Compte rendu 142 Auto-immunité : QUAL-IMMUN 1

Compte rendu 142 Auto-immunité : QUAL-IMMUN 1 Centre Toulousain pour le Contrôle de qualité en Biologie clinique Association déclarée à la Préfecture de la Haute-Garonne le 30 Octobre 1973 et enregistrée sous le W313002633 CTCB - 33 route de Bayonne - 31300 TOULOUSE : 05 34 51 49 80 Fax : 01 57 67 25 90 Email : secretariat.ctcb@ctcb.com site Internet : www.ctcb.com Siret : 428 789 853 000 28 APE : 8559A Statut du document : Définitif 1 - PRESENTATION DU PROGRAMME D INTERCOMPARAISON Coordonnateur et Expert du programme : Stéphanie Albarède, CTCB, s.albarede@ctcb.com Expert du programme : Mme Fortenfant, Laboratoire d Immunologie, fortenfant.f@chu-toulouse.fr Un large panel vous est proposé en auto-immunité en collaboration avec la société THERADIAG. THERADIAG apporte ainsi son savoir-faire dans la fabrication d échantillon et le CTCB son expérience et son indépendance pour le traitement des données. > Fréquence de passage (pour chaque programme d auto-immunité) : 2 enquêtes par an, avec 3 échantillons (400-600 µl de niveaux différents) > Présentation du programme : L ensemble des échantillons est adressé en une seule fois par la société THERADIAG. Le programme proposé est réparti de la façon suivante : ANA Anticorps anti-nucléaires ADN Anticorps anti-dna ENA Anticorps anti-antigènes nucléaires solubles 2 - DETERMINATION DE LA NOTATION DU LABORATOIRE Le système de notation qualitatif repose sur l échelle d'évaluation suivante : A = Réponse attendue B = Réponse acceptable C = Réponse à analyser par le laboratoire D = Réponse erronée Le résultat attendu est la valeur assignée qualitative transmise par le fournisseur lorsque les résultats des participants sont cohérents en inter-réactifs. Des différences par groupe de pairs peuvent amener l Expert à moduler cette valeur, le fournisseur ne pouvant pas tester tous les dispositifs médicaux de diagnostic in vitro (DMDIV) présents sur le marché. En effet, dans le domaine de l auto-immunité, de nombreux facteurs dont la nature et la présentation de l antigène, peuvent induire des discordances de résultats entre deux techniques voire deux réactifs d une même technique. Ceci explique que les valeurs attendues disponibles sur le site internet à la date de clôture puissent différer des valeurs assignées. Etant donné les faibles effectifs et/ou la dispersion des résultats, les données quantitatives ne sont pas évaluées. 3 - TRAITEMENT STATISTIQUE QUANTITATIF Le traitement statistique quantitatif est réalisé selon les protocoles suivants : - Pour les résultats rendus en inverse de dilution : Détermination de l effectif (N) après élimination des résultats rendu avec un signe < ou >, de la Médiane, Min et Max. - Pour les résultats rendus en unité internationale : Détermination de l effectif (N), effectif après troncature (N*), moyenne après exclusion des valeurs aberrantes par la médiane +/-50%, écart type (ET), coefficient de variation (CV), valeur minimum et maximum (Min*, Max*) après troncature. - Critères de rendus des résultats : si l effectif est supérieur ou égal à 3. Page 1 sur 15

