DETERMINATION DE LA TENEUR MATIERE GRASSE BRUTE DANS LES ALIMENTS POUR ANIMAUX. Version 09 Date d application
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- Marie-Noëlle Savard
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1 Agence fédérale pour la Sécurité de la Chaîne alimentaire Laboratoires Liège MET-LFSAL DETERMINATION DE LA TENEUR MATIERE GRASSE BRUTE DANS LES ALIMENTS POUR ANIMAUX Version 09 Date d application Rédaction par : Marianne Aubry, Responsable technique Révision par : Responsable qualité LFSAL; Autorisation de publication par : Patrick Genot manager LFSAL; Gestion et localisation de la version valide : QAM; Serveur du laboratoire Destinataires : Collaborateurs de la section Chimie humide Mots clefs : Qualité substantielle, graisse, aliments des animaux LAB23 I-MET Matière grasse-v /9
2 Aperçu des modifications * Révision par/date* EVRARD M / 31/05/2005 Aubry M / 03/02/2009 Aubry M. / 30/06/2010 MA / 10/08/2011 MA /15/10/2012 Motif de la révision Adaptation à la méthode SOXTEC et SOXCAP Nouveau template LIMS Partie du texte/portée de la révision Tout Tout Séchage à l étuve en place du micro-onde Veille règlementaire et vérification Remarque d audit interne tout multiple * L'écart entre la date de mise en application et la date actuelle ne peut pas dépasser 5 ans. Les modifications par rapport à la version précédente sont reprises en rouge. LAB23 I-MET Matière grasse-v /9
3 TABLE DES MATIERES 1 OBJECTIF CHAMP D APPLICATION DOCUMENTS LEGAUX ET NORMATIFS DEFINITIONS ET ABREVIATIONS PRINCIPE CONTROLE DE QUALITE CONTROLE DE 1 ERE LIGNE CONTROLE DE 2 EME ET 3 EME LIGNE CONSIGNES DE SECURITE ET MESURES SPECIFIQUES REACTIFS ET ADDITIFS APPAREILS METHODE PRÉPARATION DE L ÉCHANTILLON PROCEDE A Prise d essai Analyse PROCEDE B Prise d essai Analyse CALCUL ET RAPPORTAGE PROCEDE A PROCEDE B REFERENCE AUX PROCEDURES, INSTRUCTIONS, DOCUMENTS, FORMULAIRES OU LISTES Y AFFERENTS PROCEDURES LISTES FORMULAIRES... 9 LAB23 I-MET Matière grasse-v /9
4 1 Objectif Dosage de la matière grasse dans les aliments des animaux 2 Champ d application Procédé A Applicable aux aliments d origine végétale, à l exception de ceux qui sont connus comme contenant des matières grasses qui ne sont pas complètement extractibles par l éther de pétrole sans hydrolyse préalable. Procédé B Applicable aux aliments simples d origine animale ainsi qu aux aliments mentionnés comme exceptions à l application du procédé A. 3 Documents légaux et normatifs Norme/Fil conducteur Clauses Dérivé de la Règlement 152/2009/ CE Annexe III H 4 Définitions et abréviations Terme Origine de la définition Définition Pas d application Abréviation Origine Signification Pas d application Procédé A 5 Principe L échantillon est extrait par de l éther de pétrole. Le solvant est distillé et le résidu est séché et pesé. Procédé B L échantillon est traité à chaud par de l acide chlorhydrique. Après avoir été lavé et séché, le résidu est soumis à l analyse selon le procédé A. LAB23 I-MET Matière grasse-v /9
5 6 Contrôle de qualité 6.1 Contrôle de 1 ère ligne L analyse est suivie par une carte de contrôle de type Shewhart. Tout écart de la carte doit être signalé au responsable technique ou à son remplaçant qui décidera des actions correctives à prendre. 6.2 Contrôle de 2 ème et 3 ème ligne Ces contrôles sont exécutés suivant les directives de la procédure LAB23 P020 Gestion des contrôles qualité 7 Consignes de sécurité et mesures spécifiques - Suivre les instructions de sécurité spécifiées sur les fiches de sécurité des réactifs et dans le log book de l'appareil. - Toutes les manipulations de solvants se font sous hotte. 8 Réactifs et additifs - Ether de pétrole C (R012) - Eau déminéralisée (R144) - Acide chlorhydrique d = 1,19 (R013) - Agent de dessiccation gel de silice 2-5 mm. - Acide chlorhydrique 3 M (D019) : diluer 540 ml d HCl (R013) dans 1460 ml d eau déminéralisée (R144). - Cartouches d extraction 33 mm pour SOXTEC. - Cartouches d extraction 28 mm pour SOXCAP. - Filtres pour fioles SOXCAP. - Fioles en verre pour SOXCAP. - Récipient d hydrolyse gradué pour SOXCAP - Godets en aluminium pour SOXTEC. - Papier tournesol pour le contrôle du Ph. 9 Appareils - Système SOXTEC FOSS. - Système SOXCAP FOSS. - Etuve à 103 ± 5 C. - Etuve à vide à 75 C ± 3 C. - Four à micro-ondes à plateau tournant. LAB23 I-MET Matière grasse-v /9
