ELEVATION TOTALE HB HB/SEM METHODES. altitude élevée. S entraîner bas. sanguine ELEVATION DU TAUX D HEMOGLOBINE

Transcription

1

2 ELEVATION DU TAUX D HEMOGLOBINE METHODES Entraînement à altitude élevée Dormir haut S entraîner bas Transfusion sanguine EPO/ARANESP ELEVATION TOTALE HB < 15g/l < 10g/l 10 20g/l 10 20g/l ELEVATION HB/SEM 1g/L < 1g/l 10 20g/l 3g/l B. BERGLUND, 1st Annual USADA Symposium on anti-doping science (2002)

3 Il faut augmenter l hémoglobine de plus de 5% pour observer un effet sur la performance. Ce qui correspond à la perfusion de 1 unité de sang (450 ml) ou ml de globules rouges. Dans ces conditions 10% des GR sont d origine étrangère (en cas d hétéro transfusion). L injection de globules rouges est préférable à celle du sang total

4 Effets sur la performance: Augmentation de la vo 2 max de 12,8% 24h après reinfusion de 750ml de concentré de GR (Robertson et al. J Appl Physiol 1986) Le débit cardiaque n est pas affecté par l augmentation de la viscosité sanguine résultant de l augmentation du nombre de GR (Dowling Sports Health 1990) Augmentation de la tolérance à la chaleur Baisse de la concentration en lactates

5 2 possibilités: héterotransfusion autotransfusion Prélèvement de 0,450 à 1,8 L (1 à 4 unités) de sang Centrifugation plasma réinjecté (érythraphérèse) ou non globules rouges stockés Suivant le mode de conservation, les GR sont réinjectés - 7 à 9 semaines plus tard - ou plusieurs mois plus tard, 1 à 4 jours avant la compétition

6 Stockage des globules rouges à -4 C perte de 1% par jour soit 60% utilisables au bout de 8 semaines Durée de conservation: en France 42 jours peut aller jusqu à 56 jours avec des solutions non autorisées en France Stockage des GR à -80 C, les GR peuvent être stockés 10 ans avec une perte de 10 à 15% seulement

7

8 Prélèvement 12 heures à 4 C

9 érythraphérèse Haemonetics MCS System

10 RBC freezing (high glycerol method, 38%) Procedure Freezing 1. Fill 1 vol packed RBC (EDTA-blood, washing not required) into freezing tube (with screw cap). 2. Add 1 to 2 vol glycerol solution. 3. Mix well (tilt several times, no vortexing). 4. Freeze slowly at -80 C without vibration (put box in -80 C freezer for 1 day). 5. For long term storage, transfer into liquid nitrogen barrel. Thawing 1. Fill about 500 microliter sorbitol solution into freezing tube with frozen RBC. 2. Thaw slowly on ice (higher temperatures up to 37 C are possible, but reduce RBC recovery considerably). 3. Immediately after thawing, drop RBC into a new tube containing at least 2 ml sorbitol solution (transfer carefully, no pipetting). 4. Let sit for 30 min at room temperature. 5. Centrifuge slowly, do not resuspend sediment. 6. Wash several times with NaCl 0.9%-solution, until supernatant is not hemolytic anymore. Do not resuspend sediment. 7. Then, resuspend sediment and wash once more

11 Il faut 4 à 8 semaines pour récupérer d un prélèvement de 1L de sang Donc dans le cas d autotransfusion, le prélèvement doit avoir lieu 4 semaines au moins avant la compétition rhuepo-enhanced autologous transfusion (EEAT)

12 Concentré de GR 45 g d Hb contient GR + majeure partie des leucocytes + un certain % de plaquettes Concentré de GR avec solution additive de conservation 45 g d Hb minimum par unité Ht < 0,70 Concentré de GR appauvri en leucocytes avec solution additive de conservation 43 g d Hb minimum par unité Ht < 0,70 Concentré de GR cryopréservé 36 g minimum d Hb après reconstitution

13 Chaque globule rouge d un individu a un spectre identique et spécifique d antigène de groupe sanguin qui est sous contrôle génétique

14 Leur classification se fait selon deux niveaux : Premier niveau : les antigènes de groupes sanguins. On en recense plus de 650 actuellement (exemples : Ag A, Ag B, Ag D, Ag Fya ). Deuxième niveau : ces antigènes sont regroupés en 23 systèmes de groupes sanguins.

15

16

17 Antigènes de groupes sanguins, systèmes antigéniques et groupes sanguins érythrocytaires

18

19

20 Transfusion identique et pas seulement compatible

21 Possibilités de dépistage Transfusion hétérologue: dépistage direct Nécessité de connaître le phénotype du receveur

22 GELS-TESTS GROUPAGE ABO/Rh PHENOTYPAGE Kell-k-Kpa-Kpb-Jka-Jkb-Lea-Leb-P PHENOTYPAGE M-N PHENOTYPAGE S-s-Fya-Fyb PHENOTYPAGE Rhésus - Kell Manque de sensibilité?

23 Ces antigènes peuvent être identifiés et quantifiés par cytométrie de (en) flux. Premier AC Classe IgG provenant d un sérum humain AC secondaire marqué immunoglobuline anti-humaine de mouton

24

25

26 Dépistage indirect