Ann Biol Clin 211 ; 69 (5) : 561-9 Évaluation de la nouvelle trousse de dosage de l 2. de l analyseur Variant II TM Turbo (Bio-Rad) Evaluation of the new kit Analyzer 2. Variant II Turbo (Bio-Rad) doi:1.1684/abc.211.614 Julie Meurice Emmanuelle Guillard Stéphane Jaisson Nathalie Leroy Philippe Gillery CHU de Reims, laboratoire de biologie et recherche pédiatriques, 45 rue cognacq-jay 5192 Reims cedex, France <ecorbe-guillard@chu-reims.fr> Article reçu le 27 mai 211, accepté le 7 juillet 211 Tirés à part : E. Guillard Résumé. L évaluation de l hémoglobine glyquée ( ) est utilisée en pratique quotidienne au cours de la surveillance du diabète sucré. Son dosage peut être réalisé selon différentes méthodes dont la chromatographie liquide haute performance (CLHP). Nous avons évalué une nouvelle trousse de dosage de l 2. sur l analyseur Variant II TM Turbo (Bio-Rad) qui se caractérise par l utilisation d un tampon d élution contenant du perchlorate de sodium. Les valeurs d sont bien corrélées (r 2 =,997) à celles obtenues avec la version de l automate utilisé en routine dans notre laboratoire (Variant II TM équipé de la, Bio-Rad). Les résultats montrent des coefficients intraet inter-essais respectivement inférieurs à,6 et 1,6 %. La linéarité est excellente entre 3,2 % (11 mmol/mol) et 18,3 % (177 mmol/mol). Il n existe pas de contamination inter-échantillons. L aspect des chromatogrammes est très satisfaisant en présence de variants d hémoglobine. Cette méthode permet d obtenir un résultat d rapidement (96 secondes), mais ne permet pas de séparer l labile de l hémoglobine carbamylée, contrairement à la. La maîtrise de la qualité analytique étant un élément majeur pour la validation du résultat d et son utilisation clinique, les caractéristiques de cette nouvelle trousse de dosage de l 2. en font un outil bien adapté à la pratique quotidienne au laboratoire. Mots clés : CLHP, évaluation, Abstract. The evaluation of glycated hemoglobin ( ) is used in daily practice for monitoring the diabetes mellitus. may be assayed by different methods, among which high-pressure liquid chromatography (HPLC). We have evaluated a new kit 2. available on HPLC Variant II Turbo analyzer (Bio-Rad), which is characterized by an elution buffer containing sodium perchlorate. The correlation with the routine method used in our laboratory (HPLC Variant II analyzer equipped with the NU kit) is good (r 2 =.997). Intra- and inter-assay coefficients of variation are respectively lower than.6 and 1.6%. Linearity is excellent from 3.2% (11 mmol/mol) to 18.3% (177 mmol/mol). There is no inter-sample contamination. This method provides a result quickly (96 seconds), but does not allow separating labile from carbamylated hemoglobin, contrary to the NU kit. As the control of analytical quality is a major concern for validation and clinical use of results, the characteristics of this new kit make it a well-suited tool for daily laboratory practice. Key words: HPLC, evaluation, Pour citer cet article : Meurice J, Guillard E, Gillery P, Jaisson S, Leroy N. Évaluation de la nouvelle trousse de dosage de l 2. de l analyseur Variant II TURBO (Bio-Rad). Ann Biol Clin 211 ; 69(5) : 561-9 doi:1.1684/abc.211.614 561
