KIT ELISA dosage immunologique anti-bsa REF : ELISA A RECEPTION DU COLIS : Vérifier la composition du colis indiquée ci-dessous en pages 1 et 2

Dimension: px
Commencer à balayer dès la page:

Download "KIT ELISA dosage immunologique anti-bsa REF : ELISA A RECEPTION DU COLIS : Vérifier la composition du colis indiquée ci-dessous en pages 1 et 2"

Transcription

1 KIT ELISA dosage immunologique anti-bsa REF : ELISA : 0033 (0) : 0033 (0) : : A RECEPTION DU COLIS : Vérifier la composition du colis indiquée ci-dessous en pages 1 et 2 Stocker les articles du colis dans les bonnes conditions : Ouvrir le carton Placer les deux bouteilles de PBStween au réfrigérateur à +4 C Placer le sachet noté A au congélateur à - 20 C Placer le sachet noté M au réfrigérateur à + 4 C Attention : Ces conditions de stockage sont à respecter scrupuleusement pour permettre une conservation des produits du kit de 6 mois. Avant toute manipulation, étudier la fiche sécurité en pages 16 à 18 COMPOSITION DU COLIS POUR 40 élèves travaillant en binôme: 1 carton contenant : 1 sachet noté A contenant 3 microtubes bouchés : 1 microtube à bouchon bleu contenant 50 µl d anticorps anti- Immunoglobuline de lapin couplé à la peroxydase 1 microtube à bouchon rouge contenant 110 µl de sérum de lapin immunisé contre la BSA 1 microtube à bouchon naturel contenant 110 µl de sérum de lapin non immunisé 1 sachet noir de 20 barettes de micro-titration avec leurs supports ( ATTENTION : pour une longue conservation, garder les plaques à l abri de la lumière) Kit Test ELISA Page 1 sur 20

2 1 sachet noté M contenant : 1 tube à bouchon rouge contenant 10 ml d eau stérile 1 tube noir contenant 8 ml de TMB ( ATTENTION : le TMB doit être gardé à l abri de la lumière) 1 tube à fond conique de 12 ml de PBSx10 1 tube vide à fond conique de 50 ml 2 bouteilles de PBStween MATERIEL NECESSAIRE : - Micropipette de 10 à 100 µl (ref VVCS 100 dans la partie matériel de laboratoire du catalogue) ou compte-gouttes calibré en plastique (goutte de 40 µl) ( ref POI1 dans la partie matériel de laboratoire du catalogue) - Eau distillée (déminéraliseur et bidon ref DEMIN et BPHD5 dans la partie matériel de laboratoire du catalogue) - Tubes de 50 ml (ref TU50 dans la partie matériel de laboratoire du catalogue) - Eprouvette de 150 ml ou de 125 ml (ref ) - Papier aluminium (ref ALU dans la partie matériel de laboratoire du catalogue) - Pipettes de 2 et de 10 ml (ref PGV2 et PGV10 dans la partie matériel de laboratoire du catalogue) - Poire à pipeter (ref PSPU dans la partie matériel de laboratoire du catalogue) ou pipump (ref PIPUMP2 et PIPUMP10 dans la partie matériel de laboratoire) - Flacon de 250 ml (ref FGV250 dans la partie matériel de laboratoire du catalogue) MATERIEL CONSEILLE : Pour bloquer la réaction de révélation du test elisa :acide sulfurique ou chlorhydrique (ref ou dans la partie produits chimiques du catalogue) Pour aller plus loin : Spectrophotomètre pour mesurer l absorbance et cuve (ref SPECTRO ou BMS SPEC5000 ou PS-2642 et ref CUVSP1 dans la partie matériel de laboratoire du catalogue) ou bien appareil photo numérique (ref dans la partie observation du catalogue) et logiciel gratuit MESURIM (disponible sur le site de l Académie d Amiens) Kit Test ELISA Page 2 sur 20

