et de Cytologie Pathologiques

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MANUEL DE PRÉLÈVEMENT Service d Anatomie et de Cytologie Pathologiques CRÉDIT PHOTO : GHICL - JUILLET 2015 - VERSION 1

MANUEL DE PRELEVEMENT ACP VERSION 1 JUILLET 2015 SERVICE ANATOMIE ET CYTOLOGIE PATHOLOGIQUES Il réalise des examens d anatomie et de cytologie pathologiques Horaires d ouverture du secrétariat : Du lundi au vendredi De 8h30 à 17h30 Horaires d ouverture technique : Du lundi au vendredi de 7h30 à 18h00 Samedi de 8h00 à 12h00 Réception des prélèvements jusque 17h30 en semaine et 11h30 le samedi hors prélèvements particuliers 03 20 87 45 62 03 20 87 48 27 CONTACTS POLE HOSPITALO-UNIVERSITAIRE DE BIO-PATHOLOGIE DU GHICL ANATOMIE ET CYTOLOGIE PATHOLOGIQUES Chef de service : Pr Pierre GOSSET Anatomopathologiste : Dr Stephanos PAPADOPOULOS Anatomopathologiste : Dr Jean François QUINCHON Anatomopathologiste : Dr Adriana MIHALACHE CELLULE QUALITE Biologiste Responsable Qualité : Dr Anne-France GEORGEL Suppléant : Mme Ophélie DUMORTIER Suppléant : M. Philippe DEJARDIN CADRE DE SANTE M. Damien LAMBERTON Suppléant : Mme Elodie DEROMBISE Table des matières GENERALITES... 3 PRESCRIPTION... 4 AJOUT D ANALYSES... 4 MATERIEL UTILISE... 5 PROCEDURES D ACHEMINEMENT... 6 PRELEVEMENTS ANATOMO-PATHOLOGIQUES... 6 PRELEVEMENTS CYTOLOGIQUES... 8 PROTOCOLES D ESSAIS CLINIQUES ET THERAPEUTIQUES... 10 2

GENERALITES L EXAMEN D ANATOMIE ET DE CYTOLOGIE PATHOLOGIQUES C est un examen qui s appuie sur l observation morphologique des cellules, tissus, organes ou leurs dérivés. Il est basé sur des techniques, standards ou spéciales : histopathologiques, histochimiques, immunohistochimiques ou moléculaires. L examen d anatomie et cytologie pathologiques a plusieurs objectifs : diagnostic de maladie ou de dépistage, thérapeutique ou de suivi particulier. Il est aussi pronostique via le recueil des éléments clés de la réalisation de grades ou scores ; prédictif et à impact thérapeutique. Il est finalisé par un compte rendu textuel transmis aux médecins en charge du patient dans le cadre du soin. Un examen d anatomie et cytologie pathologiques se déroule en trois phases : la phase pré-analytique : Le prélèvement, effectué par le préleveur demandeur, est acheminé dans le service d anatomie et cytologie pathologiques. Il est accompagné d une feuille de demande d examen, qui est renseignée par le médecin demandeur et comporte les renseignements d identité et de contexte clinique nécessaires au diagnostic. L étape administrative d enregistrement est importante et renseigne : identité, numéro d examen et inventaire de prélèvements reçus. la phase analytique : Les cellules ou fragments de tissus sont traités et rendus observables au microscope par création de préparations colorées sur lames. Après un premier examen microscopique, le médecin pathologiste peut compléter son diagnostic par la demande de techniques spéciales, basées sur des principes de chimie, histochimie, histoenzymologie, immunohistochimie, et biologie moléculaire. la phase post-analytique : Le médecin pathologiste traduit son observation microscopique afin d établir une interprétation contextuelle du résultat. Le compte-rendu est ensuite communiqué aux différents correspondants, par courrier papier et support informatique (DPI et Apicrypt). Les modes de transmission des comptes-rendus sont décrits par la procédure HE2-ACP-PR02- Transmission des résultats en ACP. 3