4 - ANALYSE DES REPONSES ET COMMENTAIRES I. Matériel et méthode A. Dépistage des anticorps anti-nucléaires sur lame Hep2 99 participants ont répondu au dépistage des anticorps anti-nucléaires sur lame Hep2. La majorité des laboratoires réalisent le dépistage des AAN à la dilution 1/80 (tableau I) et au grossissement de l objectif x40 (tableau II). Ces réactifs sont listés dans le tableau III. Dilution Effectif 40 1 80 72 100 11 160 15 Total général 99 Tableau I. Nombre d utilisateurs par dilution de dépistage Grossissement Effectif Non précisé 2 20 1 40 91 50 4 63 1 Total général 99 Tableau II. Nombre d utilisateurs par grossissement de l objectif Lame Hep2 Effectif BIOADVANCE IF-HEp2 / Foie de primate 1 BIOADVANCE IFI : HEp2 anti ANA 2 BIOADVANCE IFI : HEp20-10 anti ANA 10 BIOADVANCE/EUROIMMUN IF-HEp20-10 / Foie de primate 8 BIO-RAD Kallestad HEp 2 - Kit 18 BIO-RAD Kallestad HEp 2 Slides 18 BIO-RAD Quantafluor Lame HEp2 2 BIOSYSTEMS Anti-nuclear antibodies HEp-2 (ANA-HEp-2) 1 EUROBIO / ZEUS ANA HEp2 IFI (ref 24052 ; 24012, 2401, 2502) 4 EUROBIO Hep-2 / ANA Coffret complet 1 EUROBIO HEp2000 ANA ImmunoConcept Détection des autoanticorps antinucléaires : cellules HEp-2000 7 EUROBIO HEp-2000 ANA kit ImmunoConcept Détection des autoanticorps antinucléaires: cellules HEp-2000 (Bleu Evans) 1 IMMUNOCONCEPT ANA-Ro fluorescent HEp2000 2 INGEN/ ImmuGlo ANA lame HEp-2 IFA 1 INOVA NOVA Lite HEp-2 13 MENARINI Nova- lite ANA HEp2 2 ORGENTEC/ BIOSYSTEMS Cellules Hep2 Coffret 1 THERADIAG ANA-HEp-2 coffret 7 Total général 99 Tableau III. Nombre d utilisateurs par réactif (lame Hep2) Page 2 sur 15

B. Recherche des anticorps anti DNA natif 102 laboratoires ont réalisé la recherche des anticorps anti-dna natif, la majorité (64%) des réactifs utilisés relève d une technique immuno-enzymatique (figure 1). Sur les 102 laboratoires, 4 ont seulement analysé l échantillon 1426. 1% 6% 8% 64% 15% 6% Chimiluminescence IFI ImmunoDot Immunoenzymologie RIA X-MAP Figure 1. Techniques utilisées pour la recherche d anticorps anti-adn C. Recherche et identification des anticorps anti-antigènes nucléaires solubles 55 participants ont effectué la recherche des ENA totaux, la technique immuno-enzymologie (93%) est la plus employée (figure 2). Pour l identification, par exemple pour l anticorps anti-ss-a, les techniques les plus utilisées sont l immuno-enzymologie (54%) et l immunodot (37%) (figure 3). 2% 5% Chimiluminescence Immunoenzymologie X-MAP 93% Figure 2. Techniques utilisées pour la recherche des ENA totaux Page 3 sur 15

1% 8% 54% 37% Chimiluminescence ImmunoDot Immunoenzymologie X-MAP Figure 3. Techniques utilisées pour l identification des ENA (exemple : marqueur SS-A) Page 4 sur 15

