Anti-HBs SYSTEM. Anti-HBs /R7 B7C182 7C18. Faire attention aux modifications R vision de novembre 2009

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1 SYSTEM Anti-HBs fr Anti-HBs 7C /R7 B7C182 Faire attention aux modifications R vision de novembre 2009 Service Clients : Retrouvez le contact de votre Service Clients Abbott sur Suivre scrupuleusement les instructions de cette notice. La fiabilit des r sultats du dosage ne peut pas tre garantie si ces instructions ne sont pas strictement respect es. L gende des symboles utilis s R f rence Num ro de s rie Dispositif m dical de diagnostic in vitro Num ro de lot Date d expiration Lot de r actifs Num ro de contr le Cupules r actionnelles Conserver entre 2 et 8 C Godets- chantillons Septum Attention Consulter les instructions d'utilisation Fabricant Bouchons de remplacement Contient de l azide de sodium. Au contact d un acide, d gage un gaz tr s toxique. L'explication compl te des symboles utilis s pour la d nomination des composants se trouve la partie REACTIFS. 1

2 DENOMINATION ARCHITECT Anti-HBs DOMAINE D APPLICATION ARCHITECT Anti-HBs est un dosage immunologique microparticulaire par chimiluminescence (CMIA) pour la d termination quantitative des anticorps dirig s contre l antig ne de surface du virus de l h patite B (anti-hbs) dans le s rum ou le plasma humain. RESUME ET EXPLICATION DU TEST Le dosage ARCHITECT Anti-HBs d termine la concentration des anticorps dirig s contre l antig ne de surface du virus de l h patite B (anti-hbs) pr sents dans le s rum ou le plasma humain. Le dosage des anticorps anti-hbs est souvent utilis pour v rifier l efficacit du vaccin contre l h patite B. Il a t d montr que la pr sence d anticorps anti-hbs est importante pour assurer la protection contre une infection par le virus de l h patite B (VHB). 1 De nombreuses tudes ont montr que la vaccination contre le virus de l h patite B est efficace pour stimuler la production des anticorps anti-hbs par le syst me immunitaire et pour viter ainsi l infection par le VHB. 2-4 Le dosage des anticorps anti-hbs est galement utilis pour la surveillance de la convalescence et de la gu rison des patients infect s par le virus de l h patite B. La pr sence d anticorps anti-hbs apr s une infection aigu par le VHB et la disparition de l antig ne de surface du virus de l h patite B (AgHBs) peuvent constituer des indicateurs utiles de la gu rison de la maladie. La d tection des anticorps anti-hbs chez un patient asymptomatique peut indiquer que ce dernier a t en contact avec le VHB. Les chantillons dont la concentration en anticorps anti-hbs est inf rieure 10,0 mui/ml sont consid r s comme non r actifs par le dosage ARCHITECT Anti-HBs. Les chantillons dont la concentration en anticorps anti-hbs est sup rieure ou gale 10,0 mui/ml sont consid r s comme r actifs. PRINCIPES BIOLOGIQUES DE LA METHODE ARCHITECT Anti-HBs est un dosage immunologique en deux tapes, utilisant la technologie de dosage immunologique microparticulaire par chimiluminescence (CMIA) pour la d termination quantitative des anticorps anti-hbs dans le s rum ou le plasma humain. Lors de la premi re tape, l chantillon et les microparticules paramagn tiques recouvertes d AgHBs recombinant (raghbs) sont mis en pr sence. Les anticorps anti-hbs pr sents dans l chantillon se lient aux microparticules recouvertes de raghbs. Apr s lavage, le conjugu de raghbs marqu l acridinium est ajout au cours de la deuxi me tape. Apr s un autre cycle de lavage, les solutions de pr activation et d activation sont ajout es au m lange r actionnel. La r action chimiluminescente r sultante est mesur e en unit s de lumi re relatives (RLU). Il existe une relation directe entre la quantit d anticorps anti- HBs pr sente dans l chantillon et les RLU d tect es par le syst me optique ARCHITECT i* System. La concentration en anticorps anti-hbs de l chantillon est d termin e l aide d une courbe de calibration ARCHITECT Anti-HBs pr alablement tablie. Si la concentration de l chantillon est sup rieure ou gale 10,0 mui/ml, l chantillon est consid r comme r actif pour les anticorps anti-hbs. Pour de plus amples informations concernant le syst me et la technologie du dosage, se r f rer au Chapitre 3 du Manuel Technique *i = dosage immunologique REACTIFS Kit de r actifs, 100/500 tests REMARQUE : Certains conditionnements ne sont pas disponibles dans tous les pays ou utilisables sur tous les analyseurs ARCHITECT i Systems. Contacter le distributeur local. Kit de r actifs ARCHITECT Anti-HBs (7C18) 1 ou 4 flacon(s) (4,56 ml pour le flacon de 100 tests/16,80 ml pour le flacon de 500 tests) de microparticules recouvertes de l antig ne (E. coli, recombinant) de surface du virus de l h patite B (sous-types ad et ay) dans du tampon TRIS contenant des stabilisants de prot ines. Concentration minimale : 0,125 % de particules solides. Conservateurs : azide de sodium et agents antimicrobiens. 