3 FICHE PREPARATEUR 1) Préparation du tampon PBSx1: diluer d un facteur 10 le contenu du tube noté PBSx10 provenant du sachet noté M stocké au réfrigérateur (possibilité de réaliser cette étape quelques jours à l avance et de conserver le produit dilué à 4 C pendant 4 semaines) Verser le PBSx10 dans une éprouvette de 125 ml ou 150 ml Rincer le tube qui a contenu le PBSx10 une première fois avec un peu d eau déminéralisée Récupérer cette eau de lavage dans l éprouvette Renouveler l opération plusieurs fois en veillant à ne pas dépasser un volume total de 120 ml dans l éprouvette Complèter l éprouvette avec de l eau distillée jusqu à 120 ml Transférer dans un flacon marqué PBSx1 Conserver au réfrigérateur à +4 C sans excéder une durée d 1 mois. 2) Préparation de la solution d anticorps anti-bsa de concentration C1 : diluer au PBSx1 le contenu du microtube à bouchon rouge du sachet A stocké au congélateur (possibilité de réaliser cette étape quelques jours avant le TP et conserver 24 heures à 4 C ou 4 semaines à -20 C) ATTENTION : la dilution se fait avec le PBS x1 (dilué au point 1) et non avec le PBS tween Ajouter 1,5 ml de tampon PBS x1 (préparé au point 1) dans le microtube à bouchon rouge du sachet noté A conservé au congélateur Prélever grossièrement à la pipette le mélange et le placer dans un tube propre pouvant contenir au moins 15 ml ( conseil : utiliser un tube de 50 ml en plastique). Noter ce tube C1. Recommencer 4 fois l opération d ajout de 1,5 ml de PBSx1 dans le microtube et les opérations de prélèvement et de transfert dans le tube noté C1. Ajouter 7,5 ml de tampon PBSx1 dans le tube noté C1. On obtient 15 ml de solution de concentration C1. Si le TP a lieu dans moins de 24 heures, conserver à 4 C. Si le TP a lieu quelques jours plus tard, conserver à -20 C sans excéder 4 semaines. Kit Test ELISA Page 3 sur 20

4 3) Préparation de la gamme d anticorps anti-bsa à doser : à partir de la solution C1, réaliser une dilution en cascade d un facteur ½ à chaque étape (possibilité de faire cette étape quelques jours avant le TP et de conserver les dilutions à 4 C pour 24h ou à -20 C pour 4 semaines) ATTENTION : les dilutions se font avec le PBS x1 (dilué au point 1) et non avec le PBS tween - Préparation de la concentration C2 d anticorps anti-bsa : Prélever 7,5 ml dans le tube noté C1 et les mettre dans un tube propre pouvant contenir au moins 15 ml ( conseil : utiliser un tube à fond conique en plastique de 50 ml). Noter ce tube C2. Ajouter 7,5 ml de tampon PBS x1 dans le tube noté C2. On obtient 15 ml de solution de concentration C2. - Opérer de la même façon pour la préparation des concentrations C3, C4, C5, C6, C7 et C8 d anti-bsa : dilution en cascade d un facteur ½ à partir de la solution C1 Après avoir effectué les dilutions, il reste 7,5 ml des solutions C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7 et 15 ml de la solution C8. ATTENTION : Si le TP a lieu dans moins de 24 heures, conserver les 8 solutions ainsi obtenues à 4 C. Si le TP a lieu quelques jours plus tard, conserver à -20 C sans dépasser 1 mois. 4) Préparation de la solution d anticorps de détection : dilution au PBSx1 du contenu du microtube à bouchon bleu du sachet noté A stocké au congélateur (possibilité de préparer cette solution quelques jours à l avance et conserver à 4 C pendant 24h ou à -20 C pendant 4 semaines) ATTENTION : la dilution se fait avec le PBS x1 (dilué) et non avec le PBS tween Ajouter 1,5 ml de tampon PBS x1 (préparé au point 1) dans le microtube à bouchon bleu du sachet noté A conservé au congélateur Kit Test ELISA Page 4 sur 20

