Compte rendu 153 Toxoplasmose - Rubéole - EBV - CMV

Compte rendu 153 Toxoplasmose - Rubéole - EBV - CMV Centre Toulousain pour le Contrôle de qualité en Biologie clinique Association déclarée à la Préfecture de la Haute-Garonne le 30 Octobre 1973 et enregistrée sous le n 8-543 CTCB - 33 route de Bayonne - 31300 TOULOUSE Tél : 05 34 51 49 80 Fax : 01 57 67 25 90 Email : secretariat@ctcb.com site Internet : www.ctcb.com Siret : 428 789 853 000 28 APE : 8559A Accréditation n 1-2178 Portée disponible sur www.cofrac.fr Date d'édition : 26/11/2015 Statut du document : Définitif Expert biologiste Sérologie virale Dr M. MIEDOUGE miedouge.m@chu-toulouse.fr Sérologie toxoplasmose Dr J. FILLAUX fillaux.j@chu-toulouse.fr Coordonnateur des programmes Dr S. ALBAREDE Pharmacien Biologiste s.albarede@ctcb.com Vérification du contenu scientifique et autorisation du rapport d essai d aptitude Documentation Le compte rendu comporte les éléments suivants : - Une partie commune pour tous les laboratoires : Pages explicatives : présentation du programme, du traitement statistique, évaluation du laboratoire et informations générales, Exploitation statistique, Commentaire éventuel sur les réponses des participants. - Une partie propre à chaque laboratoire «Résultats individuels» en annexe 1 : Résultats du laboratoire Evaluation de la performance du laboratoire Sommaire 1. Présentation du programme d intercomparaison page 2 2. Codage technique page 2 3. Déroulement du traitement statistique qualitatif page 2 4. Déroulement du traitement statistique quantitatif page 3 5. Détermination de la notation du laboratoire page 3 6. Interprétation des notations page 4 7. Consigne de saisie des résultats page 4 8. Exploitation des résultats : Sérologie Rubéole page 5 9. Exploitation des résultats : Sérologie CMV page 6 10. Exploitation des résultats : Sérologie EBV page 8 11. Exploitation des résultats : Sérologie toxoplasmose page 12-20 Page 1 sur 20

1. PRESENTATION DU PROGRAMME D INTERCOMPARAISON Sérologies virales : Expert du programme : Dr M. MIEDOUGE, PTI Virologie (IFB Purpan), CHU Toulouse - miedouge.m@chu-toulouse.fr En début de campagne, chaque laboratoire reçoit les 9 échantillons de la campagne qu il stocke au congélateur à -20 C (sérums conditionnés en tube plastique). Trois fois dans l année, aux dates précisées par le CTCB, le laboratoire est averti des analyses à réaliser sur 3 sérums : Sérum Rubéole : anticorps IgG Sérum CMV : anticorps IgG et IgM Sérum EBV : anticorps anti VCA IgG et IgM, anticorps anti EBNA IgG. Sérologie de la toxoplasmose : Expert du programme : Dr J. FILLAUX, Service de Parasitologie-Mycologie (IFB Purpan), CHU Toulouse - fillaux.j@chutoulouse.fr En début de campagne, chaque laboratoire reçoit les 6 échantillons de la campagne qu'il stocke au congélateur à -20 C (sérums conditionnés en tube plastique). Trois fois dans l'année, aux dates précisées par le CTCB, le laboratoire reçoit le scénario clinique correspondant aux spécimens à traiter et doit réaliser les analyses sur 2 sérums d'un même patient. Pour chaque sérum, il doit être effectué une sérologie de la toxoplasmose comportant la détection des anticorps IgG et IgM et il doit être donné une interprétation des résultats. Préparation des objets soumis à l essai : Les échantillons sont préparés et testés par notre sous-traitant selon les modalités internes (procédures et modes opératoires) : Pour les sérologies virales : PTI Virologie (IFB Purpan), CHU Toulouse Pour la sérologie de la toxoplasmose : Service de Parasitologie-Mycologie (IFB Purpan), CHU Toulouse Les échantillons sont ensuite acheminés au CTCB pour l emballage et l expédition. Tous les essais réalisés par le laboratoire sous-traitant permettent de : Vérifier l homogénéité des échantillons au sein d un même lot, Vérifier la stabilité des échantillons afin de garantir qu ils ne subiront pas de modifications significatives tout au long de l essai, Déterminer les résultats attendus qualitatifs. 2. CODAGE TECHNIQUE La saisie de la trousse s effectue au moment de la saisie des résultats sur le site internet par l intermédiaire d une liste déroulante. Une sélection correcte est obligatoire pour réaliser une exploitation statistique pertinente. La gestion du codage technique relève de la responsabilité du laboratoire participant, qui en cas de nouvelle trousse non listée dans la table de codage interactive, doit le préciser dans la zone «Commentaire» lors de la saisie internet. Le CTCB prendra alors en compte la remarque de l adhérent afin d impacter la base de données pour le prochain contrôle (après vérification et validation par l expert biologiste du programme). 3. DEROULEMENT DU TRAITEMENT STATISTIQUE QUALITATIF Le traitement statistique qualitatif est réalisé selon le protocole suivant : Type de traitement statistique «Toutes réponses confondues» «Par trousse» Règles de sélection des données Aucune sélection particulière. Traitement statistique réalisé avec l ensemble des données. Traitement statistique réalisé avec les données des laboratoires utilisant la même trousse. En synthèse, nous obtenons : N : nombre de réponses exploitables % : pourcentage de laboratoires utilisant la trousse NEGATIF : nombre de réponses négatives DOUTEUX : nombre de réponses douteuses POSITIF : nombre de réponses positives Page 2 sur 20

