Virus de l hépatite B et marqueurs Le virus de l hépatite B (VHB) Virus VHB: Hepadnavirus,, ADN enveloppé. Modes de transmission principaux: Parentérale Nosocomiale Toxicomanie intraveineuse Sexuelle Mère-enfant enfant (verticale) Familiale (horizontale). Formes fulminantes: 1 pour 1000. Passage à la chronicité: pour 5 à 10% des adultes (plus fréquent chez l homme). -1- -2- Anaes, Février 2001. Diagnostic et suivi virologiques des hépatites virales. Gastroenterol Clin Biol. 2003 ; 27 :177-200.
Le virus de l hépatite B (VHB) Risque de transmission mèrem re-enfant enfant élevé: 20 à 90%. fonction de la charge virale B (réplication importante). Nouveau-né infecté à la naissance 100% de chronicité! La vaccination Prévient le risque de contamination Fortement conseillée e dans les groupes à risque dont : Sérovaccination des nouveaux-nés s de mères m AgHBs+!!! La vaccination universelle des nourrissons est vivement recommandée! e! -3- Anaes, Février 2001. Diagnostic et suivi virologiques des hépatites virales. Gastroenterol Clin Biol. 2003 ; 27 :177-200. Bernard P.H. Sérologie des hépatites B et C : interprétation et conséquences pratiques chez la femme. Gynécologie Obstétrique & Fertilité. 2005 ; 33: 423-428. -4-
Représentation schématique du virus de l hépatite B (VHB) Enveloppe Capside ADN Viral Code pour: -Protéine S de surface (AgHBs) -Protéine de nucléocapside C (Anticorps antihbc) -Protéine sécrétée dont épitope e (AgHBe) -5- -6-1-Anaes, Février 2001. Diagnostic et suivi virologiques des hépatites virales. Gastroenterol Clin Biol. 2003 ; 27 :177-200.
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Histoire naturelle de l hépatite B L histoire naturelle de l infection à VHB est: Complexe Variable: Age au moment de l infectionl Niveau de réplication r virale Statut immunitaire. Fattovich G. Natural history and prognosis of hepatitis B. Seminars in Liver Disease 2003; 23, 1: 47-58. Hépatite B aiguë résolutive aiguë récente immunisation Ag HBs Anti HBc Anti HBs Ag HBe Anti HBe -9- -10-
Évolution des marqueurs sérologiques et moléculaires Niveau d antigène ou d anticorps Infection VHB aigue contrôlée : ADN VHB Ag HBs Ag-HBe Anti HBc ALAT Anti-HBe Anti-HBs 0 5 10 15 2 >10 Semaines après infection Années après infection D après Ganem D. Prince A.M. Hepatitis B virus infection: Natural history and clinical consequences.n Engl J Med 2004; 350: 1118-1129 Histoire naturelle de l hépatite B L infection chronique VHB: Persistance de l Ag HBs plus de 6 mois après l infection initiale Phase réplicative r précoce = Maladie hépatique h active Phase tardive non réplicative r + Séroconversion AgHBe + rémission de la maladie hépatiqueh = Porteur chronique inactif plicative (ou bas niveau de réplication) r AgHBe (apparition des anticorps anti-hbe HBe) -11- -12- Fattovich G. Natural history and prognosis of hepatitis B. Seminars in Liver Disease 2003; 23, 1: 47-58.
