RÉSUMÉ MOTS-CLÉS mycotoxine «mycos» «toxicum» mycotoxicoses.

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1 RÉSUMÉ MOTS-CLÉS : cochettes, mycotoxines pures, zéaralénone, l'ochratoxine, la contamination naturelle, tuf zéolithique, méthodes d analyse, des changements cliniques, morphologiques, histologiques et de sang, l analyse fractale. Actuellement, l élevage des porcines se fait dans un espace industriel, dans de grandes unités spécialisées, en utilisant des technologies modernes, mécanisées et automatisées. Bien qu'il existe des variations en fonction du pays, du continent, du prix et de la disponibilité, le porc est la viande la plus consommée dans le monde entier. Une estimation faite pour les 20 prochaines années prévoit une augmentation du marché mondial de viande de porc de 40%. En sachant les effets que produisent la consommation d'aliments contaminés par des mycotoxines et les affections microbiologiques produites à cause de l interdiction des antibiotiques comme promoteurs de croissance, les spécialistes ont tenté d'élaborer des stratégies concernant l'utilisation des additifs fourragers dans l'alimentation des animaux. L objectif de ces stratégies est d assurer des aliments de qualité pour les animaux destinés à la consommation humaine, en utilisant les nutriments ayant comme rôle l enrichissement de leur contenu biologique. Des organismes internationaux tels que l'organisation Mondiale de la Santé (OMS) et l'autoritaire Européenne pour la Sécurité des Aliments (EFSA), admettent l existence des risques concernant la consommation d'aliments contaminés par des mycotoxines et les conséquences sur la santé humaine et aussi sur la sante des animaux. Ces organismes font de grands efforts en matière de sécurité et de la sécurité alimentaire. Le terme mycotoxine provient du mot grec «mycos» qui signifie champignon (ou moisissure) et du mot latin «toxicum» qui signifie poison. Les maladies qui surgissent à cause de la consommation des aliments contaminés par des mycotoxines sont appelés mycotoxicoses. Jusqu'à présent, nous avons identifié 350 mycotoxines dans les produits alimentaires et dans l'alimentation des animaux, mais l'on trouve couramment seulement six familles de mycotoxines : les aflatoxine, les ochratoxines, la fumonisine, les trichothécènes, la zéaralénone et la pauline. Après la consommation des aliments contaminés par des mycotoxines peuvent apparaitre des symptômes et des signes cliniques qui dépendent du type des mycotoxines, de la

2 quantité et de la durée de l exposition et de la santé et de l'état physiologique de l'animal au moment de l'exposition. L'apparition des certaines maladies chez les êtres humains et chez les animaux peuvent être causées par la présence des mycotoxines dans les aliments et dans l'alimentation des animaux, car les mycotoxines représentent un risque potentiel par la variété et l'importance de leurs effets toxiques. Il est connu que les truies et les cochettes sont extrêmement sensibles aux mycotoxines qui sont généralement présentes dans les aliments pour animaux d'élevage. Les recherches ont démontré que la zéaralénone a des effets cibles sur le système reproducteur mais elle peut avoir aussi des effets à distance. Ceux-ci peuvent être: hépatotoxiques, hématotoxiques, cytotoxiques, oxydatifs, immunotoxiques et génotoxiques. La zéaralénone a des propriétés estrogéniques et peut causer des perturbations du système endocrinien et l'apparition de troubles de la reproduction, comme la chaleur avant la puberté, l'oestrus prolongé, le changement des comportements et des caractères sexuels, mais peut également affecter d'autres organes. L'ochratoxine A est une mycotoxine fongique étudiée de plus en plus dans le monde entier, à cause de ses effets sur la santé humaine et de la productivité des animaux, mais aussi à cause des pertes économiques qui s enregistrent dans le commerce national et international. La maladie provoquée par la présence de cette mycotoxine est appelé ochratoxicose. L'objectif principal de cette mycotoxine est le rein. Il y a des effets néphrotoxiques pour toutes les espèces des animaux. Des études épidémiologiques ont montré le fait que l OTA est impliquée dans la pathogenèse de nombreuses formes de maladies rénales humaines et animale, y compris les cancers des reins, mais également chez les animaux. Les chercheurs ont tenté d'élucider les mécanismes d'action de ces mycotoxines, mais jusqu à maintenant ces actions n ont pas pu être démontrées. Nous avons établi que leur effet principal est l altération du système immunitaire, par conséquent, diminution de la résistance de l organisme face aux infections. A l aide des programmes de recherche menés dans le monde entier nous avons souhaité élaborer des mesures réglementaires permettant de fixer des valeurs maximales dans les fourrages et dans les aliments pour éviter les risques toxiques que ces mycotoxines produisent. Au niveau européen, nous avons développé des règles pour déterminer ces niveaux pour les céréales brutes, aliments et la nourriture pour animaux qui contiennent ces céréales.

