1 Culture Cellulaire Microplaques 2 HTS- 3 Immunologie/ HLA 4 Microbiologie/ Bactériologie Containers 5 Tubes/ 6 Pipetage

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1 2 HTS

2 3 Immunologie / Immunologie Informations Techniques 3 I 2 ELISA 96 Puits 3 I 4 ELISA 96 Puits en Barrettes 3 I 6 en Barrettes de 8 Puits 3 I 7 en Barrettes de 12 Puits 3 I 8 en Barrettes de 16 Puits 3 I 8 en Barrettes Sécables 3 I 9 Tubes Immunologie 3 I 10 Plaques Terasaki 3 I 11 Plaques Terasaki 60 Puits 3 I 11 Plaques Terasaki 72 Puits 3 I 11 2 HTS

3 Immunologie La technique ELISA (EnzymeLinked Immunosorbent Assay) est probablement la méthode biochimique la plus utilisée pour les analyses et diagnostics en laboratoire. Les analytes tels que peptides, protéines, anticorps et hormones peuvent être détectés de façon sélective en faibles concentrations parmi une multitude d autres substances et être quantifiés. De plus, les techniques ELISA sont rapides, sensibles, économiques et peuvent être utilisées en haut débit. substrat 2 HTS La technique ELISA est utilisée pour différents types de tests (ex ELISA direct, ELISA indirect, ELISA sandwich, ELISA compétition). Néanmoins, toutes ces variantes sont basées sur le même principe, la fixation d un antigène ou anticorps spécifique sur une surface solide et l interaction sélective avec la solution à tester. Les molécules n interagissant pas spécifiquement avec l antigène ou l anticorps lié à la surface solide sont éliminées par lavage pendant le test. antigène Figure 1: ELISA direct anticorps HRP conjugué substrat Pour la révélation, l anticorps ou l antigène est marqué ou lié à une enzyme (ELISA direct; Fig. 1). Alternativement, un conjugué peut aussi être utilisé (ELISA indirect; Fig. 2). La réaction se déroule en ajoutant un substrat d enzyme pour produire un signal mesurable (colorimétrique, fluorescent ou luminescent). L intensité du signal renseigne la quantité d analytes présents dans l échantillon.! Informations complémentaires: Forum no. 9 Microplates for Enzyme Linked Immunosorbent Assays (Réf. no. F ) antigène anticorps primaire Figure 2: ELISA indirect anticorps secondaire conjugué 3 2

4 Propriétés de surface et couleur de microplaque Une étape clé en technique ELISA est la fixation d un antigène ou anticorps sur la surface solide par adsorption passive. Par conséquent, les caractéristiques de cette surface sont cruciales pour garantir la performance du test. Toutes les microplaques ELISA de Greiner BioOne sont en polystyrène pur de haute qualité. La matière première est hautement, et donc particulièrement adaptée pour les mesures optiques. En raison de sa nature chimique, le polystyrène est un composé hydrophobe. Des groupes hydrophiles peuvent être générés sur les surfaces polystyrène par traitement. Greiner BioOne propose deux qualités de surface pour les microplaques ELISA: des surfaces hydrophiles de et des surfaces moins hydrophiles de. La fixation sur une surface solide basée sur l adsorption passive dépend également des propriétés de la molécule à être liée. Il est donc conseillé de comparer les performances des surfaces de haute et lors de l élaboration d un nouveau test. Outre le polystyrène transparent pour les dosages colorimétriques, Greiner BioOne propose une grande variété de microplaques ELISA noires et blanches pour des dosages en luminescence et en fluorescence. La couleur de la plaque et les propriétés de surface sont identifiables à travers le nom de marque (tableau 1). Marque Propriété de Surface Couleur Moyenne fixation Haute fixation FLUOTRAC 200 Moyenne fixation noire FLUOTRAC 600 Haute fixation noire LUMITRAC 200 Moyenne fixation blanche LUMITRAC 600 Haute fixation blanche Table 1: Récapitulatif des noms de marque et propriétés des microplaques ELISA Le critère principal pour nos microplaques ELISA est un coefficient de variation stable (CV) d un lot de matière première à un autre, suivi sur une longue période (Fig. 3). Figure 3: Coefficient de variation (CV) de tous les lots de matière première testés de 2002 à 2007 pour les microplaques s (moyenne et s). Si les critères sont remplis, le lot de matière première est validé pour la production des microplaques ELISA. Le lot de matière première est aussi renseigné sur l étiquette emballage du produit fini. L identification de nos microplaques ELISA est la suivante: Le numéro du lot de matière première utilisé est rappelé sur le carton, suivi du numéro de lot de production, du numéro de carton et d un numéro de contrôle interne (Fig. 4). 2 HTS Les aspects qualitatifs Nous avons établi un standard qualité élevé sur nos produits pour l immunologie, en particulier sur la composition et la reproductibilité des propriétés de fixation. La matière première a une influence majeure sur les propriétés de fixation du produit fini. Lorsqu elle est approvisionnée pour être utilisée dans la fabrication des microplaques ELISA, ses propriétés sont vérifiées régulièrement. Des échantillons de plaques sont testés avec un test immunologique (ELISA, LIA ou la FIA, en fonction de leurs applications) et doivent remplir les critères suivants: Pour l homogénéité intra plaque, le coefficient de variation (CV) ne doit pas dépasser 5% pour des essais colorimétriques ou 10% pour des essais de fluorescence et de luminescence. Pour les produits destinés à l immunologie, afin de proposer des propriétés de fixation constantes, le CV de cinq plaques testées ne doit pas dépasser 10%. En outre, le ratio de nouvelles plaques échantillons ver sus des plaques référence doit être de l ordre de 100 /10%. Désignation Lot de matière première Lot de production Numéro de carton consécutif Numéro interne IPC Figure 4: Etiquetage des produits pur l immunologie 3 3

