3. DOCUMENTS DE REFERENCE :

1. OBJET : La présente instruction décrit la préparation et le déroulement du prélèvement de la moelle osseuse au Bloc opératoire. 2. DOMAINE D APPLICATION : La présente instruction s applique au niveau du Bloc opératoire, Service Hématologie et à L UTTC. 3. DOCUMENTS DE REFERENCE : Procédures qualité du CHU de Lille. 4. DEFINITION ET ABREVIATION : Définitions : Néant. Les abréviations suivantes sont utilisées dans le document : MO : Moelle Osseuse. PMO : Prélèvement de Moelle Osseuse. IA : Anesthésiste. 5. ACTEURS CONCERNES : IA Bloc opératoire Médecin. Médecin préleveur. UTTC. Propriété de l Hôpital Cheikh Khalifa Ibn Zaid 1/9

6. CONTENU : Activité Responsable Description des tâches Préparation du personnel pour le bloc Avant de se rendre au pôle ambulatoire : - La veille ou le jour du bloc effectuer le contrôle terminal des caisses de bloc en remplissant la Check-list des documents et matériels nécessaires pour le prélèvement de Moelle osseuse au bloc opératoire. - Regrouper les différents documents administratifs et s assurer que la demande de transport a bien été faxée. Préparer les documents, le matériel et les produits nécessaires au prélèvement de prélèvement IA Bloc opératoire Avant d entrer dans la salle de bloc : - Déposer les caisses avec le matériel, la mallette contenant la soudeuse, la mallette de transport pour la moelle et le bac de décontamination dans le SAS de transfert du pôle ambulatoire - Se mettre en tenue de bloc dans les vestiaires du personnel - Se laver les mains ou se frictionner avec la solution hydro alcoolique avant et après l habillement (respecter les règles d hygiène et de sécurité : circuit propre et circuit sale classeur hygiène) - Mettre une charlotte + un masque avant d entrer dans la salle de bloc - Prendre un chariot dans la salle de bloc - Récupérer le matériel dans le couloir d accès aux blocs - Déposer le matériel nécessaire au prélèvement sur le chariot Dans la salle de bloc : - Rentrer le chariot avec le matériel que l on vient de préparer - S assurer de l arrivée du donneur, se présenter et le rassurer - Préparer la feuille de prescription de PMO et les différentes étiquettes d identification - Préparer les tubes nécessaires pour les différentes prescriptions et le ou les comptages - Brancher la thermo-soudeuse sur secteur - Consulter avec l IA le dossier d anesthésie, lui demander de prélever le groupe et les sérologies si besoin et de noter la date l heure et le nom du préleveur sur le bon Propriété de l Hôpital Cheikh Khalifa Ibn Zaid 2/9

- Récupérer le matériel fourni par le bloc un petit champ stérile pour la balance un crayon stérile un set à badigeon des compresses un flacon de Bétadine - Hépariner les 500ml de sérum Nacl 0.9% avec 50 000 UI d héparine stérilement. A l arrivée des médecins Médecin - Convenir du nombre de poches en fonction de la quantité de moelle osseuse qui sera prélevée la fiche de calcul des cellules (Tableau Excel). - Proposer le choix des trocarts et noter de suite leur n de lot et leur date de péremption sur la feuille de prescription de PMO (GREEN01901fiche de prélèvement de moelle osseuse). - Préciser le volume souhaité de la première poche afin d adapter la quantité d ACDA à y injecter (en général, la première poche est toujours de 600 ml et elle ne doit en aucun cas dépasser 700 ml de moelle) - Déposer la balance sur une petite table en retrait. - Faire le lavage chirurgical des mains dès que le donneur est endormi par l anesthésiste et installé en décubitus ventral - S habiller en stérile, blouse et gants avec l aide de l du bloc opératoire. Préparation de la table pour le prélèvement avec l du bloc opératoire. - Ouverture du set contenant les champs opératoires - Mettre d un côté les champs - Réceptionner le matériel que l du bloc opératoire sert de façon stérile 2 poches de recueil de moelle osseuse (3 poches si volume estimé 1400ml) 2-3 robinets trois voies en fonction du nombre de poches 1 seringue de 60ml 6 seringues de 20ml + une seringue de 20 ml pour la ROPIVACAINE 2 seringues de 2ml Propriété de l Hôpital Cheikh Khalifa Ibn Zaid 3/9

