Helicobacter. Pr ag Zribi Miled Meriam 4 ème année pharmacie

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1 Helicobacter Pr ag Zribi Miled Meriam 4 ème année pharmacie 1

2 Historique Histoire des animaux observation de bactéries spiralées au sein de l estomac (milieu stérile??/acidité gastrique) Bizzozer Salmon Krienitz Freedburg Barron Steer C.Jones Warren Marshall Warren Marshall Marshall et Al Marshall Goodwin Goodwin et Al 1893: description des bactéries spiralées au niveau de la MG 1907: première observation de bactéries spiralées dans l estomac 1940: suggestion d un lien possible: l ulcère duodénal/des bactéries spiralées 1975: suggestion d une association possible: l UG/la bactérie spiralée 1979: description d une bactérie spiralée intimement liée à la MG antrale 1983: - première culture - nom 1985: dénomination officielle de la bactérie décrite: 1987: dénomination remplacée par 1989: proposition d un genre: 2

3 * 1994 agent carcinogène de type I * ère conférence de consensus * * 2005 prix Nobel pour Marshall/Warren 3

4 Taxonomie Comparaison: séquences ARN 16S: Genre Helicobacter comporte les genres: Campylobacter, Acrobacter et Wolinella 25 espèces: caractéristiques communes Spécificité de l hôte: H.pylori/ Homme H.felis/ Chat 4

5 Caractères bactériologiques 1- Caractères morphologiques Bactérie à Gram négatif Bacille mesure 2,5 à 4µm de long et 0,5 à 1µm de large Morphologie spiralée en "S" et hélicoïdale (ED/Biopsies gastriques) Formes bacillaires ou en U (après culture) Formes coccoïdes (appauvrissement du milieu de culture) 5

6 Formes bacillaires Formes intermédiares en «U» Formes coccoïdes 6

7 Caractères bactériologiques 2- Caractères culturaux: Bactérie très fragile Microaérophile: 5% d O 2, 10% de CO 2 et 85% de N 2 Ensemencement: milieux enrichis en sang (Columbia)/milieux sélectifs (addition d antibiotiques (supplément Skirrow)) Colonies: petites, transparentes, luisantes, discrètement bombées rondes et régulières (3 à 7 j/primoculture et 2 à4 j/repiquage) 7

8 Culture (+) sur milieu Columbia Examen direct/ Gram 8

9 3- Caractères biochimiques: Uréase : produite en grande quantité Oxydase (+) Catalase (+) 9

10 4- Facteusrs de virulence : Au niveau de la cellule épithéliale : Uréase, phospholiapse, cytotoxine, hémolysine Au niveau du mucus : ammoniac, phospholipase, lipopolysaccharide 10

11 Epidémiologie H. pylori est une bactérie strictement humaine, transmise aux enfants en bas âge essentiellement dans le milieu familial Transmission: - liquide gastrique dans les pays développés suite à des vomissement ou régurgitations - voie orofécale dans les pays en développement 11

12 Représente une des infections bactériennes les plus fréquentes dans le monde Elle est acquise précocement pendant l enfance Pays développés: augmente avec l âge * 20% (< 40 ans) * 50% (> 60 ans) Pays en voie de développement: 80 à 90% (population globale) 12

13 b/ Transmission intrafamiliale Se fait généralement des parents aux enfants: * acquisition de l infection (enfance) * prévalence des parents > celle des enfants Mère:* rôle important (contact direct et clos/enfants) * utilisation commune des cuillères Typage moléculaire: Etude de Akermi Mongi/Mme Fendri C Famille/6 personnes 5 Hpylori (+) 1 Hpylori (-) 13

14 Physiopathologie Réaction inflammatoire chez l'homme Certaines souches possèdent un îlot de pathogénicité appelé cag qui code pour différents gènes formant un appareil de secrétion de type IV une production d'interleukine 8 Toxine dit VacA, car vacuolisante peut aussi être produite en quantité importante par certaines souches 14

15 Une augmentation de l'apoptose, de la prolifération cellulaire compensatrice et du risque de mutation en cas d'infection à H. pylori L'évolution de cette infection chronique dépend : Facteurs de l'hôte: le polymorphisme de l'interleukine 1 b qui détermine le type de lésion qui va se développer Facteurs de l'environnement: (tabagisme pour la maladie ulcéreuse, régime pauvre en vitamines et salé pour le cancer) 15