4. DEROULEMENT DU TRAITEMENT STATISTIQUE QUANTITATIF Un traitement statistique quantitatif est réalisé par le CTCB puis validé par l expert selon le protocole suivant : Type de traitement statistique Règles de sélection des données Traitement statistique réalisé avec les données des laboratoires «Par trousse» utilisant la même trousse. Exclusion des valeurs aberrantes (erreur de saisie, inversion de flacons/ tubes) par médiane +/- 50 %. Détermination des paramètres «ROBUSTES» à partir des valeurs restantes : le programme utilise l Algorithme A décrit dans la norme NF ISO 13528 pour déterminer la moyenne robuste, l écart type robuste et le coefficient de variation robuste (cf. procédure «Analyse robuste des résultats selon la norme NF ISO 13528 PR.AND.22»). Critères de rendus des résultats : o Exclusion des trousses si l effectif est inférieur à 3 : nous avons pris le parti de rendre les résultats à partir d un effectif supérieur ou égal à 3 tout en sachant que l interprétation statistique sera limitée pour les faibles effectifs. o Exclusion des trousses si les valeurs sont supérieures aux limites hautes de quantification, o Exclusion des trousses si le CV > 20 % et seuils inhomogènes (seuil variable selon les participants). En synthèse, nous obtenons (selon le cas) : N* : nombre de valeurs APRES exclusion N: nombre de valeurs AVANT exclusion Min* : valeur minimum APRES exclusion Min : valeur minimum AVANT exclusion Max* : valeur maximum APRES exclusion Max : valeur maximum AVANT exclusion Moy r : moyenne robuste ET r : écart-type robuste CV r : coefficient de variation robuste = (ETr x 100) / (Moy r) 5. DETERMINATION DE LA NOTATION DU LABORATOIRE Le CTCB propose deux types de classification : Notation des résultats qualitatifs : Le système de notation qualitatif repose sur l échelle d'évaluation suivante : A = Réponse attendue B = Réponse acceptable C = Réponse à analyser par le laboratoire D = Réponse erronée Le résultat attendu est la valeur transmise par l expert selon le protocole qu il a défini. Cette valeur est confirmée après l exploitation des résultats des adhérents : elle devient alors la valeur assignée. Notation des résultats quantitatifs en fonction de l écart type normalisé (EN) : uniquement pour les marqueurs POSITIFS La position du laboratoire est déterminée en fonction de l écart relatif entre le résultat du laboratoire et la moyenne robuste calculée («Par trousse»). 0-3 EN - 2 EN - 1 EN + 1 EN + 2 EN + 3 EN discordance avec les laboratoires zone d alerte en accord avec les laboratoires parfait accord avec les laboratoires en accord avec les laboratoires zone d alerte discordance avec les laboratoires Chaque lettre est suivie d un + ou d un - suivant que le résultat du laboratoire est supérieur ou inférieur à la moyenne. Le Z score exprime le nombre "d'écarts types" pour lequel le résultat du laboratoire s'écarte au-dessus ou au-dessous de la moyenne vraie de la population. Les Z scores sont standardisés pour une distribution telle que la moyenne soit de 0 et l'écart type de 1 (distribution normale centrée réduite). Résultat du laboratoire Moyenne robuste EN (Z score) = Ecart-type robuste Le signe positif du Z score signale un laboratoire qui a tendance à majorer son résultat, et inversement le signe négatif signale un laboratoire qui a tendance à minorer son résultat. Les moyennes robustes sont déterminées à partir des résultats fournis par l ensemble des participants utilisant la même trousse. Avec cette approche, la valeur assignée est la valeur consensuelle des laboratoires participants. Page 3 sur 20

6. INTERPRETATION DES NOTATIONS Le laboratoire est évalué en fonction de l écart relatif entre son résultat et la moyenne robuste calculée («Par trousse). L écart type normalisé (Z score) est utilisé pour évaluer la performance du laboratoire par rapport aux autres laboratoires. De par sa formule, elle est dépendante de la dispersion des résultats et du biais du laboratoire par rapport à la moyenne robuste (X laboratoire X assigné ) : Une technique avec une dispersion élevée favorise les laboratoires, Une technique avec une dispersion faible pénalise les laboratoires. Les Z scores sont déterminés uniquement pour les marqueurs POSITIFS et pour les trousses non exclues par les critères de validité. Pour l'interprétation des résultats, il est nécessaire de tenir compte des éléments suivants qui peuvent conduire à un Z score élevé sans conséquence analytique et/ou clinique critique : coefficient de variation obtenu pour votre trousse : s il est très bas, il peut conduire à un Z score élevé pour un écart non critique. Effectif : nous avons choisi de donner une interprétation à partir d un effectif supérieur ou égal à 3 mais un effectif au moins supérieur à 10 est souhaitable. Techniques en compétition : les Z scores obtenus en cas de ratios très faibles ne sont pas pertinents. 7. CONSIGNES DE SAISIE DES RESULTATS L exploitation des données dépend directement de la qualité de la saisie de ces données. Les traitements statistiques permettent de pallier à certaines erreurs de saisie mais malgré tout, certaines données restent inexploitables. Pour les résultats quantitatifs l absence de standardisation des résultats en unités internationales constitue une source importante d hétérogénéité. Selon les trousses, les résultats sont rendus sous la forme de données brutes, de ratio, d index, d indice, d unités arbitraires. Nous avons pris le parti d utiliser le terme général de ratio sur nos formulaires de saisie. Seuls les résultats rendus sous forme relative (correspondant en général au rapport entre le signal obtenu pour l échantillon et le signal du calibrateur) peuvent être exploités. Corollaire, le seuil de positivité est alors similaire pour une même trousse. --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- PS : Ces documents doivent être archivés selon la réglementation en vigueur. Pour tout renseignement : COORDONNATEUR / BIOLOGISTE : Stéphanie ALBAREDE - s.albarede@ctcb.com ADMINISTRATIF : Marie-Christine ONDERBEKE, Tél. : 05.34.51.49.80 - Fax : 01.57.67.25.90 - secretariat.ctcb@ctcb.com TECHNIQUE : Delphine GARIMBAY, Tél. : 05.34.51.49.81 - d.garimbay@ctcb.com QUALITE : Erick SANCHEZ, Tél. : 05.34.51.49.82 - e.sanchez@ctcb.com INFORMATIQUE : Philippe GONZALVO - p.gonzalvo@ctcb.com Information : Les essais d homogénéité et de stabilité se sont avérés conformes aux modalités décrites dans la procédure de contrôle. Les documents utilisés pour réaliser ce programme d intercomparaison (préparation des objets d essai, détermination des valeurs indicatives et assignées, traitement statistique, ) sont disponibles sur demande auprès du CTCB. L interprétation de ces résultats ne doit pas se faire isolément et doit être rapprochée de ceux obtenus lors des autres opérations de contrôle effectuées dans le cadre de l évaluation interne et de l évaluation externe du laboratoire. Page 4 sur 20