5 Prélever grossièrement à la pipette le mélange et le placer dans un tube propre pouvant contenir au moins 30 ml ( conseil : utiliser un tube à fond conique en plastique propre de 50 ml). Noter ce tube «Ac détection». Recommencer 4 fois l opération d ajout de 1,5 ml de PBSx1 dans le microtube et les opérations de prélèvement et de transfert dans le tube noté «Ac détection» Ajouter 22,5 ml de tampon PBSx1 dans le tube noté «Ac détection». On obtient 30 ml de solution d anticorps de détection. Si le TP a lieu dans moins de 24 heures, conserver à 4 C. Si le TP a lieu quelques jours plus tard, conserver à -20 C sans dépasser 1 mois. 5) Préparation de la solution révélatrice TMB : diluer au ½ le contenu du tube noir de TMB stocké dans le sachet M au réfrigérateur (étape à réaliser juste avant le TP sans exposer à la lumière ni à d éventuelles traces de détergeant) Entourer d aluminium le tube en plastique vide de 50 ml (fourni dans le sachet M au réfrigérateur) de manière à protéger le contenu de la lumière Verser, dans ce tube le contenu du tube noir de TMB stocké dans le sachet M placé au réfrigérateur Ajouter 8 ml d eau stérile (tube à bouchon rouge dans le sachet M stocké au réfrigérateur) Boucher et bien agiter Conserver à l abri de la lumière à 4 C (pas plus d une journée) ATTENTION : Pour éviter toute dégradation du TMB, il est nécessaire d utiliser un tube neuf sans trace de détergeant : le tube en plastique de 50 ml fourni est à usage unique et parfaitement adapté pour la dilution du TMB. De plus, le TMB est très sensible à la lumière : il ne faut en aucun cas le préparer dans un tube sans protection d aluminium 6) Préparation du sérum non-immunisé, le témoin négatif (possibilité de réaliser cette étape quelques jours avant le TP et conserver 24h à 4 C ou 4 semaines à -20 C) : diluer, dans 10 ml de PBS x1, le contenu du microtube à bouchon blanc stocké dans le sachet A au congélateur. Kit Test ELISA Page 5 sur 20

6 Ajouter 1,5 ml de tampon PBS x1 (préparé au point 1) dans le microtube à bouchon blanc du sachet noté A conservé au congélateur Prélever grossièrement à la pipette le mélange et le placer dans un tube propre pouvant contenir au moins 10 ml ( conseil : utiliser un tube à fond conique en plastique propre de 50 ml). Noter ce tube «sérum non immunisé» Recommencer 4 fois l opération d ajout de 1,5 ml de PBSx1 dans le microtube et les opérations de prélèvement et de transfert dans le tube noté «sérum non immunisé» Ajouter 2,5 ml de tampon PBSx1 dans le tube noté «sérum non immunisé». On obtient 10 ml de témoin négatif. Si le TP a lieu dans moins de 24 heures, conserver à 4 C. Si le TP a lieu quelques jours plus tard, conserver à -20 C sans dépasser 1 mois. NOTE : Les quantités d anticorps et de sérum sont faibles, pour vous assurer de récupérer la totalité du volume contenu dans les tubes fournis, nous vous conseillons de procéder comme il est préconisé dans la notice en rinçant plusieurs fois le tube au lieu de directement pipeter dans le tube. 7) Préparation de la salle : Disposer une barette de 8 puits par binôme Préparer des compte gouttes (calibrés à 40 µl) ou des micropipettes pour prélever les solutions d anticorps de concentration C1, C2, C3, C4, C6, C8, la solution de PBSx1, la solution de sérum non immunisé, la solution d anticorps de détection et la solution de TMB révélatrice (conservée dans le papier aluminium). ATTENTION : veillez à ce que les compte gouttes de prélèvement ne se mélangent pas. NB : On peut éventuellement répartir les solutions d anticorps de concentration C1, C2, C3, C4, C6, C8 dans des tubes pour chaque binôme. A ce moment là, le binôme peut utiliser le même compte goutte pour faire tous les prélèvements de solution d anticorps en commençant par prélever et déposer la solution la moins concentrée, à savoir C8 puis des solutions de plus en plus concentrées jusqu à C1. Préparer des pipettes et des poires pour les lavages au PBS tween Kit Test ELISA Page 6 sur 20

