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1 CA 15-3 SYSTEM fr CA K /R4 B2K442 Faire attention aux modifications R vision de novembre 2009 Service Clients : Retrouvez le contact de votre Service Clients Abbott sur Suivre scrupuleusement les instructions de cette notice. La fiabilit des r sultats du dosage ne peut pas tre garantie si ces instructions ne sont pas strictement respect es. L gende des symboles utilis s R f rence Dispositif m dical de diagnostic in vitro Conserver entre 2 et 8 C Consulter les instructions d'utilisation Num ro de s rie Mandataire Num ro de lot Date d'expiration Calibrateur (A F) Contr le bas, haut (L, H) CD-ROM de dosage Cupules r actionnelles Godets- chantillons Septum Fabricant Bouchons de remplacement Lot de r actifs L'explication compl te des symboles utilis s pour la d nomination des composants se trouve au paragraphe REACTIFS 1

2 MISE EN GARDE : Les valeurs du dosage CA 15-3 obtenues par diff rentes m thodes d'analyse ne sont pas interchangeables en raison des diff rences dans les m thodes d'analyse et de la sp cificit des r actifs. Les r sultats communiqu s par le laboratoire au m decin devront indiquer la m thode de dosage CA 15-3 utilis e. Si, au cours du suivi du traitement d'une patiente, la m thode utilis e pour d terminer les taux s riels en CA 15-3 est chang e, une s rie suppl mentaire de dosages devra tre effectu e pour cette patiente. Avant de changer la m thode de dosage, le laboratoire DOIT confirmer les valeurs de base utilis es pour le suivi th rapeutique des patients. DENOMINATION ARCHITECT CA 15-3 DOMAINE D'APPLICATION ARCHITECT CA 15-3 est un dosage immunologique microparticulaire par chimiluminescence (CMIA) pour la d termination quantitative de l'antig ne d fini par l'anticorps DF3 dans le s rum et le plasma humains sur l'architect i. Ce dosage est utilis comme aide dans le suivi des patientes atteintes de cancer du sein aux stades II et III. Les r sultats des dosages CA 15-3 effectu s en s rie pour une patiente doivent tre utilis s conjointement avec d'autres m thodes cliniques employ es dans le suivi des cancers du sein. RESUME ET EXPLICATION DU TEST Les valeurs du dosage ARCHITECT CA 15-3 sont d finies l'aide des anticorps monoclonaux 115D8 et DF3. 1,2 L'anticorps monoclonal 115D8 dirig contre les membranes des globules gras de lait humain et l'anticorps monoclonal DF3 dirig contre une fraction enrichie de la membrane d'un carcinome mammaire m tastatique humain r agissent avec les pitopes exprim s par une famille de glycoprot ines de poids mol culaire lev, appel s mucines pith liales polymorphiques (MEP). 3-6 Des tudes exp rimentales ont montr que les concentrations en CA 15-3 sont fr quemment lev es chez les patientes atteintes d'un cancer du sein Ces tudes laissent supposer que le dosage du CA 15-3 pourrait pr senter un int r t clinique pour le suivi de la r ponse th rapeutique de patientes sous traitement, tant donn la corr lation respective de l'augmentation et de la diminution des concentrations avec la progression et la r gression de la maladie. 1,7,10,15-18 D'autres tudes publi es laissent supposer que l'augmentation des concentrations en CA 15-3 chez les patientes risque de r cidive d'un cancer du sein apr s traitement serait r v latrice d'une r cidive de la maladie avant m me sa d tection clinique. 10,15,16,19 Une augmentation des valeurs du dosage CA 15-3 a t constat e chez des individus pr sentant des affections non malignes telles que la cirrhose, l'h patite, les maladies auto-immunes ainsi que les troubles b nins des ovaires et des seins. 7,8 Le cancer du poumon, du colon, du pancr as ainsi que le cancer primaire du foie, des ovaires, du col ut rin et de l'endom tre comptent parmi les affections malignes non mammaires dans lesquelles des valeurs lev es en CA 15-3 ont t observ es. 7,20 Chez la plupart des individus normaux, les valeurs du dosage CA 15-3 ne sont pas lev es. 7 Il n'est pas recommand d'utiliser le dosage CA 15-3 comme m thode de d pistage de masse du cancer ; l'utilisation du dosage CA 15-3 constitue cependant une aide dans le suivi th rapeutique des patientes atteintes d'un cancer du sein PRINCIPES BIOLOGIQUES DE LA METHODE ARCHITECT CA 15-3 est un dosage immunologique en deux tapes visant d terminer la pr sence de l'antig ne d fini par l'anticorps DF3 dans le s rum et le plasma humains, utilisant la technologie CMIA protocoles de dosage flexibles, appel e Chemiflex. Dans un premier