L Allergologie moléculaire

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L Allergologie moléculaire Pr Gabrielle Pauli Mars 2013 Nous vous remercions de bien vouloir patienter, la conférence va commencer dans quelques instants

Une source allergénique contient des centaines de molécules mais seules certaines d entre elles sont allergéniques

Vous savez qu il s agit d une allergie, mais Connaissez-vous la vraie cause de la sensibilisation? Savez-vous quel est son degré de sévérité? La prise en charge de votre patient est-elle optimale? Tout dépend des composants allergéniques en cause

Sources allergéniques - Culture d acariens - Pollens - Moisissures et leur milieu de culture Extraits allergéniques la variation du contenu des allergènes majeurs peut atteindre 1000 Molécule allergénique Système multi-allergénique Système pauci-allergénique

Nomenclature des allergènes Ex rbet v 1 ou nbet v 1, allergène majeur du bouleau Abréviation Signification Explication n Naturel purifié à partir de la source (le pollen) r Recombinant produit dans différents microorganismes (bactérie, levures, cellules d insectes ) Bet Betula les 3 premières lettres du taxon v verrucosa la première lettre de l espèce 1 Ordre de découverte de l allergène (ou allergène marqueur, i.e. prévalence de sensibilisation élevée).

De la source allergénique aux composants

L expression clinique d une sensibilisation à un composant est variable. Elle dépend des caractéristiques suivantes : Spécificité d espèces Réactivité croisée Stabilité

Composants allergéniques spécifiques : Marqueurs d une vraie sensibilisation Fréquemment associés à un risque clinique Arachide Ara h 2 Abeille Api m 1 Oeuf Gal d 1 Phléole Phl p 1 Bouleau Bet v 1 Gal d 1 = Gallus domesticus, allergène n 1

Composants allergéniques croisants Composants similaires présents dans différentes sources allergéniques, même d espèces éloignées Marqueurs de réactivité croisée des IgE vis à vis de ces sources

Pollens Fruits Vég. comes. Arbres Graminées Herbacées Noix Légumes Latex Pan allergène Profiline X X X X X X X X Eur allergène Polcacine X X X LTP X X X X X X PR 10 X X X X X Hev. Like X X X X β 1 3 glucanase X X X X Sten allergène Ole e 1 like X X X Cycloph. X X Isoflavone reductase X X Thaumatine like X X X Mono allergène Expansine X Fact. Elong. latex X 2s albumine X

Conséquences Cliniques Sensibilisation à des composants spécifiques : Indication d une immunothérapie spécifique Sensibilisation à des composants croisants seulement : Poursuivre les investigations pour identifier le sensibilisant primaire

Indication de l ITS : comparaison prick tests seuls / prick test +l allergologie moléculaire Nombre Patients (%) avec une indication d ITS concordante Nombre Patients (%) avec une indication d ITS discordante 62 (46) 79 (54) L allergologie moléculaire permet de mieux cibler l immunothérapie spécifique

Observation n 1 Emilie, 29 ans Anamnèse Rhino-conjonctivite chronique, exacerbée du printemps au début de l été Attaque d asthme en mai 2000 et juin 2002 Rhinite au contact des chats A l âge de 10 ans, désensibilisation avec un extrait d acariens domestiques : efficacité insuffisante Pas d allergie alimentaire

Observation n 1, tests cutanés

Observation n 1 Emilie, 29 ans IgE spécifiques Bouleau 4,23 KU Armoise 1,44 KU Graminées 5,80 KU Conclusion provisoire Rhino-conjonctivite chronique : allergie aux acariens et +/- chat Symptômes saisonniers : Est-elle allergique à tous ces pollens? Quelle est la pertinence clinique de ces sensibilisations cutanées? Quelles sont les conséquences pour le traitement?

Vraie(s) co-sensibilisation(s)? Armoise Bouleau Phléole

...et/ou réactivité croisée? Armoise Bouleau Phléole

Composants allergéniques spécifiques Phl p 1 Phl p 5 Composants allergéniques à réactivité croisée Profiline Polcalcine Phl p 12 Phl p 7 Art v 1 Art v 4 Art v 5 Bet v 1 Bet v 2 Bet v 4

Quand l homologie est suffisamment forte, un composant peut être utilisé à la place d un autre composant homologue : Phl p 1 Phl p 5 Profiline Polcalcine Art v 1 Phl p 12 Phl p 7 ou ou Bet v 2 Bet v 4 Bet v 1

Observation n 1 Emilie, 29 ans Dosages des IgE spécifiques des composants : Bouleau Phléole rbet v 1 < 0,1 rbet v 2 profiline : 2 kua/l rbet v 4 polcalcine : < 0,1 rphl p 1 (extensine) : 4 ku A /l rphl p 2 (extensine) : < 0,1 rphl p 5 (ribonucléase) : 4 ku A /l