Le dosage de l hémoglobine glyquée ( ) est utilisé en pratique quotidienne au cours de la surveillance du diabète sucré et commence à être proposé pour son dépistage [1, 2]. Grâce aux travaux du Diabetes Control and Complications Trial (DCCT) pour le diabète de type 1 [3], de l United Kingdom Prospective Diabetes Study (UKPDS) pour le diabète de type 2 [4], on sait qu un contrôle strict de la glycémie, apprécié par l, permet de ralentir notablement l apparition des complications dégénératives graves de la maladie, dont la prévalence est en constante augmentation. De façon corollaire, les cibles à obtenir et à prendre en compte pour le traitement ont été très précisément définies, ce qui implique d obtenir des valeurs d fiables en utilisant des méthodes performantes, validées et traçables à la méthode de référence internationale de l International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medecine (IFCC) [5, 6]. Parmi les méthodes de dosage utilisées, la chromatographie liquide haute performance (CLHP) d échange ionique présente l avantage d être entièrement automatisable avec une spécificité correcte. L analyseur Variant II TM Turbo est un automate de CLHP distribué en France par la société Bio-Rad pour le dosage de l. Il a fait l objet d une évaluation au laboratoire de biologie et de recherche pédiatriques du CHU de Reims de juin à août 21. Matériel et méthodes Analyseur et réactifs L analyseur Variant II TM Turbo équipé de la trousse 2. et les réactifs ont été fournis par le fabricant (Bio- Rad Diagnostics, Marnes-la-Coquette) et utilisés selon ses recommandations. Le dosage de l sur cet automate repose sur le principe de CLHP d échange cationique. Les échantillons de sang total sont dilués et hémolysés, automatiquement dans la station d échantillonnage ou manuellement, puis injectés dans la colonne de chromatographie. L élution est assurée par un gradient de force ionique croissante, ce qui permet de séparer les différentes formes d hémoglobine en fonction de leur interaction ionique avec la colonne. L absorbance de l hémoglobine est mesurée à 415 nm (longueur d onde principale) et 69 nm (longueur d onde secondaire, permettant de corriger le résultat en tenant compte du bruit de fond). L algorithme Exponentially Modified Gaussian (EMG), utilisé par le logiciel Clinical Data Management System (CDM), recalcule mathématiquement le pourcentage du pic d hémoglobine glyquée labile (LA 1c ) et d hémoglobine carbamylée (chb), du pic d et du pic d HbA, afin de garantir la bonne intégration du pic d par rapport à ces fractions de point isoélectrique très proche. Échantillons Les échantillons testés ont été obtenus à partir de prélèvements parvenus au laboratoire pour le dosage de l (tube contenant de l EDTA, Greiner bio-one Vacuette, réf 45441). Dans certaines séries, les résultats de prélèvements parvenus simultanément en tubes contenant de l héparinate de lithium (Greiner bio-one Vacuette, réf GR5HLNV) ou en tube contenant du CTAD (Becton-Dickinson, réf 367599) ont été comparés aux résultats des prélèvements en tube contenant de l EDTA. Aucun prélèvement supplémentaire n a été nécessaire pour cette étude et aucun échantillon n a été conservé au-delà de l évaluation. Performances analytiques L aspect des chromatogrammes (nombre de fractions éluées, séparation des pics, temps de rétention) a été comparé à celui obtenu avec l automate utilisé en routine Variant II TM Bio-Rad équipé de la (référence NU 27-211). La répétabilité a été évaluée sur des échantillons de sang total à trois niveaux de concentration d (bas, moyen et haut), dosés vingt fois dans une même série par le même technicien. La reproductibilité a été évaluée sur des échantillons de contrôle de qualité (Lyphochek Diabetes Control Bio-Rad, référence 74, lot n o 33 79), reconstitués et conservés en aliquotes à - 8 C, dans 32 séries différentes. L étude de la corrélation a porté sur 16 échantillons, avec des valeurs d régulièrement réparties dans tout le domaine de mesure, dosés en parallèle sur l automate Variant II TM Turbo équipé de la trousse 2. et sur l automate Variant II TM équipé de la. Les deux dosages ont été effectués à moins de six heures d intervalle. L étude de