II. Echantillon 1424 A. Composition de l échantillon Présence d anticorps anti-ribosome : l aspect était nucléolaire et cytoplasmique de type anti-ribosome. B. Dépistage des anticorps anti-nucléaires sur lame Hep2 1. Résultats qualitatifs Résultats au niveau du noyau 68,7% des participants observent une fluorescence au niveau du noyau (tableau IV). L aspect de fluorescence observée est majoritairement de type nucléolaire (tableau V). Lame Hep2 Absence Présence BIOADVANCE IF-HEp2 / Foie de primate 1 BIOADVANCE IFI : HEp2 anti ANA 2 BIOADVANCE IFI : HEp20-10 anti ANA 10 BIOADVANCE/EUROIMMUN IF-HEp20-10 / Foie de primate 2 6 BIO-RAD Kallestad HEp 2 - Kit 5 13 BIO-RAD Kallestad HEp 2 Slides 1 17 BIO-RAD Quantafluor Lame HEp2 2 BIOSYSTEMS Anti-nuclear antibodies HEp-2 (ANA-HEp-2) 1 EUROBIO / ZEUS ANA HEp2 IFI (ref 24052 ; 24012, 2401, 2502) 2 2 EUROBIO Hep-2 / ANA Coffret complet 1 EUROBIO HEp2000 ANA ImmunoConcept Détection des autoanticorps antinucléaires : cellules HEp-2000 3 4 EUROBIO HEp-2000 ANA kit ImmunoConcept Détection des autoanticorps antinucléaires: cellules HEp-2000 (Bleu Evans) 1 IMMUNOCONCEPT ANA-Ro fluorescent HEp2000 1 1 INGEN/ ImmuGlo ANA lame HEp-2 IFA 1 INOVA NOVA Lite HEp-2 9 4 MENARINI Nova- lite ANA HEp2 2 ORGENTEC/ BIOSYSTEMS Cellules Hep2 Coffret 1 THERADIAG ANA-HEp-2 coffret 2 5 Total général 31 68 Tableau IV. Résultat qualitatif de la fluorescence du noyau pour l échantillon 1424 Aspect de la fluorescence du noyau Effectif Dots nucléaires 1 Moucheté 2 Moucheté / Homogène 1 Moucheté / Nucléolaire 5 Nucléolaire 51 Nucléolaire / Autre 3 Nucléolaire / Cerclé (périphérique) 5 Total général 68 Tableau V. Aspect de la fluorescence du noyau pour l échantillon 1424 Page 5 sur 15

Résultats au niveau du cytoplasme 83,8 % des participants ont observé une fluorescence cytoplasmique (tableau VI) et 71% l ont qualifié de type anti-ribosome (tableau VII). Résultat qualitatif fluorescence du cytoplasme Effectif Absence 14 Non réalisée 2 Présence 83 Total général 99 Tableau VI. Résultat qualitatif de la fluorescence du cytoplasme pour l échantillon 1424 Aspect de la fluorescence du cytoplasme Effectif Aucun aspect 4 Cytoplasmique (autre) 17 Cytoplasmique de type anti-mitochondries 1 Cytoplasmique de type anti-ribosome 59 Cytoplasmique de type anti-synthétases 2 Total général 83 Tableau VII. Aspect de la fluorescence du cytoplasme pour l échantillon 1424 2. Résultats quantitatifs Seuls les résultats de la fluorescence cytoplasmique ont été analysés (figure 4, tableau VIII). Cependant, la majorité des laboratoires a rendu un titre au niveau du noyau et au niveau du cytoplasme, avec une médiane plus faible s agissant du noyau (1/260 contre 1/320). Concernant la fluorescence cytoplasmique, les titres rendus sont très dispersés. Résultats au niveau du cytoplasme 20 Répartition des titres en inverse de dilution pour la fluorescence cytoplasmique Médiane = 320 Nombre de réponse 15 10 5 0 80 >100 160 >160 200 320 400 640 800 1280 >1280 Total 6 1 11 2 4 18 1 12 1 6 1 Figure 4. Répartition des titres en IFI sur Hep2 pour la fluorescence cytoplasmique - Echantillon 1424 Page 6 sur 15

