ARCHITECT -hcg totale et la r cup ration a t calcul e et exprim e en pourcentage. Le pourcentage de r cup ration du dosage ARCHITECT -hcg totale tait compris entre 104,1 % et 108,8 %, avec une moyenne de 106,7 %. Il s'agit de donn es indicatives ; les r sultats obtenus peuvent tre diff rents d'un laboratoire l'autre. V rification de la dilution L exactitude du protocole de dilution automatique ARCHITECT -hcg totale a t valu e l'aide d' chantillons de s rum humain. Les r sultats des chantillons analys s en double en utilisant le protocole de dilution automatique au 1/15 me ont t compar s aux r sultats des m mes chantillons dilu s au 1/15 me avec le diluant manuel multi-dosages ARCHITECT i. La performance a t valu e sous forme de pourcentage de r cup ration et a t calcul e d'apr s l' quation suivante :* Conc. en hcg apr s dilution automatique (mui/ml) % de r cup ration = x 100 Conc. en hcg apr s dilution manuelle (mui/ml) Conc. en hcg apr s Conc. en hcg apr s dilution manuelle dilution automatique % de Echantillon (mui/ml) (mui/ml) r cup ration A 98 488,05 102 152,34 103,7 B 27 534,10 27 199,45 98,8 C 47 730,65 46 994,66 98,5 D 13 413,25 13 438,39 100,2 E 10 391,55 9 463,34 91,1 * Donn es indicatives ; les r sultats obtenus peuvent tre diff rents d'un laboratoire l'autre. Sensibilit analytique Le dosage ARCHITECT -hcg totale a t con u de mani re fournir une sensibilit analytique < 1,2 mui/ml. La sensibilit analytique est d finie comme tant gale la concentration 2 carts-types par rapport la valeur URL moyenne du calibrateur A ARCHITECT -hcg totale (0,00 mui/ml), ce qui repr sente la plus faible concentration en hcg mesurable pouvant tre distingu e de z ro. Sp cificit Le dosage ARCHITECT -hcg totale a t con u de mani re fournir une sp cificit analytique moyenne < 10 % de r activit crois e avec la FSH, la LH et la TSH. Des fractions aliquotes de s rum humain contenant de l'hcg ont t surcharg es avec 150 mui/ml de FSH, 250 mui/ml de LH et 100 μui/ml de TSH, puis analys es pour d terminer leur concentration en hcg. La r activit crois e a t calcul e sous forme de pourcentage d'interf rence et elle tait inf rieure 10 % pour chacune des substances test es. 6
Contamination La contamination d un chantillon contenant 0 mui d hcg/ml par un chantillon voisin contenant 1 000 000 mui d hcg/ml tait inf rieure 7,5 mui d hcg/ml. REMARQUE : Certains chantillons peuvent pr senter des concentrations lev es en raison de la formation de prot ines sur l'aiguille du pipeteur. Pour de plus amples informations sur le d pannage, se r f rer au Chapitre 10 du Manuel Technique Interf rence L'interf rence potentielle moyenne dans le dosage ARCHITECT -hcg totale de l'h moglobine, de la bilirubine, des triglyc rides et des prot ines aux concentrations indiqu es ci-dessous est < 10 %. H moglobine - < 10 % 500 mg/dl Bilirubine - < 10 % 20 mg/dl Triglyc rides - < 10 % 3 000 mg/dl Prot ines - < 10 % 2 g/dl et 12 g/dl Pr cision par corr lation Le dosage ARCHITECT -hcg totale a t con u de mani re fournir une pente de 1,0 +/- 0,15 et un coefficient de corr lation > 0,95 pour la plage de mesure comprise entre 0 et 15 000 mui/ml lorsqu'il est compar au dosage AxSYM -hcg totale. Une tude a t r alis e sur des chantillons analys s par les dosages ARCHITECT -hcg totale et AxSYM -hcg totale. Les donn es de cette tude r sum es dans le tableau* ci-apr s ont t analys es l'aide des m thodes de r gression des moindres carr s et de Passing- Bablok. 25 Abbott ARCHITECT -hcg totale vs. Abbott AxSYM -hcg totale Limites Nombre AxSYM Ordonn e Coef. de M thode d' chant. (mui/ml) l'origine Pente corr lation R gression lin aire 93 2 1 0001 3,40 1,00 0,945 par la m thode des 192 2 15 0002 58,34 0,89 0,980 moindre carr s 471 2 200 0003-672,30 0,82 0,986 R gression lin aire 93 2 1 0001 0,48 1,08 0,945 de Passing-Bablok** 192 2 15 0002 1,88 0,94 0,980 471 2 200 0003 19,84 0,80 0,986 Lors de cette valuation, les chantillons s riques analys s par le dosage ARCHITECT -hcg totale ont donn des r sultats compris entre : 1 1,99 et 1 262,17 mui/ml, 2 1,99 et 14 934,93 mui/ml, 3 1,99 et 180 620,00 mui/ml. * Donn es indicatives ; des variables telles que les diff rences au niveau de la taille d' chantillonnage et des populations d' chantillons peuvent affecter la corr lation du dosage ; c'est pourquoi les r sultats obtenus peuvent tre diff rents d'un laboratoire l'autre. ** M thode de r gression lin aire sans hypoth ses particuli res concernant la distribution des chantillons et des erreurs de mesure. 25 BIBLIOGRAPHIE 1. 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ARCHITECT, AxSYM et Chemiflex sont des marques commerciales d Abbott Laboratories dans plusieurs pays. Abbott Ireland Diagnostics Division Lisnamuck, Longford Co. Longford Ireland +353-43-3331000 Distribu par Abbott Laboratories Abbott Park, IL 60064 USA et ABBOTT 65205 Wiesbaden, Germany Juin 2010 2006, 2010 Abbott Laboratories 8