5 ELISA 96 Puits 2 HTS ELISA 96 Puits Greiner BioOne fabrique des microplaques pour le diagnostic et la recherche en immunologie depuis plus de 30 ans. Un large choix de microplaques comportant différents traitements de surface est proposé. La gamme comprend des microplaques à fond transparent, noires ou blanches, ou UVStar. La microplaque est compatible avec les systèmes de robotique.! Informations complémentaires sur microplaques immunologie (FLUOTRAC TM et LUMITRAC TM microplaques) et formats plus denses (384 et 1536 puits) Chapitre 2 p. 2 I 4, 2 I 12, 2 I Fond F / Standard (ST) (Fig. 3) Figure 3: : Fond F / ST Volume total: 382 µl Volume de travail: µl Le profil du puits est un critère déterminant pour une microplaque. 5 profils de puits différents sont disponibles: 1. Fond U (Fig. 1) 4. Fond F / Puits Cheminée (Fig. 4) Figure 1: : Fond U Volume total: 323 µl Volume de travail: µl Figure 4: : Fond F / Puits cheminée Volume total: 392 µl Volume de travail: µl 5. DemiPuits (Fig. 5) 2. Fond V (Fig. 2) Figure 2: : Fond V Volume total: 234 µl Volume de travail: µl Figure 5: : Demipuits Volume total: 199 µl Volume de travail: µl Plus d informations sur les profils de puits p. 2 I 6.! Pour détails techniques concernant les surfaces en contact et les ratios surface/volume Annexe Technique p. A l

6 ELISA 96 Puits 651 0XX ELISA 96 Puits Fond U / Fond V / Fond F / DemiPuits 2 HTS Fabriqué en polystyrène cristal 650 0XX Free of detectable DNase, RNase, human DNA nonpyrogenic Format fond U fond U fond V fond V Couleur Couvercle Format / ST / ST / puits cheminée / puits cheminée demipuits demipuits Couleur Couvercle 10/40 10/40 3 5

7 ELISA 96 Puits en Barrettes 2 HTS ELISA 96 Puits en Barrettes ELISA 96 Puits en Barrettes en Barrettes Fond C en Barrettes Fond F C8 F8 F12 F16 en Barrettes Fond U U8 U16 Figure 1: Aperçu des microplaques en barrettes disponibles Les microplaques au format barrettes offrent l avantage d une flexibilité plus grande pour le diagnostic. Les barrettes peuvent être retirées du cadre support, de façon à pouvoir ajuster le nombre de tests à réaliser au nombre d échantillons et ne pas être lié au format prédéterminé d une microplaque. De plus, chaque barrette peut être soumise à une grande variété de conditions de test. Un aperçu de la gamme de microplaques en barrettes disponible chez Greiner BioOne est présenté en Fig en barrettes Fond U Les plaques en barrettes avec un fond rond (Fond U, Fig. 3), sont disponibles aussi bien en barrettes de 8 puits que de 16 puits. Le U désigne la forme de fond rond. Les plaques en barrettes fond U sont idéales pour les tests d agglutination. Pas d angles et en conséquence un pipetage simple et performant Adapté aux analyses /! Pour les détails techniques concernant les surfaces en contact et les ratios surface/volume Annexe Technique p. A l en barrettes sécables individuelles, Fond C Le C représente un fond plat avec des coins arrondis (Fig. 2). Les coins arrondis indiquent que chaque puits individuel peut être pipeté sans liquide résiduel et le fond plat permet une mesure optique précise. Les barrettes à sont fournies sous la forme de 12 barrettes de 8 puits, dans un cadre support de 96 places (matrice 12 x 8). Chaque puits individuel peut être séparé (option «singlebreak») et le nombre de tests réalisés ajusté précisément au nombre d échantillons. Les plaques à sont disponibles en polystyrène transparent et en option avec un marquage rouge, vert, bleu ou jaune en surface supérieure du puits. Figure 3: : Fond U Volume total: 312 µl Volume de travail: µl 3. en barrettes Fond F Les plaques en barrettes à fond plat (, Fig. 4) sont disponibles en barrettes de 8 puits en barrettes de 12 puits en barrettes de 16 puits Le F indique des puits à fond plat. Ce type de puits est idéal pour des mesures optiques précises. Le faisceau lumineux n est pas dévié par le profil du puits. Les microplaques en barrettes à sont disponibles en polystyrène transparent (qualité MICROLON ) et également en noir (qualité FLUOTRAC TM ) et blanc (qualité LUMITRAC TM ). Figure 2: : Fond C Volume total: 346 µl Volume de travail: µl Figure 4: : Fond F Volume total: 388 µl Volume de travail: µl 3 6

