Le polymorphisme PNPLA3 est-il impliqué dans l hépatite alcoolique aiguë sévère 1,2 Eric Nguyen-Khac, 2 Hakim Houchi, 1 Marie Laure Dreher, 4 Yves Edouard Harpe, 2 Mickael Naassila 1 INSERM ERI 24 (Groupe de Recherche sur l Alcool et les Pharmacodépendances), Université de Picardie Jules Verne, Amiens. 2 CHU Amiens, Service d Hépato-Gastroentérologie, 80054 Amiens. 4 BIOBANQUE de Picardie, CHU Amiens sud
Le polymorphisme PNPLA3 est-il impliqué dans l hépatite alcoolique aiguë sévère Conflits d intérêt MSD, Echosens, Roche, Janssen
Introduction PNPLA3 (adiponutrin) famille patatin like phospholipase Exprimée dans différents tissus, dont le foie Encode protéine transmembranaire Activité hydrolase sur les TG GWAS 1 SNP non synonyme rs738409 C>G (I148M), associé à la stéatose non alcoolique du foie 2 Association avec élévation des transaminases 1 Romeo et al, Nat Genet 2008 2 Yuan X et al, Am J Hum genet 2008
Introduction Polymorphisme PNPLA3 et maladie alcoolique du foie Origines Comparaisons OR p Fréquence allèle G (cirrhose) Tian, 2010 Mexico city Cirrhose vs. témoins MAF vs. témoins 1,81 1,26 4,7. 10-5 0,72 5,1. 10-2 Trépo, 2011 Belgique Cirrhose vs. témoins 2,86 <0,001 0,37 Stickels, 2011 Allemagne Cirrhose vs. témoins MAF vs. témoins 3,6 2,55 1,5. 10-5 0,36 4,2. 10-3 Falleti, 2011 Italie Cirrhose vs. témoins 3,52 <0,0001 0,42
Introduction Child A Child B Child C Fréq All G 0,70 0,75 0,77 p 0,05 Tian et al, Nature Genetics 2010 Stickels et al, Hepatology 2011
Objectifs Etudier le polymorphisme de la séquence nonsynonyme PNPLA3 rs738409 C/G chez les patients ayant une hépatite alcoolique aiguë sévère Etudier les répercussions cliniques et biologiques des génotypes CC, CG et GG chez les patients ayant une hépatite alcoolique aiguë sévère
Patients et Méthodes Constitution de 3 groupes Hépatite Alcoolique Aiguë sévère (HAA) n=64 Cirrhose alcoolique sans HAA n=36 Témoins sains (appariement âge et sexe) n=105 Hépatite Alcoolique Aigues sévères (HAA) Alcool > 50 g/j, les 3 derniers mois Score de Maddrey 32 Histologie compatible (70% PBH) Traitement par corticoïdes ou bi thérapie NAC-Corticoïdes Accord des patients, stockage de l ADN Cirrhose alcoolique Arguments clinico biologiques, et morphologiques Maddrey < 32, sans antécédent d HAA
Patients et Méthodes (2) Technique de génotypage ADN, extraction à partir de prélèvement sanguin. Technique de génotypage : SNP TaqMan _10 C7241, PCR temps réel. (Applied Biosystems, Warrington United Kingdom) séquence nonsynonyme PNPLA3 rs738409 C/G (I148M) Génotypage au Laboratoire (chercheur, en aveugle/données cliniques)