7 PRINCIPE ET INTERET PEDAGOGIQUE: Définition et vocabulaire : Le test E.L.I.S.A. ( Enzym Linked ImmunoSorbent Assay) est un test immunologique classiquement utilisé pour la détection et le dosage protéique. Note : Le dosage de protéines par ELISA concerne généralement les antigènes. Pour les anticorps, étant donné l'hétérogénéité de la réponse anticorps, on parle plutôt de titrage (titre: inverse de la dernière dilution positive) => tests semiquantitatifs. Contexte d utilisation du test ELISA : Le test ELISA est utilisé lors du test de dépistage du virus du SIDA : Ce test de dépistage s effectue en deux étapes dont la première est un test E.L.I.S.A. permettant de détecter les anticorps produits par l organisme et dirigés contre le virus. Les tests ELISA HIV permettent de déterminer la présence ou l'absence de l'ag P24 et/ou des anticorps anti HIV1/HIV2, par comparaison à une valeur seuil (résultats qualitatifs). La deuxième étape est un test de confirmation par immuno-transfert (Western blot). Intérêt pédagogique : L intérêt général de la manipulation est de montrer (en une séance de TP) que l on peut non seulement détecter mais aussi doser une protéine (ici un anticorps) dans une solution ou un sérum (un anticorps anti-hiv dans le cas du test du SIDA) grâce à la technique ELISA. But du test ELISA que nous proposons: Le test consiste à doser un anticorps de lapin anti-bsa à l aide d un support tapissé de BSA (Bovine Serum Albumin) et d un anticorps antiimmunoglobuline de lapin couplé à la peroxydase. Les anticorps sont généralement coûteux, les barettes ou plaques de microtitration permettent de travailler avec de petits volumes. Kit Test ELISA Page 7 sur 20

8 Description des étapes du kit : La première étape (réalisée par nos soins) est nommée Coating, durant cette étape la BSA va se fixer au fond des cupules (par effet électrostatique). Nous utilisons une solution très concentrée de BSA qui va tapisser le fond des cupules et occuper tous les sites de fixation protéique. Les cupules sont ensuite lavées à l aide d un tampon et sont alors prêtes à l emploi. BSA Rebord de la cupule Pour mieux comprendre le Coating : 200µL d une solution de BSA à 20g/L ont été distribués dans chacune des cupules. Les barrettes ont ensuite été incubées à 4 C durant 24 heures puis lavées pour enlever l excès de BSA. Cette étape permet la fixation des protéines au fond des cupules. L anticorps à doser (anti-bsa) pourra ensuite se fixer à la BSA. La fixation de la BSA au fond des cupules est un phénomène électrostatique propre à n importe quel type de protéine (donc également aux anticorps). Il est primordial pour réaliser un bon dosage que la cupule soit tapissée de BSA afin d éviter que des anticorps se fixent au fond de la cupule et non à la protéine. C est la raison pour laquelle nous utilisons une solution très concentrée de BSA. La deuxième étape correspond à la fixation de l anticorps à doser. On incube dans les cupules 80µL de la solution à doser durant 15 minutes. Puis les cupules sont lavées avec un tampon pour enlever les quelques anticorps non fixés. Anticorps à doser = Anti-BSA Lors de la troisième étape, l anticorps de détection (ou conjugué) se fixe à l anticorps anti-bsa. Il est couplé à une enzyme : la peroxydase. Une solution d anticorps de détection est incubée dans les cupules durant 15 minutes. Puis les cupules sont lavées pour enlever les quelques anticorps non fixés. Anticorps de détection couplé à la peroxydase = Conjugué POD = Peroxydase Kit Test ELISA Page 8 sur 20

9 La dernière étape est la détection des anticorps fixés. On incube dans les cupules une solution révélatrice contenant un substrat de la peroxydase : le TMB (tétra-méthyl-benzidine) qui se colore en bleu en présence de l enzyme. L intensité de la coloration est directement proportionnelle à la quantité de peroxydase présente dans la cupule, donc directement proportionnelle à la concentration d anticorps à doser. TMB (incolore) TMB oxydé (bleu) Dans la composition de barette proposée, nous utiliserons une gamme de concentration de l anticorps à doser pour montrer que plus sa concentration en solution est importante, plus la coloration est visible. Nous lirons les intensités contre deux témoins. Nous vous proposons de réaliser d autres témoins (facultatifs) pour vérifier toutes les étapes du test et avoir une réelle démarche de laboratoire. Kit Test ELISA Page 9 sur 20

