HOPITAL SA I NT JOSCPH

HOPITAL SA I NT JOSCPH MARSEILLE Vrtrdeüol rervlce queliu Code : 2LBM)10 verslon : 03 Laboratoire autorisé Arrêté du 7 aout 1996 Manuel du dépistage de La Trisomie 21 fætale par les Marqueurs Sériques Maternels Fonction Nom : Visa : Rédaction : Vérification : Approbation : MP. Direction ÂÂâJicate

SOMMAIRE 1. Eléments nécessaires au dépistage de la Trisomie 21 par les Marqueurs Sériques Maternels..4 1.1. Périodes du dépistage et Marqueurs Sériques Maternels.4 1.2. Mesure de la clarté nucale fœtale.4 1.3. Cas des Grossesses gémellaires.4 1.4. Cas des jumeaux évanescents.4 1.5. Documents indispensables pour la prise en charge 5 1.6. Facteurs correctifs à indiquer sur la fiche de renseignements 5 2. Rendu des résultats 6 2.1. Seuil de décision 6 2.2. Délais et modalités de rendu 6 2.3. Compte-rendu de résultat 7 2.4. Cas particulier d un risque proche du seuil 7 2.5. Expression des résultats 7 2.6. Bornages du logiciel de calcul de risque 7 2.7. Profils atypiques : commentaires et conduite à tenir.8 3. Horaires du laboratoire et conditions de prélèvement.9 4. Issues de grossesse.9 5. Coordonnées du laboratoire.9 6. L encadrement réglementaire 10 7. Glossaire 10 2 de 10

Il est possible, pendant une grossesse, d estimer la probabilité que le fœtus soit porteur d une trisomie 21. Cette anomalie chromosomique est accidentelle dans 95% des cas. L hôpital Saint Joseph bénéficie sur son plateau de la présence d une maternité, d un laboratoire avec activité de biochimie spécialisée et de cytogénétique et d un généticien. Cela permet sur le même site de bénéficier d une prise en charge complète dans ce dépistage. La patiente peut réaliser sur place toutes les étapes : la consultation gynéco obstétricale, l échographie, le prélèvement sanguin pour les marqueurs sériques maternels (MSM), la consultation de génétique pour le rendu du résultat si nécessaire, le prélèvement pour DPNI ou placentocentèse ou amniocentèse si nécessaire. Il n est pas obligatoire que toutes les étapes soient réalisées sur place. L arrêté du 23 juin 2009 autorisant le dépistage de la trisomie 21 pendant une grossesse précise les différentes modalités de réalisation : - Le dépistage combiné du 1 er trimestre. Le calcul de risque associe l âge maternel, la mesure de la clarté nucale (CN) fœtale et les marqueurs sériques du 1 er trimestre (hg libre et PAPP-A). - Le dépistage séquentiel intégré. Le calcul de risque associe l âge maternel, la mesure de la CN fœtale (échographie du 1 er trimestre) et les marqueurs sériques du 2 ème trimestre (hcg totale et AFP). - Le dépistage par les marqueurs sériques du 2 ème trimestre sans intégration de la CN. Le calcul de risque associe l âge maternel et les marqueurs sériques du 2 ème trimestre (hcg totale et AFP). Il faut disposer de la date de fécondation, si possible obtenue par échographie. 3 de 10