la contamination d un échantillon de concentration basse d (5,2 %, soit 33 mmol/mol) par un échantillon de concentration élevée (16,5 %, soit 157 mmol/mol) a été effectuée selon le protocole Valtec [7]. Interférences Hémoglobines anormales Des échantillons contenant une hémoglobine anormale S, C, E, J, Hope, Lepore et O Arab ont été testés. Nous avons évalué l interférence analytique de cette hémoglobine (proximité de migration avec l ou l HbA, intégration correcte du pic d ) et vérifié si l identification de cette hémoglobine par l automate était correcte. 562 Ann Biol Clin, vol. 69, n 5, septembre-octobre 211
Évaluation de la trousse 2. (variant II) Hémoglobine F Des échantillons contenant une concentration élevée d HbF (1,9 % à 2,2 % d HbF) ont été testés dans le but d évaluer l interférence analytique de l HbF sur le dosage d. Hémoglobine glyquée labile L a été dosée dans des échantillons de sang total, avant et après une incubation de dix à 9 minutes dans une solution de glucose à,5 M. Hémoglobine carbamylée L a été dosée dans des échantillons de sang total, avant et après incubation pendant trois heures dans une solution de KCl (témoin) ou de KCNO de,125 mm à 1 mm. Le dosage a également été réalisé dans des échantillons de patients diabétiques insuffisants rénaux présentant une fraction élevée d hémoglobine carbamylée. Bilirubine et triglycérides L interférence de la bilirubine et des triglycérides a été évaluée par dosage d avant et après addition de différentes dilutions de plasma hyperbilirubinémique et hypertriglycéridémique à des globules rouges lavés au préalable par NaCl,15 M [8]. Influence de l anticoagulant Le dosage d a été effectué sur 19 échantillons de patients ayant bénéficié à la fois d un prélèvement en tube contenant de l EDTA, en tube contenant de l héparinate de lithium et en tube contenant du CTAD, afin d évaluer l influence de l anticoagulant sur le résultat. Influence de la concentration d hémoglobine totale L a été dosée dans des dilutions successives d un échantillon de sang total dans NaCl,15 M, afin d obtenir une concentration d hémoglobine totale finale comprise entre 16 et 163 g/l. Résultats Aspect des chromatogrammes Un exemple de chromatogramme est présenté sur la figure 1. La fraction d est individualisée et quantifiée en pourcentage de l hémoglobine A totale. La LA 1c et la chb sont éluées sous le même pic, bien séparé du pic de l. Des alertes («valeurs en dehors des limites normales») ou des alarmes («aire totale en dehors des limites») peuvent être affichées. Précision Les coefficients de variation intra-essais sont restés compris entre,4 et,6 % pour des échantillons comportant 5,3 % (34 mmol/mol), 8, % (64 mmol/mol) et 12,7 % (115 mmol/mol) d. Les coefficients de variations inter-essais ont été trouvés respectivement à 1,6 % pour l échantillon de contrôle bas ( : 5,7 %, 39 mmol/mol) et,7 % pour l échantillon de contrôle haut ( : 9,7 %, 83 mmol/mol). Corrélation La comparaison avec les résultats obtenus à l aide de l automate Variant II TM NU montre un bon accord entre les 2 1 1 LA 1c + chb.5 HbA Tests statistiques Sauf indication contraire, les résultats sont exprimés par rapport à l incertitude de mesure de l appareil, évaluée sur les résultats des contrôles de qualité selon l équation [9] :.16.23.28.41.74.85 1.4 U = σ ² + (biais / 3) : écart-type de fidélité intermédiaire, biais : erreur de justesse Les valeurs situées à l extérieur de l intervalle représenté par cette incertitude sont considérées comme significativement différentes. Les études de corrélation ont été réalisées par calcul de régression linéaire et selon la représentation de Bland et Altman [1]..25.5.75 1. 1.25 1.5 Figure 1. Aspect du chromatogramme obtenu sur l automate Variant II TM Turbo équipé de la trousse de dosage de l 2.. L hémoglobine glyquée labile (LA 1c ) et l hémoglobine carbamylée (chb) co-éluent dans un même pic. Ann Biol Clin, vol. 69, n 5, septembre-octobre 211 563