16 Pouvoir pathogène Bas niveau socio-économique +++ Promiscuité Facteurs de risque Antécédents familiaux Mauvaises conditions d hygiène Conditions de vie (enfance) Vie en communauté (crèche, école) 16

17 a/ Gastrite Une inflammation de la muqueuse gastrique définition Cette gastrite survient toujours quand H. pylori est présent Elle peut persister des décennies, voire toute la vie du sujet sauf traitement intercurrent Peut être symptomatique peut évoluer vers les maladies suivantes 17

18 b/ Maladie ulcéreuse Dans environ 5% des cas, vers la maladie ulcéreuse, autrefois considérée d'origine psychosomatique la muqueuse qui devient alors sensible à l'acide L'éradication de H. pylori permet de guérir cette maladie 18

19 c/ Cancer gastrique L'infection à H. pylori est la 1 ère infection bactérienne associée au développement de cancers chez l'homme Dans moins de 1% des cas, la gastrite va évoluer vers un carcinome gastrique Elle survient après plusieurs décennies et une séquence de transformations de la muqueuse où un état pré-cancéreux peut être observé Ce cancer de mortalité élevée est encore la deuxième cause de mortalité par cancer dans le monde Un autre cancer de l'estomac : le lymphome du MALT (Mucosa Associated Lymphoid Tissue) encore plus rare a vu son pronostic transformé depuis la connaissance de H. pylori 19

20 d/ Autres maladies L'infection à H. pylori a été impliquée dans beaucoup d'autres maladies ou syndromes idiopathiques, avec des niveaux de preuve variables 20

21 DIAGNOSTIC Diagnostic direct Prélèvement : Biopsie antrale et/ou fundique dans l eau physiologique Examen direct : - La biopsie est dilacérée au scalpel puis colorée au Gram - Elle se présente sous forme de bacille à Gram négatif - Test à l uréase : réalisée directement à partir de la biopsie, la lecture est faite 1 heure après et 24 heures 21

22 + - 22

23 Culture : Milieux de culture : Columbia au sang, GS Skirrow (polymixine, trimétoprime, vancomycine), Mueller Hinton au sang L incubation est réalisée à 37 C en microaérophilie pendant 3 à 5 jours Les colonies son transparentes de 1 mm Identification : Helicobacter possède une uréase, une catalase et une oxydase PCR : Amplification du gène ure A 23

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25 B/ Méthodes indirectes : 1- ELISA : Cette technique présente l inconvénient de : pas de corrélation entre le titre d Ac et la sévérité de l infection et ne permet pas de différencier une infection ancienne d une infection active 25

26 2- Détection de H pylori dans les selles : test de Hp SA : ELISA Avantages : Rapide Excellente reproductibilité Contrôler l efficacité du traitement (après 15 jours d arrêt du traitement) Limites Un Test qualitatif Faux négatifs (au cours du traitement) Faux positifs (traces de selles dans les puits) Spécificité modérée 26

27 3- Test respiratoire à l urée marquée ou Breath test: la propriété de Hpylori de posséder une uréase très forte Le plus souvent un isotope stable non radioactif du carbone 13C est utilisé De l urée marquée au 13C absorbée est hydrolysée dans l estomac par l uréase de H pylori en ammoniac et gaz carbonique Au niveau intestinal le gaz carbonique passe dans le sang et est éliminé par le poumon dans l air expiré 27

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29 Avantages : C est une technique rapide (40 mn), fiable et efficace dans le contrôle du traitement (après 1 mois) Inconvénients : Non réalisable pour les enfants d âge < 5 ans Faux négatifs (test au cours du traitement) Risque de vomissement La quantité de CO2 expirée est parfois insuffisante 29

30 Traitement Le traitement de l infection à H. pylori est recommandé: - L ulcère gastrique ou duodénal - Le un lymphome gastrique de MALT - Les patients issus d une famille à haut risque de cancer gastrique - Les patients dyspeptiques de moins de 45 ans Plusieurs protocoles thérapeutiques, la trithérapie constitue le meilleur schéma d éradication pendant au moins 7 jours et comprenant un inhibiteur de la pompe à protons (IPP) en association avec deux antibiotiques : la clarithromycine associée à l amoxicilline ou au métronidazole Le taux d éradication de la bactérie est de l ordre de 80 % suivant les combinaisons mais la résistance aux antibiotiques constitue la cause principale de l échec de ces traitements d éradication 30