8 Sérologie Rubéole 8.1 Sérum 1533 - IgG Analyse des réponses qualitatives Trousses N % Négatif Douteux Positif =Assigné ABBOTT - Architect 107 23 0 0 107 BECKMAN - Access 11 2,36 0 0 11 BECKMAN - Unicel DxI 600/800 48 10,3 0 0 48 BIOMERIEUX - Vidas Rubéole IgG II 55 11,8 1 0 54 BIORAD - Bioplex 2 0,43 0 0 2 BIORAD - Platelia 2 0,43 0 0 2 DIASORIN - Liaison XL 22 4,72 0 0 22 ORTHO - Vitros 10 2,15 0 0 10 ROCHE - Cobas 6000 e601, Cobas 8000 e602, Modular E170 137 29,4 0 0 137 ROCHE - Elecsys 2010, Cobas e411 6 1,29 0 0 6 Siemens - ADVIA Centaur Rubella G 47 10,1 0 0 47 Siemens - Enzygnost Anti Rubéole IgG 4 0,86 0 0 4 Siemens - IMMULITE 2000/XPi Rubéole IgG 15 3,22 0 0 15 TOTAL 466 100% 1 0 465 Analyse des réponses quantitatives Trousses N N* Min* Max* Moy r ET r CV r ABBOTT - Architect 107 107 12,3 24,7 21,1 1,38 6,5 BECKMAN - Access 11 11 21 35,7 27,5 3,77 13,7 BECKMAN - Unicel DxI 600/800 48 48 23 34 28,1 2,7 9,6 BIOMERIEUX - Vidas Rubéole IgG II 55 54 30 54 39,8 4,29 10,8 DIASORIN - Liaison XL 22 22 17,7 33 24,5 1,28 5,2 ORTHO - Vitros 10 10 37,9 93 67,3 21,6 32,2 ROCHE - Cobas 6000 e601, Cobas 8000 e602, Modular E170 137 136 69,6 100 92,4 3,23 3,5 ROCHE - Elecsys 2010, Cobas e411 6 6 82 97 86,1 4,42 5,1 Siemens - ADVIA Centaur Rubella G 47 46 75 119 91,1 7,27 8 Siemens - Enzygnost Anti Rubéole IgG 4 3 20 26,38 21,4 1,87 8,7 Siemens - IMMULITE 2000/XPi Rubéole IgG 15 15 30,5 40 35,3 2,83 8 Page 5 sur 20

9 Sérologie CMV 9.1 Sérum 1535 - IgG Analyse des réponses qualitatives Trousses N % Négatif Douteux Positif =Assigné Autre 2 0,5 0 0 2 ABBOTT - Architect 90 22,6 0 0 90 BECKMAN - Access 3 0,75 0 0 3 BECKMAN - Unicel DxI 600/800 21 5,28 0 0 21 BIOKIT - Bioelisa colour 2 0,5 0 0 2 BIOMERIEUX - Vidas CMV IgG 101 25,4 0 0 101 BIORAD - Bioplex 2 0,5 0 0 2 BIORAD - Platelia 2 0,5 0 0 2 DIASORIN - Liaison 8 2,01 0 0 8 DIASORIN - Liaison XL 46 11,6 0 1 45 ORTHO - Vitros 5 1,26 0 0 5 ROCHE - Cobas 6000 e601, Cobas 8000 e602, Modular E170 84 21,1 0 0 84 ROCHE - Elecsys 2010, Cobas e411 6 1,51 0 0 6 SIEMENS - Enzygnost Anti CMV IgG 6 1,51 0 0 6 SIEMENS - IMMULITE 2000/XPi CMV IgG 20 5,03 0 0 20 TOTAL 398 100% 0 1 397 Analyse des réponses quantitatives Trousses N N* Min* Max* Moy r ET r CV r ABBOTT - Architect 90 87 51 92,1 75,2 6,03 8 BECKMAN - Access 3 3 82,6 92 86,8 5,43 6,3 BECKMAN - Unicel DxI 600/800 21 21 81 110 93,6 9,57 10,2 BIOMERIEUX - Vidas CMV IgG 101 94 29 55 40 4,21 10,5 DIASORIN - Liaison 8 8 51,4 70,6 64 6,01 9,4 DIASORIN - Liaison XL 46 44 32,6 88,1 63,6 4,48 7 ORTHO - Vitros 5 5 42,3 52 44,7 2,71 6,1 ROCHE - Cobas 6000 e601, Cobas 8000 e602, Modular E170 84 83 235 370,8 263 9,84 3,7 ROCHE - Elecsys 2010, Cobas e411 6 4 248 315,2 262 14 5,3 SIEMENS - IMMULITE 2000/XPi CMV IgG 20 20 6,24 7,7 7,05 0,37 5,2 Page 6 sur 20