deux méthodes. La droite de régression a pour équation y (% trousse Turbo) =,967x (% trousse NU) +,181, avec un coefficient de corrélation r 2 =,997 (figure 2A). La représentation de Bland et Altman confirme la légère sous-estimation (,9 % d en moyenne avec un écart-type à,18 %) du taux d obtenu sur Variant II TM Turbo équipé de la trousse 2. par rapport à la valeur obtenue sur Variant II TM équipé de la (figure 2B), en particulier pour des valeurs d supérieures à 1, %. Contamination inter-échantillons L étude de la contamination d un échantillon de valeur basse d (5,2 % d, soit 33 mmol/mol) par un échantillon de valeur élevée (16,5 % d, soit 157 mmol/mol), réalisée selon le protocole Valtec [7], n a pas montré de différence significative entre les valeurs obtenues (résultats non montrés). Interférences Hémoglobines anormales L hémoglobine C est correctement identifiée, les hémoglobines S, E et Lepore sont éluées dans la fenêtre variant A trousse TURBO B Différence des moyennes TURBO - NU 2, 16, 12, 8, 4,,,,4,2, -,2 -,4 -,6 -,8-1, -1,2 2,6 2, 4,6 y =,967x +,1811 R 2 =,9972 4, 6,6 6, 8,6 8, 1, 1,6 12,6 12, 14,6 Meilleure moyenne estimée 14, 16,6 16, 18,6 18, + 2 ET m - 2 ET Figure 2. Corrélation entre les résultats d hémoglobine glyquée ( ) obtenus sur l automate Variant II TM Turbo équipé de la trousse 2. et de l automate Variant II TM équipé de la. A) Étude de régression linéaire. B) Représentation de Bland et Altman. window après l HbA, l hémoglobine J est éluée dans une fenêtre unknown entre l et l HbA, l hémoglobine O Arab est éluée dans une fenêtre unknown après l HbA, l hémoglobine Hope est éluée avec l (figure 3). Les résultats d sont analytiquement exploitables en présence d un variant d hémoglobine S, E, C, O Arab et Lepore. Il faut noter que l échantillon qui suit un échantillon contenant une hémoglobine C présente un pic résiduel après le pic d HbA, qui ne modifie pas les résultats. HbF L HbF est éluée juste avant l. La comparaison des résultats obtenus entre les deux analyseurs pour huit échantillons contenant un taux d HbF allant jusqu à 2,2 % ne montre pas de différence supérieure à,2 % d (résultats non montrés). Hémoglobine glyquée labile La LA 1c co-élue avec la chb sur l automate Variant II TM Turbo équipé de la trousse 2. (figure 1). Les résultats des dosages obtenus avec les échantillons contenant de la LA 1c formée in vitro sont présentés sur la figure 4. Ils montrent une diminution progressive de la valeur d avec l augmentation du taux de la LA 1c. Une différence significative (supérieure à l incertitude de mesure de 3 % calculée pour l analyseur Variant II TM Turbo) a été constatée à partir d un taux estimé de LA 1c + chb de 5,5 % sur la trousse 2., correspondant à un taux de 5, % de LA 1c sur la. Hémoglobine carbamylée Les résultats des dosages d dans des échantillons carbamylés in vitro ne montrent pas d interférence de la chb sur le dosage de l jusqu à une valeur du pic «chb+la 1c» de 3,3 %, correspondant à 2,5 % de chb avec la (figure 5). Les résultats des dosages d sur des échantillons de patients insuffisants rénaux présentant un taux élevé de fraction carbamylée confirment ces données, avec un seuil de non interférence sur le dosage de l pour des valeurs de la chb inférieure à 3, % avec la (résultats non montrés). Aucune interférence de la bilirubine et des triglycérides n a été constatée jusqu aux valeurs supérieures testées, soit 415 mol/l de bilirubine totale et 22,3 mmol/l de