Marqueurs du suivi au stade M+ François-Clément Bidard Département d Oncologie Médicale Laboratoire des biomarqueurs circulants dirigés par le Pr Jean-Yves Pierga Institut Curie
Biopsie liquide «surrogate» de la biopsie solide +/- information supplémentaire? Cellules Tumorales Circulantes (CTC) ADN tumoral circulant (ctdna) Autres : mirna, RNA cellules endothéliales marqueurs sériques Bidard et al, Sci Transl Med 2013 Différences : processus biologiques de «relargage» différents signification Similarités : cellules et ADN très rares, «perdues» au milieu de cellules / ADN normal
Cellules tumorales circulantes Différentes techniques utilisées depuis >10 ans 1 seule (CellSearch) a démontré sa reproductibilité (label CE & FDA pour IVD) Comptage des CTC +++ Caractérisation moléculaire
Cellules tumorales circulantes Décompte de CTC = facteur pronostique PFS & OS Validité % autres facteurs pronostiques? Validité % marqueurs sériques? Méta-analyse européenne 1944 dossiers individuels 20 études 17 centres 7 pays
PFS OS Avant début du traitement Changements précoces (#J21) en cours de traitement Bidard et al, Lancet Oncol 2014
Les CTC améliorent significativement la prédiction pronostique par rapport à un modèle optimisé clinico-biologique avant ET pendant traitement par rapport aux marqueurs sériques (ACE et CA15.3) CTC (CellSearch ) = facteur pronostique dynamique dans le cancer du sein métastatique Niveau de preuve I Bidard et al, Lancet Oncol 2014
Utilité clinique cancer du sein métastatique + DETECT IV CirCe T-DM1 Bidard et al, Cancer Met Rev 2014
STIC CTC: décision en 1 ère ligne M+ RH+ Bidard et al, Cancer Met Rev 2014
STIC CTC: décision en 1 ère ligne M+ RH+ Oct 2014: >360 patientes randomisées en France - Quand décision «a priori» de débuter par une hormonothérapie, confirmation par les CTC dans #70% des cas traitement changé en chimiothérapie dans #30% des cas - Quand décision «a priori» de débuter par une chimiothérapie, confirmation par les CTC dans #45%des cas traitement changé en hormonothérapie dans 55% des cas
ADN tumoral circulant Bidard et al, Sci Transl Med 2013
<10cm2, non-metastatic, residual, treatable >10cm2, metastatic, overt, non-treable ADN tumoral circulant Sensibilité / Spécificité Blood reservoir Mutated allele fraction 100% 10% Sanger Sequencing 1% real-time PCR, NGS 0.1% ctdna fraction < 0.01% possible 0.01% Multiplex: plusieurs mutations à la fois BEAMing, digital PCR, modified NGS Clinically relevant
ADN tumoral circulant Mesure «multicible» de mutations dans le ctdna par NGS ciblé sur patients sélectionnés (ctdna élevé ++) ++ preuve de concept ++ Recherche pour l instant mais futur très proche (SHIVA; SAFIR02 ) Forshew et al, Nature 2013
Extracted cfdna cfdna Patient sequenced ADN tumoral (ng/ml circulant (ng) plasma) Mutation Metastasis biopsy (reads) % variant Plasma (reads) Detected (>1% variant) biopsy / plasma Concordance biopsy-plasma (Y/Y or N/N) Excellente concordance entre plasma et biopsie maladie métastatique Essai SHIVA 27 patients 29 mutations par biopsie solide 28 par biopsie liquide P -1 6.8 4.5 TP 53 p.p 278S 31.5 (5225) 31.3 (1677) Y / Y Yes P -2 138.1 10 P IK3CA p.e545k 71.8 (241) 68.7 (527) Y / Y Yes P -3 67.5 10 N o ne - - N / N Yes P -4 18 10 N o ne no t available - N A / N - P -5 30.8 10 Lebofsky et al, resubmitted to Mol Oncol M LH 1 p.r 389Q 76.2 (4954) 56.5 (1179) Y / Y Yes A LK intro nic