3 Ce thèse a comme objectif l analyse des effets primaires sur le système reproducteur et des effets secondaires sur d'autres systèmes biologiques (effet à distance) causés par les mycotoxines (ZEA et OTA) et déterminer leurs conséquences au niveau national, mais aussi au niveau de la ville de Brasov. Dans le premier chapitre intitulé «DES GENERALITES SUR LES MYCOTOXINES» nous avons présenté les mycotoxines et nous avons mentionné les causes qui conduisent à leur apparition et les organismes qui les produisent. Nous avons analysé les principaux mécanismes de la toxicité et leur action sur la santé humaine et animale et les conséquences du stress oxydatif dû à l'action des mycotoxines sur l immunité. Dans le 2 e chapitre «LA ZEARALENONE» nous avons fait une description détaillée sur la toxicité, le métabolisme et le mécanisme d'action de la zéaralénone et de ses dérivés auprès les animaux d élevage. A partir des principaux effets de la ZEA et de ses dérivés causés par la capacité de se lier aux récepteurs d œstrogène et en raison de leurs effets hormonaux nous avons présenté leur toxicité sur la reproduction et le système de la reproduction «in vivo» et «in vitro» et les effets concernant les récepteurs d'œstrogène sur le statut de l hormone. Nous avons décrit la toxicité chronique qui survient à la suite du cycle entérohépatique et de ses effets (immunotoxicité, cancérogénicité, écotoxicité) à cause de la consommation des aliments naturellement contaminés ou avec de la mycotoxine pure. Nous avons également fait une analyse sur le contrôle et la prévention des risques, la gestion concernant la nourriture des animaux et les méthodes utilisées dans la désintoxication et la biodégradation de la zéaralénone. Dans le 3 e chapitre «L OCHRATOXINE» nous avons présenté le métabolisme et les mécanismes d'action de l ochratoxine, ses effets néphrotoxiques, hépatotoxiques, cancérogènes, génotoxiques, mutagènes, tératogènes, neurotoxiques, immunotoxiques et oxydatives et, de même, les facteurs qui influencent l ochratoxinogénèse. Dans le 4 e chapitre intitulé «MÉTHODES DE DÉTERMINATION DES MYCOTOXINES» nous avons présenté les méthodes d'analyse utilisées pour la détection des mycotoxines des céréales et des aliments destinés à la consommation humaine et animale, avec leurs avantages et leurs inconvénients. Le 5 e chapitre «LA LEGISLATION CONCERNANT LES NIVEUAX MAXIMAUX DES MYCOTOXINES ADMISES DANS LES ALIMENTS ET LES

4 FOURRAGES» parle du rôle majeur des certains organismes internationaux qu ont des responsabilités pour assurer la sécurité et la salubrité des aliments et qui ont élaboré des lois qui ont établi des niveaux maximaux des mycotoxines pour les céréales, pour les aliments destinés aux animaux et pour les aliments utilisés dans l'alimentation humaine. Dans la deuxième partie de la thèse, nous avons présenté la source de financement des recherches menées, notamment le projet «Bourses de doctorat POSDRU /107/1.5/S/76888 pour augmenter la qualité et la formation des jeunes chercheurs dans le domaine de l'agronomie et de médecine vétérinaire», Université des Sciences Agronomiques et Médecine Vétérinaire Bucarest. Dans la première partie du 6 e chapitre intitulé «LE BUT ET L ORGANISATION DES RECHERCHES» nous avons décrit le but et les objectifs de la recherche, notamment: l'analyse du danger représenté par les mycotoxines dans notre pays concernant l ensemble des alimentaire; déterminer la pertinence des différentes techniques de laboratoire pour la détermination des mycotoxines; l enquête des effets de la zéaralénone-toxine pure sur la reproduction et sur d'autres appareils; enquêter les effets de l'ochratoxine A - toxine pure sur le système