1 ou 4 flacon(s) (5,9 ml pour le flacon de 100 tests/ 26,3 ml pour le flacon de 500 tests) de conjugu : antig ne (E. coli, recombinant) de surface du virus de l h patite B (soustypes ad et ay) marqu l acridinium dans du tampon MES avec des stabilisants de prot ines (plasmas bovin et humain). Concentration minimale : 0,10 μg/ml. Conservateurs : azide de sodium et agents antimicrobiens. Diluant de dosage Diluant manuel multi-dosages ARCHITECT i (7D82-50) 1 flacon (100 ml) de diluant manuel multi-dosages ARCHITECT i contenant une solution saline tamponn e au phosphate. Conservateur : agent antimicrobien. Autres r actifs Solution de pr activation ARCHITECT i Solution de pr activation contenant 1,32 % (m/v) d eau oxyg n e. Solution d activation ARCHITECT i Solution d activation contenant 0,35 N d hydroxyde de sodium. Tampon de lavage ARCHITECT i Tampon de lavage contenant une solution saline tamponn e au phosphate. Conservateurs : agents antimicrobiens. PRECAUTIONS ET RESTRICTIONS D EMPLOI Pour diagnostic in vitro. Suivre scrupuleusement les instructions de cette notice. La fiabilit des r sultats du dosage ne peut pas tre garantie si ces instructions ne sont pas strictement respect es. Mesures de s curit ATTENTION : Ce produit contient des composants d origine humaine et/ou potentiellement infectieux. Se r f rer la partie REACTIFS de cette notice. Aucune des m thodes d analyse actuellement connues ne peut garantir de fa on absolue que les produits d origine humaine ou d riv s de microorganismes inactiv s ne transmettront pas d infections. Par cons quent, tous les produits d origine humaine doivent tre consid r s comme potentiellement infectieux. Il est recommand de manipuler ces r actifs et les chantillons humains selon les r gles OSHA Standard on Bloodborne Pathogens. 5 Les produits contenant ou susceptibles de contenir des agents infectieux doivent tre manipul s selon les r gles de bios curit de niveau 2 6 ou autres r gles de bios curit en vigueur 7,8. Ce produit contient de l azide de sodium ; se r f rer la partie REACTIFS pour une liste d taill e. Au contact d un acide, d gage un gaz tr s toxique. Ne se d barrasser de ce produit et de son r cipient qu en prenant toutes pr cautions d usage. Pour de plus amples informations sur l' limination appropri e de l'azide de sodium et une explication d taill e des mesures de s curit lors du fonctionnement de l'analyseur, se r f rer au Chapitre 8 du Manuel Technique Le plasma humain utilis dans le conjugu est non r actif pour l AgHBs, l ARN VIH-1 ou l Ag VIH-1, et pour les anticorps anti-vhc, anti-vih-1/vih-2 et anti-hbs. 2

3 Pr cautions d emploi Ne pas utiliser les kits de r actifs au-del de leur date d expiration. Ne pas effectuer de pools de r actifs au sein d un m me kit ou entre plusieurs kits de r actifs. Avant de charger le kit de r actifs ARCHITECT Anti-HBs sur le syst me pour la premi re fois, homog n iser le flacon de microparticules afin de remettre en suspension les microparticules qui peuvent s tre d pos es pendant le transport. Pour de plus amples informations sur l homog n isation des microparticules, se r f rer au paragraphe Proc dure du dosage de la partie PROCEDURE de cette notice. Des septums DOIVENT tre utilis s afin d emp cher l vaporation et la contamination des r actifs et d assurer leur validit. La fiabilit des r sultats du dosage ne peut tre garantie si les septums ne sont pas utilis s conform ment aux instructions de cette notice. Afin d viter toute contamination, porter des gants propres lors de l application d un septum sur un flacon de r actif d bouch. Une fois qu un septum a t plac sur un flacon de r actif ouvert, ne pas retourner le flacon afin d viter toute fuite de r actif et de ne pas compromettre les r sultats du dosage. Apr s un certain temps, il se peut que des liquides r siduels s chent la surface du septum. Il s agit de sels secs qui n ont aucun effet sur la performance du dosage. Pour de plus amples informations sur les pr cautions d emploi lors du fonctionnement du syst me, se r f rer au Chapitre 7 du Manuel Technique Conditions de conservation Le kit de r actifs, les calibrateurs et les contr les ARCHITECT Anti-HBs doivent tre conserv s entre 2 et 8 C en position verticale et peuvent tre utilis s imm diatement apr s leur sortie du r frig rateur (2 8 C). Les r actifs sont stables jusqu leur date d expiration s ils sont conserv s et manipul s selon les indications du fabricant. Le kit de r actifs ARCHITECT Anti-HBs peut tre conserv bord de l ARCHITECT i pendant 30 jours au maximum. Au-del de ce d lai, le kit de r actifs doit tre jet. Pour de plus amples informations sur le temps de conservation des r actifs bord de l appareil, se r f rer au