10 FICHE DE MANIPULATION PAR LES BINOMES : Les barettes fournies ont déjà subi l étape de «coating», c'est-à-dire qu elle sont prêtes à l emploi : la BSA est fixée au fond des puits NB : Les barrettes de huit puits ne sont pas totalement symétriques, un coté possède une encoche ce qui permet de repérer le puit N 1 et le N 8. Le puit 1 sera le témoin positif, les puits 2 à 7 seront les différentes concentrations de la gamme étalon et le puit 8 sera le témoin négatif. 1) Incubation de l anticorps ou du sérum non-immunisé dans les cupules et lavage A. Remplissage des cupules Dans le puit 1, mettre 80 µl (ou 2 gouttes de 40µL avec un compte-gouttes calibré) de la solution de PBSx1 Dans le puit 2, mettre 80 µl (ou 2 gouttes de 40µL avec un compte-gouttes calibré) de la solution d anticorps anti-bsa C1 Dans le puit 3, mettre 80 µl (ou 2 gouttes de 40µL avec un compte-gouttes calibré) de la solution d anticorps anti-bsa C2 Dans le puit 4, mettre 80 µl (ou 2 gouttes de 40µL avec un compte-gouttes calibré) de la solution d anticorps anti-bsa C3 Dans le puit 5, mettre 80 µl (ou 2 gouttes de 40µL avec un compte-gouttes calibré) de la solution d anticorps anti-bsa C4 Dans le puit 6, mettre 80 µl (ou 2 gouttes de 40µL avec un compte-gouttes calibré) de la solution d anticorps anti-bsa C6 Dans le puit 7, mettre 80 µl (ou 2 gouttes de 40µL avec un compte-gouttes calibré) de la solution d anticorps anti-bsa C8 Dans le puit 8, mettre 80 µl (ou 2 gouttes de 40µL avec un compte-gouttes calibré) de la solution de sérum non immunisé B. Incubation Incuber 15 minutes à température ambiante Kit Test ELISA Page 10 sur 20

11 C. Lavage Vider les cupules par retournement (voir schéma suivant en page 11) en prenant garde à ce que les contenus des cupules des puits 1 à 7 ne contaminent pas le contenu de la cupule du témoin négatif du puit 8. Sens du retournement T+ C1 C2 C3 C4 C6 C8 T- Laver deux fois au PBS tween en remplissant à la pipette les cupules sans les faire déborder. Vider les cupules par retournement en prenant à nouveau garde à ne pas contaminer le puit 8 du témoin négatif (respecter le sens de retournement) 2) Incubation de l anticorps conjugué et lavage Déposer 80µL (ou 2 gouttes de 40µL) de la solution d anticorps de détection dans toutes les cupules Incuber 15 minutes à température ambiante Vider les cupules en prenant garde à ne pas contaminer le puit 8 (voir le schéma de retournement dans le point 1 de la manipulation ci-dessus en page 11) Laver deux fois au PBS tween en remplissant à la pipette les cupules sans les faire déborder. Vider les cupules par retournement en prenant à nouveau garde à ne pas contaminer le puit 8 du témoin négatif (respecter le sens de retournement) 3) Révélation A. Enlever l aluminium protégeant le tube de TMB de la lumière pour vérifier que le TMB n est pas bleu B. Dépôt de la solution de révélation : Pour les puits 2 à 8 : Déposer 80 µl (ou 2 gouttes de 40µL au compte-gouttes calibré) de la solution de TMB substrat de la peroxydase. Pour le puit 1 : Déposer 40 µl (ou 1 goutte de 40µL au compte-gouttes calibré) de la solution d anticorps de détection et 40 µl (ou 1 goutte de 40µL au compte-gouttes calibré) de la solution de TMB substrat de la peroxydase Kit Test ELISA Page 11 sur 20

12 C. Incubation Incuber 5 minutes à température ambiante 4) Interpréter les résultats (assez rapidement) Dès le dépôt du TMB, la réaction de révélation commence : la coloration bleue apparaît. Vous disposez d environ 5 minutes pour observer les colorations de tous les puits. ATTENTION : Au-delà de 5 minutes, les puits 1 à 7 présenteront tous la même intensité de bleu. En effet, la réaction enzymatique de révélation continue car le TMB est en excès. Une fois une molécule de TMB oxydée, le site actif de l enzyme est libéré. Une nouvelle molécule de TMB se fixe à l enzyme et est oxydée à son tour. Conseil pour quantifier l intensité des différentes colorations : Vous pouvez prendre une photographie des barettes avec un appareil numérique en veillant à ce que les colorations des puits soient bien visibles. A l aide du logiciel MESURIM disponible gratuitement sur le site de l Académie d Amiens, vous pouvez mesurer les intensités lumineuses des puits. 5) Possibilité de stopper la réaction de coloration ( dans le cas où les résultats ne sont pas exploités tout de suite) Ajouter dans les puits 80 µl de 1N HCL ou 0,0625N d acide sulfurique (l acide bloque l enzyme) : le TMB vire au jaune. Conseils pour quantifier l intensité des différentes colorations : Vous pouvez lire la mesure d absorbance en spectrophotométrie à 450 nm. Il suffit de transvaser à la pipette, dans une cuve adaptée, le contenu de puits identiques issus de plusieurs barettes. Vous pouvez prendre une photographie des barettes avec un appareil numérique en veillant à ce que les colorations des puits soient bien visibles. A l aide du logiciel MESURIM disponible gratuitement sur le site de l Académie d Amiens, vous pouvez mesurer les intensités lumineuses des puits. Kit Test ELISA Page 12 sur 20