temps, l' chantillon, le tampon de lavage et les microparticules paramagn tiques recouvertes d'anticorps 115D8 sont mis en pr sence. Les antig nes d finis par l'anticorps DF3 pr sents dans l' chantillon se lient aux microparticules recouvertes d'anticorps 115D8. Apr s lavage, le conjugu DF3 marqu l'acridinium est ajout lors de la deuxi me tape. Les solutions de pr activation et d'activation sont ensuite ajout es au m lange r actionnel. La r action chimiluminescente qui en r sulte est mesur e en unit s relatives de lumi re (URL). Il existe une relation directe entre la quantit d'antig nes d finis par l'anticorps DF3 pr sente dans l' chantillon et le nombre d'url d tect es par le syst me optique ARCHITECT i*. Ce dosage est unique du fait que les calibrateurs sont fournis pr dilu s. Au cours du processus d'analyse, l'architect dilue tous les contr les et chantillons en utilisant le m me facteur de dilution final que celui employ pour les calibrateurs pr dilu s. Pour de plus amples informations concernant l'analyseur et la technologie du dosage, se r f rer au chapitre 3 du Manuel Technique * i = dosage immunologique REACTIFS Kit de r actifs, 100 tests/500 tests REMARQUE : Certains conditionnements ne sont pas disponibles dans tous les pays ou utilisables sur tous les analyseurs ARCHITECT i Systems. Contacter le distributeur local. Kit de r actifs ARCHITECT CA 15-3 (2K44) 1 ou 4 flacon(s) (6,6 ml pour le flacon de 100 tests/ 27,0 ml pour le flacon de 500 tests) de microparticules recouvertes de 115D8 (souris, monoclonal) dans du tampon TRIS contenant un stabilisant de prot ines (bovines). Conservateur : agent antimicrobien. 1 ou 4 flacon(s) (5,9 ml pour le flacon de 100 tests/ 26,3 ml pour le flacon de 500 tests) de conjugu DF3 (souris, monoclonal) marqu l'acridinium dans du tampon phosphate contenant un stabilisant de prot ines (bovines). Concentration minimale : 0,05 μg/ml. Conservateur : agent antimicrobien. Autres r actifs Solution de pr activation ARCHITECT i Solution de pr activation contenant 1,32 % (m/v) d'eau oxyg n e. Solution d'activation ARCHITECT i Solution d'activation contenant de l'hydroxyde de sodium 0,35 N. Tampon de lavage ARCHITECT i REMARQUE : La taille du flacon et le volume varient en fonction de la commande. Tampon de lavage contenant une solution saline tamponn e au phosphate. Conservateur : agent antimicrobien. Diluant de dosage Diluant manuel multiparam tre ARCHITECT i (7D82-50) 1 flacon (100 ml) de diluant manuel multiparam tre ARCHITECT i contenant une solution saline tamponn e au phosphate. Conservateur : agent antimicrobien. 2

3 PRECAUTIONS ET RESTRICTIONS D'EMPLOI Pour diagnostic in vitro. Suivre scrupuleusement les instructions de cette notice. La fiabilit des r sultats du dosage ne peut pas tre garantie si ces instructions ne sont pas strictement respect es. Mesures de s curit ATTENTION : Ce produit n cessite la manipulation d' chantillons humains. Il est recommand de consid rer tous les produits d origine humaine comme potentiellement infectieux et de les manipuler selon les r gles "OSHA Standard on Bloodborne Pathogens". 21 Les produits contenant ou susceptibles de contenir des agents infectieux doivent tre manipul s selon les r gles de bios curit de niveau 2 22 ou autres r gles de bios curit en vigueur. 23,24 Les microparticules et le conjugu contiennent un m lange de 5-chloro-2-m thyl-4-isothiazoline-3-one et de 2-m thyl-4- isothiazoline-3-one (3/1), un composant de ProClin 300, et sont classifi s selon les directives de la Communaut Europ enne (CE) comme : irritant (Xi). Les risques particuliers (R) et les conseils de prudence (S) attribu s ces substances sont les suivants : R43 Peut entra ner une sensibilisation par contact avec la peau. S24 Eviter le contact avec la peau. S35 Ne se d barrasser de ce produit et de son r cipient qu'en prenant toutes pr cautions d'usage. S37 Porter des gants appropri s. S46 En cas d'ingestion, consulter imm diatement un m decin et lui montrer l'emballage ou l' tiquette. Ce produit contient de l azide de sodium. Au contact d un acide, d gage un gaz tr s toxique. Ne se d barrasser de ce produit et de son r cipient qu en prenant toutes pr cautions d usage. Pour les produits non classifi s comme dangereux par la Directive europ enne 1999/45/EC (amend e), une fiche de donn es de s curit est disponible pour les professionnels sur simple demande. Pour de plus amples informations sur l limination appropri e de l azide