Chapitre 5 du Manuel Technique Les r actifs peuvent tre conserv s l int rieur ou l ext rieur du syst me ARCHITECT i. Si les r actifs sont retir s du syst me, les conserver entre 2 et 8 C (munis de septums et de bouchons de remplacement) en position verticale. Il est recommand de laisser les r actifs conserv s l ext rieur du syst me dans leur emballage d origine afin de les maintenir en position verticale. Si le flacon de microparticules (muni d un septum) ne reste pas dans une position verticale pendant sa conservation au r frig rateur l ext rieur du syst me, le kit de r actifs doit tre jet. Une fois que les r actifs ont t retir s du syst me, d clencher une lecture du carrousel-r actifs afin d actualiser le temps de stabilit des r actifs bord de l appareil. Indications d alt ration des r actifs Un contr le dont la valeur se situe en dehors des limites sp cifi es peut indiquer une alt ration des r actifs ou des erreurs de technique. Les r sultats des chantillons pass s dans la m me s rie ne sont pas valables et ces chantillons devront tre r analys s. Une recalibration du dosage peut tre n cessaire. Pour de plus amples informations sur le d pannage, se r f rer au Chapitre 10 du Manuel Technique FONCTIONNEMENT DE L APPAREIL Avant d effectuer le dosage, le fichier du dosage ARCHITECT Anti-HBs doit tre install sur l ARCHITECT i partir du CD-ROM de dosage ARCHITECT i. Pour de plus amples informations concernant l installation du fichier de dosage, la visualisation et la modification des param tres de dosage, se r f rer au Chapitre 2 du Manuel Technique Pour de plus amples informations sur l impression des param tres de dosage, se r f rer au Chapitre 5 du Manuel Technique Pour une explication d taill e du fonctionnement du syst me, se r f rer au Manuel Technique L unit de r sultat par d faut du dosage ARCHITECT Anti-HBs est la mui/ml. Il est possible de s lectionner une autre unit de r sultat, l UI/l, pour l enregistrement des r sultats en r glant le param tre de dosage Result concentration units (Unit s de concentration r sultats) sur UI/l. Le facteur de conversion utilis par le syst me est de 1. PRELEVEMENT ET PREPARATION DES ECHANTILLONS POUR L ANALYSE Le dosage ARCHITECT Anti-HBs peut tre effectu sur du s rum humain (y compris le s rum pr lev sur des tubes s parateurs de s rum) ou du plasma pr lev sur EDTA potassique, citrate de sodium, ACD, CPDA-1 et h parinate de sodium. Les anticoagulants liquides peuvent avoir un effet diluant et provoquer une baisse des concentrations des chantillons de patients individuels. Aucun autre anticoagulant n a t valid pour l utilisation avec le dosage ARCHITECT Anti-HBs. Suivre les instructions du fabricant de tubes pour le traitement des tubes de pr l vement de s rum ou de plasma. Le syst me ARCHITECT i n est pas configur pour d tecter le type d chantillon utilis pour le dosage ; il revient par cons quent l op rateur de v rifier les types d chantillons utilis s dans le dosage ARCHITECT Anti-HBs. La performance de ce test n a pas t tablie pour les chantillons pr lev s sur des cadavres, ni pour les s cr tions et fluides corporels autres que le s rum ou le plasma humain. Manipuler les chantillons de patients avec pr caution afin d viter toute contamination crois e. Utiliser de pr f rence des pipettes ou des embouts de pipette usage unique. Ce dosage a t con u et valid pour tre utilis avec du s rum ou du plasma humain provenant de patients et de donneurs individuels. L utilisation de pools d chantillons est proscrire car la pr cision des r sultats qu ils fournissent n a pas t valid e. Ne pas utiliser d chantillons inactiv s par la chaleur. Ne pas utiliser d chantillons fortement h molys s. Pour obtenir des r sultats optimaux, v rifier l absence de bulles dans tous les chantillons. Eliminer les bulles l aide d un b tonnet avant l analyse. Utiliser un b tonnet diff rent pour chaque chantillon, afin d viter toute contamination crois e. Pour obtenir des r sultats optimaux, les chantillons de s rum et de plasma ne doivent pas contenir de fibrine, ni de globules rouges ou autres particules en suspension. De tels chantillons peuvent donner des r sultats incoh rents et doivent tre transf r s dans des tubes pour centrifugeuse et centrifug s une vitesse d au moins x g pendant 10 minutes. S assurer que le caillot s est compl tement form dans les chantillons de s rum avant de centrifuger ces derniers. Certains chantillons, en particulier ceux provenant de patients sous traitement anticoagulant ou thrombolytique, peuvent pr senter des temps de coagulation lev s. Si l chantillon est centrifug avant la formation compl te du caillot, la pr sence de fibrine peut entra ner des r sultats erron s. Les chantillons pr lev s sur des patients trait s l h parine peuvent tre partiellement coagul s et donner des r sultats erron s en raison de la pr sence de fibrine. Afin d viter ce ph nom ne, pr lever l chantillon avant de commencer le traitement l h parine. 3