Lame Hep2 N Médiane Min Max BIOADVANCE IFI : HEp20-10 anti ANA 8 320 80 640 BIOADVANCE/EUROIMMUN IF-HEp20-10 / Foie de primate 5 200 80 640 BIO-RAD Kallestad HEp 2 - Kit 10 260 80 640 BIO-RAD Kallestad HEp 2 Slides 13 320 80 640 EUROBIO / ZEUS ANA HEp2 IFI (ref 24052 ; 24012, 2401, 2502) 3 1280 1280 1280 EUROBIO HEp2000 ANA ImmunoConcept Détection des autoanticorps antinucléaires : cellules HEp-2000 3 640 160 1280 INOVA NOVA Lite HEp-2 9 320 160 1280 Tableau VIII. Résultats quantitatifs 1424 - IFI sur Hep2 pour fluorescence observée au niveau du cytoplasme C. Recherche des anticorps anti DNA natif Pour l échantillon 1424 on observe 100 % de bonne réponse c est-à-dire négatif. Parmi les 102 laboratoires, 4 n ont pas réalisé la recherche sur cet échantillon. D. Recherche et identification des anticorps anti-antigènes nucléaires solubles Recherche d ENA Totaux : parmi les 55 laboratoires ayant réalisé cette recherche, on observe 100 % de bonnes réponses : 54 réponses négatives. La réponse positive obtenue avec le réactif BIORAD Bioplex 2200 Ana screen est juste puisque ce réactif inclus la recherche d anticorps anti-ribosome dans son panel. Recherche d Anticorps anti - SS-A : 70 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont tous rendu un Recherche d Anticorps anti - SS-B : 70 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont tous rendu un Recherche d Anticorps anti Sm : 69 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont tous rendu un Recherche d Anticorps anti - RNP : 31 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont tous rendu un Recherche d Anticorps anti - Sm/RNP : 58 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont tous rendu un Recherche d Anticorps anti - Scl70 : parmi les 71 laboratoires ayant réalisé cette recherche on observe 70 réponses négatives et une réponse positive obtenue avec le réactif BIO-RAD ANA 6 Profile. Recherche d Anticorps anti - JO1 : 70 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont tous rendu un Recherche d Anticorps anti - PCNA : 25 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont tous rendu un Recherche d Anticorps anti - CENP-B : parmi les 49 laboratoires ayant réalisé cette recherche on observe 48 réponses négatives et une réponse douteuse obtenue avec le réactif BIOADVANCE/ EUROIMMUN Euroline ANA Profil 3 (sans RNP isolé). Page 7 sur 15

E. Commentaires Concernant le dépistage des anticorps sur cellules HEp2, seulement 84% des participants ont observé la fluorescence cytoplasmique. Pour rappel, les anticorps anti-ribosomes donnent un aspect cytoplasmique granuleux : la granulation est fine et dense tendant vers un aspect homogène avec renforcement périnucléaire. On observe également une fluorescence nucléolaire (le reste du noyau n étant pas marqué). Les anticorps anti-ribosomes étant présents le plus souvent dans les formes graves de lupus, il est très rare en pratique courante de les trouver de façon isolée (sans anticorps anti-adn ou anti-ena) telle que le proposait cet échantillon. Concernant la recherche des anticorps anti DNA natif et l identification des anticorps anti-antigènes nucléaires solubles, les résultats qualitatifs sont bons dans l ensemble. Page 8 sur 15