triglycérides (résultats non montrés). Influence de la nature de l anticoagulant Nous n avons pas constaté de différence significative dans les valeurs trouvées, ni dans le cas de l EDTA par rapport à l héparinate de lithium, ni dans le cas de l EDTA par rapport au CTAD, lorsque les dosages sont effectués sur les tubes primaires (figure 6). Il faut cependant noter une interférence liée au temps de contact avec la solution wash, utilisée pour effectuer des dilutions externes, avec les prélèvements réalisés sur héparinate de lithium. En 564 Ann Biol Clin, vol. 69, n 5, septembre-octobre 211
Évaluation de la trousse 2. (variant II) A B C 2 2 2 1 1 1 1 1 1 HbE.29.11.17.23.41.52.76.86 HbC.13.23.16.28.42.52.77.86 HbS.11.17.29.52.23.42.76.85.25.5.75 1. 1.25 1.5 D E F 2 1 1.11.3.16.26.24.42.52.7 1.5 1.21 HbJ 1.5.25.5.75 1. 1.25 1.5 G.25.5.75 1. 1.25 1.5 2 1 1 2 1 1.11.2.23.43.52.65.75 1.6 1.16 HbO Arab.25.5.75 1. 1.25 1.5.11.15.23.28.42.52.75.86 1.5 1.19 Hb Lepore 1.5 1.12.25.5.75 1. 1.25 1.5 2 1 1.16.2.23.11.29.42 + Hb Hope.6 1.5.25.5.75 1. 1.25 1.5 1.5 1.13.25.5.75 1. 1.25 1.5 Figure 3. Étude du comportement chromatographique des hémoglobines anormales sur l automate Variant II TM Turbo équipé de la trousse 2.. A) Hémoglobine C. B) Hémoglobine S. C) Hémoglobine E. D) Hémoglobine J. E) Hémoglobine O Arab. F) Hémoglobine Hope. G) Hémoglobine Lepore. Ann Biol Clin, vol. 69, n 5, septembre-octobre 211 565
effet, nous avons constaté une sous-estimation des résultats obtenus sur des prélèvements effectués sur héparinate de lithium et dilués manuellement par rapport à ceux obtenus sur tubes EDTA (figure 7). La sous-estimation est d autant plus importante que le temps de contact avec la solution wash est long. Influence de la concentration d hémoglobine totale de l échantillon Aucune différence significative du résultat d n a été constatée entre 98 et 163 g/l d hémoglobine totale. A différence témoin-glucose B différence témoin-glucose C différence témoin-glucose,8,6,4,2, -,2 -,4 -,6 -,8,,8,6,4,2, -,2 -,4 -,6 -,8,,8,6,4,2, -,2 -,4 -,6 -,8, 2, 2, 2, 4, 6, L (%) 8, 4, 6, 8, L (%) 4, 6, L (%) 1, 1, 8, - U 12, - U 12, - U 1, A différence témoin-carbamylé B différence témoin-carbamylé C différence témoin-carbamylé,8,7,6,5,4,3,2,1,9,8,7,6,5,4,3,2,1 1,6 1,4 1,2 1 1,8,6,4,2 1 1 2 2 2 3 3 4 4 chb (%) chb (%) 4 chb (%) 5 5 6 6 6 7 7 8 8 8 Figure 4. Influence de l hémoglobine glyquée labile (LA 1c ) formée in vitro sur le dosage de l hémoglobine glyquée ( ). Le graphique représente la valeur d obtenue sur les automates équipés de la ( ) et de la trousse 2. ( ) en fonction du taux de LA 1c évalué par la. Chaque valeur, qui est la moyenne de deux déterminations, représente la différence entre la valeur obtenue sur les échantillons témoins et la valeur obtenue sur les échantillons glyqués in vitro par incubation avec du glucose. Les valeurs significativement différentes sont situées à l extérieur des bornes représentées par l incertitude de mesure (± 3 % ; représenté par +U et -U). A) Interférence de la LA 1c formée in vitro sur un échantillon de valeur basse d (5,1 %, 32 mmol/mol). B) Interférence de la LA 1c formée in vitro sur un échantillon de valeur moyenne d (7,7 %, 61 mmol/mol). C) Interférence de la LA 1c formée in vitro sur un échantillon de valeur haute d (1,5 %, 91 mmol/mol). Figure 5. Influence de l hémoglobine carbamylée (chb) formée in vitro sur le dosage de l hémoglobine glyquée ( ). Le graphique représente la valeur d obtenue sur les analyseurs équipés de la ( ) et de la trousse 2. ( ) en fonction du taux d hémoglobine carbamylée dosé par la. Chaque valeur, qui est la moyenne de deux déterminations, représente la différence entre la valeur obtenue sur les échantillons