4 La s paration gravim trique n est pas suffisante pour la pr paration des chantillons. Ils doivent tre s par s du caillot ou des globules rouges par centrifugation, selon les recommandations du fabricant de tubes. Les chantillons peuvent tre conserv s avec ou sans le caillot ou les globules rouges au maximum pendant 14 jours entre 2 et 8 C. Si le dosage est effectu plus de 14 jours apr s le pr l vement, s parer le s rum ou le plasma du caillot, du s parateur de s rum ou des globules rouges et le conserver congel ( une temp rature inf rieure ou gale -20 C). Les chantillons congel s doivent tre homog n is s AVEC SOIN apr s d cong lation, en les passant au Vortex une vitesse FAIBLE. Les chantillons centrifug s pr sentant une couche lipidique en surface doivent tre transf r s dans un godet- chantillon ou un tube aliquot. Veiller ne transf rer que l chantillon clarifi sans substances lip miques. les contr les exp rimentaux et les 24 chantillons non r actifs ou les 22 chantillons r actifs surcharg s soumis 4 cycles de cong lation/d cong lation. Les diff rences de performance quantitatives observ es se trouvaient dans les limites de variation acceptables ; Cependant, il est recommand d viter des cycles de cong lation/d cong lation r p t s. Si des chantillons sont exp di s, ils doivent tre conditionn s et tiquet s conform ment la l gislation r gissant le transport des chantillons et des substances infectieuses. Les chantillons peuvent tre exp di s temp rature ambiante, entre 2 et 8 C (glace) ou une temp rature inf rieure ou gale -20 C (carboglace). Ne pas d passer les dur es de conservation indiqu es pr c demment. Avant l exp dition, il est recommand de s parer les chantillons du caillot, du s parateur de s rum ou des globules rouges. les contr les exp rimentaux et les 23 chantillons non r actifs ou les 23 chantillons r actifs surcharg s avec des concentrations lev es de triglyc rides (< 3000 mg/dl)*, bilirubine (< 20 mg/dl)* et h moglobine (< 500 mg/dl)*. les contr les exp rimentaux et les 30 chantillons non r actifs ou les 30 chantillons r actifs surcharg s avec des globules rouges une concentration inf rieure ou gale 0,4 % v/v*. les contr les exp rimentaux et les 21 chantillons non r actifs ou les 20 chantillons r actifs surcharg s avec des concentrations lev es en prot ines (< 12 g/dl)*. Homog n iser les calibrateurs et les contr les ARCHITECT Anti- HBs en les retournant doucement avant utilisation. * Les diff rences de performance quantitatives observ es se trouvaient dans les limites de variation normales. PROCEDURE Mat riel fourni 7C18 Kit de r actifs ARCHITECT Anti-HBs Mat riel n cessaire mais non fourni Syst me ARCHITECT i 7C18-01 Calibrateurs ARCHITECT Anti-HBs 7C18-10 Contr les ARCHITECT Anti-HBs 7D82-50 ARCHITECT i Pour de plus amples informations sur le mat riel requis pour les proc dures de maintenance, se r f rer au Chapitre 9 du Manuel Technique Pipettes ou embouts de pipette (facultatifs) pour la distribution des volumes sp cifi s l cran Demande de patient ou Demande de contr le. Proc dure du dosage Avant de charger le kit de r actifs ARCHITECT Anti-HBs sur le syst me pour la premi re fois, le flacon de microparticules doit tre homog n is afin de remettre en suspension les microparticules qui peuvent s tre d pos es pendant le transport : Retourner le flacon de microparticules 30 fois. V rifier visuellement si les microparticules du flacon sont remises en suspension. S il reste encore des microparticules coll es au flacon, continuer le retourner jusqu ce qu elles soient compl tement remises en suspension. Une fois les microparticules remises en suspension, retirer et jeter le bouchon. Retirer un septum de sa pochette en portant des gants propres. Appliquer le septum d un coup sec sur l ouverture du flacon. Si les microparticules ne sont pas remises en suspension, NE PAS LES UTILISER. Contacter le Service Clients Abbott. Demander une calibration, si n cessaire. Demander les analyses. Pour de plus amples informations sur la demande d analyse des chantillons de patients, des calibrateurs et des contr les, ainsi que sur les proc dures g n rales de fonctionnement, se r f rer au Chapitre 5 du Manuel Technique Charger le kit de r actifs ARCHITECT Anti-HBs sur l ARCHITECT i. V rifier que tous les r actifs requis sont pr sents. S assurer que chaque flacon de r actif est recouvert d un septum. Le volume minimum dans le godet- chantillon est calcul par le syst me et imprim sur le Rapport de la liste des demandes. Ne pas pr lever plus de 10 r pliques partir du m me godet- chantillon. Afin de minimiser les pertes par vaporation, v rifier que le volume d chantillon ad quat est pr