III. Echantillon 1425 A. Composition de l échantillon Présence d anticorps anti-mitochondries de spécificité M2. B. Dépistage des anticorps anti-nucléaires sur lame Hep2 1. Résultats qualitatifs Résultats au niveau du noyau Parmi les 99 participants, 10 laboratoires (10,1%) observent la présence d une fluorescence au niveau du noyau avec les lames Hep2 commercialisées par BIORAD et BIOADVANCE (tableau IX). L aspect de fluorescence observée est majoritairement de type dots nucléaires (tableau X). Lame Hep2 Absence Présence BIOADVANCE IF-HEp2 / Foie de primate 1 BIOADVANCE IFI : HEp2 anti ANA 2 BIOADVANCE IFI : HEp20-10 anti ANA 8 2 BIOADVANCE/EUROIMMUN IF-HEp20-10 / Foie de primate 8 BIO-RAD Kallestad HEp 2 - Kit 14 4 BIO-RAD Kallestad HEp 2 Slides 14 4 BIO-RAD Quantafluor Lame HEp2 2 BIOSYSTEMS Anti-nuclear antibodies HEp-2 (ANA-HEp-2) 1 EUROBIO / ZEUS ANA HEp2 IFI (ref 24052 ; 24012, 2401, 2502) 4 EUROBIO Hep-2 / ANA Coffret complet 1 EUROBIO HEp2000 ANA ImmunoConcept Détection des autoanticorps antinucléaires : cellules HEp-2000 7 EUROBIO HEp-2000 ANA kit ImmunoConcept Détection des autoanticorps antinucléaires: cellules HEp-2000 (Bleu Evans) 1 IMMUNOCONCEPT ANA-Ro fluorescent HEp2000 2 INGEN/ ImmuGlo ANA lame HEp-2 IFA 1 INOVA NOVA Lite HEp-2 13 MENARINI Nova- lite ANA HEp2 2 ORGENTEC/ BIOSYSTEMS Cellules Hep2 Coffret 1 THERADIAG ANA-HEp-2 coffret 7 Total général 89 10 Tableau IX. Résultat qualitatif de la fluorescence du noyau pour l échantillon 1425 Aspect de la fluorescence du noyau Effectif Autre 1 Dots nucléaires 6 Moucheté 1 Moucheté / Nucléolaire 1 Nucléolaire / Dots nucléaires 1 Total général 10 Tableau X. Aspect de la fluorescence du noyau pour l échantillon 1425 Page 9 sur 15

Résultats au niveau du cytoplasme 95,9% des participants ont noté la présence d une fluorescence cytoplasmique, deux laboratoires mentionnent qu ils ne réalisent pas cette recherche et un laboratoire n a pas observée de fluorescence sur cet échantillon 1425 (tableau XI). La majorité des laboratoires 84,4% ont observé une fluorescence cytoplasmique de type anti-mitochondries (tableau XII). Résultat qualitatif fluorescence du cytoplasme Effectif Absence 1 Non réalisée 2 Présence 96 Total général 99 Tableau XI. Résultat qualitatif de la fluorescence du cytoplasme pour l échantillon 1425 Aspect de la fluorescence du cytoplasme Effectif Aucun aspect 4 Cytoplasmique (autre) 10 Cytoplasmique de type anti-mitochondries 81 Cytoplasmique de type anti-ribosome 1 Total général 96 Tableau XII. Aspect de la fluorescence du cytoplasme pour l échantillon 1425 2. Résultats quantitatifs Résultats au niveau du noyau Les résultats rendus sur noyaux n ont pas été analysés car il s agit de réponses erronées : il n y avait pas de fluorescence nucléaire. Résultats au niveau du cytoplasme L échantillon contenait un titre élevé d anticorps anti mitochondrie : la médiane des participants est de 1/640 (figure 5). Les résultats sont très dispersés avec 5 dilutions d écarts. Ces dispersions se retrouvent en intra-réactif (tableau XIII). 20 Répartition des titres en inverse de dilution pour la fluorescence cytoplasmique Médiane = 640 Nombre de réponse 15 10 5 0 80 >80 100 >100 160 >160 200 320 400 640 >640 800 1280 >1280 1600 2560 Total 4 2 1 1 5 3 1 13 2 14 2 1 18 2 1 4 Figure 5. Répartition des titres en IFI sur Hep2 pour la fluorescence cytoplasmique - Echantillon 1425 Page 10 sur 15