Évolution des marqueurs sérologiques et moléculaires Niveau d antigène ou d anticorps Infection VHB chronique ADN VHB Ag HBs Ag-HBe Anti HBc ALAT Anti-HBe Anti-HBs 0 5 10 15 2 >10 Semaines après infection Années après infection D après Ganem D. Prince A.M. Hepatitis B virus infection: Natural history and clinical consequences.n Engl J Med 2004; 350: 1118-1129 Phases de l infection VHB Phase de tolérance immunitaire AgHBe+ Phase de clairance immunitaire Phase de bas niveau ou de non-réplication AgHBe- et anti-hbe+ Phase de réactivation ADN VHB ALAT -13- -14- HC modérée HC et AgHBe+ HC modérée à sévère cirrhose Portage chronique inactif Hépatite B résolue (AgHBs- et anti-hbs+) HC modérée à sévère cirrhose HC et AgHBe- D après Fattovich G. Natural history and prognosis of hepatitis B. Seminars in Liver Disease 2003; 23, 1: 47-58. Castera L. Tests de quantification virale pour le virus de l hépatite B. Hépato-gastro. 2004 ; 2, 11 :99-103.
Histoire naturelle de l hépatite B L infection chronique VHB (suite): Forme particulière re de l hépatite l chronique B : Présence d une d hépatite h active, après s la séroconversion s AgHBe. = Exitance de virus mutants: Variants du VHB n exprimant n pas l AgHBel (hépatite chronique Ag HBe négatif) Fattovich G. Natural history and prognosis of hepatitis B. Seminars in Liver Disease 2003; 23, 1: 47-58. -15- -16-
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Histoire naturelle de l hépatite B Les virus mutants: Variants du VHB n exprimant n pas l AgHBel (hépatite chronique Ag HBe négatif). Virus mutant (région pré-c). La distribution géographique g de ces génotypes g du VHB varie. -19- -20- Dans le bassin méditerranm diterranéen en et l Est l européen: en: près s de 20% des porteurs chroniques de l Ag l HBs avec anticorps anti-hbe présentent une réplication r virale avec la détection d de l ADN l du VHB et des lésions l hépatiques h nécrotico-inflammatoires. inflammatoires. Brunetto M.R. Outcome of anti-hbe positive chronic hepatitis B in alpha-interferon treated and untreatred patients: a long term cohort study. Journal of Hepatology. 2002; 36:263-270 Hadziyannis S.J. Interferon alpha therapy in HBeAg-negative chronic hepatitis B: new data in support of long-term efficacy. Journal of Hepatology. 2002; 36:280-282 12-Brunetto M.R. Outcome of anti-hbe positive chronic hepatitis B in alpha-interferon treated and untreatred patients: a long term cohort study. Journal of Hepatology. 2002; 36:263-270
Dépistage et diagnostic de l hépatite B Le dépistage de marqueurs d infection par le VHB est obligatoire ou recommandé dans de nombreuses situations. L interprétation des tests est décisive dans la prise en charge thérapeutique. Tests directs: virus ou l un l des composants (antigènes). nes). Tests indirects: marqueurs sériques s (anticorps). Chevaliez S. Pawlotsky JM. Dépistage et diagnostic des hépatites B et C. La Revue du Praticien. 2005; 55 : 615-623. Les techniques du diagnostic virologique Les techniques immuno-enzymatiques: Les méthodes ELISA +++: antigènes ou anticorps. Les techniques moléculaires: Détection et quantification du génome viral (ADN) par amplification de la cible (PCR temps réel) ou amplification du signal (hybridation). Analyse des séquences virales pour identifier les résistances aux antiviraux. -21- -22-. Chevaliez S. Pawlotsky JM. Dépistage et diagnostic des hépatites B et C. La Revue du Praticien. 2005; 55 : 615-623
Les techniques moléculaires Techniques moléculaires : détection et de quantification ADN. Soit amplification de la cible: -PCR temps réel. Soit amplification du signal: -Méthodes d hybridation et des «ADN branchés». Effort de standardisation des tests nécessaire. Ne pas tenir compte de différences de moins de ± 0.5 log. Si AgHBe négatif + 5 ADN VHB < 10 copies/ml = Patients porteurs inactifs????? -23- Castera L. Tests de quantification virale pour le virus de l hépatite B. Hépatogastro. 2004 ; 2, 11 :99-103. Les techniques moléculaires Techniques moléculaires: tests de détection et de quantification de l ADN du VHB. Détection actuelle des valeurs minimales de 10 copies /ml. La sensibilité des techniques Continue de s améliorer Objectif de standardisation des tests qui vont définir les niveaux seuils de réplication significatifs sur le plan clinique. -24- Servoss M.D. et al. Serologic and molecular diagnosis of hepatitis B virus. Clin Liver Dis. 2004; 8: 267-281.