sent dans le godet- chantillon avant d effectuer le dosage. Si l chantillon est dans un portoir prioritaire : 125 μl pour le premier dosage Anti-HBs plus 75 μl pour chaque dosage Anti-HBs suppl mentaire effectu dans le m me godet- chantillon. Si l chantillon est analys dans les 3 heures qui suivent le chargement bord de l appareil : 150 μl pour le premier dosage Anti-HBs plus 75 μl pour chaque dosage Anti-HBs suppl mentaire effectu sur le m me godet- chantillon. Si l chantillon reste plus de 3 heures bord de l appareil, un volume d chantillon suppl mentaire est n cessaire. Pour de plus amples informations sur les volumes d chantillons et les pertes par vaporation, se r f rer au Chapitre 5 du Manuel Technique En cas d utilisation de tubes primaires ou aliquots, utiliser une jauge d chantillon afin de s assurer que le volume d chantillon de patient pr sent est suffisant. Homog n iser les calibrateurs et les contr les ARCHITECT Anti-HBs en les retournant doucement avant utilisation. Pour obtenir les volumes requis de calibrateurs et de contr les ARCHITECT Anti-HBs, tenir les flacons la verticale et distribuer 7 gouttes de chaque calibrateur (pour 2 r pliques) ou 5 gouttes de chaque contr le (pour une r plique) dans les godets- chantillons respectifs. Charger les chantillons Pour de plus amples informations sur le chargement des chantillons, se r f rer au Chapitre 5 du Manuel Technique Appuyer sur la touche LANCER. Le syst me ARCHITECT i ex cute les op rations suivantes : D place l chantillon vers le point d aspiration. Charge une cupule r actionnelle (CR) dans la couronne r actionnelle. Aspire et distribue l chantillon dans la CR. D place la CR d une position et distribue les microparticules dans la CR. Homog n ise, incube et lave le m lange r actionnel. Ajoute le conjugu dans la CR. Homog n ise, incube et lave le m lange r actionnel. Ajoute les solutions de pr activation et d activation. Mesure l mission chimiluminescente pour d terminer la quantit d anticorps anti-hbs pr sents dans l chantillon. Evacue le contenu de la CR dans la poubelle pour d chets liquides et d charge la CR dans la poubelle pour d chets solides. Calcule le r sultat. 4

5 Pour une performance optimale, il est important de suivre les proc dures de maintenance habituelles d crites au Chapitre 9 du Manuel Technique Si votre laboratoire exige une maintenance plus fr quente, se conformer cette exigence. Proc dures de dilution des chantillons Les chantillons dont la concentration en anticorps anti-hbs est sup rieure mui/ml sont annot s > miu/ml et peuvent tre dilu s l aide 1) du protocole de dilution automatique ou 2) de la proc dure de dilution manuelle. 1) Protocole de dilution automatique (pour des concentrations allant jusqu mui/ml) Le syst me dilue l chantillon au 1/15 me, puis calcule automatiquement la concentration de l chantillon avant dilution et enregistre le r sultat. 2) Proc dure de dilution manuelle (pour des concentrations allant jusqu mui/ml) La dilution manuelle sugg r e pour le dosage Anti-HBs est de 1/100 me. Des dilutions sup rieures au 1/100 me sont d conseill es. Pour une dilution au 1/100 me, ajouter 10 μl d chantillon de patient 990 μl de diluant manuel multi-dosages ARCHITECT i (7D82). L op rateur doit saisir le facteur de dilution sur l cran Demande de patient ou Demande de contr le. Tous les dosages s lectionn s pour cette demande seront dilu s. Le syst me utilisera ce facteur de dilution afin de calculer automatiquement la concentration de l chantillon avant la dilution et d enregistrer le r sultat. La concentration enregistr e par l ARCHITECT i DOIT tre sup rieure 10,0 mui/ml. Si la concentration enregistr e est inf rieure 10,0 mui/ml, utiliser une dilution plus faible. Les chantillons dont la concentration en anticorps anti-hbs est sup rieure mui/ml peuvent tre dilu s l aide 1) du protocole de dilution automatique et de la proc dure de dilution manuelle ou 2) de la proc dure de dilution manuelle. 1) Protocole de dilution automatique et proc dure de dilution manuelle (pour des concentrations allant jusqu mui/ml) La dilution manuelle sugg r e pour le dosage Anti-HBs est de 1/100 me. Des dilutions sup rieures au 1/100 me sont d conseill es. Pour une dilution au 1/100 me, ajouter 10 μl d chantillon de patient 990 μl de diluant manuel multi-dosages ARCHITECT i (7D82). Demander le protocole de dilution automatique pour l chantillon dilu manuellement au 1/100 me. La concentration enregistr e par l ARCHITECT i DOIT tre sup rieure 10,0 mui/ml. Afin d obtenir la concentration finale de l chantillon, multiplier le r sultat (obtenu par le protocole de dilution automatique) par le facteur de dilution manuelle (par exemple 100). Si la concentration enregistr e par l ARCHITECT i est inf rieure 10,0 mui/ml, utiliser une dilution plus faible. 