Lame Hep2 N Médiane Min Max BIOADVANCE IFI : HEp20-10 anti ANA 6 1280 640 2560 BIOADVANCE/EUROIMMUN IF-HEp20-10 / Foie de primate 6 960 400 1280 BIO-RAD Kallestad HEp 2 - Kit 14 180 80 1280 BIO-RAD Kallestad HEp 2 Slides 14 640 320 1280 EUROBIO / ZEUS ANA HEp2 IFI (ref 24052 ; 24012, 2401, 2502) 3 1280 1280 1280 INOVA NOVA Lite HEp-2 10 640 160 2560 Tableau XIII. Résultats quantitatifs 1425 - IFI sur Hep2 pour fluorescence observée au niveau du cytoplasme C. Recherche des anticorps anti DNA natif Pour l échantillon 1425, on observe 100 % de bonne réponse c est-à-dire négatif. Parmi les 102 laboratoires, 4 n ont pas réalisé la recherche sur cet échantillon. D. Recherche et identification des anticorps anti-antigènes nucléaires solubles Recherche d ENA Totaux : 53 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont tous rendu un résultat négatif. Recherche d Anticorps anti - SS-A : parmi les 70 laboratoires ayant réalisé cette recherche on observe 69 réponses négatives et une réponse douteuse obtenue avec le réactif PHADIA/THERMO FISCHER EliA. Recherche d Anticorps anti - SS-B : 69 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont tous rendu un Recherche d Anticorps anti Sm : 68 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont tous rendu un Recherche d Anticorps anti - RNP : 31 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont rendu un résultat négatif. Recherche d Anticorps anti - Sm/RNP : 57 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont rendu un Recherche d Anticorps anti - Scl70 : 69 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont rendu un Recherche d Anticorps anti - JO1 : 69 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont rendu un résultat négatif. Recherche d Anticorps anti - PCNA : 24 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont rendu un Recherche d Anticorps anti - CENP-B : parmi les 48 laboratoires ayant réalisé cette recherche on observe 47 réponses négatives et une réponse positive obtenue avec le réactif PHADIA/THERMO FISCHER EliA. E. Commentaires Cet échantillon contenait un titre élevé d anticorps anti-mitochondrie et ne posait pas de problèmes particuliers. Les résultats qualitatifs sont bons dans l ensemble. On observe une dispersion importante des titres, mais celle-ci est sans conséquence puisque le titrage est réalisé en routine de laboratoire sur triple substrat. Page 11 sur 15

IV. Echantillon 1426 A. Composition de l échantillon Présence d anticorps anti- SS-A et SS-B et anti-dna. B. Dépistage des anticorps anti-nucléaires sur lame Hep2 1. Résultats qualitatifs Résultats au niveau du noyau On observe un seul résultat faussement négatif (tableau XIV). L aspect attendu était homogène et moucheté fin : 31,6 % ont observé ce type de fluorescence, 41,8% des laboratoires ont observé uniquement l aspect homogène, 24,5% ont vu un aspect de fluorescence moucheté seul (tableau XV). Résultat qualitatif fluorescence du noyau Effectif Absence 1 Présence 98 Total général 99 Tableau XIV. Résultat qualitatif de la fluorescence du noyau pour l échantillon 1426 Aspect de la fluorescence du noyau Effectif Homogène 41 Homogène / Autre 1 Moucheté 24 Moucheté / Autre 1 Moucheté / Homogène 31 Total général 98 Tableau XV. Aspect de la fluorescence du noyau pour l échantillon 1426 Résultats au niveau du cytoplasme Sur les 99 participants, 2 laboratoires n ont pas réalisé cet examen et les 97 autres n ont pas observé de fluorescence au niveau du cytoplasme. 2. Résultats quantitatifs Résultats au niveau du noyau La dispersion de l ensemble des résultats est moindre que pour les échantillons 1424 et 1425 (pas de titre <1/160) mais reste élevée (figure 6). La médiane des titres rendus sur noyaux est de 1/640. Les médianes intra-réactifs sont comparables (tableau XVI). Page 12 sur 15