Préparer les documents, le matériel et les produits nécessaires au prélèvement du bloc opératoire. 3 trocarts roses 1 trocart d IM pour la ROPIVACAINE la poche d ACDA. 2 trocarts de prélèvement de moelle Gallini (taille choisie par le médecin). 2-3 petits béchers (demander à l du bloc opératoire. de répartir le NaCl 0.9% hépariné dans ceux-ci) en fonction du nombre de poches. une trentaine de compresses stériles. la pince à clamper la cupule (demander à l du bloc opératoire. d y verser de la Bétadine ) le container pour la pesée le crayon le petit champ - Rincer les seringues de 20ml ainsi que les trocarts de GALLINI avec le NaCl 0.9% hépariné qui est dans les petits béchers, ceci pendant l installation des champs opératoires par les médecins - Adapter les robinets 3 voies sur les poches de recueil - Préparer avec la seringue de 60ml la quantité d ACDA décidée en début de séance (ratio de 20%). Préparation et calibrage de la balance - Déposer le champ stérile sur la balance - Demander à l du bloc opératoire.de faire le zéro avec uniquement le champ sur la balance. - Peser au départ le container contenant la poche + le robinet + ACDA = «A» - Noter avec le crayon le poids A sur le champ stérile de la table - En cours de prélèvement, peser toujours le container + la poche avec le robinet + ACDA + la moelle prélevée = «B» le poids de la moelle prélevée = B - A ce poids en grammes est assimilable au volume en ml. Préparation de la petite table de prélèvement - Mettre à disposition pour chaque médecin un trocart GALLINI hépariné Propriété de l Hôpital Cheikh Khalifa Ibn Zaid 4/9

3 seringues héparinées compresses - Mettre au centre de la table un petit bécher contenant le NaCl 0.9% hépariné (liquide de rinçage pour trocarts de GALLINI et seringues) et la cupule avec pince Kocher et Bétadine. Pendant le prélèvement : - Noter le début de l heure de prélèvement - Purger délicatement les seringues et injecter la moelle osseuse directement dans la poche puis réaspirer et réinjecter la moelle dans la poche après chaque injection pour éviter la coagulation - Rincer les seringues de prélèvement au fur et à mesure avec le NaCl 0.9% hépariné. - Vider l air de la poche et la peser régulièrement pour savoir si la quantité voulue est atteinte. La première poche remplie : - Prélever 2ml de cette poche pour le comptage des cellules nucléées (attention pour que l échantillon soit fiable, il faut bien mélanger la poche et aspirer 20ml, équivalent à une purge, avant de prélever les 2ml puis remettre les 20ml). - La personne désignée achemine l échantillon au laboratoire qui communique les résultats par téléphone en cours de prélèvement ce qui permet d adapter le volume de moelle restant à prélever. - Noter le N 1 sur la poche et le volume prélevé sur la table à l aide du crayon stérile. Idem pour les poches suivantes. Prélèvement de la moelle osseuse - NB : penser à changer le bécher de rinçage après chaque poche, après avoir nettoyé le matériel de prélèvement Fin du prélèvement - Noter l heure de fin de prélèvement - Souder les poches de moelle ou utiliser les clips de secours en cas de problème avec la soudeuse (effectuer les soudures en respectant une distance d environ 2,5cm entre chacune d elles et une distance de 10 cm entre la première soudure et la poche) Attention! par sécurité, il faut clamper en amont de la soudure avec la Propriété de l Hôpital Cheikh Khalifa Ibn Zaid 5/9

Prélèvement de la moelle osseuse Médecin préleveur pince Kocher pour palier un éventuel problème de soudure. - Enlever le robine 3 voies et remettre le bouchon - Identifier les poches (voir l Instruction d étiquetage des poches de moelle) en y collant au verso la grande étiquette dûment remplie au préalable sans oublier d y ajouter : Etiquette donneur. Etiquette receveur. Etiquette donneur unique. Etiquette «risque biologique». - Mettre les poches de moelle dans les sachets plastiques pour le transport et les déposer dans la mallette de transport adaptée. - Faire remplir et signer la feuille de prescription de PMO par le médecin responsable. - Remplir la feuille de transport. - Passer en salle de prélavage pour rincer les béchers avant de se rendre à l UTTC. - Remettre en main propre la moelle, mais aussi si nécessaire les prélèvements sanguins et/ou médullaires à la coordinatrice de greffe. - Tous les papiers administratifs seront ramenés à la coordinatrice de greffe et seront remplis par le médecin préleveur et le convoyeur avant le départ du greffon. - Enfiler 2 paires de gants. - Installer les champs stériles. - Changer la 2 ème paire de gants. - Réaliser les prélèvements à visée scientifique (si spécifié sur la feuille de prescription). Propriété de l Hôpital Cheikh Khalifa Ibn Zaid 6/9