13 ATTENTION : Les volumes sont très petits et s évaporent rapidement (une barette laissée la nuit sur la paillasse est vide le lendemain). Scotcher hermétiquement les barrettes et conserver au réfrigérateur. INTERPRETATIONS ET CONCLUSIONS 1) Dans le cas d une faible concentration en anticorps anti-bsa TMB (incolore) TMB oxydé (bleu) FAIBLE COLORATION 2) Dans le cas d une forte concentration en anticorps anti-bsa COLORATION INTENSE Kit Test ELISA Page 13 sur 20

14 L intensité de la coloration est proportionnelle à la concentration d anticorps à doser, plus la concentration est élevée, plus la coloration est visible. En effet, la BSA est en excès puisqu elle tapisse le fond de la cupule donc si on augmente la concentration d anticorps à doser, il y aura augmentation du nombre d anticorps fixés. Lorsque l on ajoute le conjugué, celui ci va reconnaître les anticorps anti-bsa fixés précédemment. Ainsi la quantité de peroxydase présente dans la cupule après lavage sera directement proportionnelle à la quantité d anticorps à doser. Lorsque l on ajoute le substrat de la peroxydase (le TMB) en excès, la concentration enzymatique dans la cupule déterminera la quantité de substrat transformé et, par conséquent, l intensité de la coloration. Limites du test : Ceci n est pas valable si la concentration de l anticorps de détection est inférieure à la concentration de l anticorps à doser. La concentration en substrat ne doit pas être inférieure à la concentration enzymatique. Si la BSA n est pas en excès, des anticorps peuvent se fixer aux rebords de la cupule et fausser les résultats. Pour aller plus loin : Pour compléter la manipulation, vous pouvez réaliser d autres témoins : Pour montrer que le TMB est responsable de la coloration bleue : Dans un puit, faire l étape d incubation d ancticorps avec la concentration C1 ou C2, l étape d incubation de l anticorps conjugué, l étape de lavage mais ne pas réaliser l étape de révélation au TMB. Pour montrer que l anticorps est nécessaire à la coloration bleue : Dans un puit, ne pas faire l étape d incubation d anticorps mais réaliser les étapes d incubation de l anticorps conjugué, l étape de lavage et l étape de révélation au TMB. (il est normal que la coloration bleue apparaisse au bout d un certain temps : c est le TMB qui est dégradé à la lumière) Pour montrer que l anticorps de détection est nécessaire à la coloration bleue : Dans un puit, effectuer l étape d incubation d anticorps avec la concentration C1 ou C2, sans faire l étape d incubation de l anticorps conjugué, mais effectuer l étape de lavage et l étape de révélation au TMB. (il est normal que la coloration bleue apparaisse au bout d un certain temps : c est le TMB qui est dégradé à la lumière) Pour montrer que le TMB vire au bleu au bout d un certain temps : Dans un puit, ne faire ni l étape d incubation d anticorps, ni l étape d incubation de l anticorps conjugué ni l étape de lavage mais seulement l étape de révélation au TMB. Pour montrer que le PBS n est pas responsable de la coloration bleue : Dans un puit, faire l étape d incubation d anticorps avec une solution de PBS sans Kit Test ELISA Page 14 sur 20