de sodium et une explication d taill e des mesures de s curit lors du fonctionnement de l'analyseur, se r f rer au Chapitre 8 du Manuel Technique Pr cautions d'emploi Ne pas utiliser les kits de r actifs au-del de leur date d'expiration. Ne pas m langer de r actifs provenant de kits diff rents. Avant de charger le kit de r actifs ARCHITECT CA 15-3 sur l'analyseur pour la premi re fois, le flacon de microparticules doit tre homog n is afin de remettre en suspension les microparticules qui se sont d pos es pendant le transport. Pour de plus amples informations sur l'homog n isation des microparticules, se r f rer au paragraphe "Proc dure du dosage" dans la section "Proc dure" de cette notice. Des septums DOIVENT tre utilis s afin d'emp cher l' vaporation et la contamination des r actifs et d'assurer leur int grit. La fiabilit des r sultats du dosage ne peut pas tre garantie si les septums ne sont pas utilis s conform ment aux instructions de cette notice. Afin d' viter toute contamination, porter des gants propres lors de la mise en place d'un septum sur un flacon de r actif d bouch. Une fois qu'un septum a t plac sur un flacon de r actif ouvert, ne pas retourner le flacon afin d' viter toute fuite de r actif et de ne pas fausser les r sultats du dosage. Avec le temps, il se peut que des liquides r siduels s chent la surface du septum. Il s'agit de sels secs qui n'ont aucun effet sur la performance du dosage. Pour de plus amples informations sur les pr cautions d'emploi lors du fonctionnement de l'analyseur, se r f rer au chapitre 7 du Manuel Technique Conditions de conservation Le kit de r actifs ARCHITECT CA 15-3 doit tre conserv entre 2 et 8 C en position verticale et peut tre utilis imm diatement apr s sa sortie du r frig rateur (2 8 C). Les r actifs sont stables jusqu' leur date d'expiration s'ils sont conserv s et manipul s selon les indications du fabricant. Le kit de r actifs ARCHITECT CA 15-3 peut tre conserv bord de l'architect i pendant un maximum de 30 jours. Au-del de ce d lai, le kit de r actifs doit tre jet. Pour de plus amples informations sur le suivi du temps de conservation bord de l appareil, se r f rer au chapitre 5 du Manuel Technique Les r actifs peuvent tre conserv s l'int rieur ou l'ext rieur de l'architect i. Si les r actifs sont retir s du syst me, les conserver entre 2 et 8 C (munis de septums et de bouchons de remplacement) en position verticale. Pour les r actifs conserv s l'ext rieur de l'analyseur, il est recommand de les laisser dans leurs portoirs et emballage d'origine afin de les maintenir dans une position verticale. Si l'un des flacons de r actif (munis de septums) ne reste pas en position verticale pendant sa conservation au r frig rateur l'ext rieur de l'analyseur, le kit de r actifs entier doit tre jet. Pour toute information sur le d chargement des r actifs, se r f rer au Chapitre 5 du Manuel Technique Indications d alt ration des r actifs Un contr le dont la valeur se situe en dehors des limites sp cifi es peut indiquer une alt ration des r actifs ou des erreurs de technique. Les r sultats des chantillons analys s dans la m me s rie ne sont pas valides et doivent tre r analys s. Une recalibration du dosage peut tre n cessaire. Pour de plus amples informations sur le d pannage, se r f rer au chapitre 10 du Manuel Technique FONCTIONNEMENT DE L'APPAREIL Avant d'effectuer le dosage, le fichier du dosage ARCHITECT CA 15-3 doit tre install sur l'architect i partir du CD-ROM de dosages ARCHITECT i Addition A. Pour de plus amples informations sur l'installation d'un fichier de dosage ainsi que sur la visualisation et la modification des param tres de dosage, se r f rer au chapitre 2 du Manuel Technique Pour de plus amples informations sur l'impression des param tres de dosage, se r f rer au chapitre 5 du Manuel Technique Pour une explication d taill e du fonctionnement de l'analyseur, se r f rer au Manuel Technique 3