9.2 Sérum 1535 - IgM Analyse des réponses qualitatives Trousses N % Négatif Douteux Positif =Assigné Autre 2 0,51 0 0 2 ABBOTT - Architect 87 22,3 2 1 84 BECKMAN - Access 3 0,77 0 0 3 BECKMAN - Unicel DxI 600/800 20 5,12 0 0 20 BIOMERIEUX - Vidas CMV IgM 103 26,3 7 44 52 BIORAD - Bioplex 2 0,51 0 0 2 BIORAD - Platelia 2 0,51 0 0 2 DIASORIN - Liaison 8 2,05 0 2 6 DIASORIN - Liaison XL 44 11,3 2 3 39 MEDAC - Ela PKS 1 0,26 0 0 1 ORTHO - Vitros 5 1,28 0 0 5 ROCHE - Cobas 6000 e601, Cobas 8000 e602, Modular E170 83 21,2 4 65 14 ROCHE - Elecsys 2010, Cobas e411 5 1,28 1 3 1 SIEMENS - Enzygnost Anti CMV IgM 4 1,02 0 1 3 SIEMENS - IMMULITE 2000/XPi CMV IgM 20 5,12 1 3 16 THERADIAG - Ela PKS 2 0,51 0 1 1 TOTAL 391 100% 17 123 251 Analyse des réponses quantitatives Trousses N N* Min* Max* Moy r ET r CV r ABBOTT - Architect 86 85 0,87 2 1,48 0,11 7,6 BECKMAN - Access 3 3 1,73 2,4 1,93 0,26 13,6 BECKMAN - Unicel DxI 600/800 20 20 1,48 2,7 2,05 0,32 15,4 BIOMERIEUX - Vidas CMV IgM 101 96 0,66 1,1 0,9 0,07 7,3 DIASORIN - Liaison 8 8 20 25,1 23,2 1,85 8 DIASORIN - Liaison XL 44 42 21,9 29,1 25 1,49 6 ORTHO - Vitros 5 5 1,31 1,47 1,41 0,02 1,3 ROCHE - Cobas 6000 e601, Cobas 8000 e602, Modular E170 82 79 0,85 1,07 0,95 0,05 5 ROCHE - Elecsys 2010, Cobas e411 5 4 0,83 1,08 0,91 0,08 9 SIEMENS - IMMULITE 2000/XPi CMV IgM 20 20 1,08 1,47 1,22 0,09 7,3 Commentaire disponible pour ce marqueur en page 11. Page 7 sur 20

10 Sérologie EBV 10.1 Sérum 1534 - VCA IgG Analyse des réponses qualitatives Trousses N % Négatif Douteux Positif =Assigné Autre 6 1,68 1 0 5 ABBOTT - Architect 61 17 0 0 61 ALL DIAG - EBV Check 6 1,68 0 0 6 ALL DIAG ImmunoQuick 4 1,12 0 0 4 BIOADVANCE - Elisa "mode semi-quantitatif" 1 0,28 0 0 1 BIOADVANCE - Euroline 5 1,4 0 0 5 BIOMERIEUX - Vidas EBV VCA/EA IgG 145 40,5 0 0 145 BIORAD - Bioplex 5 1,4 0 0 5 BIORAD - Platelia 3 0,84 0 0 3 BIORAD - RDT 3 0,84 0 0 3 BIOSYNEX - Immuno Quick Filtration 1 0,28 0 0 1 DIASORIN - Liaison 19 5,31 0 0 19 DIASORIN - Liaison XL 63 17,6 0 0 63 INGEN - Elisa 1 0,28 0 0 1 ORGENTEC - Alegria 9 2,51 0 0 9 SERION/VIRION - EBV VCA IgG 1 0,28 0 0 1 SIEMENS - Enzygnost Anti EBV IgG 2 0,56 0 0 2 SIEMENS - IMMULITE 2000/XPi VCA IgG 16 4,47 0 0 16 SIEMENS - Novagnost Epstein-Barr Virus VCA IgG 1 0,28 0 0 1 THERADIAG - Chorus 2 0,56 0 0 2 THERADIAG - Immuno Dot 2 0,56 0 0 2 THERADIAG - Immuno Well (Elisa) 2 0,56 0 0 2 TOTAL 358 100% 1 0 357 Analyse des réponses quantitatives Trousses N N* Min* Max* Moy r ET r CV r ABBOTT - Architect 61 60 25,3 34,3 29 2,08 7,2 BIOMERIEUX - Vidas EBV VCA/EA IgG 144 136 1,38 2,68 1,97 0,2 10,1 BIORAD - Platelia 3 3 2,66 3,06 2,87 0,23 7,9 DIASORIN - Liaison 19 19 96,2 123 111 8,54 7,7 DIASORIN - Liaison XL 63 61 82 141 111 9,29 8,4 ORGENTEC - Alegria 9 9 116 170,4 139 11,5 8,2 SIEMENS - IMMULITE 2000/XPi VCA IgG 16 16 13,8 19,5 16,5 1,12 6,8 Page 8 sur 20