uro-génital et sur d'autres appareils; évaluer les effets de l'ingestion des fourrages naturellement contaminés par des mycotoxines sur l appareil reproducteur et sur d'autres appareils; l'évaluation de la capacité d inhibition des effets des mycotoxines des fourrages naturellement contaminés. Dans la deuxième partie nous avons parlé du «CADRE NATUREL, ORGANISATIONNEL ET INSTITUTIONNEL DANS LEQUEL LES RECHERCHES ONT EU LIEU», les institutions publiques et privées, avec lesquelles nous avons collaboré pour atteindre les objectifs qu on s est proposé dans cette thèse. Le 7 e chapitre intitulé «DES RECHERCHES CONCERNANT LE CONTROLE DES FOURRAGESX DU POINT DE VUE MYCOTOXICOLOGUE» a eu comme objectif d évaluer le risque envisagé par les matières premières et les fourrages destinés aux animaux d élevage en ce qui concerne la contamination par les mycotoxines dans l ensemble de la chaîne alimentaire. La recherche a été basée sur les données obtenues dans le cadre du Programme Stratégique National du Contrôle des Aliments, la période analysée étant comprise entre les années Ces données ont été obtenues de l Autorité Nationale Sanitaire Vétérinaire pour la Sécurité des Aliments et du Laboratoire d'hygiène et de Santé Publique Vétérinaire. Le

5 nombre total d'échantillons analysés dans la période a été de 4,989, dont 47 on été non conformes, tous provenant de l an On a remarqué que la limite d'aflatoxine a été excédée de 12,7% des matières premières et de 3,6 % des fourrages mélangés étant non conformes. Nous pouvons considérer que les changements climatiques qui ont eu lieu au cours des dernières années ont déterminé l augmentation du nombre des échantillons non conformes. Dans le comté de Brasov nous n avons pas identifié des échantillons non conformes. Pour les échantillons récoltés dans le cadre du programme d autocontrôle nous avons identifié des mycotoxines, mais dans les limites approuvées par la loi. Le 8 e chapitre intitulé «DES RECHERCHES SUR LE CONTROLE DES CONTAMINATIONS DU POINT DE VUE MYCOTOXICOLOGIQUE» a eu comme but d identifier la situation nationale et celle de Brasov concernant les résidus de mycotoxines provenant des produits d'origine animale destinés à la consommation humaine. La recherche a été basée sur les données d ANSVSA, IISPV et DSVSA Brasov conformément au Programme National pour le Contrôle des Résidus. La période analysée a été comprise entre les années 2010 à Pendant cette période, un seul échantillon positif a été identifié pour la viande de porc. Le 9 e chapitre intitulé «METHODES POUR DETERMINER LES MYCOTOXINES ET LES MICRO-ORGANISMES PRODUCTEURS» a eu comme objectif l'évaluation des aliments mélangés utilisés dans le cadre de l'expérience et des organes provenant de l'abattage des truies en utilisant trois techniques d'enquêter les mycotoxines et les micro-organismes qu ils fabriquent, notamment: L Examen Mycologique, La Méthode ELISA et la Méthode HPLC. L examen mycologique a été utilisé pour identifier les moisissures des échantillons de fourrages utilisés dans les expériences. Pour effectuer l'examen mycotoxicologique nous avons utilisé deux méthodes, notamment la Méthode ELISA et la Méthode HPLC. La Méthode ELISA est une méthode quantitative à l aide de laquelle on peut scanner rapidement les échantillons des fourrages attribués aux cochettes qui font partie de l'expérience, mais aussi pour les échantillons des organes prélevés après l'abattage des cochettes. La Méthode d analyse HPLC est une méthode quantitative et qualitative des mycotoxines attribuées dans la contamination naturelle et expérimentale, tant pour la nourriture administrée aux cochettes qui font partie de l expérience que pour les organes prélevés.