2) Proc dure de dilution manuelle (pour des concentrations allant jusqu mui/ml) La dilution manuelle sugg r e pour le dosage Anti-HBs est de 1/100 me. Des dilutions sup rieures au 1/100 me sont d conseill es. Pour une dilution au 1/100 me, ajouter 10 μl d chantillon de patient 990 μl de diluant manuel multi-dosages ARCHITECT i (7D82). L op rateur doit saisir le facteur de dilution sur l cran Demande de patient ou Demande de contr le. Tous les dosages s lectionn s pour cette demande seront dilu s. Le syst me utilisera ce facteur de dilution afin de calculer automatiquement la concentration de l chantillon avant la dilution et l enregistrement du r sultat. La concentration enregistr e par l ARCHITECT i DOIT tre sup rieure 10,0 mui/ml. Si la concentration enregistr e est inf rieure 10,0 mui/ml, utiliser une dilution plus faible. Pour de plus amples informations sur les demandes de dilution, se r f rer au Chapitre 5 du Manuel Technique Calibration Pour effectuer une calibration ARCHITECT Anti-HBs, analyser les calibrateurs 1 et 2 en double. Un chantillon de chacun des contr les Anti-HBs doit tre analys afin de pouvoir valuer la calibration du dosage. S assurer que les valeurs des contr les du dosage se trouvent dans les limites de concentration sp cifi es dans la notice des contr les. Les calibrateurs doivent tre charg s en priorit. Plage de calibration : mui/ml. Lorsque la calibration du dosage ARCHITECT Anti-HBs a t accept e et m moris e, tous les chantillons suivants peuvent tre analys s sans nouvelle calibration, sauf si : Un kit de r actifs portant un nouveau num ro de lot est utilis ; Les valeurs des contr les se trouvent en dehors des limites sp cifi es. Pour de plus amples informations sur la proc dure de calibration du dosage, se r f rer au Chapitre 6 du Manuel Technique PROCEDURES DU CONTROLE DE QUALITE REMARQUE : Il est recommand d analyser le contr le positif 1, le contr le positif 2 et le contr le n gatif ARCHITECT Anti-HBs pour v rifier la calibration. Le contr le de qualit recommand pour le dosage ARCHITECT Anti- HBs consiste analyser un chantillon de chacun des contr les une fois toutes les 24 heures, chaque jour d utilisation. Si les proc dures du contr le de qualit de votre laboratoire requi rent une utilisation plus fr quente des contr les pour v rifier les r sultats d analyses, se conformer ces exigences. S assurer que les valeurs des contr les du dosage se trouvent dans les limites de concentration sp cifi es dans la notice des contr les. REMARQUE : Pour les instructions sp ciales concernant l analyse des contr les ayant une concentration de 0 mui/ml (contr le n gatif ARCHITECT Anti-HBs), se r f rer la notice des contr les ARCHITECT Anti-HBs. V rification des performances du dosage Pour de plus amples informations sur les protocoles de v rification des performances du dosage mentionn es dans la notice, se r f rer l Annexe B du Manuel Technique Le dosage ARCHITECT Anti-HBs appartient au groupe 4. RESULTATS Le dosage ARCHITECT Anti-HBs utilise une m thode de traitement des donn es par l ajustement de la courbe logistique 4 param tres (4PLC, pond ration en X) pour cr er une courbe de calibration. Interpr tation des r sultats Les chantillons dont la concentration est inf rieure 10,00 mui/ml sont consid r s comme non r actifs selon les crit res du dosage ARCHITECT Anti-HBs. Les chantillons dont la concentration est sup rieure ou gale 10,00 mui/ml sont consid r s comme r actifs selon les crit res du dosage ARCHITECT Anti-HBs. REMARQUE : Pour de plus amples informations sur la configuration des interpr tations Grayzone et High Reactive sur l ARCHITECT i System, se r f rer au Chapitre 2 du Manuel Technique Les param tres d interpr tation Grayzone et High Reactive sont modifiables et doivent tre utilis s selon les exigences des m decins. Annotations La rubrique Annotations peut contenir des informations sur certains r sultats. Une description des annotations qui apparaissent dans cette rubrique est fournie au Chapitre 5 du Manuel Technique LIMITES DE LA METHODE Si les concentrations en anticorps anti-hbs ne correspondent pas l observation clinique, il est recommand d effectuer un dosage suppl mentaire afin de pouvoir confirmer le r sultat. Afin de diagnostiquer une infection aigu, chronique ou gu rie, les r sultats doivent tre utilis s en association avec les ant c dents m dicaux du patient et les dosages d autres marqueurs de l h patite. Les chantillons contenant des particules en suspension ou des globules rouges devront tre centrifug s avant de lancer l analyse. 5