1. Eléments nécessaires au dépistage de la trisomie 21 par les Marqueurs Sériques Maternels 1.1. Périodes du dépistage et marqueurs sériques maternels - 1 er trimestre : de 11 SA (semaines d aménorrhée) + 0 jour à 13 SA + 6 jours Marqueurs sériques dosés : PAPP-A (Pregnancy-Associated Plasma Protein-A) et βhcg libre. - 2 ème trimestre : de 14 SA + 0 jour à 17 SA + 6 jours Marqueurs sériques dosés : hcg totale et AFP (Alpha Foeto Proteine) Soit dépistage séquentiel intégré Soit dépistage par les seuls marqueurs sériques maternels du 2 ème trimestre - Dépistage possible au-delà de 17 SA + 6 jours. Le logiciel SSDW6 que nous utilisons permet de réaliser un dépistage jusqu à 19 SA + 6 jours. Pour une grossesse d âge gestationnel supérieur à 19 SA+6J, le prélèvement est transmis à un laboratoire réalisant cet examen au-delà de 20 SA. - La date du début de grossesse (DG) ou date de fécondation (DF) est donnée par la mesure de la longueur cranio-caudale (LCC) du fœtus à l échographie du 1 er trimestre. Dans le cas des marqueurs sériques du 2 ème trimestre, la DG est donnée soit par l échographie de datation soit par la date des dernières règles à laquelle 14 jours sont ajoutés. 1.2. Mesure de la clarté nucale fœtale La mesure de la clarté nucale fœtale doit être réalisée entre 11 SA + 0 jour et 13 SA + 6 jours, soit pour une LCC (longueur cranio caudale) du fœtus de 45 à 83.6 mm de LCC. L échographiste qui mesure la clarté nucale doit avoir un numéro d adhésion à un réseau périnatal. 1.3. Cas des Grossesses gémellaires Le dépistage combiné du 1 er trimestre ne peut pas être réalisé. La HAS recommande la mesure des CN. S il n y pas eu de mesure de CN, un dépistage par les marqueurs du 2 ème trimestre est proposé. Après mesure des CN, un dépistage du 2 ème trimestre séquentiel intégré est possible. 1.4. Cas des jumeaux évanescents En cas de jumeau évanescent (arrêt de développement d un des deux embryons), le prélèvement ne peut être réalisé que 5 semaines après l arrêt de développement de l embryon. En cas de présence d un deuxième sac sans développement embryonnaire, les MSM du 1 er trimestre peuvent être réalisés. 4 de 10

1.5. Documents indispensables pour la prise en charge Prescription médicale Feuille de renseignements (ou fiche d évaluation du risque T21 4LBM017) Compte-rendu échographie T1 (si dépistage du 1 er trimestre ou dépistage séquentiel intégré du 2 ème trimestre) comportant : Le nom de l échographiste et son numéro d identifiant à un réseau périnatal La date de l échographie Les mesures de CN et de LCC Nous souhaitons disposer du compte-rendu échographique afin d éviter les erreurs de transcription sur la feuille de renseignements. Le consentement de la patiente et l attestation de consultation médicale sont sur la fiche de renseignements : fiche d évaluation du risque T21 (4LBM017). Elle doit être signée par la patiente et par le médecin prescripteur. Une fiche d informations sur les marqueurs sériques maternels est remise à la patiente à la fin de l enregistrement administratif. 1.6. Facteurs correctifs à indiquer sur la fiche de renseignements Origine géographique de la patiente qui permet d intégrer dans le calcul un facteur correctif pour les différents MSM. Le terme origine géographique est imposé par la CNIL. Au moindre doute sur l origine (métissage ), aucun facteur correctif ne doit être appliqué. - Europe/Afrique du Nord : (Europe, Moyen Orient, Afrique du Nord, Amérique latine...) - Afro-Caribéen (Afrique subsaharienne, Comores, Caraïbes, Madagascar...) - Asiatiques : (Chine, Japon, Corée, Inde...) Ethnie par défaut : Europe/Afrique du Nord Poids maternel au moment du prélèvement Diabète : uniquement les patientes diabétiques insulino-dépendantes en dehors des grossesses Fumeur : à partir d 1 cigarette dans les 15 jours qui précèdent le prélèvement Fécondation in vitro : uniquement les patientes ayant eu un protocole de stimulation pour la ponction ovocytaire avec transfert d embryon frais. Ne pas cocher FIV si transfert d embryon congelé (TEC) ou fécondation avec ovocytes cryoconservés. 5 de 10