6 Les résultats obtenus à la suite de l'analyse des fourrages composés et des organes à l aide de l'examen mycologique et des examens mycotoxicologiques ELISA et HPLC ont été les suivants: Dans le maïs naturellement contaminé nous avons identifié plusieurs espèces de moisissures du genre Fusarium, Penicillium et Aspergillus. Après les analyses effectuées nous avons obtenu une charge fongique de 112,273 UFC / g. Le fourrage administré au groupe de contrôle au début de l'expérience a été positif pour toutes les mycotoxines testées, mais c était dans les limites approuvées. A la fin de l'expérience nous n'avons pas identifié l OTA dans le fourrage administré au groupe de contrôle, mais la ZEA a eu des valeurs près de la limite admise. Le maïs naturellement contaminé a contenu DON et OTA en dessous des limites fixées par la loi, AFB1 légèrement au-dessus de la limite et ZEA a eu des valeurs cinq fois plus élevées que la limite approuvée. Le tuf zéolithique a déterminé la réduction de la quantité des mycotoxines en proportion de %. ZEA a été détectée dans tous les organes examinés, sauf ceux qui provenaient du groupe de contrôle. Nous avons trouvé une plus grande quantité de ZEA dans les reins que dans le foie, tandis que nous avons détecté des quantités plus grandes d OTA dans le foie par rapport aux reins. Dans le 10 e chapitre «LES INVESTIGATIONS CLINIQUES DES EFFETS DES MYCOTOXINES CHEZ LES CROCHETTES» nous avons observé les symptômes cliniques associés à la consommation des mycotoxines, en tenant compte des signes cliniques généraux, de l'apparence des organes génitaux externes et de l'augmentation de la croissance des animaux. Dans le groupe qui a été naturellement contaminé, nous avons constaté l apparition de la diarrhée sans la présence de la fièvre, de l'apathie ou de l'anorexie. Chez une crochette de ce groupe nous avons remarqué l apparition du prolapsus rectal et une hernie ombilicale. Pour les groupes où nous avons utilisé du maïs naturellement moisis et de la zéaralénone pure nous avons observé le gonflement des vulves et la présence de l'hypersécrétion et la congestion locale. Après avoir examiné le groupe des cochettes pour lesquelles nous avons introduit le tuf zéolithique nous pouvons conclure qu'il a fourni une protection partielle contre les effets des mycotoxines oestrogéniques. En calculant l augmentation de croissance nous avons remarqué que la meilleure croissance a été enregistrée auprès du groupe qui a reçu de la zéaralénone pure, alors que le groupe à la contamination naturelle a eu la plus faible augmentation. Ce dernier a eu aussi le plus haut indice de conversion alimentaire, décrivant une légère malabsorption. Dans le groupe qui a

7 reçu l'ochratoxine pure nous avons observé une limitation de l'apport alimentaire et nous avons constaté une diminution de l augmentation de croissance. Nous croyons que l'administration a limité les effets de la malabsorption sans parvenir à compenser l'action toxique des mycotoxines. Le 11 e chapitre intitulé «LA DETERMINATION DES EFFETS STEROIDIENS DES MYCOTOXINES A L AIDE D UN EXAMEN CYTO-VAGINAL» a eu comme objectif de mettre en évidence d'éventuels changements induits au niveau de la muqueuse vaginale par les mycotoxines administrées dans le cadre de la contamination naturelle ou expérimentale. La cytologie vaginale révèle des changements de la muqueuse vaginale et des cellules épithéliales vaginales sous l'influence des stéroïdes ovariens. L examen cyto-vaginal a été fait en série, les jours 30, 40 et 45 de l'expérience pour toutes les cochettes qui faisaient partie de l'expérience. Les échantillons prélevés du vagin ont été colorées en utilisant la méthode le bleu de méthylène et la Méthode Wright. Après cet examen, nous avons constaté que le groupe de contrôle a montré les caractéristiques de l'âge des animaux tout au long de l'expérience, les groupes qui ont subi une contamination naturelle et le tuf zéolithique, une contamination naturelle et une contamination expérimentale avec la ZEA ont montré des changements spécifiques à la stimulation oestrogénique du jour 41 de l'expérience. Le tuf zéolithique a prouvé sa capacité de limiter l action hormonale des mycotoxines en présentant