Observation n 1 Emilie, 29 ans Conclusion Allergie aux pollens de graminées avec une sensibilisation croisée aux autres pollens via les profilines. Les sensibilisations au bouleau, à l armoise, et aux autres pollens ne sont pas pertinentes Désensibilisation à l extrait de pollen de graminées

En conclusion, le diagnostic moléculaire des allergies polliniques N est pas indispensable en cas de monosensibilisation à un pollen avec une histoire clinique compatible Est indispensable en cas de polysensibilisations à plusieurs pollens ++ s il y a recouvrement des saisons polliniques Bouleau, frêne, Graminées, fagacées (chêne, hêtre, châtaignier) Pour confirmer une allergie pollinique à des pollens appartenant à la même famille (fagales : aulne, noisetier). Pour éliminer une allergie pollinique non pertinente seulement révélée par les tests cutanés. Si on veut débuter une désensibilisation.

Autre exemple : les acariens Composants spécifiques majeurs 75 sérums de patients Alsaciens (dosages effectués par S. Vrtala, R. Valenta - Vienne) Tropomyosine

Observation n 2 Camille, 8 ans, suspicion d allergie à l arachide Histoire clinique Tests cutanés IgE spécifiques Rhino conjonctivite saisonnière en mars /avril qui s aggrave depuis 2 ans Œdème des lèvres après consommation de noisette fraiche Prurit pharyngé isolé après consommation de M&M s Positifs : graminées, bouleau, noisette, arachide Négatifs : autres pneumallergènes courants et autres fruits à coque Bouleau : 15 ku/l Noisette : 9,6 ku/l Arachide : 8,7 ku/l

Observation n 1 Camille, 8 ans, suspicion d allergie à l arachide Conclusion provisoire Allergie au pollen de bouleau Allergie alimentaire à l arachide et à la noisette : Risque de réaction sévère? Eviction de la noisette et de l arachide? et sous quelle forme?

Stabilité de la protéine et risque clinique température sucs digestifs Protéine labile réaction locale Protéine stable réaction systémique

Profiline Regulatory actin binding protein Identité de plus de 75 % entre les différentes profilines. Gradient de sensibilisation aux profilines Nord Sud < 10 % dans les pays du Nord de l Europe 28 38 % en Europe du Sud. Protéines sensibles à la chaleur et à la digestion Syndrome oral essentiellement. 50 % de pertinence clinique (Asero, Clin Exp Allergy 2008)

PR-10 Pathogenesis-related proteins Homologues de Bet v 1 présents dans les autres fagales et divers aliments Gradient de sensibilisation aux PR10 Nord Sud > 90% dans les pays du Nord de l Europe Jusqu à 30 % en Europe du Sud. Sensibles à la chaleur et à la digestion Syndrome oral essentiellement Les fruits cuits sont habituellement bien tolérés

nsltp Transfère les lipides entre les liposomes et les membranes cellulaires Principalement localisées dans la peau du fruit Stables Sensibilisation prédominante dans les régions méditerranéennes Symptômes : du syndrome oral à l anaphylaxie sévère. Le patient peut développer au cours du temps des réactions plus sévères au même aliment Faible homologie LTP pollen-aliments

Les protéines de stockage Albumines, globulines, vicilines Présentes dans les graines Contribuent à la croissance des plantes Plus fréquemment en cause chez les enfants Très stables, symptômes potentiellement sévères

Evaluation du risque pour l arachide, Spécifiques de l arachide, stables, risque élevé de réaction systémique

Observation n 2 Camille, 8 ans Dosages des IgE spécifiques des composants : Bouleau Arachide Noisette Bet v 1 : 12,3 ku A /l Bet v 2 : 1,3 ku A /l Ara h 1 : < 0,1 Ara h 2 : 0,15 ku A /l Ara h 3 : < 0,1 ku A /l Ara h 8 : 8,76 ku A /l Cor a 1 : 8,5 ku A /l Cor a 8 : < 0,1

Réactivité croisée bouleau et arachide

Observation n 2 Camille, 8 ans Conclusion Allergie au pollen de bouleau Allergie alimentaire croisée à l arachide (Ara h 8) et à la noisette (Cor a 1) par le biais des PR 10 Se manifestant uniquement par un syndrome oral et pour des quantités importantes Pas d allergie potentiellement sévère (Ara h 1, Ara h 2, Ara h 3, Cor a 8)

Observation n 2 Camille, 8 ans Prise en charge Désensibilisation au bouleau (bet v 1 prédominant / profiline) Possibilité de consommer des noisettes cuites et du Nutella. (TPO pour éliminer une sensibilisation à Cor a 9 ) Possibilité de consommer de l arachide (peu symptomatique)

En conclusion, le diagnostic moléculaire des allergies alimentaires vous aide à Evaluer un risque de réactions sévères Savoir si le patient peut tolérer l aliment sous certaines formes Connaitre un risque de persistance de l allergie Et en conséquence choisir la meilleure prise en charge pour le patient Eviction? Eviction stricte? Kit d urgence?

L Allergologie Moléculaire améliore le diagnostic de l allergie