4 PRELEVEMENT ET PREPARATION DES ECHANTILLONS POUR L'ANALYSE Le dosage ARCHITECT CA 15-3 ne peut tre effectu que sur du s rum humain (y compris le s rum pr lev sur des tubes s parateurs de s rum [SST]) ou du plasma pr lev sur EDTA tripotassique, h parinate de sodium ou h parinate de lithium. Aucun autre anticoagulant n'a t valid pour une utilisation avec le dosage ARCHITECT CA Suivre les instructions du fabricant pour le traitement des tubes de pr l vement. Lors de l' valuation de s ries d' chantillons, il est recommand d'utiliser le m me type d' chantillons pendant toute l' tude. L'ARCHITECT i n'est pas configur pour d tecter le type d' chantillon utilis pour le dosage. Il revient par cons quent l'utilisateur de v rifier les types d' chantillons utilis s dans le dosage ARCHITECT CA Manipuler les chantillons patients avec pr caution afin d' viter toute contamination crois e. Il est recommand d'utiliser des pipettes ou des embouts usage unique. Ne pas utiliser d' chantillons fortement h molys s. Ne pas utiliser d' chantillons inactiv s par la chaleur. V rifier l'absence de bulles dans tous les chantillons. Si des bulles sont pr sentes, les liminer l'aide d'un b tonnet avant l'analyse. Utiliser un b tonnet neuf pour chaque chantillon afin d' viter toute contamination crois e. Les chantillons de s rum et de plasma ne doivent pas contenir de fibrine, de globules rouges ou d'autres particules en suspension. Pour les chantillons de s rum, s'assurer que le caillot s'est compl tement form avant de les centrifuger. Certains chantillons, en particulier ceux provenant de patients sous traitement anticoagulant ou thrombolytique, peuvent pr senter des temps de coagulation lev s. Si l' chantillon est centrifug avant la formation compl te du caillot, la pr sence de fibrine peut entra ner des r sultats erron s. Si le dosage est effectu plus de 24 heures apr s le pr l vement, s parer le s rum ou le plasma du caillot, du s parateur de s rum ou des globules rouges. Les chantillons peuvent tre conserv s au maximum pendant 7 jours entre 2 et 8 C avant d' tre analys s. Si le dosage est effectu plus de 7 jours apr s le pr l vement, le s rum ou le plasma devront tre conserv s congel s une temp rature inf rieure ou gale -20 C. Eviter les cong lations et d cong lations r p t es. Les chantillons doivent tre homog n is s AVEC SOIN apr s d cong lation, en les passant au Vortex une vitesse FAIBLE ou en les retournant d licatement, puis centrifug s avant emploi, de fa on liminer les globules rouges ou les particules en suspension et obtenir des r sultats coh rents. Effectuer le pr l vement au milieu du tube afin d' viter toutes particules de la surface ou du fond de l' chantillon. La performance de ce test n'a pas t tablie pour les fluides corporels autres que le s rum ou le plasma humain. Ne pas utiliser d' chantillons pr sentant une contamination microbienne vidente. Avant l'exp dition, il est recommand de s parer les chantillons du caillot, du s parateur de s rum ou des globules rouges. Ces chantillons doivent tre conditionn s et tiquet s conform ment la l gislation r gissant le transport des chantillons cliniques et des substances infectieuses. Les chantillons peuvent tre exp di s sur de la glace ou de la carboglace. PROCEDURE Mat riel fourni 2K44 Kit de r actifs ARCHITECT CA 15-3 Mat riel n cessaire mais non fourni Analyseur ARCHITECT i 3K50 ARCHITECT i - Version am ricaine - Addition A 3K52 ARCHITECT i - Version internationale ( l'exception des Etats-Unis) - Addition A 2K44-01 Calibrateurs ARCHITECT CA K44-10 Contr les ARCHITECT CA D82-50 ARCHITECT i Pipettes ou embouts de pipette (facultatif) pour la distribution des volumes sp cifi s dans l' cran Demande de patient ou Demande de contr le. Pour de plus amples informations sur le mat riel requis pour les proc dures de maintenance, se r f rer au chapitre 9 du Manuel Technique Proc dure d'analyse Avant de charger le kit de r actifs ARCHITECT CA 15-3 sur l'analyseur pour la premi re fois, le flacon de microparticules doit tre homog n is afin de remettre en suspension les microparticules qui se sont d pos es pendant le transport : Retourner le flacon de microparticules 30 fois. Examiner le flacon pour s'assurer que les microparticules sont remises en suspension. Si des microparticules restent encore coll es au flacon, continuer retourner ce dernier jusqu' ce qu'elles soient compl tement remises en suspension. Une fois les microparticules remises en suspension, retirer et jeter le bouchon. Retirer un septum de la pochette en portant des gants propres. Placer soigneusement le septum dans l'ouverture du flacon. Si les microparticules ne sont pas remises en suspension, NE PAS LES UTILISER. Contacter Abbott Assistance. Programmer les analyses. Charger le kit de r actifs ARCHITECT CA 15-3 sur l'architect i. V rifier que tous les r actifs requis sont pr sents. S'assurer que chaque flacon de r actif est recouvert d'un septum. Le volume minimum d' chantillon requis est calcul par le syst