une stagnation dans l évolution des symptômes spécifiques au niveau cyto-vaginal. Dans le groupe avec OTA nous n avons pas trouvé des changements au niveau cytovaginal à aucun moment de l'expérience. Le 12 e chapitre «L EXAMEN DU SANG» a eu comme objectif de mettre en évidence les paramètres biochimiques et hématologiques du sang des groupes contaminés par des mycotoxines par rapport au groupe témoin. Tout au long de l'expérience, des échantillons de sang ont été effectués le 14 juillet, le 21, 25 et le 28 aout 2014 pour un nombre de cinq animaux de chaque groupe. Après avoir analysé les résultats obtenus nous pouvons remarquer la variation de l'hématocrite pendant la période expérimentale, le dépassement de la limite supérieure pour les groupes contaminés expérimentalement avec ZEA et OTA, une tendance de croissance de l'hémoglobine pour tous les groupes expérimentaux, la variation du nombre des leucocytes qui peut mettre en évidence l immunosuppression induite par l'action des mycotoxines et sa croissance suivante suggère une

8 infection développée à cause de l'immunosuppression. L'augmentation continue du nombre des globules rouges était en accord avec l'augmentation du taux de l'hémoglobine. La variation du nombre des globules rouges pour le groupe qui a été contamine avec OTA a suggéré l altération de la rate par cette mycotoxine. Tout au long de l'expérience nous avons constaté une diminution des paramètres VEM et HEM et les valeurs CHEM ont montré de faibles écarts par rapport aux valeurs de référence. Tout au long de l'expérience les valeurs de la créatinine sont restées dans les limites normales, mais l'acide urique et ASAT q dépassé l'indice de référence. L augmentation des valeurs ALAT et GGT et PAL pour les groupes qui ont subit une contamination expérimentale suggère l hépatotoxicité des mycotoxines pures. Les valeurs du glucose, des protéines totales et de la bilirubine ont été maintenues dans des limites physiologiques. La valeur de Ca +2 n'a pas été affectée, cependant le Na a eu des évolutions anormales pour les groupes qui ont subit une contamination naturelle et le tuf zéolithique et la contamination expérimentale. Le 13 e chapitre «L EXAMEN NECROPSIQUE ET HISTOPATOLOGIQUE» a eu comme but d évaluer les changements macroscopiques et microscopiques induits au niveau des organes internes par la consommation de mycotoxines. L'examen a été effectué après l'abattage des animaux et a été destiné surtout à l'aspect des ovaires, de l utérus, des reins, du foie et de la rate. La contamination naturelle a causé des dommages en particulier au niveau des organes génitaux, mais les autres organes examinés ont été affecté: les reins, le foie, la rate et le cœur. Nous avons observé que le tuf zéolite administré dans les fourrages a limité les effets des mycotoxines. Dans le groupe ayant reçu de la zéaralénone pure nous avons observé les plus importantes lésions au niveau des ovaires et de l'utérus. L'ochratoxine a produit des lésions nécrotiques et des saignements au niveau des reins, du foie et de la rate, mais n'a pas produit d'importants dommages au niveau du système reproducteur. Dans le 14 e chapitre intitulé «L EVALUATION DU METABOLISME DU CALCIUM A TRAVERS LA MORPHOCITOMETRIE ET L ANALYSE MATHEMATIQUE DES IMAGES RADIOLOGIQUES» nous avons voulu évaluer l action des mycotoxines auprès de l ossification des os. En partant du fait que l estrogène intervient dans le métabolisme osseux et dans le processus de l'ossification nous avons recherché si l action action oestrogénique de la ZEA se produit aussi au niveau du système squelettique. De même, la