10.2 Sérum 1534 - VCA IgM Analyse des réponses qualitatives Trousses N % Négatif Douteux Positif =Assigné Autre 5 1,42 1 1 3 ABBOTT - Architect 58 16,5 1 0 57 ALL DIAG - EBV Check 6 1,71 3 0 3 ALL DIAG - ImmunoQuick 5 1,42 0 3 2 BIOADVANCE - Elisa "mode semi-quantitatif" 1 0,28 0 0 1 BIOADVANCE - Euroline 5 1,42 4 0 1 BIOMERIEUX - Vidas EBV VCA IgM 141 40,2 9 6 126 BIORAD - Bioplex 5 1,42 0 0 5 BIORAD - Platelia 3 0,85 3 0 0 BIORAD - RDT 3 0,85 1 1 1 BIOSYNEX - Immuno Quick Filtration 1 0,28 0 0 1 DIASORIN - Liaison 19 5,41 0 2 17 DIASORIN - Liaison XL 61 17,4 3 8 50 INGEN - Elisa 1 0,28 0 0 1 MERIDIAN - Elisa 1 0,28 0 0 1 MERIDIAN - Merifluor 1 0,28 1 0 0 ORGENTEC - Alegria 9 2,56 1 2 6 SERION/VIRION - EBV VCA IgM 1 0,28 0 0 1 SIEMENS - Enzygnost Anti EBV IgM 2 0,57 2 0 0 SIEMENS - IMMULITE 2000/XPi VCA IgM 16 4,56 3 10 3 SIEMENS - Novagnost Epstein-Barr Virus VCA IgM 1 0,28 1 0 0 THERADIAG - Chorus 2 0,57 1 0 1 THERADIAG - Immuno Dot 2 0,57 0 0 2 THERADIAG - Immuno Well (Elisa) 2 0,57 0 1 1 TOTAL 351 100% 34 34 283 Analyse des réponses quantitatives Trousses N N* Min* Max* Moy r ET r CV r ABBOTT - Architect 58 56 1 1,43 1,2 0,06 4,8 BIOMERIEUX - Vidas EBV VCA IgM 140 130 0,17 0,27 0,21 0,01 6,9 BIORAD - Bioplex 5 5 1,6 3,3 2,28 0,38 16,6 BIORAD - Platelia 3 3 0,7 0,85 0,79 0,08 9,7 DIASORIN - Liaison 19 19 37,4 56,9 43 3,58 8,3 DIASORIN - Liaison XL 58 56 35 64 44,9 4,49 10 ORGENTEC - Alegria 9 8 21,3 33 25,3 2,86 11,3 SIEMENS - IMMULITE 2000/XPi VCA IgM 16 16 0,796 1,2 1,02 0,1 10,1 Commentaire disponible pour ce marqueur en page 11. Page 9 sur 20

10.3 Sérum 1534 - EBNA IgG Analyse des réponses qualitatives Trousses N % Négatif Douteux Positif =Assigné Autre 6 1,69 1 0 5 ABBOTT - Architect 61 17,2 0 0 61 ALL DIAG - EBV Check 6 1,69 0 0 6 ALL DIAG - ImmunoQuick 4 1,13 0 0 4 BIOADVANCE - Elisa "mode semi-quantitatif" 1 0,28 0 0 1 BIOADVANCE - Euroline 5 1,41 0 0 5 BIOMERIEUX - Vidas EBV EBNA IgG 144 40,6 0 0 144 BIORAD - Bioplex 5 1,41 0 0 5 BIORAD - Platelia 3 0,85 0 0 3 BIORAD - RDT 3 0,85 0 0 3 BIOSYNEX - Immuno Quick ELIFA 1 0,28 0 0 1 BIOSYNEX - Immuno Quick Filtration 1 0,28 0 0 1 DIASORIN - Liaison 18 5,07 0 0 18 DIASORIN - Liaison XL 62 17,5 0 1 61 INGEN - Elisa 1 0,28 0 0 1 ORGENTEC - Alegria 9 2,54 0 0 9 SERION/VIRION - EBV EBNA 1 IgG 1 0,28 0 0 1 SIEMENS - IMMULITE 2000/XPi EBNA IgG 16 4,51 0 0 16 SIEMENS - Novagnost Epstein-Barr Virus EBNA IgG 1 0,28 0 0 1 THERADIAG - Chorus 2 0,56 0 0 2 THERADIAG - Immuno Dot 2 0,56 0 0 2 THERADIAG - Immuno Well (Elisa) 3 0,85 0 0 3 TOTAL 355 100% 1 1 353 Analyse des réponses quantitatives Trousses N N* Min* Max* Moy r ET r CV r ABBOTT - Architect 61 60 12,1 19,69 13,5 0,77 5,7 BIOMERIEUX - Vidas EBV EBNA IgG 143 139 3,56 8,14 5,43 0,56 10,3 BIORAD - Platelia 3 3 2,3 2,55 2,39 0,12 5,2 DIASORIN - Liaison 18 18 60,7 71,5 66,3 3,54 5,3 DIASORIN - Liaison XL 62 57 46 87,3 68,8 8,98 13,1 SIEMENS - IMMULITE 2000/XPi EBNA IgG 16 16 35,4 47,4 41,9 3,84 9,2 Absence d'analyse statistique quantitative pour la ou les trousses suivantes Trousses N Min Max ORGENTEC - Alegria 3 452 800 Exclusion de la trousse «ORGENTEC - Alegria» car la majorité des résultats obtenus sont supérieurs à la limite haute de quantification. Page 10 sur 20