témoins et la valeur obtenue sur les échantillons carbamylés in vitro par incubation avec du KCNO. Les valeurs ont été considérées comme significativement différentes lorsqu elles étaient situées à l extérieur de l intervalle représenté par l incertitude de mesure (± 3 % ; représenté par +U et -U). A) Interférence de la chb formée in vitro sur un échantillon de valeur basse d (5, %, 31 mmol/mol). B) Interférence de la chb formée in vitro sur un échantillon de valeur moyenne d (7,9 %, 63 mmol/mol). C) Interférence de la chb formée in vitro sur un échantillon de valeur haute d (11,9 %, 17 mmol/mol). 566 Ann Biol Clin, vol. 69, n 5, septembre-octobre 211
Évaluation de la trousse 2. (variant II) 12, 12, 11, 11, 1, 1, 9, 9, 8, 7, 6, 5, 4, EDTA Hépariné Figure 6. Influence de l anticoagulant sur les résultats d hémoglobine glyquée ( ). Des échantillons (n = 19) prélevés simultanément en tube contenant de l EDTA, de l héparinate de lithium et du CTAD ont été utilisés pour le dosage de l par la méthode testée. La concentration minimale d hémoglobine totale nécessaire au dosage de l est de 98 g/l (résultats non montrés). En dessous de cette valeur, l aire totale étant différence EDTA-autres anticoagulants 1,5 1,5 -,5-1 -1,5 5 1 Temps (min) 15 - U Figure 7. Influence du temps de contact avec la solution wash des échantillons prélevés simultanément en tube contenant de l EDTA, de l héparinate de lithium (A) et du CTAD (B) sur le dosage de l. Chaque valeur représente la différence entre la valeur obtenue sur des échantillons prélevés sur tube EDTA et la valeur obtenue sur des échantillons prélevés sur tube héparinate de lithium ( ) et sur tube CTAD ( ). 2 8, 7, 6, 5, 4, EDTA CTAD inférieure à 1 1 6 V/s, le chromatogramme ne peut être validé techniquement. Cette anomalie est indiquée par un astérisque à côté de la valeur de l aire totale sur le rapport imprimé. Discussion L utilisation optimale du dosage d en pratique quotidienne nécessite la mise en œuvre de méthodes robustes et fiables dans les laboratoires de biologie médicale. La CLHP permet l obtention d un chromatogramme identifiant un certain nombre de fractions mineures, avec des caractéristiques variables selon les techniques [11]. Nous avons étudié les performances d une nouvelle trousse de dosage de l 2. de l analyseur Variant II TM Turbo. Le dosage doit être préfèrentiellement effectué sur du sang veineux recueilli en tube contenant de l EDTA, mais peut être ponctuellement effectué sur tube contenant un autre anticoagulant, en respectant les précautions indiquées ci-dessus pour les prélèvements réalisés en tubes contenant de l héparinate de lithium. L analyseur permet un dosage rapide, le résultat d étant obtenu en 96 secondes (contre 18 secondes avec Ann Biol Clin, vol. 69, n 5, septembre-octobre 211 567
la ). La précision est bonne, puisque les études de répétabilité et de reproductibilité fournissent des coefficients de variation respectivement inférieurs à,6 et 1,6 %, en respectant les recommandations du fabricant quant à la calibration, c est-à-dire une calibration à chaque changement de trousse, soit toutes les 2 5 injections. Il existe une très bonne corrélation des résultats avec ceux de la sur l ensemble de la gamme de valeurs. Il faut cependant remarquer qu il existe une légère sousestimation des valeurs obtenues sur la trousse 2. par rapport à celles obtenues sur la. Cette différence est liée à l étalonnage propre des deux techniques. Le rendu des résultats est possible en présence d un variant d hémoglobine S, E, C, O Arab et Lepore, avec les précautions d usage [12]. L absence d interférence de l HbF, annoncée par le fabricant jusqu à 25 %, n a pas pu être vérifiée au cours de cette