Les techniques moléculaires En pratique: Tester les dons de sang. Diagnostic d une infection active. Aide à l évaluation pronostique. Aide à la décision thérapeutique. Évaluer la réponse aux traitements. Techniques moléculaires : également tests qualitatifs pour identifier les virus mutants (variants du VHB). -25- Pawlotsky J.M. Molecular diagnosis of viral hepatitis. Gastroenterology. 2002; 122: 1554-1568. Adler M. et al. Practical use of hepatitis C and B molecular tools: Belgian guidelines. Acta Gastro-Enterologica Belgica. 2005; LXVIII:308-313 Liens entre: Charge virale/activité de l hépatite/risque de contamination? ADN VHB (Copies/ml) Virémie Hybridation (sans amplification du signal) Phases Possibles de l infection /Réponse immune Infectiosité/ Risque de contamination Don sang Contact intime Contact Famille >10 9-10 10 11 Très haute +++ Fin de l incubation Immunodépression immunotolérance ++++ ++ ++ >10 5-10 6 Haute ++ Infection aiguë ou chronique active +++ ± ± >10 3-10 5 Basse - Infection non progressive ou inactive ++ - - 10-10 3 Très basse - Infection non progressive ou inactive + - - -26- D après Weber B. Recent developments in the diagnosis and monitoring of HBV infection and role of the genetic variability of the S gene. Expert Rev Mol Diagn. 2005; 5, 1:75-91.
Dépistage et diagnostic de l hépatite B Les marqueurs sont utiles lors: du dépistage. du diagnostic d une hépatite aiguë. du diagnostic et de la prise en charge thérapeutique d une hépatite chronique. En 2005, le développement des tests sensibles de détection et quantification de l ADN du VHB permet de détecter une réplication virale chez la plupart des porteurs chroniques du VHB. Chevaliez S. Pawlotsky JM. Dépistage et diagnostic des hépatites B et C. La Revue du Praticien. 2005; 55 : 615-623. Anaes, Février 2001. Diagnostic et suivi virologiques des hépatites virales. Gastroenterol Clin Biol. 2003 ; 27 :177-200. Dépistage et diagnostic de l hépatite B, en pratique: Marqueurs utiles au diagnostic de l hépatite aiguë B: antigène HBs anticorps anti-hbc totaux IgM anti-hbc anticorps anti-hbs -27- -28- Chevaliez S. Pawlotsky JM. Dépistage et diagnostic des hépatites B et C. La Revue du Praticien. 2005; 55 : 615-623. Anaes, Février 2001. Diagnostic et suivi virologiques des hépatites virales. Gastroenterol Clin Biol. 2003 ; 27 :177-200.
Dépistage et diagnostic de l hépatite B, en pratique: Marqueurs utiles au diagnostic de l hépatite chronique B: antigène HBs anticorps anti-hbc totaux anticorps anti-hbs ADN du VHB antigène HBe anticorps anti-hbe Chevaliez S. Pawlotsky JM. Dépistage et diagnostic des hépatites B et C. La Revue du Praticien. 2005; 55 : 615-623. Anaes, Février 2001. Diagnostic et suivi virologiques des hépatites virales. Gastroenterol Clin Biol. 2003 ; 27 :177-200. Dépistage et diagnostic de l hépatite B, en pratique: Marqueurs utiles au suivi du traitement de l hépatite chronique B: couple antigène HBe/anticorps anti-hbe ADN du VHB (quantitatif) couple antigène HBs/anticorps anti-hbs -29- -30- Chevaliez S. Pawlotsky JM. Dépistage et diagnostic des hépatites B et C. La Revue du Praticien. 2005; 55 : 615-623. Anaes, Février 2001. Diagnostic et suivi virologiques des hépatites virales. Gastroenterol Clin Biol. 2003 ; 27 :177-200.