15 anticorps, effectuer l étape d incubation de l anticorps conjugué, l étape de lavage et l étape de révélation au TMB. (il est normal que la coloration bleue apparaisse au bout d un certain temps : c est le TMB qui est dégradé à la lumière) Pour montrer que le lavage est nécessaire pour enlever les anticorps conjugués qui ne sont pas fixés et donc non spécifiques du dosage : Dans un puit, ne pas faire l étape d incubation de l anticorps, effectuer l étape d incubation de l anticorps conjugué, ne pas procéder au lavage mais révéler au TMB normalement. Pour voir plus de caractéristiques du test ELISA, vous pouvez déterminer le point d extinction, c est à dire la concentration minimale d anti-bsa détectée par la technique. Pour ce faire, il suffit de diluer la solution C8 (page 3) en cascade, on peut faire une barrette avec des concentrations C9, C10, C11 Le point d extinction doit apparaître en C10 ou C11 si on a réalisé des dilutions au 1/2. On montre ainsi que le test ELISA est une technique très sensible puisqu elle permet de détecter des concentrations infimes d anticorps. C10 = 0,033µg d AC/ml C11 = 0,0166µg d AC/ml Remerciements à Brigitte Maurel (lycée de Decazeville) qui a élaboré et mis au point ce protocole. Kit Test ELISA Page 15 sur 20

16 FICHE SECURITE Le TMB est un produit dangereux qui nécessite le port de gants, de lunettes et d une blouse. Le PBS tween et le PBS doivent de préférence être manipulés avec gants, lunettes et blouse. Les anticorps ne sont pas dangereux en eux-mêmes mais étant donné qu ils sont dilués dans le PBS, il faut respecter les mêmes consignes de sécurité que vis-à-vis du PBS. Produit Pictogramme et risques normalisés TMB T. Toxique R 61 Risque pendant la grossesse d'effets néfastes pour l'enfant. R 20/21 Nocif par inhalation et par contact avec la peau. R 36 Irritant pour les yeux. Ne s enflamme pas spontanément et n est pas explosif De contact avec la peau En règle générale, le produit n'irrite pas la peau. Actions à mener en cas d inhalation de d ingestion projection dans les yeux Donner de Lavage Si les troubles l air frais. avec de persistent, Assistance l'eau en consulter un respiratoire écartant médecin. si les nécessaire. paupières Tenir le plusieurs malade au minutes. chaud. Si les Si les troubles troubles persistent, persistent, consulter consulter un un médecin. médecin. Remarques générales: Les symptômes d'empoisonnement peuvent apparaître après de nombreuses heures seulement ; une surveillance médicale est donc nécessaire au moins 48 heures après un accident. En cas d'inconscience, coucher et transporter la personne en position latérale stable Kit Test ELISA Page 16 sur 20

17 Produit Pictogramme et risques normalisés PBS Ne s enflamme pas spontanémen t et n est pas explosif de contact avec la peau Laver immédiateme nt la peau avec une grande quantité d eau savonneuse pendant au moins 15 minutes. Laver les vêtements contaminés avant réutilisation. Consulter un médecin si des symptômes se développent (rougeurs, démangeai -sons) Actions à mener en cas d inhalation de projection dans les yeux Emmener la Rincer personne à immédiatem l air frais. Si ent les yeux elle ne respire à grande pas, la mettre eau pendant sous au moins 15 respirateur minutes en artificiel. Si la séparant personne les respire avec paupières. difficulté, lui administrer de l oxygène et appeler un médecin. d ingestion Si la personne est consciente, lui rincer imméditement la bouche avec de l eau puis lui faire boire une grande quantité d eau. Appeler un médecin. Kit Test ELISA Page 17 sur 20

18 Produit Pictogramme et risques normalisés PBS tween Ne s enflamme pas spontanémen t et n est pas explosif de contact avec la peau Laver immédiate -ment la peau avec une grande quantité d eau savonneuse pendant au moins 15 minutes. Laver les vêtements contaminés avant de les utiliser. Actions à mener en cas d inhalation De projection dans les yeux Emmener la Rincer personne à immédiatem l air frais. Si ent les yeux elle ne respire à grande pas, la mettre eau pendant sous au moins 15 respirateur minutes en artificiel. Si la séparant personne les respire avec paupières. difficulté, lui administrer de l oxygène et appeler un médecin. d ingestion Si la personne est consciente, lui rincer immédite -ment la bouche avec de l eau puis lui faire boire une grande quantité d eau. Appeler un médecin. Kit Test ELISA Page 18 sur 20

