Concept de laboratoire mobile pour l investigation et la surveillance épidémiologique, la formation et la recherche en Afrique Sahélienne A. Da Silva
Contexte Épidémies de méningites cérébrospinales Émergence d épidémies à Nm W135 (Burkina Faso 2001 et 2002) Décision rapide d une riposte vaccinale appropriée avec un vaccin PS trivalent ACW135 disponible en quantité limitée Impératif d un diagnostic microbiologique précis et diligent Surveillance et alerte microbiologique Laboratoires nationaux de référence (LNR) : identification des agents étiologiques de méningites bactériennes aiguës (MBA) LNR couvrent 30 à 40% des cas notifiés Districts ruraux ou éloignés du LNR peu ou mal couverts bactériennes aiguës (MBA) Laboratoires de districts peu ou pas dotés (équipements, RH) 2
Hypothèse de travail Laboratoire mobile permettrait de : Fournir à temps aux autorités sanitaires des données bactériologiques des cas suspects de MBA dans les districts en alerte ou en épidémie Décider de la riposte vaccinale appropriée de la surveillance et alerte microbiologique Fournir sur le terrain les résultats de laboratoire pour améliorer la prise en charge thérapeutique des cas Former et/ou recycler dans de bonnes conditions les techniciens de laboratoire au niveau district Contribuer au renforcement de la surveillance épidémiologique Vérification du concept sur le terrain Conception, développement et essais d un prototype n 1 Recommandations opérationnelles : prototype n 2 3
Méthodes (1) Phase I (2002-2003) laboratoire mobile prototype n 1 Conception, aménagement sur base d un véhicule utilitaire Renault Kangoo 4x4 Test de qualification de terrain : performance des équipements et réalisation d examens de laboratoire Partenariat : AMP, Institut Pasteur, Université de Munster (Allemagne), IMTSSA Marseille (France), Ministère de la Santé du Burkina Faso Phase II (2004) évaluation utilisation du prototype n 1 Districts du Burkina Faso ayant dépassé le seuil d alerte épidémique Confirmer le germe en situation réelle d investigation biologique de cas de méningite Recycler les techniciens de laboratoire en cours d intervention 4
Méthodes (2) Phase III(2005) évaluation prototype n 1 en supervision formative Programme de supervision des techniciens de laboratoire de district Renforcement des capacités des laboratoires régionaux et de districts Partenariat : Ministère de la Santé du Burkina Faso et AMP Phase IV (2006) développement/évaluation prototype n 2 Basé sur les recommandations de l évaluation du prototype n 1 Conception, aménagement sur base d un véhicule utilitaire Toyota Hi- Lux 4x4 et d une cellule amovible Partenariat : AMP, l Université de Munster (Allemagne), IMTSSA Marseille (France), Laboratoire Biomérieux, Ministère de la Santé du Burkina Faso Évaluation de l utilisation en situation de recherche-action 5
Résultats - Phase I (1) Conception/réalisation prototype n 1 Laboratoire installé dans un véhicule utilitaire Renault Kangoo 4x4, diesel climatisé derrière les sièges du conducteur et passager panneau solaire sur le toit 6
Résultats - Phase I (2) Équipement du prototype n 1 une hotte ventilée : culture et examens complémentaires du Liquide Céphalo-Rachidien (LCR) en toute sécurité une étuve à 37 C avec des boîtes GenBox et coffrets de GenBag : obtention d une atmosphère humide et d une concentration appropriée en CO2 (5 à 10% environ) pour la culture des bactéries un réfrigérateur : conservation des milieux de culture, des réactifs et de 1ml de LCR pour la PCR une centrifugeuse : étude des culots de centrifugation et la recherche des Antigènes solubles un évier-cuve inox : coloration et le rinçage des frottis sur lame un microscope Olympus CX31 : examen des LCR à l état frais, numération des éléments cellulaires, parasitologie, puis après coloration formule leucocytaire et mise en évidence des bactéries 7
Résultats - Phase I (3) Test de qualifiquation-terrain réalisé en collaboration avec l IMTSSA Pharo 8
Résultats - Phase I (4) Température du frigo Control de la température Air conditionné d origine du Renault Kangoo pas adapté aux conditions tropicales 35 30 25 20 15 10 5 C Utilisation du prototype 1 en plein soleil (panneau solaire) diminue les performances du réfrigérateur embarqué 0 60 8-9- 10-11- 8h00 12-13- 14-15- Température de l'étuve 16-17- 16h00 18-19- Température de l incubateur au dessus de 37 C l après-midi 50 40 30 20 C 10 0 8-9- 10-11- 12-13- 14-15- 16-17- 18-19- 8h00 16h00 9
Résultats - Phase I (5) 13 Alimentation électrique laboratoire - Volts Monitoring électrique Instabilité électrique Fonctionnement irrégulier des panneaux solaires 12,5 12 11,5 11 10,5 10 8-9- 10-11- 12-13- 14-15- 16-17- 18-19- matin midi soir Température régulateur solaire ( C) 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 8-9- 10-11- 12-13- 14-15- 16-17- 18-19- matin midi soir 10
Résultats - Phase I (6) Diagnostics biologiques dans 2 districts Sites Ag detection Culture Negatif Positif Negatif Positif Benguedo 13 2 Nm A 1 Sp 14 2 Nm A Pouytenga 4 2 Nm A 5 1 Nm A Total 17 5 19 3 Les 2 NmA testés étaient sensibles à oxacilline, chloramphenicol et ceftriaxone 11
Résultats - Phase II (7) Interventions dans 3 districts reculés et en épidémie en 2004 (semaines 12, 14 et 16) Nm Sp Négatif Total A W135 Nanoro 0 8 (8) 5 (4) 7 19 Zabré 3 (1) 0 1 (1) 22 26 Toma 0 5 0 7 13 Total 3 13 6 36 58 Les 10 Nm et 3 Sp testés, étaient tous sensibles à oxacilline, chloramphénicol et ceftriaxone 12