Répartition des titres en inverse de dilution pour fluorescence au niveau du noyau Médiane = 640 35 Nombre de réponse 30 25 20 15 10 5 0 160 >160 320 400 640 >640 800 1280 >1280 1600 2000 Total 11 1 26 5 31 2 2 12 4 1 1 Figure 6. Répartition des titres en IFI sur Hep2 - Echantillon 1426 Lame Hep2 N Médiane Min Max BIOADVANCE IFI : HEp20-10 anti ANA 10 640 320 1280 BIOADVANCE/EUROIMMUN IF-HEp20-10 / Foie de primate 6 520 400 1280 BIO-RAD Kallestad HEp 2 - Kit 17 320 160 2000 BIO-RAD Kallestad HEp 2 Slides 16 320 160 1280 EUROBIO / ZEUS ANA HEp2 IFI (ref 24052 ; 24012, 2401, 2502) 3 640 640 640 EUROBIO HEp2000 ANA ImmunoConcept Détection des autoanticorps antinucléaires : cellules HEp-2000 7 640 320 640 INOVA NOVA Lite HEp-2 10 640 320 1280 THERADIAG ANA-HEp-2 coffret 7 320 160 1280 Tableau XVI. Résultats quantitatifs 1426 - IFI sur Hep2 pour fluorescence observée au niveau du noyau C. Recherche des anticorps anti DNA natif Les résultats sont dispersés (tableau XVII) : - 60,8% de résultats positifs ou douteux ; - 39.2% de résultats faussement négatifs. Les résultats quantitatifs sont proches des seuils (tableaux XVIII et XIX). Page 13 sur 15

Négatif Douteux Positif Chimiluminescence 3 5 DIASORIN LIAISON dsdna 5 MENARINI ZENIT RA ds DNA IgG 3 IFI 1 15 BIOADVANCE crithidia luciliae anti-ndna 9 BIORAD Kallestad crithidia luciliae 1 2 INOVA DIAGNOSTICS Nova lite Crithidia luciliae 1 ORGENTEC Critidia luciliae Coffret 1 THERADIAG Chrithidia Luciliae 2 ImmunoDot 1 5 BIOADVANCE/ EUROIMMUN Euroassay anti-ena Profil, dsdna 1 BIOADVANCE/ EUROIMMUN EUROLINE ANA Profil 3 4 THERADIAG DNA-Dot 1 Immunoenzymologie 32 5 28 Autre 1 BIOADVANCE/EUROIMMUN Elisa anti-dsdna 2 2 BIORAD Kallestad anti - ds DNA microplate EIA 1 12 DIASORIN ETI-dsDNA 1 IMMUNOCONCEPTS RELISA anti-dsdna 1 INOVA DIAGNOSTICS QUANTA Lite dsdna 3 INOVA DIAGNOSTICS QUANTA Lite dsdna SC 1 3 ORGENTEC Anti-dsDNA IgG 1 ORGENTEC Anti-dsDNA IgG (Alegria) 9 ORGENTEC Anti-dsDNA Screen (Alegria) 1 PHADIA/THERMO FISHER EliA dsdna Well 18 2 1 PHADIA/THERMO FISHER Varelisa ssdna antibodies 1 THERADIAG DNA-LISA 1 THERADIAG Chorus dsdna IgG 3 THERADIAG ELISIS dsdna IgG 1 RIA 1 SIEMENS ANTI-ADN 1 X-MAP 3 3 BIORAD BioPlex 2200 ANA Screen 3 THERADIAG FIDIS Connective Profil 3 Total général 40 5 57 Tableau XVII. Résultat qualitatif - Echantillon 1426 Réactif N Médiane Min Max BIOADVANCE crithidia luciliae anti-ndna 6 45 10 160 Tableau XVIII. Résultat quantitatif - Echantillon 1426 (Titre en inverse de dilution) Réactif N N* Moyenne ET CV% Min* Max* BIOADVANCE/EUROIMMUN Elisa anti-dsdna 4 3 97,33 11,02 11,32 90 110 BIORAD Kallestad anti - ds DNA microplate EIA 12 9 74,66 20,53 27,50 48 105,48 DIASORIN LIAISON dsdna 5 4 43,83 4,62 10,54 40 50,3 ORGENTEC Anti-dsDNA IgG (Alegria) 9 9 10,49 0,74 7,01 9 11,2 PHADIA/THERMO FISHER EliA dsdna Well 19 18 7,11 1,67 23,52 4,6 9,8 Tableau XIX. Résultat quantitatif - Echantillon 1426 (Titre en UI) D. Recherche et identification des anticorps anti-antigènes nucléaires solubles Recherche d ENA Totaux : parmi les 54 laboratoires ayant réalisé cette recherche on observe 52 réponses positives et 2 réponses négatives obtenues avec les réactifs ORGENTEC ENA Screen (Alegria) et THERADIAG ELISIS ENA Polyvalent IgG. Page 14 sur 15