variant 46.8 (3123) 45 (384) Y / Y Yes P IK3CA p.e545k 45.9 (135) 14.9 (215) Y / Y Yes SM A D4 p.s178x 17.6 (2284) 3.3 (391) Y / Y Yes P -6 185.4 10 P IK3CA p.h1047r no t available 26.7 (644) NA / Y - P -7 14.1 10 P IK3CA p.e545k 17.7 (62) 23.3 (348) Y / Y Yes P -8 40.2 10 STK11 p.d194y 36.2 (2426) 1.6 (985) Y / Y Yes TP 53 p.v173l 36.5 (1391) 1.2 (2060) Y / Y Yes P -9 11.1 7.4 TP 53 p.c275f no t available 7.4 (780) NA / Y - A P C p.r 1463R 0.13 (777) 1.9 (265) N / Y No P -10 147.3 10 TP 53 p.r249m 53.1 (2654) 1.2 (2345) Y / Y Yes P -11 17.1 10 N o ne - - N / N Yes P -12 43.2 10 TP 53 p.e271v no t available 3.7 (410) NA / Y - P IK3CA p.t1025a 57.6 (3648) 12.1 (511) Y / Y Yes P -13 241.2 10 TP 53 p.r175h 60 (363) 2.2 (413) Y / Y Yes KRA S p.q61h 30.4 (1881) 0.4 (1260) Y / N No P -14 5.8 3.8 A LK intro nic variant 46.2 (1658) 45.7 (707) Y / Y Yes P -15 24.1 10 B RA F p.n581t 62.0 (4491) 26.3 (543) Y / Y Yes P -16 11.2 7.4 N o ne - - N / N Yes P -17 423 10 N o ne - - N / N Yes P -18 21.3 10 FB XW7 p.s396s 51.7 (2671) 46.4 (1755) Y / Y Yes P IK3CA p.h1047r 25.3 (4696) 3 (1894) Y / Y Yes TP 53 p.s241f 36.6 (3856) 2.4 (4182) Y / Y Yes P -19 33 10 TP 53 p.r156p 48.5 (1688) 17 (1715) Y / Y Yes P -20 54 10 N o ne no t available - N A / N - P -21 83.9 10 N o ne - - N / N Yes P -22 82 10 TP 53 p.v157g 72.2 (883) 42.1 (682) Y / Y Yes P -23 37.3 10 TP 53 p.g266e 20.4 (928) 48.4 (888) Y / Y Yes P -24 17.8 10 M ET p.r 988C 55.4 (2619) 45.8 (2014) Y / Y Yes H R A S p.a 59A 40.8 (1585) 49.8 (908) Y / Y Yes P -25 13 8.6 P IK3CA p.e545k 28 (721) 3.8 (339) Y / Y Yes P -26 34.9 10 N o ne - - N / N Yes P -27 131.4 10 P IK3CA p.e545k 47.6 (313) 16.4 (268) Y / Y Yes KRA S p.g12a 47.8 (2846) 22.5 (777) Y / Y Yes P -28 17.8 10 SM A RCB 1 intro nic variant 49.5 (2547) 46.6 (824) Y / Y Yes P -29 9.8 6.5 No ne no t available - NA / N - P -30 20.9 10 No ne no t available - NA / N - P -31 13 8.6 N o ne - - N / N Yes P -32 144 10 TP 53 p.v157f 89 (399) 79.9 (812) Y / Y Yes P -33 18 10 TP 53 p.r273h 2.64 (1476) 5.4 (368) Y / Y Yes P -34 22.2 10 N o ne - - N / N Yes
ADN tumoral circulant Etude pan-exome «découverte» de mutations apparaissant 6 patients (dont K du sein) avec quantité +++++++++ de ctdna Etude des mécanismes de résistance Murtaza et al, Nature 2013
ADN tumoral circulant > CTC? Différents types de mutations ctdna évaluable dans #30 cancers du sein M+ / 50 ctdna correlé aux CTC & impact pronostique Preuve de concept Dawson et al, New Engl J Med 2013 Au labo Cohorte de cancers du sein triple négatif métastatique; détection de TP53 mut Pas d impact pronostique du ctdna // Impact pronostique des CTC Madic et al, Int J Cancer 2014
ADN tumoral circulant > CTC????? Quoi de neuf en 2014? Cohorte de 40 cancers du sein Cellules Tumorales Circulantes (CTC) triple négatifs métastatiques Validité clinique : niveau de preuve I cancers du sein Mutations TP53 Tumeur & plasma Utilité clinique exacte à préciser, en essai APPLICATION DANS QQUES ANNEES ADN Tumoral Circulant (ctdna) Qd tumeur mutée, mutation retrouvée dans 80% des cas dans le plasma Aspects techniques ++ primordiaux ++ Impact pronostique des pour CTC >> être ctdna applicable à l ensemble des cancers M1 (+/- M0?) Utilité clinique Biopsie liquide +++ pour mutations ponctuelles APPLICATION DEMAIN (CBPNC : EGFR) Amplifications : + compliqué (peu sensible) Délétions : encore quasi-impossible CTC-like : un long chemin