MSM Diabète Fumeuse FIV Ethnie AFP 0.8645 1.03 hcg 0.7526 0.77 Β-hCG 0.92 0.9608 0.97 PAPP-A 1 0.8352 0.80 Afro-Caribéen : 1.15 Asie : 0.94 Afro-Caribéen : 1.18 Asie : 1.06 Afro-Caribéen : 1.0437 Asie : 1.07 Afro-Caribéen : 1.3382 Asie : 1.09 2. Rendu du résultat La présence au sein de l hôpital Saint Joseph d un médecin généticien permet une prise en charge rapide des patientes dès l émission du résultat. 2.1. Seuil de décision Le seuil de risque retenu pour situer la patiente dans le groupe à risque accru de trisomie 21 a été fixé à 1/250. 2.2. Délais et modalités de rendu Les résultats sont validés par un biologiste agréé réception du prélèvement. dans un délai de 3 jours après Ils sont adressés par voie postale au médecin prescripteur, en double exemplaire pour qu il puisse en remettre un à la patiente, en cas de risque faible. Ils sont téléphonés et faxés en cas de risque supérieur au seuil de 1/250 justifiant une prise en charge adaptée. Le résultat n est pas rendu directement à la patiente par le laboratoire. Cependant, un résultat comprenant les informations qui ont été utilisées et le résultat des dosages peut lui être rendu si elle le souhaite. 6 de 10

2.3. Compte-rendu de résultat Les données qui ont servi au calcul de risque se trouvent sur le compte rendu du résultat : Date de prélèvement Date de naissance de la patiente Nombre de fœtus Caractère fumeur Poids de la patiente Origine géographique Nom et numéro de réseau de l échographiste Date de l'échographie Longueur craniocaudale (LCC) Clarté nucale (CN) Antécédent de trisomie 21 (apparait uniquement si existant) Diabète Réalisation d une FIV avec ou sans donneuse d ovocytes. Si don d ovocyte, âge maternel de la donneuse Ces données doivent être vérifiées attentivement. En cas d erreur constatée par la patiente ou le médecin prescripteur, merci de nous le signaler afin qu un nouveau calcul soit réalisé avec les informations justes. Le nouveau résultat annule et remplace le précédent. 2.4 Cas particulier d un risque proche du seuil Pour ces dossiers, une attention particulière doit être portée concernant les facteurs influençant le calcul de risque. 2.5. Expression des résultats Le résultat des marqueurs est exprimé en MoM (Multiple de la Médiane). Dans le cas d un risque supérieur ou égal à 1/250, le commentaire édité sur le compte rendu est le suivant : «Patiente appartenant à une groupe à risque élevé de trisomie 21 fœtale, un caryotype fœtal doit être proposé». 2.6. Bornage du logiciel de calcul de risque Le logiciel SSDW6 utilisé comporte des bornages. Le bornage correspond à la valeur limite d un marqueur au-delà ou en deçà de laquelle les équations des facteurs de risque ne sont plus adaptées car ces valeurs extrêmes n appartiennent plus aux distributions des populations de références utilisées dans le calcul de risque. Cela signifie que le calcul de risque tient compte de la valeur bornée (en MoM) et non de la valeur réelle du marqueur (en MoM) si celle-ci est située en deçà ou au delà de la valeur du bornage. 7 de 10

Tableau du bornage du logiciel SSDW6 SSDW6 Borne mini Borne maxi AFP 0.4 3.0 hcg 0.2 5.0 b-hcg 0.3 5.0 PAPP-A 0.2 3.0 CN 0.78 5.0 Sur le compte rendu, un commentaire est ajouté lorsque le résultat en MoM d un marqueur est en dehors d une borne du logiciel. Un courrier est joint au résultat. Commentaires utilisés dans le compte rendu du résultat hcg sup à 5 MoM Le risque calculé de Trisomie 21 est sous estimé en raison du bornage du logiciel à 5 MoM pour le dosage de l'hcg totale. Une prise en charge adaptée doit être proposée. b-hcg sup à 5 MoM Le risque calculé de Trisomie 21 est sous estimé en raison du bornage du logiciel à 5 MoM pour le dosage de la bêta libre. Une prise en charge adaptée doit être proposée. PAPP-A < à 0.2 MoM Le risque calculé de Trisomie 21 est sous estimé en raison du bornage du logiciel à 0.2 MoM pour le dosage de la PAPP-A. Une prise en charge adaptée doit être proposée. Si le risque est proche du seuil de 1/250, la patiente doit être adressée en consultation. Une échographie précoce, un caryotype fœtal ou un DPNI devant être discutés. 2.7 Profils atypiques : commentaires et conduite à tenir Devant les valeurs atypiques d un ou plusieurs marqueurs sériques maternels, un commentaire est ajouté dans le compte rendu. 8 de 10