MANUEL DE PRELEVEMENT ACP VERSION 1 JUILLET 2015 PRESCRIPTION La prescription est assurée par un professionnel habilité et doit répondre à une question clinique. Elle s appuie sur les recommandations de bonnes pratiques et si nécessaire sur un échange entre clinicien et anatomo-pathologiste. Le bon de demande d examen est daté et comporte les renseignements pré-analytiques (date, heure de prélèvement et NOM COMPLET du préleveur) et cliniques nécessaires à l interprétation des examens d anatomie pathologique. S il s agit d une prescription, celle-ci doit être en plus signée. Une information doit être donnée au patient et son consentement obtenu notamment dans le cadre de la tumorothèque et de foetopathologie. Deux bons de demande d examens spécifiques au service d anatomie et cytologie pathologiques sont disponibles : Prescription d étude anatomo-cytopathologique non urgente Prescription d étude anatomo-cytopathologique urgente Fiche de liaison pour examen cytologique et histopathologique Bon d urgence Les bons de demande doivent être complétés à l aide des cases prévues à cet effet et l ensemble des informations demandées doit y être retrouvé. Eviter les abréviations. Signaler sur les fiches de liaison les prélèvements à risque contaminant Tous les prélèvements, même ceux qui seront traités par un laboratoire extérieur à l établissement, doivent transiter par le service d anatomie et cytologie pathologiques qui prend en charge leur acheminement, en accord avec le service demandeur. AJOUT D ANALYSES Il est possible de réaliser certaines analyses complémentaires sur les prélèvements déjà reçus. Le rajout est validé par le laboratoire en fonction du volume d échantillon restant. Il doit être confirmé par l envoi d une nouvelle prescription. 4

MATERIEL UTILISE (fourni par le service d ACP) Flacons à bouchon bleu 20 ml de formol ROSE tamponné pbs 4 % Flacons à bouchon bleu 65 ml de formol tamponné pbs 4 % Sachet TissueSAFE Pots pour transport des pièces anatomiques Cubi (10L) 498 mm x 298mm Contenance : 1 L ou 2.5 L ou 5 L Formol dilué Flacons à bouchon jaune Alcool à 50 % Kit frottis liquide Thinprep + cytobrush Flacons à bouchon vert Liquide de Michel Cryotubes Tubes coniques de 50 ml à bouchon bleu Cytolyt Lames et boites de transport de lames Prescription médicale non urgente Prescription médicale urgente Glacières pour transport de prélèvements Sachets Tissue Safe pour transport de pièce fraîche sous-vide Sachets secondaires de transport sur route Réservées aux blocs opératoires Réservés aux blocs opératoires Réservés aux prélèvements extérieurs à Saint Vincent 5

MANUEL DE PRELEVEMENT ACP VERSION 1 JUILLET 2015 Commande du matériel La commande de matériel s effectue via le bon de commande disponible sur intranet. La demande doit parvenir au service d anatomie et cytologie pathologiques le lundi dernier délai pour une préparation et une livraison dans la semaine. Cette demande peut parvenir par fax au 03.20.87.48.27 ou directement dans le service d Anatomie et Cytologie Pathologiques. PROCEDURES D ACHEMINEMENT Les prélèvements en provenance de l Hôpital Saint Philibert sont à déposer par les services de soins au Laboratoire de Biologie de Saint Philibert. Un cahier de traçabilité de dépôt de prélèvements (HC3-ENR10 - Cahier de traçabilité des prélèvements d'anatomo-cytopathologie déposés au LBM St Philibert) est à renseigner à l accueil du laboratoire. Tous les champs doivent être complétés et il est demandé d annoter un patient par ligne. Pour les prélèvements nécessitant un transport sur route (respect du triple emballage) : Mettre le pot dans un sachet de transport (+ absorbant). Mettre une étiquette patient sur le sachet de transport. Insérer la prescription dans la poche kangourou. Prélèvements anatomo-pathologiques : Prélèvements anatomo-pathologiques URGENTS : Bon d Urgence Sans fixateur : flacon vide ou pot Ou compresse imbibée de sérum physiologique pour les petits fragments Types de prélèvements Acheminement en «urgence immédiate» Examen extemporané, Prélèvement ganglionnaire (pour recherche de lymphome), Sarcome, tumeur pédiatrique, Fœtus, Etude en biologie moléculaire, Biopsies musculaires, Etude en immunofluorescence (pour Saint Vincent de Paul), Vaccinothérapie. Prévenir 48 h à l avance le service d anatomie et cytologie pathologiques au 03.20.87.45.62 ou 42.13 en précisant le service demandeur, la date, l heure et la nature du prélèvement Faire parvenir au service d anatomie et cytologie pathologiques avant 17h en semaine (15h pour les biopsies musculaires) et avant 11h le samedi A remettre en mains propres au personnel d anatomie et cytologie pathologiques Seuls les examens ayant été soumis à cette procédure seront assurés avec certitude. Des protocoles spécifiques sont disponibles sur intranet à l'emplacement : Services Hospitaliers - Laboratoires - Protocoles - Prélèvements - Anapath. 6