COMMENTAIRE POUR LES MARQUEURS : CMV IgM 1535 et EBV VCA IgM 1534 Les sérums de ces 2 contrôles sont issus du mélange de poches de sérum provenant de l EFS surchargés en sérums POSITIFS en IgM anti-cmv ou anti-ebv selon le cas. Les tests de vérification de l homogénéité ont été réalisés avec les trousses ARCHITECT et nous avons obtenu les résultats suivants : Marqueur Seuil de positivité fournisseur Index Résultat CMV IgM >1 1,92 POSITIF EBV VCA IgM >1 1.40 POSITIF L analyse «qualitative» des réponses est globalement concordante avec le résultat attendu avec cependant une proportion de résultats DOUTEUX ou NEGATIFS importante avec certaines trousses. Sur ce sérum très dilué, ces trousses se montrent donc légèrement moins sensibles en terme de limite de détection sans que soit mis en évidence de double population. Etant donné qu il n existe pas d exigences en terme de performances concernant ces marqueurs nous avons attribué la note B (Acceptable) aux réponses DOUTEUSES. Les réponses NEGATIVES ont été analysées trousse par trousse et ont été notées : - B si les ratios obtenus étaient proches du seuil et les CV < 20% (témoignant d une dispersion homogène autour du seuil). - D (Erronée) si les valeurs étaient trop basses (témoignant d un inversion probable de sérums au vu du résultat des marqueurs IgG). Page 11 sur 20

11.1 Scénario et résultats 11 Sérologie Toxoplasmose SERUM 1531 : Jeune fille de 19 ans, bilan dans le cadre de la prescription d une contraception. SERUM 1532 : Même patiente, 1 mois plus tard. Pool (1531 et 1532) qualifié* sur : Architect i2000 Abbott : IgG = 117,4 UI/mL, IgM = 0,13 Evolis BioRad : IgG = 181,74 UI/mL, IgM = 0,52 Vidas BioMerieux : IgG = 270 UI/mL, Avidité = 0,48 Western Blot Toxo II IgG LDBIO : Positif (p30, p31, p33, p40, p45) * Techniques accréditées COFRAC 15089 n 8-1769 SERUM 1531 VALEUR ASSIGNEE : Présence d IgG Absence d IgM SERUM 1532 VALEUR ASSIGNEE : Présence d IgG Absence d IgM La réponse aux questions suivantes était facultative et ne rentre pas dans la notation du participant Notion préliminaire : Il n y a pas d erreur de pré-analytique. EXAMENS COMPLEMENTAIRES ET INTERPRETATIONS POSSIBLES A PARTIR DES RESULTATS DES IGG ET IGM DOSES SUR LE SERUM 1531 : Aucun examen complémentaire n était nécessaire sur le 1 er sérum. Interprétation : La présence d IgG spécifiques, en l absence d'igm spécifiques, est en faveur d une toxoplasmose ancienne en dehors de tout contexte transfusionnel et/ou injection de gammaglobulines. A contrôler dans un délai de 3 semaines à 1 mois. EXAMENS COMPLEMENTAIRES ET INTERPRETATION A PARTIR DES RESULTATS DES IGG ET IGM DOSES SUR LE SERUM 1532 ET EN TENANT COMPTE DES RESULTATS DU SERUM 1531 : Aucun examen complémentaire n était nécessaire sur le 2 ème sérum. Interprétations : Titre stable des IgG. Infection ancienne. Contrôle ultérieur inutile sauf contexte clinique particulier. Page 12 sur 20

11.2 Remarques concernant les résultats, interprétations et examens complémentaires Résultats qualitatifs Comme à chaque contrôle, je vous invite à être vigilant sur la saisie des résultats car il y a toujours des résultats négatifs en quantitatif interprétés «positif» et réciproquement pour toutes les techniques. Il n est pas possible au vu du nombre d adhérents de vérifier individuellement la concordance de vos résultats quantitatifs et votre interprétation. Je vous conseille de garder une trace écrite ou informatique (SIL) de vos résultats d EEQ afin de pouvoir argumenter vos erreurs auprès de l auditeur. En ce qui concerne les seuils des techniques, certains adhérents utilisent des seuils différents de ceux recommandés par le fabricant. Ceci n est pas justifiable. Sur ce contrôle, les résultats positifs pour la recherche d IgM semblent être dus à des erreurs de saisie d une interprétation positive alors que la valeur mesurée est inférieure au seuil déclaré par le participant. Examens complémentaires Un certain nombre d entre vous a demandé la réalisation d une avidité des IgG. Ceci n est pas justifié en l absence d IgM, de grossesse et/ou de signes cliniques. Il n y a pas de pertinence à essayer de dater l infection, dans le cas de cette jeune fille. Page 13 sur 20

11.3.1 Interprétations des adhérents rendues au vu des résultats du seul sérum 1531 Interprétation Effectif Fréquence Pas d'interprétation. 3 0,6 % Présence d IgG, présence d IgM. Ces résultats ne permettent pas d exclure une infection récente et seule la cinétique des anticorps réalisée sur un deuxième prélèvement à 3 semaines d intervalle permettra de dater l infection. 2 0,4 % IgG stables. Infection ancienne. Les résultats sont à interpréter en fonction de la date de début de la grossesse et la prise en charge médicale doit être adaptée à l âge gestationnel. 1 0,2 % La présence d IgG spécifiques, en l absence d'igm spécifiques, est en faveur d une toxoplasmose ancienne en dehors de tout contexte transfusionnel et/ou injection de gammaglobulines. A contrôler dans un délai de 3 semaines à 1 mois. 491 98,2 % Présence d IgG équivoque et absence d IgM. Sérum transmis à un laboratoire expert pour la réalisation de techniques complémentaires. 1 0,2 % Autre. 2 0,4 % Page 14 sur 20