6 La performance de ce test n a pas t tablie pour les chantillons pr lev s sur des cadavres, ni pour les s cr tions et fluides corporels autres que le s rum ou le plasma humain. Ne pas utiliser d chantillons inactiv s par la chaleur. Les chantillons pr lev s sur des patients trait s l h parine peuvent tre partiellement coagul s et donner des r sultats erron s en raison de la pr sence de fibrine. Afin d viter ce ph nom ne, pr lever l chantillon avant de commencer le traitement l h parine. Les r sultats quantitatifs obtenus par d autres m thodes d analyses (par ex. MEIA, EIA ou RIA) peuvent ne pas tre quivalents et ne peuvent tre utilis s de mani re interchangeable. Une nouvelle valeur de base pour l utilisation du dosage ARCHITECT Anti-HBs doit tre tablie pour le suivi des patients vaccin s. CARACTERISTIQUES SPECIFIQUES Reproductibilit La reproductibilit du dosage ARCHITECT Anti-HBs a t d termin e lors d tudes cliniques r alis es sur 3 lots de r actifs. Un panel compos de 5 chantillons uniques a t analys en r pliques de 4 avec chaque lot de r actifs, 1 fois par jour pendant 5 jours, dans 3 laboratoires. Chaque s rie comprenait les contr les positifs ARCHITECT, dont chacun a t analys en double en d but et en fin d analyse. Les carts-type (E.T.) et les coefficients de variation (CV en %) intra-s rie et inter-s ries ont t d termin s l aide d une analyse des composantes de la variance 9 pour un mod le randomis 10 (tableau I). TABLEAU I Reproductibilit du dosage ARCHITECT Anti-HBs Nombre Echan- total de Intra- Intertillons du R pli- Moyenne s rie s ries a Total b panel ques mui/ml E.T. CV (%) E.T. CV (%) E.T. CV (%) ,67 0,302 6,5 0,403 8,6 0,613 13, ,60 0,434 3,0 0,708 4,9 1,367 9, ,75 3,082 3,9 4,130 5,2 7,085 8, ,04 4,752 1,9 7,565 3,0 19,464 7, ,20 14,474 3,0 19,225 3,9 38,688 7,9 Contr le positif ,18 0,687 4,2 0,765 4,7 1,388 8,6 Contr le positif ,06 1,934 2,4 2,460 3,0 6,045 7,4 a La variabilit inter-s ries comprend la variabilit intra-s rie. b La variabilit totale comprend la variabilit intra-s rie, inter-s ries, interlots et inter-laboratoires. Sensibilit Un total de 389 chantillons provenant de 248 individus vaccin s contre le VHB, de 41 individus gu ris de l infection par le VHB et de 100 individus pr sentant un risque de contracter une infection par le VHB ont t analys s. Sur les 389 chantillons, 340 (87,40 %) taient r actifs de mani re r p table et positifs par un dosage suppl mentaire (tableau II). TABLEAU II R activit du dosage ARCHITECT Anti-HBs dans des chantillons provenant d individus vaccin s contre le VHB, d individus dont l infection par le VHB est gu rie et d individus risque lev de contracter une infection par le VHB. Nombre Nombre d chantillons d chantillons positifs par r actifs un dosage Nombre de fa on suppl mentaire d chantillons r p table (% des r actifs Cat gorie test s (% du total) de fa on r p table) Patients vaccin s contre le VHB (98,79 %) 245 (100,00 %) Patients dont l infection par le VHB est gu rie a (95,12 %) 39 (100,00 %) Patients ayant un risque lev d infection b par le VHB (56,00 %) 56 (100,00 %) TOTAL (87,40 %) 340 (100,00 %) a 2 chantillons taient r actifs pour les anticorps anti-hbc et anti-hbe mais non r actifs pour les anticorps anti-hbs par RIA. b sont comprises les cat gories d chantillons suivantes : toxicomanes par voie intraveineuse (34), patients h modialys s (33) et patients h mophiles (33). Panels d chantillons de sang s riels provenant d individus vaccin s contre le VHB. Un total de 90 chantillons comprenant 15 panels d chantillons de sang s riels provenant d individus vaccin s contre le VHB ont t analys s. Le vaccin a t administr en 3 injections sur une p riode de 6 mois. Tous les chantillons pr lev s un mois apr s la troisi me et derni re injection taient r actifs par le dosage ARCHITECT Anti-HBs. Corr lation Le dosage ARCHITECT Anti-HBs a t compar un dosage disponible dans le commerce pour d terminer la corr lation avec la m thode de r gression de Passing-Bablok 11 et de la corr lation de Spearman Rank. 12 La comparaison a t effectu e en utilisant les r sultats de 187 chantillons provenant d individus vaccin s contre le VHB et d individus dont l infection par le VHB est gu rie. Le coefficient de corr lation tait de 0,906, la pente de 1,07 et l ordonn e l origine de -3,01. Sp cificit 3 laboratoires cliniques ont analys un total de chantillons de s rum et de plasma provenant des cat gories suivantes : donneurs de sang total volontaires, couples d chantillons de s rum et de plasma, patients hospitalis s pris au hasard, sympt mes sans relation avec une infection par le VHB et substances potentiellement interf rentes. Un total de 259 (15,09 %) sur les chantillons taient r actifs de fa on r p table et 254 (98,07 %) de ces 259 chantillons taient positifs par un dosage suppl mentaire (tableau III). TABLEAU III R activit du dosage ARCHITECT Anti-HBs dans des chantillons provenant de donneurs de sang total volontaires, dans des chantillons de plasma provenant de couples d chantillons s rum/plasma, dans des chantillons de