me et imprim sur le rapport Liste des demandes. Ne pas pr lever plus de 10 r pliques partir du m me godet- chantillon. Afin de minimiser les effets de l' vaporation, v rifier que le volume d' chantillon ad quat est pr sent dans le godet- chantillon avant d'effectuer le dosage. Echantillon patient prioritaire : 70 μl pour le premier dosage CA 15-3, plus 20 μl pour chaque dosage suppl mentaire effectu sur le m me godet- chantillon. Echantillon de routine maintenu jusqu' 3 heures bord de l'analyseur : 150 μl pour le premier dosage CA 15-3, plus 20 μl pour chaque dosage suppl mentaire CA 15-3 effectu sur le m me godet- chantillon. Echantillon de routine maintenu plus de 3 heures bord de l'analyseur : un volume suppl mentaire est requis. Pour de plus amples informations sur l' vaporation et les volumes des chantillons, se r f rer au chapitre 5 du Manuel Technique En cas d'utilisation de tubes primaires ou aliquots, utiliser la jauge chantillon afin de s'assurer que le volume d' chantillon de patient est suffisant. Avant l'analyse, il faut homog n iser les calibrateurs et contr les ARCHITECT CA 15-3 en les retournant d licatement. Pour obtenir le volume requis (250 μl) de calibrateurs ARCHITECT CA 15-3, tenir les flacons la verticale et distribuer 7 gouttes de chacun des calibrateurs dans les godets- chantillons respectifs. Pour obtenir le volume requis (150 μl) de contr les ARCHITECT CA 15-3, tenir les flacons la verticale et distribuer 4 gouttes de chacun des contr les dans les godets- chantillons respectifs. Charger les chantillons Pour de plus amples informations sur le chargement des chantillons, se r f rer au chapitre 5 du Manuel Technique 4

5 Appuyer sur la touche LANCER. L'ARCHITECT i effectue les op rations suivantes : D place l' chantillon jusqu'au point d'aspiration Charge une cupule r actionnelle (CR) dans la couronne r actionnelle Aspire et distribue l' chantillon dans la CR Fait avancer la CR d'une position. Pr l ve du tampon de lavage et des microparticules et les transf re dans la CR (contenant l' chantillon ou le contr le) ou pr l ve des microparticules et les transf re dans la CR (contenant le calibrateur pr dilu ). Homog n ise, incube et lave le m lange r actionnel Ajoute le conjugu dans la CR Homog n ise, incube et lave le m lange r actionnel Ajoute les solutions de pr activation et d'activation Mesure l' mission chimiluminescente pour d terminer la quantit d'antig nes d finis par l'anticorps DF3 pr sents dans l' chantillon Evacue le contenu de la CR dans la poubelle pour d chets liquides et d charge la CR dans la poubelle pour d chets solides Calcule le r sultat Pour de plus amples informations sur la demande d'analyse des chantillons de patients et des contr les, ainsi que sur les proc dures g n rales de fonctionnement, se r f rer au chapitre 5 du Manuel Technique Il est important de suivre le programme de maintenance d crit au chapitre 9 du Manuel Technique Si votre laboratoire exige une maintenance plus fr quente, se conformer cette exigence. Proc dures de dilution des chantillons Les chantillons dont la concentration en CA 15-3 est sup rieure 800 U/ml sont annot s ">800.0" et peuvent tre dilu s l'aide du protocole de dilution automatique ou de la proc dure de dilution manuelle. Si l'on utilise le protocole de dilution automatique, le syst me effectue une dilution au 1/5 de l' chantillon, puis calcule automatiquement la concentration de l' chantillon avant dilution et enregistre le r sultat. Les dilutions manuelles doivent tre effectu es de la mani re suivante : La dilution recommand e pour le dosage ARCHITECT CA 15-3 est de 1/5. Pour une dilution au 1/5, ajouter 100 μl d' chantillon de patient 400 μl de diluant manuel multiparam tre ARCHITECT i (7D82-50). Saisir le facteur de dilution dans l' cran Demande de patient ou Demande de contr le. Tous les dosages s lectionn s pour cette demande seront dilu s. Le syst me utilisera ce facteur de dilution afin de calculer automatiquement la concentration de l' chantillon avant la dilution et d'enregistrer le r sultat. La dilution doit tre effectu e de sorte que le r sultat pour l' chantillon dilu soit sup rieur 30 U/ml. Pour de plus amples informations sur les demandes de dilution, se r f rer au chapitre 5 du Manuel Technique Calibration Pour effectuer une calibration du dosage ARCHITECT CA 15-3, analyser les calibrateurs A, B, C, D, E et F en double. Un chantillon de chacun des contr les CA 15-3 doit tre analys afin