11.3.2 Interprétations des adhérents au vu des résultats des deux sérums Interprétation Effectif Fréquence Pas d'interprétation. 35 6,6 % IgG stables. Infection ancienne. Les résultats sont à interpréter en fonction de la date de début de la grossesse et la prise en charge médicale doit être adaptée à l âge gestationnel. 14 2,6 % IgG stables. Infection datant probablement de plus de 2 ou 3 mois par rapport à la date du premier sérum (en fonction du réactif utilisé). La prise en charge de la femme enceinte sera à adapter en fonction de l âge gestationnel. 9 1,7 % La présence d IgG spécifiques, en l absence d'igm spécifiques, est en faveur d une toxoplasmose ancienne en dehors de tout contexte transfusionnel et/ou injection de gammaglobulines. A contrôler dans un délai de 3 semaines à 1 mois. 20 3,8 % Titre stable des IgG. Infection ancienne. Contrôle ultérieur inutile sauf contexte clinique particulier. 451 84,9 % Augmentation significative des IgG. Il est nécessaire de dater l infection. Sérum transmis à un laboratoire expert pour la réalisation de techniques complémentaires. 1 0,2 % Augmentation significative des IgG. Probable réactivation sérologique d une infection ancienne. 1 0,2 % Page 15 sur 20

11.3.3 Analyse(s) complémentaire(s) demandée(s) au vu des résultats du seul sérum 1531 Effectif Fréquence Aucune 412 77 % Avidité IgG 11 2,1 % IgA spécifique 0 0 % Inoculation à la souris 0 0 % Deuxième technique IgM (immunocapture) 0 0 % Charge immunitaire 0 0 % Western-blot de confirmation de la spécificité des IgG 0 0 % 11.3.4 Analyse(s) complémentaire(s) demandée(s) au vu des résultats des deux sérums Effectif Fréquence Aucune 414 77,4 % Avidité IgG 7 1,3 % IgA spécifique 0 0 % Inoculation à la souris 0 0 % Deuxième technique IgM (immunocapture) 0 0 % Charge immunitaire 0 0 % Western-blot de confirmation de la spécificité des IgG 0 0 % Page 16 sur 20

11.4 Sérum 1531 - IgG Analyse des réponses qualitatives Trousses N % Négatif Douteux Positif =Assigné Autre 1 0,16 0 0 1 Abbott - Architect IgG 125 20,4 0 0 125 Beckman Coulter - Access Toxo IgG (depuis 2008) 16 2,61 0 0 16 Beckman Coulter - DXI Toxo IgG 55 8,99 0 0 55 BioMérieux - Toxo Screen DA 1 0,16 0 0 1 BioMérieux - Toxo Spot IF 4 0,65 0 0 4 BioMérieux - Vidas Toxo Compétition 3 0,49 0 0 3 BioMérieux - Vidas Toxo IgG 105 17,2 0 0 105 Biorad - Bioplex 1 0,16 0 0 1 Biorad - Pastorex Toxo 5 0,82 0 0 5 Biorad - PlateIiaToxoIgG 11 1,8 0 0 11 Diasorin - Liaison Toxo IgG 2 0,33 0 0 2 Diasorin - Liaison XL Toxo IgG 16 2,61 0 0 16 Fumouze - Toxolatex 10 1,63 0 0 10 Fumouze - Toxoplasmose HAI 1 0,16 0 0 1 IF maison 1 0,16 0 0 1 LDBIO Diagnostics - Western Blot Toxo II IgG 1 0,16 0 0 1 Orthoclinical Diag - Vitros Toxo IgG 10 1,63 0 0 10 Roche - Cobas 6000 e601, Cobas 8000 e602, Modular E170 158 25,8 0 0 158 Roche - Cobas Core Toxo IgG EIA 2 1 0,16 0 0 1 Roche - Elecsys 2010, Cobas e411 9 1,47 0 0 9 Siemens - ADVIA Centaur Toxoplasma G 58 9,48 0 0 58 Siemens - Enzygnost Toxo IgG 4 0,65 0 0 4 Siemens - IMMULITE 2000/XPi Toxoplasmose IgG 14 2,29 0 0 14 TOTAL 612 100% 0 0 612 Analyse des réponses quantitatives Trousses N N* Min* Max* Moy r ET r CV r Abbott - Architect IgG 125 125 96,3 145,9 118 6,59 5,6 Beckman Coulter - Access Toxo IgG (depuis 2008) 13 13 350 571,4 426 23,3 5,5 Beckman Coulter - DXI Toxo IgG 44 43 341 511 423 30,4 7,2 BioMérieux - Toxo Spot IF 3 3 155 160 160 0 0 BioMérieux - Vidas Toxo IgG 101 101 121 335 227 37,2 16,4 Biorad - PlateIiaToxoIgG 8 6 195,22 262 237 8,85 3,7 Diasorin - Liaison XL Toxo IgG 15 13 169 325 224 29,5 13,2 Orthoclinical Diag - Vitros Toxo IgG 10 10 352 476 446 32 7,2 Roche - Cobas 6000 e601, Cobas 8000 e602, Modular E170 144 144 2114 3850 3217 129 4 Roche - Elecsys 2010, Cobas e411 6 6 2539 3454 3184 304 9,5 Siemens - ADVIA Centaur Toxoplasma G 58 58 311,1 398,4 352 13,9 3,9 Siemens - Enzygnost Toxo IgG 3 3 240 350 322 37,4 11,6 Siemens - IMMULITE 2000/XPi Toxoplasmose IgG 10 10 381 629 459 56,1 12,2 Page 17 sur 20

