LE CONTRÔLE ANTIDOPAGE ET SES LIMITES ; ENTRE DIFFICULTÉS ANALYTIQUES ET PROGRES
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- Laurent Plamondon
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1 LE CONTRÔLE ANTIDOPAGE ET SES LIMITES ; ENTRE DIFFICULTÉS ANALYTIQUES ET PROGRES E. SAUSSEREAU 1, M. GUERBET 2, J.P. GOULLÉ 1,2 1-Groupe Hospitalier du Havre 2- UFR de Médecine et de Pharmacie, EA 4651, Rouen Académie Nationale de Pharmacie Paris, 23 janvier 2013
2 LE CONTRÔLE ANTIDOPAGE AGENCE MONDIALE ANTIDOPAGE (AMA) 32 laboratoires accrédités (01/10/2012) Respect de 2 standards internationaux : Norme ISO Standard international pour les laboratoires : Production résultats valides Harmonisation des techniques / rendu des résultats
3 LE CONTRÔLE ANTIDOPAGE Urinaire et sanguin Chaque 1 er janvier, liste des interdictions Urines : plus de 130 molécules recherchées Composés à analyser x10 en 40 ans
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6 SUBSTANCES INTERDITES S1. AGENTS ANABOLISANTS 1. Stéroïdes anabolisants androgènes (SAA) SAA exogènes (44) : nandrolone, stanozolol, SAA endogènes par administration exogène (ainsi que métabolites et isomères (27) : testostérone, épitestostérone, 2. Autres agents anabolisants Clenbutérol Modulateurs sélectifs de récepteurs aux androgènes (SARM S )
7 SUBSTANCES INTERDITES S2. HORMONES PEPTIDIQUES, FACTEURS DE CROISSANCE 1. Agents stimulants de l erythropoïèse : erythropoiétine (EPO), darbopoïétine (depo), méthoxy PEG epoétine (CERA), péginesatide (hématide) 2. Chez l homme : HCG et LH 3. Corticotrophines 4. Hormone de croissance (GH) et fact. de croissance : Analogue à l insuline -1 (IGF-1) - Dérivé des plaquettes (PDGF) Endothélial vasculaire (VEGF) - Autres substances structure proche
8 SUBSTANCES INTERDITES S3. BETA-2 AGONISTES (et isomères optiques) Salbutamol, formotérol, salmétérol (seuils de tolérance) S4. MODULATEURS HORMONAUX ET METAB. 1. Inhibiteurs d aromatase : aminoglutéthimide 2. Modulateurs sélectifs des récepteurs aux œstrogènes (SERM) : tamoxifène, 3. Autres anti-œstrogènes : Clomifène, 4. Modificateurs des fonctions de la myostatine 5. Modulateurs métaboliques
9 SUBSTANCES INTERDITES S5. DIURETIQUES ET AUTRES AGENTS MASQUANTS Diurétiques (44) : furosémide, Autres agents masquants : succédanés de plasma S0. SUBSTANCES NON APPROUVEES Toute substance non approuvée pour usage thérapeutique humain est interdite
10 METHODES INTERDITES M1. MANIPULATION DE SANG (ou composants) 1. Transfusion : autologue, homologue, hétérologue 2. Amélioration artificielle : consommation, transport ou libération O 2 1. Manipulation intravasculaire de sang M2. MANIPULATION CHIMIQUE ET PHYSIQUE 1. Falsification : adultération urines (protéases) 2. Perfusions ou injections IV
11 METHODES INTERDITES M3. DOPAGE GENETIQUE 1. Transfert de polymères d acides nucléiques (ou analogues) 2. Utilisation de cellules Normales ou génétiquement modifiées
12 SUBSTANCES ET METHODES INTERDITES EN COMPETITION S6. STIMULANTS 1. Stimulants non spécifiés : cocaïne, ecstasy 2. Stimulants spécifiés : méthylhexaneamine S7. NARCOTIQUES : Morphine S8. CANNABINOIDES : THC et cannabimimétiques S9. GLUCOCORTICOIDES : per os, IV, IM, rectale
13 BILAN DES CONTRÔLES 2011 EN FRANCE (AFLD) Contrôles : 5935 urinaires 3555 sanguins Urines : 2,8 % résultats positifs : Glucocorticoïdes (23,9 %) Cannabis (23,5 %) Stimulants (17,3 %) Stéroïdes anabolisants (11,1 %) Agents masquants (9,1 %) Bêta-2 agonistes (7,0 %)
14 DES PROGRES ANALYTIQUES DETERMINANTS Développement de l informatique Techniques de CG et de CL couplées à la spectrométrie de masse (GC-MS et LC-MS/MS) Identification substances analysées par leur SM unique «empreinte digitale» + de SM de référence
15 GC-MS
16 LC-MS/MS
17 LC-MS/MS HAUTE RESOLUTION
18 DES DIFFICULTES ANALYTIQUES Malgré les progrès : µg/ml ng/ml POURQUOI? Emploi substances structure proche comp. endog Administration petites doses : <seuil de détection Usage d agents masquants ou diurétiques Détournement molécules nouvelles en dévelop t. Falsification des échantillons (urines, sang)
19 DES DIFFICULTES ANALYTIQUES L affaire BALCO Tétrahydrogestrinone (2003) : THG : dérivée de la testostérone masse musculaire Non répertoriée dans bibliothèques non reconnue
20 QUELLES PARADES? MULTIPLES AU PLAN ANALYTIQUE : Améliorer techniques d identification (M. exacte) Abaisser les seuils de détection Répertorier les molécules en développement Profil biologique : hématologique, stéroïdien Conserver les échantillons des contrôles Développer analyse matrices alternatives
21 NIVEAUX REQUIS DE PERFORMANCE (AMA) AMA ng/ml S1. SAA exogènes Clenbutérol ng/ml 5 0,2 S3. Bêta-agonistes S4. Antagonistes et modulateurs H S6. Stimulants S7. Narcotiques P2. Bêta-bloquants
22 NOUVEAUX EQUIPEMENTS DE MASSE EXACTE LC-MS/MS-HR Thevis M. et al. J. Mass. Spectrom. 2009, 44 : Stabilisateurs de fact. induct. de l hypoxie
23 REPERTORIER MOLECULES EN DEVELOPPEMENT Thérapeutiques nouvelles et médic. émergents AUTANT D OPPORTUNITES Anticiper sur les dernières tendances Obtenir informations sur molécules en développement : PARTENARIAT INDUSTRIE PHARMA Accord 2010 : AMA et Industrie exemplaire Nov 2012 : conf internat industriels médt et AMA
24 CONCLUSION Des difficultés analytiques Des progrès déterminants / équipements Anticiper les tendances Partenariat fort / Industrie pharmaceutique Profil biologique Coopération internationale / lutter contre trafics (INTERPOL / douanes)
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