6 10 Méthode 10.1 Préparation de l échantillon L échantillon est préparé suivant les directives de la procédure «LAB23 P011 Préparation des échantillons» 10.2 Procédé A Prise d essai Peser, à 1 mg près, 2 g de l échantillon (m1) et les introduire dans une cartouche d extraction pour SOXTEC bouchée à l aide d un tampon de coton dégraissé. Placer la cartouche dans l extracteur SOXTEC (cfr SOP de l appareil). Les barèmes de temps/température sont les suivants : Analyse Ébullition : 20 minutes à 135 C Rinçage : 40 minutes à 135 C Elimination du solvant : 10 minutes à 135 C Evaporation du solvant résiduel : 59 minutes à 135 C Taré Remplir les godets collecteurs en aluminium (m2) et les remplir de 70 ml d éther de pétrole (R012) et ouvrir l arrivée d eau pour le condenseur à reflux. Démarrer l appareil. A la fin de l analyse (durée : environ 2 h10 minutes), retirer les godets en aluminium contenant la matière grasse extraite ; éteindre l appareil. Sécher les godets en les plaçant pendant une heure et demie deux heures dans l étuve à 103 ± 5 C à vide en présence d agent de dessiccation. Remarque : Pour les poudres de laits, Sécher les godets en les plaçant pendant une heure et demie dans l étuve à 75 C à vide en présence d agent de dessiccation. Laisser refroidir dans un dessiccateur et peser (m3) Procédé B Prise d essai Peser à 1 mg près (m4), 2 g de l échantillon dans une fiole SOXCAP munie de son filtre. Afin que l hydrolyse soit optimale, la prise d essai traitée ne devrait pas excéder les données reprises dans le tableau ci-après, pourvu que les teneurs attendues soient annoncées sur l échantillon Analyse % de graisse Prise d essai recommandée (en g) , ,5 > 20 1 Remplir le récipient d hydrolyse du SOXCAP avec 800 ml d HCl 3M (D019) (jusqu au trait «R»). LAB23 I-MET Matière grasse-v /9
7 Monter le SOXCAP et placer les échantillons comme décrit dans la SOP de l appareil. S assurer que les manettes du SOXCAP sont en position «Fume removal» et «Condenser water». Ouvrir le robinet d eau pour le condenseur et démarrer l appareil à thermostat 8. Lorsque l ébullition de l acide commence, diminuer le thermostat à 7.5 et laisser bouillir pendant 60 minutes. L hydrolyse terminée, mettre le thermostat en position 0. Ouvrir la pompe à vide et positionner la manette supérieure en position «Waste removal» afin d éliminer la solution acide. Le liquide éliminé, positionner la manette supérieure sur «Fume removal» et la manette inférieure sur «Rinse Water» afin de remplir le récipient d eau pour le rinçage des échantillons ; s arrêter à la marque «H 2 O» du récipient (cfr fig. 4). Répéter l opération à cinq fois afin d avoir six rinçages au total. Contrôler (à l aide de papier tournesol) le ph de l eau éliminée qui doit être proche de 7 (entre 6,5 et 7). Si nécessaire, effectuer un ou plusieurs nouveaux rinçages jusqu à ce que le ph désiré soit atteint. Retirer le statif contenant les fioles de l appareil et éponger le dessous des fioles plusieurs fois sur du papier absorbant. Placer les fioles sur le statif de séchage et mettre sécher l ensemble à l étuve à 103 C durant 3 heures. Laisser refroidir au dessiccateur. Fixer une cartouche en cellulose pour SOXCAP sur la partie supérieure des fioles. A l aide d une tigette en verre, faire descendre avec précaution le filtre et l aliment dans la cartouche en cellulose puis boucher avec une bourre d ouate la partie inférieure de la fiole (fig. 3). LAB23 I-MET Matière grasse-v /9
8 Fixer l adaptateur pour SOXTEC sur la partie inférieure de la fiole Placer le module dans le SOXTEC en suivant la procédure A à partir du point " Analyse", excepté que le remplissage des godets en aluminium doit se faire avec 90 ml d éther de pétrole (R012) à la place de 70 ml, comme décrit dans le procédé A (fig. 4). Sortir les godets en aluminium de l étuve à vide, peser les godets contenant la matière grasse extraite (m6). 11 Calcul et rapportage 11.1 Procédé A m3 m2 % MGA = 100 m1 Où : %MG A = pourcentage de matière grasse dans l aliment m1 = masse de la prise d essai (g) m2 = tare du godet en aluminium (g) m3 = masse du godet en aluminium contenant l extrait gras (g). LAB23 I-MET Matière grasse-v /9
9 11.2 Procédé B Où : m6 m2 % MG B = 100 m4 %MG B = pourcentage de matière grasse totale dans l aliment m6 = masse du godet en aluminium contenant l extrait gras (g) m2 = tare du godet en aluminium (g) m4 = masse de la prise d essai (g) L incertitude de mesure sur l analyse est reprise dans la liste L : Liste des incertitudes de mesure section Chimie humide Aliment 12 Référence aux procédures, instructions, documents, formulaires ou listes y afférents 12.1 Procédures LAB23 P018 Carte de contrôle qualité LAB23 P020 Gestion des contrôles qualité LAB23 P011 Préparation des échantillons 12.2 Listes LAB23 L010-01: Liste des incertitudes de mesure section Chimie humide - Aliments 12.3 Formulaires LAB23 F543-CH01 Feuille de travail chimie humide LAB23 I-MET Matière grasse-v /9
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