Commentaires ajoutés dans compte rendu en fonction des situations. AFP 2.5 MoM hcg > 10 MoM b-hcg et PAPP-A < 0.5 MoM PAPP-A < 0.25 MoM PAPP-A 3 MoM b-hcg < 0.25 MoM AFP 2,5 MoM. Une échographie orientée doit être proposée. Taux élevé d'hcg. Un prélèvement de contrôle de l'hcg est conseillé. Patiente ayant un risque de pathologie vasculaire. Une échographie avec un référent doit être proposée. Profil hormonal atypique, valeurs basses de l' HCG libre et de la PAPP-A qui sont inférieures à 0.5 MoM. Une échographie morphologique précoce doit être proposée. Merci de nous transmettre le compte rendu et le suivi de la grossesse. Profil atypique, valeur basse de la PAPP-A < 0,25 MoM. Une échographie spécialisée est à proposer. Devant cette valeur élevée de PAPP-A, s'assurer qu'il ne s'agit pas d'une grossesse gémellaire, d'un jumeau évanescent ou d'une réduction embryonnaire. Nous transmettre cette information pour adapter la prise en charge de cette patiente. Si c'est le cas, il faut réaliser les marqueurs du 2 ème trimestre. Profil atypique, valeur basse de la bêta libre < 0,25 MoM. Une échographie spécialisée est à proposer. 3. Horaires du laboratoire et conditions de prélèvement Les patientes et les prélèvements peuvent être accueillis au laboratoire de 7 heures à 19 heures du lundi au vendredi et le samedi matin de 8H à 12 H sans rendez-vous. Il n est pas nécessaire d être à jeun. Le prélèvement doit être réalisé juste après l échographie T 1. 4. Issues de grossesse Le laboratoire de l Hôpital Saint Joseph dispose d une activité de cytogénétique qui transmet de façon systématique tous les résultats de caryotypes fœtaux dont les MSM ont été réalisés au sein de l établissement. 5. Coordonnées du laboratoire Laboratoire de Biologie Médicale de l Hôpital Saint Joseph 26, boulevard de Louvain 13285 Marseille cedex 08 Téléphone secrétariat : 04 91 80 69 65 / 04 91 80 65 19 (de 7h a 19h) Accès internet au site de l hôpital Saint Joseph: http://www.hopital-saint-joseph.fr 9 de 10

Les Praticiens agréés : - Le Dr Marie-Pierre BRECHARD agréée depuis 1998 - Le Dr Pierre YEROKINE - agréé depuis 1998-6 technicien(ne)s habilité(e)s permettant d assurer une continuité de l activité. - Le laboratoire adhère au réseau PERINAT-SUD - Déclaration de l activité T21 à la CNIL Réf : 1815889 v0 6. L'encadrement réglementaire Le dépistage du risque de trisomie 21 fœtale est encadré par des textes législatifs. Encadrement général : Loi du 29.07.1994 (Bioéthique) et Décret du 06.05.1995 Autorisations de laboratoires : JO du 07.08.1996, Décret du 22.12.2006 Encadrement de la prescription lors de la consultation médicale et des analyses : Décret du 28.05.1997, Arrêté du 23.01.1997, Arrêté du 11.02.1999, Arrêté du 23.06.2009, Arrêté du 19.02.2010, Arrêté du 27 mai 2013, Arrêté du 14 janvier 2014. Encadrement de l'archivage : Décret du 28.05.1997 et Arrêté du 23.06.2009 Accréditation : Rapport Ballereau de 2009 et Guides SH GTA 04, SH GTA 06, et SH GTA 14 du Cofrac. 7. GLOSSAIRE MSM : Marqueurs sériques maternels MST : Marqueurs sériques maternels pour estimation du risque de T21 foetale ABA : Association des biologistes agréés DG : Date de début de grossesse DF : Date de fécondation LCC : Longueur cranio caudale CN : Clarté nucale 10 de 10

Laboratoire autorisé Arrêté du 7 aout 1996 Manuel du dépistage de La Trisomie 21 fœtale par les Marqueurs Sériques Maternels Fonction Nom : Visa : Rédaction : Vérification : Approbation : Biologiste Dr. P. YEROKINE Généticien Dr. MP. BRECHARD Direction Médicale