de pouvoir valuer la calibration du dosage. S'assurer que les valeurs des contr les du dosage se situent dans les limites de concentration sp cifi es dans la notice des contr les. Les calibrateurs doivent tre charg s en position prioritaire. Plage de calibration : U/ml. Lorsque la calibration du dosage ARCHITECT CA 15-3 a t accept e et m moris e, tous les chantillons suivants peuvent tre analys s sans effectuer de nouvelle calibration, sauf si : un kit de r actifs portant un nouveau num ro de lot est utilis les valeurs des contr les se situent en dehors des limites sp cifi es. Pour de plus amples informations sur la proc dure de calibration d'un dosage, se r f rer au chapitre 6 du Manuel Technique PROCEDURES DU CONTROLE DE QUALITE Le contr le de qualit recommand pour le dosage ARCHITECT CA 15-3 consiste analyser un chantillon de chaque contr le une fois toutes les 24 heures chaque jour d'utilisation. Si les proc dures du contr le de qualit du laboratoire exigent une utilisation plus fr quente des contr les pour v rifier les r sultats d'analyse, se conformer ces exigences. S'assurer que les valeurs des contr les du dosage se situent dans les limites de concentration sp cifi es dans la notice des contr les. V rification des performances du dosage Pour de plus amples informations sur les protocoles de v rification des performances du dosage mentionn es dans la notice, se r f rer l'annexe B du Manuel Technique Le dosage ARCHITECT CA 15-3 appartient au groupe 1. RESULTATS Calculs Le dosage ARCHITECT CA 15-3 utilise une m thode de traitement des donn es par ajustement de la courbe logistique 4 param tres (4PLC, pond ration en Y) pour cr er une courbe de calibration. Annotations La rubrique "Annotations" peut contenir des informations sur certains r sultats. Une description des annotations qui peuvent appara tre dans cette rubrique est fournie au chapitre 5 du Manuel Technique Plage de mesure (Domaine de mesure) La plage de mesure du dosage ARCHITECT CA 15-3 est comprise entre 0,5 U/ml et 800 U/ml. LIMITES DE LA METHODE Les r sultats doivent toujours tre utilis s conjointement avec d'autres donn es, savoir les sympt mes, les r sultats d'autres analyses, l'examen clinique, etc. Si les r sultats du dosage ARCHITECT CA 15-3 ne correspondent pas l'observation clinique, il est recommand d'effectuer d'autres tests afin de confirmer le r sultat. Les chantillons provenant de patients auxquels ont t administr es des pr parations d'anticorps monoclonaux de souris des fins diagnostiques ou th rapeutiques peuvent contenir des anticorps humains anti-souris (HAMA). De tels chantillons peuvent donner des r sultats faussement lev s ou abaiss s lorsqu'ils sont test s avec des kits de dosage qui utilisent des anticorps monoclonaux de souris. 25,26 Des informations cliniques ou diagnostiques suppl mentaires peuvent tre requises pour d terminer l' tat du patient. Des anticorps h t rophiles pr sents dans le s rum humain peuvent r agir avec les immunoglobulines des r actifs, interf rant avec les dosages immunologiques in vitro. Les patients r guli rement en contact avec des animaux ou des produits contenant du s rum d'origine animale peuvent tre sujets cette interf rence et fournir de ce fait des valeurs anormales. 27 Pour tablir un diagnostic, de plus amples informations peuvent tre n cessaires. Il n'est pas exclu que les r sultats du dosage CA 15-3 de patientes atteintes d'un cancer du sein confirm se situent dans la plage des r sultats obtenus pour des sujets sains et que des concentrations lev es en antig nes circulants d finis par l'anticorps DF3 soient observ es chez des patients pr sentant des maladies non malignes. Pour ces raisons, la valeur d'un dosage CA 15-3, quelque soit la concentration obtenue, ne doit pas tre utilis e comme crit re absolu d'absence ou de pr sence d'une maladie maligne. Les r sultats du dosage CA 15-3 doivent tre utilis s conjointement avec les informations fournies par l' valuation clinique et d'autres m thodes diagnostiques. Le dosage ARCHITECT CA 15-3 ne doit pas tre utilis comme m thode de d pistage du cancer. Les calibrateurs ARCHITECT CA 15-3 sont fournis pr dilu s. Un protocole sp cifique assure la dilution de tous les contr les et chantillons par le m me facteur de dilution final que celui utilis pour les calibrateurs pr dilu s. Des donn es repr sentatives de la performance sont indiqu es aux paragraphes "R sultats attendus" et "Caract ristiques sp cifiques". Les r sultats obtenus peuvent varier 5