évaluation. Nous avons cependant étudié des échantillons contenant une concentration élevée d HbF (jusqu à 2,2 %) ne montrant pas de différence entre les deux trousses. Il n y a pas de contamination inter-échantillons significative, malgré la présence de pics supplémentaires mineurs sur le chromatogramme après passage d un échantillon contenant une hémoglobine C. En effet, ceux-ci n entraînent pas de différence de la valeur d rendue par l automate. Cette contamination concerne une hémoglobine anormale très polarisée, qui reste donc fortement fixée à la colonne malgré le lavage réalisé après chaque échantillon. La LA 1c co-élue avec la chb sur l automate Variant II TM Turbo. Le rendu du résultat d est possible sans conséquence sur l interprétation [13,14], pour des taux estimés de«la 1c + chb» inférieurs à 5,5 %, soit des valeurs de la LA 1c estimées avec la inférieures à 5, %. Concernant la chb, la validation des résultats d est possible pour des taux estimés de «LA 1c + chb» inférieurs à 3,3 %, soit des valeurs de chb inférieures à 2,5 % estimées avec la. Enfin, la praticabilité de cette nouvelle trousse est très satisfaisante. L automate permet de réaliser des séries importantes de dosages compte-tenu du temps d analyse court de 96 secondes, du changement de colonne à réaliser toutes les 2 5 injections lors du changement de trousse, de la calibration recommandée seulement lors des changements de trousse ou en cas de mauvais résultat des contrôles internes de qualité. Un entretien mensuel est recommandé, avec nettoyage des surfaces intérieures et extérieures, du lecteur code à barre, des courroies et convoyeurs de portoirs d échantillons ainsi que de l aiguille et de la station de dilution. Dans notre expérience, il s avère nécessaire mais sa réalisation est très facile. Conclusion Les performances de la nouvelle trousse de dosage de l 2. l analyseur Variant II TM Turbo sont globalement très satisfaisantes, sur des paramètres tels que la répétabilité, la reproductibilité ou encore la corrélation avec le Variant II TM équipé de la. De même, il n existe pas de contamination inter-échantillons, et l aspect des chromatogrammes est très satisfaisant en présence de variants d hémoglobine. Il n y a pas d interférence de la LA 1c et de la chb pour des taux estimés de «LA 1c + chb» inférieurs à 3,3 %. Le dosage est légèrement plus sensible à l interférence de ces fractions modifiées de l hémoglobine qu avec la, car il existe une co-élution de la LA 1c et de la chb. Enfin, la praticabilité de l analyseur est très convenable. Cet automate est donc un analyseur simple d utilisation, qui permet le dosage d dans de bonnes conditions pour des séries importantes de dosages. Conflits d intérêts : Cette étude a fait l objet d un contrat d évaluation entre le CHU de Reims et la Société Bio-Rad, qui a mis à disposition l appareil et les réactifs nécessaires. Références 1. International Expert Committee. International expert committee report on the role of the A 1c assay in the diagnosis of diabetes. Diabetes Care 29 ; 32 : 1-8. 2. American Diabetes Association. Diagnosis and classification of diabetes mellitus. Diabetes Care 21 ; 33 : S62-9. 3. The Diabetes Control Complications Trial Research Group. The effect of intensive treatment of diabetes on the development and progression of long-term complications in insulin-dependent diabetes mellitus. N Engl J Med 1993 ; 329 : 977-86. 4. UK Prospective Diabetes Study (UKPDS) Group. Intensive blood glucose control with sulphonylureas or insulin compared with conventional treatment and risk of complications in patients with type 2 diabetes (UKPDS 33). Lancet 1998 ; 352 : 837-53. 5. 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