9 littérature spécialisée mentionne l intervention de l OTA dans le métabolisme du calcium, en signalant à la fois des augmentations et des diminutions du calcium sérique dose-dépendante. Nous avons récolté le fémur des animaux abattus, qui a été radiographié et les images obtenues ont été utilisées pour l évaluation morpho-cytometrique des diamètres de la diaphyse fémorale et l analyse fractale des images radiographiques. Après avoir interprété les données obtenues nous avons constaté que la plus grande épaisseur de l'os du fémur a été enregistrée dans le groupe de contrôle, mais ce groupe a eu le plus mince os compact. Le plus élevé indice corticale moyenne (MCI) a été obtenu dans des groupes avec la contamination naturelle et le plus faible a été obtenue dans le groupe de contrôle. Les résultats des analyses fractales et morpho-cytometrice montent l ossification avancée des os des groupes exposés aux mycotoxines. Nous pouvons conclure que l'ota et la ZEA interviennent dans le métabolisme du calcium et dans le processus d'ossification. Le 15 e chapitre est dédié au «CONCLUSIONS FINALES ET RECOMMANDATIONS». Ainsi, nous considérons le faite que : 1. Pendant la période soumise à l analyse nous avons identifié 47 échantillons des grains non-conformes provenant tous de l année 2013, peut-être en raison des changements climatiques au cours des dernières années. Les échantillons récoltés pendant ce programme stratégique ont été conformes dans le comté de Brasov. 2. Les principales espèces de moisissures détectés dans le maïs naturellement contaminé ont fait partie des genres : Fusarium, Penicillium et Aspergillus. 3. Le fourrage administré au groupe témoin a été positif pour toutes les mycotoxines testées mais il s est encadré dans les limites approuvées. 4. Le maïs naturellement contaminé a contenu DON et OTA en dessous des limites fixées par la loi, AFB1 légèrement au-dessus des limites et ZEA qui a eu des valeurs cinq fois plus élevé que la limite admise. 5. ZEA et OTA ont été détectées dans tous les organes examinés, sauf ceux qui provenaient du groupe de contrôle. La quantité ZEA a été plus élevée dans les reins que dans le foie. Nous avons enregistré une quantité plus grande d OTA au niveau du foie qu au niveau des reins. 6. Les examens ELISA et HPLC ont montré des variations sensibles et ont assuré les paramètres qualitatifs et quantitatifs.

10 7. La contamination naturelle a provoqué l'apparition de la diarrhée sans la présence de la fièvre, de l'apathie et de l'anorexie, ce qui recommande le contrôle de l alimentation. 8. L maïs naturellement contaminé et le fourrage contenant de la zéaralénone pure ont déterminé le gonflement de la vulve, l apparition d une hypersécrétion et de la congestion locale. 9. Le tuf zéolithique administré a déterminé la réduction de la quantité de mycotoxines en proportion de %, offrant ainsi une protection partielle contre l'action oestrogénique des mycotoxines et en limitant ses effets. 10. Le groupe qui a reçu de la zéaralénone pure a eu la meilleure augmentation de la croissance, tandis que l'ochratoxine a causé la diminution de la croissance des cochettes, en remarquant aussi la limitation volontaire de l apport de fourrage. 11. Le groupe avec la contamination naturelle a eu la plus faible croissance et le plus haut indice de conversion du fourrage, en décrivant une légère malabsorption. 12. L examen cyto-vaginal a révélé les effets œstrogéniques de la ZEA manifestés auprès des groupes avec la contamination naturelle et avec la mycotoxine pure, en mettant en évidence la présence de cellules intermédiaires chez les cochettes pré-pubères. L OTA n'a pas produit de changement au niveau cyto-vaginal à aucun moment de l'expérience. 13. L évolution des paramètres hématologiques indique l affectation de la rate par l OTA et les effets hématotoxiques produits par la zéaralénone. 14. Le profil biochimique des groupe ayant subit une contamination naturelle a décrit un syndrome de malnutrition. 15. Les mycotoxines enquêtées n'ont pas influencé l'acide urique, la glycémie et la bilirubine totale dans les conditions d'administration de l'expérience. 16. Les résultats biochimiques indiquent une légère affectation du foie pour les groupes avec la contamination expérimentale en modifiant ALAT, ASAT, GGT et PAL; l'action hépatotoxique a été plus forte dans le groupe avec l'ochratoxine pure. 17. Les paramètres biochimiques ont indiqué l action toxique modérée au niveau des reins de l'ensemble des mycotoxines utilisées qui s est manifestée par la modification de l urée, de la créatinine, de sodium et de protéine totale. 18. Dans le groupe qui a reçu le tuf nous avons observé des valeurs baisses des minéraux, en particulier le fer, le sodium et le calcium et la valeur du potassium a été augmentée pour compenser l'hyponatrémie.