6 RESULTATS ATTENDUS La distribution des valeurs du dosage CA 15-3 obtenues pour 396 chantillons est repr sent e dans le tableau ci-dessous. Distribution des valeurs du dosage ARCHITECT CA 15-3 Pourcentage (%) Nombre 31,4 60,1 de 0 31, > 120 sujets U/ml U/ml U/ml U/ml SUJETS APPAREMMENT SAINS Femmes (Pr -m nopause) 99 99,0 1,0 0,0 0,0 Femmes (Post-m nopause) ,0 0,0 1,0 0,0 Hommes ,5 1,5 0,0 0,0 Total ,7 1,0 0,3 0,0 Dans cette tude, pour 99,0 % des femmes saines, les r sultats du dosage CA 15-3 taient inf rieurs ou gaux 31,3 U/ml (moyenne = 13,0, E.T. = 7,0). Il est recommand chaque laboratoire d' tablir ses propres valeurs de r f rence pour les diff rentes populations desservies. Suivi du stade de la maladie chez des patientes pr sentant un cancer du sein diagnostiqu Toute modification des valeurs du dosage CA 15-3 effectu sur des chantillons s riels de patientes atteintes de carcinome du sein doit tre valu e conjointement avec les r sultats d'autres m thodes cliniques utilis es pour le suivi de ce type de cancer. L'efficacit du dosage ARCHITECT CA 15-3 comme aide dans le suivi du stade de la maladie chez des patientes ayant un cancer du sein diagnostiqu a t d termin e lors d'une tude valuant les modifications des concentrations en CA 15-3 dans des s ries d' chantillons s riques de patientes par rapport au stade de la maladie. Cette tude portait sur des chantillons de 74 patientes et un total de 377 observations. Le nombre moyen d'observations par patiente tait de 5,1. Lors de cette tude, toute augmentation de la valeur d'au moins 9,575 % de la valeur du dosage [soit 2,5 fois le % CV total (3,83 %)] tait consid r e repr senter une modification significative de la concentration en CA % des chantillons s riels (50/66) de patientes pr sentant une augmentation significative des valeurs taient corr l s une progression de la maladie alors que 65 % des chantillons s riels (153/237) ne pr sentant aucune modification significative des valeurs de CA 15-3 taient corr l s une absence de progression. La concordance totale dans cette tude est de 67 % ou 203/303. Le tableau suivant pr sente les donn es selon un sch ma de classification de 2 x 2. Modification du stade de la maladie par paire s quentielle Modification de la concentration Pas de en CA 15-3 Progression progression Total > 9,575 % < 9,575 % Total Le tableau suivant pr sente la distribution par patiente. 97 % des chantillons s riels (36/37) dont les valeurs avaient augment de mani re significative taient correl s une progression de la maladie alors que 27 % des chantillons s riels (10/37) ne pr sentant aucune modification significative de la concentration en CA 15-3 taient correl s une absence de progression. La concordance totale dans cette tude est de 62 % ou 46/74. Modification du stade de la maladie par patiente Modification de la concentration Pas de en CA 15-3 Progression progression Total > 9,575 % < 9,575 % Total CARACTERISTIQUES SPECIFIQUES Reproductibilit La reproductibilit du dosage ARCHITECT CA 15-3 est < 8 % (CV total). Une tude a t men e conform ment au protocole EP5-A du Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, anciennement NCCLS). 28 Un panel constitu de 5 chantillons base de plasma exempt de fibrine a t analys en double, sur 2 appareils distincts, en utilisant 2 lots de r actifs, 2 fois par jour, pendant 20 jours. Une seule courbe de calibration a t utilis e pour chaque lot de r actifs pendant toute l' tude. Les r sultats de cette tude sont r sum s ci-apr s.* Echan- Conc. tillon du Lot de Appa- moyenne Intra-s rie Total panel r actifs reil n (U/ml) E.T. CV (%) E.T. CV (%) ,6 0,7 2,4 0,9 3, ,0 0,6 2,2 0,7 2, ,2 3,6 3,0 4,5 3, ,6 1,9 1,7 2,4 2, ,6 7,9 3,1 9,5 3, ,9 4,2 1,8 6,5 2, ,7 18,2 3,7 22,3 4, ,8 12,7 2,7 17,3 3, ,1 32,2 4,7 34,6 5, ,2 20,1 3,0 29,5 4,4 R cup ration La r cup ration moyenne du dosage ARCHITECT CA 15-3 est de 100 ± 15 %. Une tude a t men e pour le dosage ARCHITECT CA 15-3 conform ment aux proc dures d crites dans le document Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 29 Des concentrations connues de l'antig ne d fini par l'anticorps DF3 ont t ajout es des chantillons normaux de s rum humain. La concentration en CA 15-3 a t d termin e l'aide du dosage ARCHITECT CA 15-3 II et le pourcentage de r cup ration r sultant a t calcul. Des donn es repr sentatives de cette tude sont r sum es dans le tableau suivant.