11.5 Sérum 1531 - IgM Analyse des réponses qualitatives Trousses N % Négatif Douteux Positif Abbott - Architect IgM 125 22,2 =Assigné 124 0 1 Beckman Coulter - Access Toxo IgM 16 2,84 16 0 0 Beckman Coulter - DXI Toxo IgM 54 9,59 53 0 1 Biomérieux - Isaga 6 1,07 6 0 0 Biomérieux - Toxo Spot IF 1 0,18 1 0 0 BioMerieux - Vidas Toxo IgM 83 14,7 83 0 0 Biorad - Platelia Toxo IgM 15 2,66 15 0 0 Diasorin - Liaison XL Toxo IgM 12 2,13 12 0 0 Diasorin - Liaison Toxo IgM 3 0,53 3 0 0 Orthoclinical Diag - Vitros Toxo IgM 10 1,78 10 0 0 Roche - Cobas 6000 e601, Cobas 8000 e602, Modular E170 158 28,1 156 0 2 Roche - Cobas Core Toxo IgM EIA II 1 0,18 1 0 0 Roche - Elecsys 2010, Cobas e411 9 1,6 9 0 0 Siemens - ADVIA Centaur Toxoplasma M 53 9,41 53 0 0 Siemens - Enzygnost Toxoplasmose IgM 2 0,36 0 2 0 Siemens - IMMULITE 2000/XPi Toxoplasmose IgM 15 2,66 15 0 0 TOTAL 563 100% 557 2 4 Analyse des réponses quantitatives Pas d'analyse quantitative pour les marqueurs Négatifs Page 18 sur 20

11.6 Sérum 1532 - IgG Analyse des réponses qualitatives Trousses N % Négatif Douteux Positif =Assigné Autre 1 0,17 0 0 1 Abbott - Architect IgG 125 20,6 0 0 125 Beckman Coulter - Access Toxo IgG (depuis 2008) 17 2,81 0 0 17 Beckman Coulter - DXI Toxo IgG 53 8,75 0 0 53 BioMérieux - Toxo Screen DA 1 0,17 0 0 1 BioMérieux - Toxo Spot IF 4 0,66 0 0 4 BioMérieux - Vidas Toxo Compétition 3 0,5 0 0 3 BioMérieux - Vidas Toxo IgG 102 16,8 0 0 102 Biorad - Bioplex 1 0,17 0 0 1 Biorad - Pastorex Toxo 5 0,83 0 0 5 Biorad - PlateIiaToxoIgG 11 1,82 0 0 11 Diasorin - Liaison Toxo IgG 2 0,33 0 0 2 Diasorin - Liaison XL Toxo IgG 15 2,48 0 0 15 Fumouze - Toxolatex 10 1,65 0 0 10 Fumouze - Toxoplasmose HAI 1 0,17 0 0 1 IF maison 1 0,17 0 0 1 LDBIO Diagnostics - Western Blot Toxo II IgG 1 0,17 0 0 1 Orthoclinical Diag - Vitros Toxo IgG 10 1,65 0 0 10 Roche - Cobas 6000 e601, Cobas 8000 e602, Modular E170 158 26,1 0 0 158 Roche - Cobas Core Toxo IgG EIA 2 1 0,17 0 0 1 Roche - Elecsys 2010, Cobas e411 9 1,49 0 0 9 Siemens - ADVIA Centaur Toxoplasma G 57 9,41 0 0 57 Siemens - Enzygnost Toxo IgG 4 0,66 0 0 4 Siemens - IMMULITE 2000/XPi Toxoplasmose IgG 14 2,31 0 0 14 TOTAL 606 100% 0 0 606 Analyse des réponses quantitatives Trousses N N* Min* Max* Moy r ET r CV r Abbott - Architect IgG 125 125 85 156,9 117 6,29 5,4 Beckman Coulter - Access Toxo IgG (depuis 2008) 13 13 372,95 534,9 420 25,6 6,1 Beckman Coulter - DXI Toxo IgG 42 42 363 629 429 33,8 7,9 BioMérieux - Vidas Toxo IgG 99 97 150 299 224 37,3 16,7 Biorad - PlateIiaToxoIgG 6 5 222,48 468 273 54,5 20 Diasorin - Liaison XL Toxo IgG 15 14 154 323 236 53,7 22,8 Orthoclinical Diag - Vitros Toxo IgG 10 10 334 490 428 50,7 11,9 Roche - Cobas 6000 e601, Cobas 8000 e602, Modular E170 143 143 2413 3935 3213 133 4,1 Roche - Elecsys 2010, Cobas e411 6 6 2662 3462 3223 285 8,8 Siemens - ADVIA Centaur Toxoplasma G 57 57 313 394 351 15,4 4,4 Siemens - Enzygnost Toxo IgG 3 3 300 350 300 0 0 Siemens - IMMULITE 2000/XPi Toxoplasmose IgG 10 10 340 528 423 66,3 15,7 Page 19 sur 20

11.7 Sérum 1532 - IgM Analyse des réponses qualitatives Trousses N % Négatif Douteux Positif Abbott - Architect IgM 125 22,2 =Assigné 125 0 0 Beckman Coulter - Access Toxo IgM 16 2,85 16 0 0 Beckman Coulter - DXI Toxo IgM 53 9,43 52 0 1 Biomérieux - Isaga 6 1,07 6 0 0 Biomérieux - Toxo Spot IF 1 0,18 1 0 0 BioMerieux - Vidas Toxo IgM 84 14,9 83 0 1 Biorad - Platelia Toxo IgM 15 2,67 15 0 0 Diasorin - Liaison XL Toxo IgM 12 2,14 12 0 0 Diasorin - Liaison Toxo IgM 3 0,53 3 0 0 Orthoclinical Diag - Vitros Toxo IgM 10 1,78 10 0 0 Roche - Cobas 6000 e601, Cobas 8000 e602, Modular E170 158 28,1 156 0 2 Roche - Cobas Core Toxo IgM EIA II 1 0,18 1 0 0 Roche - Elecsys 2010, Cobas e411 9 1,6 9 0 0 Siemens - ADVIA Centaur Toxoplasma M 51 9,07 50 0 1 Siemens - Enzygnost Toxoplasmose IgM 2 0,36 0 2 0 Siemens - IMMULITE 2000/XPi Toxoplasmose IgM 16 2,85 16 0 0 TOTAL 562 100% 555 2 5 Analyse des réponses quantitatives Pas d'analyse quantitative pour les marqueurs Négatifs Page 20 sur 20