Recherche d Anticorps anti - SS-A : parmi les 94 laboratoires ayant réalisé cette recherche on observe 93 réponses positives et une réponse négative obtenue avec le réactif THERADIAG ENA Dot 7. Recherche d Anticorps anti - SS-B : parmi les 94 laboratoires ayant réalisé cette recherche on observe 91 réponses positives, deux réponses négatives obtenues avec le réactif ORGENTEC ALEGRIA et D- TEK/ DIASORIN BlueDOT ANA8 IgG et une réponse douteuse avec le réactif ORGENTEC ALEGRIA. Recherche d Anticorps anti Sm : 89 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont rendu un résultat négatif. Recherche d Anticorps anti - RNP : 43 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont rendu un résultat négatif. Recherche d Anticorps anti - Sm/RNP : 70 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont rendu un Recherche d Anticorps anti - Scl70 : 92 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont rendu un Recherche d Anticorps anti - JO1 : 89 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont rendu un résultat négatif. Recherche d Anticorps anti - PCNA : 27 laboratoires ont réalisé cette recherche et ont rendu un résultat négatif. Recherche d Anticorps anti - CENP-B : parmi les 54 laboratoires ayant réalisé cette recherche on observe 53 réponses négatives et une réponse douteuse obtenue avec le réactif D-TEK/ DIASORIN BlueDOT ANA10 IgG. E. Commentaires La dispersion des résultats concernant les anticorps anti-dna s explique par un faible titre d anticorps et une différence de sensibilité des réactifs. Un effet matrice ne peut être exclu. L évaluation individuelle des participants est donc faite par réactif. **** Rédaction : Dr S. ALBAREDE - s.albarede@ctcb.com Pharmacien Biologiste Dr F. FORTENFANT - fortenfant.f@chu-toulouse.fr Laboratoire d Immunologie - CHU de Toulouse - Hôpital Rangueil Autorisation du rapport d essai d aptitude par le Coordonnateur des programmes : Dr S. ALBAREDE - s.albarede@ctcb.com Pharmacien Biologiste ***** PS : Ces documents doivent être archivés selon les recommandations du GBEA (Arrêté du 26 novembre 1999, paru au JO du 11 décembre 1999). --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Pour tout renseignement : ADMINISTRATIF : Marie-Christine ONDERBEKE, Tél. : 05.34.51.49.80 - Fax : 01.57.67.25.90 - secretariat.ctcb@ctcb.com ADMINISTRATIF et TRAITEMENT STATISTIQUE : Delphine GARIMBAY, Tél. : 05.34.51.49.81 - d.garimbay@ctcb.com ASSURANCE QUALITE : Erick SANCHEZ, Tél. : 05.34.51.49.82 - e.sanchez@ctcb.com INFORMATIQUE : Philippe GONZALVO - p.gonzalvo@ctcb.com Information : Les essais d homogénéité et de stabilité se sont avérés conformes aux modalités décrites dans la procédure de contrôle. Les documents utilisés pour réaliser ce programme d intercomparaison (préparation des objets d essai, détermination des valeurs indicatives et assignées, traitement statistique, ) sont disponibles sur demande auprès du CTCB. L interprétation de ces résultats ne doit pas se faire isolément et doit être rapprochée de ceux obtenus lors des autres opérations de contrôle effectuées dans le cadre de l évaluation interne et de l évaluation externe du laboratoire. Page 15 sur 15