Antibiothérapie Results 2004 (5) Résultats - Phase II (8) Méningite à pneumocoque ou à méningocoque sévère : ampicilline IV Suivant les recommandations du MSP, Méningite à méningocoque non sévère : 1 dose de chloramphénicol huileux IM Riposte Vaccinale Nanoro (population 2-29 ans) : vaccination de masse avec un vaccin PS antiméningocccique trivalent trivalent (A/C/W135) (112,421 doses pendant la semaine 15, 3-8 Avril 2004) Zabré : pas de riposte vaccinale une campagne (une campagne avec un vaccin A/C a été conduite l année dernière) Toma: résultats obtenus après la décroissance des cas dans les 2 districts 13
Results 2004 (5) Résultats - Phase III (9) Formation recyclage des techniciens de laboratoire En cours d intervention (2003-2004) :12 techniciens En tournée de supervision formative (2005) : 10 (5 districts) Rôle du labo Mobile dans la supervision formative Dispositif embarqué (étuve, microscope, réfrigérateur, matériel, réactifs et consommables de laboratoire) permet l identification des germes responsables de méningite bactérienne aiguë dans de bonnes conditions de travail Grille de supervision Frottis positifs de LCR colorés au Gram (Diplocoques à Gram négatif, Bacille à Gram Négatif) Frottis négatifs de LCR colorés au Gram CD: film portant sur les techniques d utilisation 14
Résultats - Phase III (9) Éléments de la supervision formative Conditions de conservation et de transport des échantillons de LCR des CSPS et/ou des CMA/CM, vers les laboratoires pour examen cytobactériologique Conditions d utilisation des milieux de TransIsolate (TI) respect les directives mises en place par OMS et CDC Qualité de remplissage des registres de LCR Compétences des techniciens de laboratoire sur l examen direct et indirect des LCR Qualité des frottis de lames colorées et conservées Gestion et le circuit de transmission des données de laboratoire Nombre de LCR reçu et traité de semaine1 à la semaine 18 Difficultés/problèmes liés au bon fonctionnement des laboratoires Forces et faiblesses liées au diagnostic des MBA Plans de résolution des difficultés/problèmes rencontrés par les techniciens des laboratoires supervisés 15
Recommandations - post-test (1) Recommandations relatives au véhicule prototype n 1 Solidité du véhicule: Le prototypes n 1 a souffert de multiples crevaisons, de problèmes électriques (panneau solaires) et de vibrations entraînant l instabilité plusieurs pièces du véhicule Véritable véhicule tout-terrain est hautement recommandé Revue complète du système électrique Ergonomie et espace à bord : manque d ergonomie et d espace impliquent des conditions d utilisation sous-optimales pour le technicien Nouvelle conception de l intégration et de l aménagement du laboratoire 16
Recommandations - post-test (2) Recommandations relatives au véhicule prototype n 1 Contrôle de la température : Utilisation de panneaux solaires détachables pour permettre de garer le véhicule-laboratoire à l ombre. Sécurité et ergonomie : Séparation entre la cabine du chauffeur et le compartiment laboratoire Mobilité et liaison : Conception d un compartiment laboratoire détachable permettant de stationner le laboratoire pendant que le véhicule circule dans le district ou vers un laboratoire de référence 17
Recommandations - post-test (3) Challenge : améliorer aussi la rapidité du processus de décision au niveau du système 25 Weekly incidence per 100,000 20 15 10 5 Mobile lab intervention Vaccination Campaign Epidemic Alert 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 Week Nanoro Toma Zabré 18
Évaluation - Phase IV (1) Conception/réalisation prototype n 2 Laboratoire installé dans une cellule amovible fixée sur véhicule utilitaire Toyota Hi-Lux 4x4, diesel climatisé Groupe électrogène 19
Évaluation - Phase IV (2) Utilisation en situation de recherche-action Étude transversale de portage et séroprévalence pendant un épidémie due à NmA dans le district Secteur 15 à de Bobo-Dioulasso (Burkina Faso) 12 jours de recrutement 52 sérums centrifugé et aliquotés / jour 104 cultures effectuées / jour 20
Conclusion (1) Utilité démontré du Laboratoire mobile de biologie médicale pour Surveillance et l alerte microbiologique des MBA Aide à la décision pour la riposte vaccinale et la prise en charge des cas dans les zones peu équipées et difficiles d accès Supervision formative des agents et techniciens de laboratoire Recherche - action de terrain Outil efficace Contexte d infrastructures et ressources rares ou inexistantes Si le processus de décision au niveau des Autorités sanitaires des pays utilisateurs est lui aussi accéléré Extension du concept et de l outil Laboratoire mobile Autres pathologies infectieuses à potentiel épidémique (maladies diarrhéiques, paludisme, tuberculose, VIH/SIDA, fièvres hémorragiques virales 21
Perspectives Conclusion (2) Poursuite de l évaluation du prototype n 2 dans les diverses situations d utilisation Réalisation d études médico-économiques et financières rétrospectives (prototype n 1) et prospectives (prototype n 2) Coût d acquisition prototype n 1 Renault Kangoo : 36 K Coût d acquisition prototype n 2 Toyota Hi-Lux : 75 K Réalisation en partenariat d un projet de démonstration à l échelle d un pays Modus operandi de l introduction de laboratoire mobile dans le système actuel Coûts et conditions d exploitation des laboratoires mobile Facteurs et critères de viabilité 22