RECOMMANDATIONS AUX OPERATEURS Principes : Préserver le donneur en respectant impérativement le volume maximal prélevable (20ml/kg de poids du donneur). Préserver le receveur en se rapprochant au mieux du nombre de cellules prescrites, sans le dépasser. Recommandations : prélever ce qu il faut dans un minimum de volume, et pour cela : Ne pas prélever plus de 10-15 ml par seringue. Faire un comptage intermédiaire des cellules. Tenir compte du résultat pour adapter le volume de la deuxième poche voir la fiche de calcul des cellules (Fiche Excel de calcul). Organiser le transport de la moelle au laboratoire de thérapie cellulaire Gérer le matériel et les commandes - Changer la 2 ème paire de gants entre chaque poche - Une fois le prélèvement terminé, il sera injecté au niveau des points de ponction un anesthésique local : la ROPIVACAINE 2 mg/ml en injectant à l aide d un trocart d IM 10 ml par tunnel de prélèvement, sauf en cas de problème d allergie à la XYLOCAINE ou ses dérivés chez le donneur. La ROPI - Réaliser le pansement des orifices de ponction en fin de bloc - Compléter et signer la feuille de prescription. Dès la fin du prélèvement, l qui a effectué le bloc : - Appelle L UTTC. - envoie le groupe du donneur qui partira au laboratoire d hématologie. De retour dans le service : - préparer les deux caisses pour le prochain prélèvement - vérifier le contenu des caisses à l aide de la liste gérée vérifier les péremptions (validité de 3 mois) veiller à refaire les caisses avec le matériel ayant la péremption la plus Propriété de l Hôpital Cheikh Khalifa Ibn Zaid 7/9

courte : maximum 1 mois,.si <, renvoyer en stérilisation) Décontamination et stérilisation du matériel Aide-soignante évaluer les stocks et prévoir les commandes spécifiques avec le cadre de santé et l indiquer dans la case «commentaires» de la liste gérée du matériel de bloc - quand les caisses sont prêtes ne pas oublier de remplir dûment la (GRE EN 017 01) pour la partie «mise à jour». - la caisse de décontamination contenant le matériel souillé est déposée dans la pièce «utilité ménagère» à l extérieur du secteur stérile. - Faire tremper le matériel souillé dans la caisse avec du SALVANIOS instruments : 3 pressions pour 15L jusqu à son envoi en stérilisation le lendemain matin ; il sera alors déposé dans une caisse prévue à cet effet par l Aide-soignante (lui préparer la check-list matériel à stériliser) NB : Lors de la réception du matériel stérilisé les Aide-soignante mettront le matériel de côté. Il sera remis dans le local «rangement médical» de l extérieur. Transmettre les informations utiles à l équipe de greffe - Réaliser les transmissions à l équipe en charge de la greffe (Médecin et ). concernant le bloc (richesse ou non du prélèvement) concernant le donneur, pour rassurer le receveur - Archiver les différents documents dans les pochettes qui leurs sont réservées 7. DOCUMENTS ASSOCIES : Feuille de stérilisation. LG/CSH/014. feuille de prescription. la fiche de calcul des cellules (Tableau Excel). la feuille de prescription de PMO. (FE/CSH/07). Check-list des documents et matériels nécessaires pour le prélèvement de Moelle osseuse au bloc opératoire. Propriété de l Hôpital Cheikh Khalifa Ibn Zaid 8/9

8. CIRCUIT DU DOCUMENT : Nom/Prénom Fonction Visa Rédaction Vérification Groupe de Travail Projet Allogreffe Groupe de Travail Projet Allogreffe Dr Myriam TOUHAMI ----------- ----------- ----------- ----------- Directrice Médicale Approbation Amina HADIR Chef de Service Qualité Validation Pr M Hamed HARIF Directeur Général Version Date Nature de modification Page(s) ------ ------ ------ ------ Propriété de l Hôpital Cheikh Khalifa Ibn Zaid 9/9