Prélèvements Anatomo-pathologiques NON URGENTS : Acheminement non urgent: Isoler la fiche de liaison du flacon (pas de contamination par le formol) Identifier le contenant par une étiquette patient Numéroter les flacons si plusieurs Grosses pièces opératoires : orienter la pièce (fils) si nécessaire, Plusieurs contenants possibles : Sachets TissueSAFE pour pièce fraîche sous-vide (blocs opératoires Saint Philibert et Saint Vincent) : à conserver au réfrigérateur avant transport Formol : choisir la taille adéquate du contenant par rapport au prélèvement : Flacons à bouchon bleu pré-remplis en formol Pots vides : 1 volume de formol dilué égal au 2/3 du volume de la pièce. Biopsies ou petites pièces opératoires : Petits flacons à bouchon bleu : formol Etude en immunofluorescence (Saint Philibert et extérieurs au GHICL) : Petits flacons bouchon vert : liquide de Michel 7

MANUEL DE PRELEVEMENT ACP VERSION 1 JUILLET 2015 Prélèvements cytologiques : Prélèvements cytologiques URGENTS : Bon d Urgence Sans fixateur Acheminement en «urgence immédiate»: Faire parvenir au service d anatomie et cytologie pathologiques dans les plus brefs délais avant 17h en semaine et avant 11h le samedi (sinon à conserver à 4 C) A remettre en mains propres au personnel d anatomie et cytologie pathologiques LCR LBA Liquide articulaire Types de prélèvements Particularité : cils bronchiques : Amenés immédiatement dans sérum physiologique à température ambiante Prévenir le service d anatomie et cytologie pathologiques au 03.20.87.45.62 ou 42.13 la veille 8

Prélèvements Cytologiques NON URGENTS : Acheminement non urgent : Isoler la fiche de liaison du flacon (pas de contamination par le fixateur) Identifier le contenant par une étiquette patient Numéroter les flacons si plusieurs Plusieurs types de fixations possibles Alcool : flacons bouchon jaune : Fixation immédiate en quantité équivalente au volume de liquide Lames fixées : vaporiser un spray fixateur à + de 20 cm de la lame, laisser sécher avant de ranger dans les porte-lames. Lames sèches : sécher à l air libre au moins 10 mn avant de ranger dans les porte-lames. Cytolyt : flacon 50 ml conique à bouchon bleu : Projeter le matériel et/ou rincer la seringue dans le tube cytolyt. Milieu liquide : kit Thinprep (flacon bouchon blanc et cytobrush) : Détacher et déposer la tête de la brosse dans le flacon de fixateur après réalisation du frottis. Prélèvements cytologiques usuels Liquide urinaire, Liquide pleural, Liquide péricardique, Alcool Liquide d ascite ou péritonéal, Aspiration bronchique Prélèvements particuliers Frottis cervico-vaginaux en cytologie conventionnelle : Frottis cervico-vaginaux en cytologie en couche mince : Ponctions d organes profonds : Ganglions et autres prélèvements (cytologie voies biliaires, thyroïde ) : Lames fixées Milieu liquide Lésion solide ou semi-solide : cytolyt Prélèvement purement liquidien : alcool Prélèvement superficiel : étalement Etalements secs et fixés à préciser sur la fiche de liaison et sur le porte-lame, ainsi que leur nombre Les examens immunocytochimiques ne seront possibles que sur étalement sec. 9

MANUEL DE PRELEVEMENT ACP VERSION 1 JUILLET 2015 PROTOCOLES D ESSAIS CLINIQUES ET THERAPEUTIQUES Avant la mise en place d'un protocole, le chef de service d Anatomie Pathologique doit être informé. Un cahier des charges du protocole d'essai clinique doit lui être adressé et les bons de demande soumis à son approbation : Nom du protocole, Marche à suivre, Durée, Envoi des échantillons à l'extérieur : la logistique de l envoi est à la charge du responsable de l essai Financement de la société de transport Commande du milieu de transport (ex : carboglace) Prise en charge des analyses, Et toute autre information permettant d effectuer le protocole dans les meilleures conditions Aucune analyse ne sera réalisée et aucun prélèvement ne sera conservé sans concertation. 10