* Valeur Antig ne d fini Valeur % de Echan- endog ne par DF3 CA 15-3 r cup tillon du dosage ajout mesur e ration a (U/ml) (U/ml) (U/ml) 1 31, , , , , , , , ,0 97 R cup ration moyenne obtenue pour deux concentrations diff rentes indiqu es ci-dessus = 91,8 % a % de r cup ration = Valeur mesur e en CA 15-3 (U/ml) Valeur endog ne en CA 15-3 (U/ml) + x 100 CA 15-3 ajout (U/ml) Parall lisme de dilution Le parall lisme de dilution moyen du dosage ARCHITECT CA 15-3 est de 100 ± 15 % selon une tude effectu e pour le dosage ARCHITECT CA 15-3 conform ment au protocole EP6-P2 30 du Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, anciennement NCCLS). Des chantillons pr sentant des concentrations lev es connues en CA 15-3 ont t dilu s avec le diluant manuel multiparam tre. La concentration en CA 15-3 a t d termin e pour chaque dilution et le pourcentage (%) de r cup ration a t calcul. Des donn es repr sentatives de cette tude sont r sum es dans le tableau suivant.* 6

7 Echan- Facteur de Valeur Valeur % de tillon dilution final attendue obtenue r cup ration a (U/ml) (U/ml) 1 Undiluted 680,4 680,4-1: ,3 490, :2 645,4 322,7 95 1: ,2 184,9 90 1:5 634,0 126,8 93 1:10 603,0 60, Undiluted 754,8 754,8-1: ,1 505,8 94 1:2 648,0 324,0 86 1: ,1 198,5 87 1:5 646,5 129,3 86 1:10 607,0 60, Undiluted 705,0 705,0-1: ,5 501, :2 705,8 352, : ,7 199,3 93 1:5 702,0 140, :10 668,0 66,8 95 Pourcentage de r cup ration moyen de ces trois chantillons dilu s = 92 % Valeurs obtenues x Facteur de dilution a % r cup ration = x 100 Concentration non dilu e Sensibilit analytique La sensibilit du dosage ARCHITECT CA 15-3 est < 0,5 U/ml (n = 24 s ries en r pliques de 10). La sensibilit analytique correspond la limite sup rieure de l'intervalle de confiance de 95 % et repr sente la plus faible concentration en antig ne d fini par l'anticorps DF3 pouvant tre distingu e de z ro. Sp cificit analytique La sp cificit moyenne du dosage ARCHITECT CA 15-3 est < 12 %. Des tudes de r cup ration ont t men es pour comparer les chantillons s riques contenant les substances suivantes aux concentrations indiqu es ci-dessous avec des contr les s riques.* SUBSTANCE INTERFERENTE Substance analys e Concentration analys e Bilirubine 20 mg/dl H moglobine 500 mg/dl Prot ines totales 12 g/dl Triglyc rides 3 g/dl AGENTS CHIMIOTHERAPEUTIQUES Substance analys e Concentration analys e B ta estradiol 6,7 μg/ml Cisplatine 66,7 μg/ml Cyclophosphamide 330 μg/ml Doxorubicine 6,6 μg/ml 5-fluorouracil 280 μg/ml Ac tate de m gestrol 39,6 μg/ml M thotrexate 13,2 μg/ml Mitomycine C 17,2 μg/ml Paclitaxel 3,5 ng/ml Tamoxif ne 5,0 μg/ml Testost rone 33,0 μg/ml Sulfate de vinblastine 1,3 μg/ml FACTEURS CLINIQUES POTENTIELLEMENT INTERFERENTS Le dosage ARCHITECT CA 15-3 a t valu en analysant des chantillons contenant des HAMA et le facteur rhumato de (FR) pour une valuation suppl mentaire de la sp cificit du dosage. 5 chantillons positifs pour les HAMA et 5 chantillons positifs pour le FR ont t valu s pour d terminer le pourcentage de r cup ration en surchargeant chaque chantillon avec l'antig ne d fini par l'anticorps DF3 pour atteindre respectivement 35 et 250 U/ml ; les r sultats obtenus pour le pourcentage de r cup ration moyen sont r sum s dans le tableau ci-apr s.* Facteur clinique Nombre d' chantillons % de r cup ration moyen HAMA FR Effet crochet L'effet de prozone est un ph nom ne par lequel des chantillons de tr s haute concentration peuvent avoir des r sultats compris dans le domaine de mesure du dosage. Pour le dosage ARCHITECT CA 15-3, aucun effet de prozone n'a t observ lors de l'analyse d' chantillons contenant jusqu' environ U/ml d'antig nes d finis par l'anticorps DF3. Comparaison des m thodes Le coefficient de corr lation de la m thode de comparaison du dosage CA 15-3 est > 0,90 et la pente est de 1,0 + 0,15. Le dosage ARCHITECT CA 15-3 a t compar au dosage Abbott AxSYM CA Les r sultats de cette analyse sont indiqu s dans le tableau suivant.* ARCHITECT CA 15-3 vs. Abbott AxSYM CA 15-3 M thode de Nombre Coefficient Ord. l'origine Pente r gression d' chantillons de corr lation (IC 99 %) (IC 99 %) Passing-Bablok 402 0,980-0,3 0,94 (-0,9 0,0) (0,92 0,97) Valeurs des chantillons (ARCHITECT) : 0, ,5 U/ml Valeurs des chantillons (AxSYM) : 4, ,9 U/ml M thode de r gression lin aire sans hypoth ses particuli res concernant la distribution des chantillons et des erreurs de mesure. 31 BIBLIOGRAPHIE 1. Hayes DF, Zurawski VR Jr, Kufe DW. 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