8 en Barrettes U8 et F8 ELISA 96 Puits en Barrettes en Barrettes U8 et F8 U8 s F8 s / blanches / noires 2 HTS X Barrettes montées sur cadre Free of detectable DNase, RNase, human DNA nonpyrogenic Description Quantité x barrettes Couleur des barrettes 12 x U8 12 x U8 fond U fond U Description Quantité x barrettes 12 x F8 12 x F8 12 x F8 12 x F8 12 x F8 12 x F8 LUMITRAC TM 200 LUMITRAC TM 600 FLUOTRAC TM 200 FLUOTRAC TM 600 Couleur des barrettes blanche blanche noire noire 3 7

9 2 HTS ELISA 96 Puits en Barrettes en Barrettes F12, F16 et U16 en Barrettes F12, F16 et U16 Transparentes X X 754 0XX en barrettes F12 s, traitées culture cellulaire sur demande en barrettes F16 disponibles en noir ou blanc sur demande en barrettes U16 disponibles en noir ou blanc sur demande Barrettes montées sur cadre Free of detectable DNase, RNase, human DNA nonpyrogenic Description Quantité x barrettes 8 x F12 8 x F12 Couleur des barrettes Description Quantité x barrettes x F x F x U x U16 fond U fond U Couleur des barrettes 3 8

10 en Barrettes Sécables en Puits Individuels / ELISA 96 Puits en Barrettes en Barrettes Sécables en Puits Individuels C8 Transparent avec ou sans Marquage Couleur Plaques en barrettes sécables en puits individuels C8 sans marquage couleur traitées culture cellulaire sur demande Barrettes montées sur cadre 2 HTS Free of detectable DNase, RNase, human DNA nonpyrogenic Description SB SB SB SB SB SB Quantité x barrettes Couleur des barrettes Marquage couleur du puits rouge rouge bleu bleu Description SB SB SB SB Quantité x barrettes Couleur des barrettes Marquage couleur du puits vert vert jaune jaune 3 9

11 2 HTS Tubes Immunologie Tubes Immunologie Tubes Immunologie Tubes p. 5 I 3 Tubes pour Culture p. 1 I 19 Fabriqué en polystyrène cristal X Les tubes immunologie sont souvent utilisés pour déterminer des taux d hormones, par exemple la TSH (thyroid stimulating hormone). Avec une longueur de 75 mm et un diamètre de 12 mm avec ou sans étoile dans le fond, ils sont disponibles en qualité et. Le fond étoilé augmente la surface contact et rend possible la fixation en plus grande quantité d antigènes ou d anticorps. Fond rond rond rond étoilé rond étoilé ø [mm] x hauteur [mm] Volume [ml] 12 x x x x / / / /

12 Plaques Terasaki Plaques Terasaki Plaques Terasaki 60 et 72 Puits 2 HTS 659 1XX Plaques Terasaki Couvercle pour lecture au microscope Réf Micro distributeur pour des plaques Terasaki 60 puits disponible sur demande Fabriqué en polystyrène cristal Plaques Terasaki Le système d antigène de leucocyte humain () est le complexe majeur d histocompatibilité (MHC) humain et est composé de deux classes polymorphes I (A, B et C) et II (DR, DQ et DP). Principalement, quatre applications différentes peuvent être distinguées dans le typage : Transplantation Transfusion Association de maladies Police scientifique La détermination sérologique des protéines des positions génétiques A, B, C et DR est principalement réalisée par le test de microlymphocytotoxicité complémentdépendant (LCT) ou test de Terasaki, qui a été standardisé depuis Le principe de ce test est la cytolyse des lymphocytes à tester, qui est causé par l activation du système de complément par le couple AntigèneAnticorps. Les lymphocytes perméabilisés sont généralement colorés par des chromophores ou des fluorophores et évalués microscopiquement. Les plaques Terasaki de Greiner BioOne sont adaptées à toutes les applications de détermination sérologique des antigènes. Les plaques sont fournies en format 60 ou 72 puits, les dimensions de la plaque restant identiques. Les puits individuels ont un volume de 10 µl. Réf possède un couvercle par sachet. Les plaques Terasaki possèdent un traitement de surface stable un an Format Volume par puits [µl] Empilable 60 puits puits puits puits puits puits 10 Traitement de surface TC Couvercle 10/ * ) /480 10/ * ) / / * ) /1200 * ) carton pliant * ) carton pliant * ) carton pliant 3 11