11 19. Tous les groupes expérimentaux ont présenté des changements macroscopiques au niveau des organes internes. La modification des ovaires et de l'utérus ont montré la toxicité au niveau de l appareil reproducteur, toxicité manifestée par les mycotoxines existantes dans le maïs naturellement contaminés. Dans le groupe où nous avons administré le tuf zéolithique les changements anatomopathologiques ont été plus réduits. 20. La zéaralénone pure a particulièrement touchée le système reproducteur. Nous avons remarque des lésions hémorragiques au niveau des reins, de la vessie, du foie et de la rate. 21. L ochratoxine a produit les plus graves lésions macroscopiques au niveau des reins et du foie de toutes les mycotoxines incluses dans l'expérience. Du point de vue microscopique son action a été principalement caractérisée par des lésions nécrotiques et des saignements au niveau des reins, du foie et de la rate. 22. La contamination naturelle a produit des lésions en particulier au niveau des organes génitaux, mais elle a affecté aussi les autres organes examinés: les reins, le foie, la rate et le cœur. 23. Il existe une relation inverse du point de vue proportionnel entre l'épaisseur de l'os et MCI, déterminée par la vitesse d'ossification et aussi entre MCI et la dimension fractale des images radiologiques. 24. Les résultats de l'analyse fractale et MCI démontrent l ossification avancée des os des groupes exposés à la mycotoxine. Tant l OTA que la ZEA interviennent dans le métabolisme du calcium et le processus d'ossification. A la suite des recherches effectuées nous pouvons recommander: l administration du tuf zéolithique dans les fourrages afin de limiter les effets des mycotoxines et supplémenter les fourrages avec des minéraux lors qu on utilise le tuf zéolithique dans les fourrages; l utilisation des fourrages de bonne qualité en particulier pour les porcs jeunes; effectuer des examens cytovaginaux pour surveiller d une manière indirecte la zéaralénone chez les porcelets et utiliser les méthodes ELISA et HPLC pour détecter les niveaux des mycotoxines dans les fourrages et dans les organes; l utilisation des examens radiologiques (morpho-cytométrie et l analyse fractale) pour analyser la physiologie osseuse. Le dernier chapitre est consacré à des sources bibliographiques. Pour la recherche nous avons consulté 261 des articles spécialisés, 14 actes legislatives, 6 de sites Web et documents officieles des organisations internatinalles avec des compentences dans le domaine de la these.

12 Il est nécessaire d analyser et de surveiller les fourrages afin d éviter que les humains et les animaux ne soient exposés aux mycotoxines comme est déclaré par l initiative - One Health. Les éléments originaux de cette thèse sont les suivants: Effectuer l examen cyto-vaginal comme une méthode de dépister les effets hormonaux des mycotoxines auprès des porcines pré-pubères. La comparaison de deux colorants utilisés pour l examen cyto-vaginal. La comparaison des effets de la contamination naturelle et expérimentale des fourrages avec la zéaralénone auprès des jeunes porcs. L examinassions radiographique des fémurs comme un moyen d'investigation du métabolisme du calcium et de l'ossification. L utilisation du tuf zéolithique à des concentrations de 2,4% dans la nourriture administrée aux porcs.