patients hospitalis s et dans des chantillons d individus pr sentant des sympt mes sans relation avec une infection par le VHB et des chantillons contenant des substances potentiellement interf rentes Nombre Nombre d chantillon d chantillons positifs par r actifs un dosage Nombre de fa on suppl mentaire a d chantillons r p table (% des r actifs Cat gorie test s (% du total) de fa on r p table) Donneurs de sang total (15,31 %) 151 (98,05 %) volontaires Echantillons de plasma provenant de couples 50 8 (16,00 %) 8 (100,00 %) d chantillons s rum/plasma Patients (13,00 %) 63 (96,92 %) hospitalis s Sympt mes sans relation avec une infection par le VHB (20,00 %) 32 (100,00 %) et substances potentiellement interf rentes b TOTAL (15,09 %) 254 (98,07 %) a Une analyse suppl mentaire des anticorps anti-hbc et anti-hbe et de l AgHBs a t effectu e pour confirmer la pr sence de l anticorps anti-hbs dans les chantillons r actifs par le dosage ARCHITECT Anti-HBs. La d tection des anticorps anti-hbs par RIA a galement t effectu e. Un chantillon tait d fini comme positif pour les anticorps anti-hbs si un ou plusieurs des marqueurs du VHB suivants taient d tect s : anticorps anti-hbs (d tect s par la m thode de comparaison ou par RIA), anticorps anti-hbc, anti-hbe ou AgHBs. b Sont comprises les cat gories d chantillons suivantes : positifs pour les anticorps anti-cmv (10), anti-ebv (10), anti-hsv (10), anti-vha (10), anti- VHC (10), anti-vih-1 (10), anti-rub ole (10), anti-toxoplasmose (10), pr sentant une infection par E. coli (10), par une levure (10), positifs pour la syphilis (10), positifs pour les anticorps anti-nucl aires (10), facteur rhumato de (10), my lome multiple (10), positifs pour l AgHBs (10) et cirrhose du foie due l alcool (10). 6

7 Sp cificit et sensibilit globales La sp cificit et la sensibilit globales ont t estim es partir des r sultats de chantillons analys s avec le dosage ARCHITECT Anti-HBs dans 5 laboratoires. Pour repr senter des chantillons uniques, les r sultats des panels d chantillons de sang s riels provenant d individus vaccin s contre le VHB et les chantillons s riques provenant de couples s rum/plasma ont t exclus de ces calculs. La sp cificit globale a t estim e comme tant gale 99,67 % (1 491/1 496) avec un intervalle de confiance 95 % compris entre 99,22 % et 99,89 %. La sensibilit globale a t estim e comme tant gale 97,54 % (594/ 609) avec un intervalle de confiance 95 % compris entre 95,97 % et 98,62 %. BIBLIOGRAPHIE 1. Wainwright RB, McMahon BJ, Bulkow LR, et al. Duration of Immunogenicity and Efficacy of Hepatitis B Vaccine in a Yupik Eskimo Population Preliminary Results of an 8-year Study. In: Hollinger FB, Lemon SM, Margolis HS, editors. Viral Hepatitis and Liver Disease. Baltimore: Williams & Wilkins, 1991: Ambrosch F, Frisch-Niggemeyer W, Kremsner P, et al. Persistence of Vaccine-induced Antibodies to Hepatitis B Surface Antigen and the Need for Booster Vaccination in Adult Subjects.Postgrad Med J 1987;63(S2): Krugman S, Giles JP, Hammond J. Viral Hepatitis Type B (MS-2 Strain): Studies on Active Immunization. JAMA 1971;217: Jilg W, Schmidt M, Deinhardt F. Immune Response to Hepatitis B Revaccination. J Med Virol 1988;24: US Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration, 29 CFR Part , Bloodborne pathogens. 6. US Department of Health and Human Services. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. 5th ed. Washington, DC: US Government Printing Office; January World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual. 3rd ed. Geneva: World Health Organization; Clinical and Laboratory Standards Institute. Protection of Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections: Approved Guideline Third Edition. CLSI Document M29-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; Box GEP, Hunter WG, Hunter JS. Statistics for Experimenters: An Introduction to Design, Data Analysis, and Model Building. New York: John Wiley & Sons, Inc, 1978:510-39, SAS Institute Inc. The MIXED Procedure. In: SAS Technical Report P-229, SAS/STAT Software: Changes and Enhancements, Release Cary, NC: SAS Institute Inc, 1992: Passing H, Bablok W. A New Biometrical Procedure for Testing the Equality of Measurements from Two Different Analytical Methods. J Clin Chem.Clin Biochem.1983; 21: Netter J, Wasserman W, Kutner M. Applied Linear Regression Models. Boston: IRWIN, 1989: ARCHITECT est une marque commerciale d Abbott Laboratories dans plusieurs pays. Les brevets am ricains suivants s appliquent au syst me ARCHITECT ou ses composants. D autres brevets et demandes de brevets existent aux Etats-Unis et dans d autres pays. 5,468,646 5,543,524 5,545,739 5,565,570 5,669,819 5,783,699 Abbott Ireland Diagnostics Division Finisklin Business Park Sligo Ireland Novembre , 2009 Abbott Laboratories 7