Caractéristiques cliniques et biologiques de base HAA Cirrhose sans HAA Témoins sains p Age (ans) moy ± sd 52 ± 1 57,3 ± 1,6 52 ± 0,8 0,471 Sexe M, n (%) 37 (54,4) 29 (68,2) 53 (50,5) <0,001 Taux de prothrombine (%) 35,85 ± 1,39 62,7 ± 2,7 <0,001 Albumine (g/l) 26,19 ± 0,72 32,2 ± 1,0 <0,001 Bilirubine (µmol/l) 199,5 ± 15,6 59,5 ± 20,8 <0,001 ASAT (UI/L) 122,6 ± 16,0 90,8 ± 14,0 0,085 GGT (UI/L) 251,6 ± 27,2 282,6 ± 50,8 0,282 Phosphatases Alcalines (UI/L) 147,97 ± 7,68 154,7 ± 13,0 0,320 Créatinine (µmol/l) 82,4 ± 6,6 97,2 ± 9,3 0,095 Globules Blancs (x10 3 /mm 3 ) 10486,8 ± 866,2 6710,9 ± 538,5 <0,001 Lymphocytes (x10 3 /mm 3 ) 1223,4 ± 61,8 1255,6 ± 115,8 0,398 Plaquettes (x10 3 /mm 3 ) 131 ± 10,1 143,2 ± 11,1 0,210 AFP 8,1 ± 2,5 53,9 ± 36,4 0,077 Maddrey 55,23 ± 2,93 20,8 ± 3,1 <0,001 Child Pugh 12,3 ± 0,2 8,3 ± 0,3 <0,001 Mortalité à 6 mois, n (%) 20 (31,3) 8 (23,1) <0,001
Répartition des génotypes OR=2,44, p=0,04 OR=3,1, p=0,0002 70% 68,6% OR=1,31, p=0,52 50% 47,2% 41,7% 40,6% 40,6% 20% 27,6% 3,8% 11,4% 18,8% C/C C/G G/G Témoins sains C/C C/G G/G Cirrhose Sans HAA C/C C/G G/G HAA
Fréquences Alléliques C et G OR=3, p=0,00001 70% 82,4% OR=2,19, p=0,01 68,1% OR= 1,37, p=0,31 60,9% 50% 31,9% 39,1% 20% 17,6% C G Témoins sains C G Cirrhose Sans HAA C HAA G
Génotypes CC vs. CG + GG Présentation clinique et biologique Pas de différences significatives Génotypes Décès (n) Vivants (n) CC 3 (11,4 %) 23 (88,5 %) CG + GG 17 (44,7 %) 21 (55,3 %) p= 0,005, OR = 6,21 (IC 95% : 1,41 31,24)
Survie moyenne M6 (J) Survie Cum. Impact des génotypes sur la mortalité P=0,002 P=0,01 1 Graphe de Survie Cumulée de Base pour survie 18ojr Variable censure : <Sans> Courbes de survie M6 Variable de stratification : Genotype Modèle : Taux proportionnels P=0,01 166,2±38,1 J 112,9±71,2 J 118,3±71,2 J,8,6,4,2 0 C/C C/G G/G Survie C Délais de Survie C Délais de Survie C Délais de C/C C/G G/G 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 Temps
Facteurs de risque de mortalité à M6 Analyse univariée Groupe HAA Vivants Groupe HAA décédés Age (ans) moy ± sd 50,2 ± 1,4 55,3 ± 1,4 0,01 Taux de prothrombine (%) 38,4 ± 1,8 31,2 ± 1,8 0,009 Bilirubine J0 (µmol/l) 165,7 ± 14,2 257,1 ± 28,3 0,001 Bilirubine J7 (µmol/l) 131,7 ± 15 230,3 ± 30,8 0,001 Phosphatases Alcalines (UI/L) 158,4 ± 10,1 123,3 ± 12,4 0,02 Créatinine (µmol/l) 73,3 ± 5,8 100,6 ± 17,2 0,03 Maddrey 49,2 ± 3,7 66,3 ± 4,5 0,004 Meld 22,4 ± 0,9 28,7 ± 1,6 <0,0001 Modèle Lille 0,3 ± 0 0,5 ± 0,1 0,02 GAHS 8,7 ± 0,2 9,7 ± 0,3 0,004 ABIC 8,1 ± 0,2 9,8 ± 0,3 0,00004 Génotypes, n (%) CC CG GG 22 (51,2) 13 (30,2) 8 (18,6) 4 (19) 13 (61,9) 4 (19) p 0,01
Facteurs de risque de mortalité à M6 (Analyse multivariée) OR IC 95% p Bilirubine J7 1,011 1,001 1,021 0,027 Prévalence G 2,4 1,092 5,299 0,029
Réponse thérapeutique pas d impact du génotype Génotypes Modèle Lille < 0,45 Modèle Lille > 0,45 p CC 9 8 0,60 CG + GG 20 13 Génotypes Modèle Lille < 0,56 Modèle Lille > 0,56 p CC 13 4 0,47 CG + GG 22 11 Génotypes Dimi Bili J7 Pas dimi Bili J7 p CC 6 8 0,08 CG + GG 25 9
Conclusions Polymorphisme PNPLA3 rs738409 C/G Augmente significativement le risque de cirrhose alcoolique, Augmente significativement le risque d Hépatite alcoolique aiguë sévère, Facteurs de risque indépendant de mortalité chez les patients HAA