Conclusion: Dépistage et diagnostic de l hépatite B, en pratique: Diagnostic direct Diagnostic indirect Antigène Génome viral Anticorps totaux ou IgG IgM Ag HBs Ag HBe ADN du VHB Ac anti-hbs Ac anti-hbe Ac anti-hbc Marqueurs virologiques disponibles pour le dépistage,le diagnostic ic et le suivi virologiques. Chevaliez S. Pawlotsky JM. Dépistage et diagnostic des hépatites B et C. La Revue du Praticien. 2005; 55 : 615-623. Conclusion, Principaux problèmes clés non résolus: sensibilité des méthodes de détection de l Ag de surface (AgHBs( AgHBs) ) et de la reconnaissance des mutants du gène S. Épidémiologie de la variabilité génétique du VHB et prévalence des d mutants du gène S dans le monde. Impact des mutants du gène S sur l efficacité de la vaccination. -32- Signification clinique et standardisation des marqueurs de l infection chronique: quantification de l Ag HBs,, Ag HBe et anticorps IgM anti- HBc. Standardisation des méthodes moléculaires pour quantifier l ADN et signification clinique des bas niveaux d ADN viral circulant. Apport des méthodes moléculaires ultra-sensibles d amplification dans le dépistage virale des dons de sang et intérêt des anticorps anti ti-hbc. -31- IgM anti- HBc Weber B. Recent developments in the diagnosis and monitoring of HBV infection and role of the genetic variability of the S gene. Expert Rev Mol Diagn. 2005; 5, 1:75-91.
Bibliographie I -33- Bibliographie II 6-Chevaliez S. Pawlotsky JM. Dépistage et diagnostic des hépatites B et C. C La Revue du Praticien. 2005; 55 : 615-623. 623. 7-Servoss M.D. et al. Serologic and molecular diagnosis of hepatitis B virus. Clin Liver Dis. 2004; 8: 267-281. 281. 8-Pawlotsky J.M. Molecular diagnosis of viral hepatitis.. Gastroenterology. 2002; 122: 1554-1568. 1568. 9-Adler M. et al. Practical use of hepatitis C and B molecular tools: Belgian guidelines. Acta Gastro-Enterologica Belgica.. 2005; LXVIII:308-313. 313. 1-Anaes, Février 2001. Diagnostic et suivi virologiques des hépatites virales. Gastroenterol Clin Biol. 2003 ; 27 :177-200. 2-Bernard P.H. Sérologie des hépatites B et C : interprétation et conséquences pratiques chez la femme. Gynécologie Obstétrique & Fertilité. 2005 ; 33: 423-428. 428. 3-Ganem D. Prince A.M. Hepatitis B virus infection: Natural history and clinical consequences. N Engl J Med 2004; 350: 1118-1129. 1129. 4-Fattovich G. Natural history and prognosis of hepatitis B. Seminars in Liver Disease 2003; 23, 1: 47-58. 5-Castera L. Tests de quantification virale pour le virus de l hépatite B. Hépato- gastro.. 2004 ; 2, 11 :99-103. -34-
Bibliographie III 10-Weber B. Recent developments in the diagnosis and monitoring of HBV infection and role of the genetic variability of the S gene.. Expert Rev Mol Diagn.. 2005; 5, 1:75-91. 11-Hadziyannis S.J. Interferon alpha therapy in HBeAg-negative chronic hepatitis B: new data in support of long-term efficacy.. Journal of Hepatology.. 2002; 36:280-282 282 12-Brunetto M.R. Outcome of anti-hbe positive chronic hepatitis B in alpha- interferon treated and untreatred patients: a long term cohort study. Journal of Hepatology.. 2002; 36:263-270. 270. -35-