19 FICHE CONSERVATION Les flacons de PBSx10 se conservent à +4 C La solution diluée se garde à +4 C pendant 1 mois au plus. 2 bouteilles de PBStween se conservent à +4 C Le sachet A contenant 3 microtubes est conservé à -20 C : 1 microtube à bouchon rouge contenant 110µL de sérum de lapin immunisé contre la BSA -20 C 1 microtube à bouchon bleu contenant 50 µl d anticorps anti- Immunoglobuline de lapin couplé à la peroxydase -20 C 1 microtube à bouchon naturel contenant 110µL de sérum de lapin non immunisé -20 C Le contenu du sachet A peut être conservé 6 mois dans les conditions décrites ci-dessus. Les solutions diluées à partir des tubes du sachet A se conservent 24 heures à 4 C ou bien 4 semaines à -20 C Le sachet M contenant plusieurs tubes est conservé à +4 C : 1 tube en plastique vide de 50 ml à fond conique : il doit rester propre et sans trace de détergeant pour la préparation du TMB ( ATTENTION : pour une longue conservation, garder les plaques à l abri de la lumière) 1 tube à bouchon rouge contenant 10 ml d eau stérile +4 C 1 tube noir contenant 8 ml de TMB +4 C ( ATTENTION : le TMB doit être gardé à l abri de la lumière) 1 tube à fond conique de 12 ml de PBSx10 +4 C 1 sachet noir de 20 barettes de micro-titration avec leurs supports +4 C Le contenu du sachet M peut être conservé 6 mois dans les conditions décrites ci-dessus (à part le tube vide de 50 ml qui se conserve aussi longtemps que nécessaire) La solution diluée de PBS (PBSx1) se conserve 4 semaines à 4 C mais la solution de TMB diluée (conservée à l abri de la lumière) ne se garde que 24 heures à 4 C. Kit Test ELISA Page 19 sur 20

20 FICHE TRI ET RECUPERATION Le TMB, le PBS, le PBS tween doivent être récupérés dans un récipient adapté ou à défaut dilués dans une grande quantité d eau. Les barettes de plastique peuvent être jetées dans les bacs de récupération du plastique. Elles sont recyclables. Kit Test ELISA Page 20 sur 20

Kit Elisa Dosage immunologique anti-bsa Réf. ELISA

Kit Elisa Dosage immunologique anti-bsa Réf. ELISA Page 1/11 Kit Elisa Dosage immunologique antibsa Réf. ELISA A RECEPTION DU COLIS : þ Vérifier la composition du colis indiquée cidessous þ Stocker les articles du colis dans les bonnes conditions : Ouvrir

Plus en détail

Corps humain et santé

Corps humain et santé Français p 1 Kit pour test E.L.I.S.A. dosage immunologique Version : 3111 1 Composition du kit et stockage Stocker au congélateur (- 20 C) - Sachet A : Microtube bleu : Sérum de lapin anti-bsa 85 µl [Ac1]

Plus en détail

Il existe plusieurs types de tests ELISA mais le plus couramment utilisé et celui que nous proposons

Il existe plusieurs types de tests ELISA mais le plus couramment utilisé et celui que nous proposons 14: ELISA La technique de dosage d immunoabsorption par enzyme liée (en anglais Enzyme Linked Immuno Assay) ou ELISA est principalement utilisée en immunologie afin de détecter et/ou doser la présence

Plus en détail

KIT OUCHTERLONY méthode de double diffusion REF : IMVS ou IMVD A RECEPTION DU COLIS :

KIT OUCHTERLONY méthode de double diffusion REF : IMVS ou IMVD A RECEPTION DU COLIS : KIT OUCHTERLONY méthode de double diffusion REF : IMVS ou IMVD : 0033 (0)169922672 : 0033 (0)169922674 : www.sordalab.com @ : sordalab@wanadoo.fr A RECEPTION DU COLIS : Vérifier la composition du colis

Plus en détail

A RECEPTION DU COLIS :

A RECEPTION DU COLIS : KIT DIGESTION IN VITRO : DIALYSE REF : C/DIAL : 0033 (0)169922672 : 0033 (0)169922674 : www.sordalab.com @ : sordalab@wanadoo.fr A RECEPTION DU COLIS : Vérifier la composition du colis indiquée ci-dessous

Plus en détail

DOSAGE D ANTICORPS PAR L UTILISATION DU TEST ELISA

DOSAGE D ANTICORPS PAR L UTILISATION DU TEST ELISA Fiche sujet - candidat Après une vaccination, l organisme réagit par la production d anticorps dirigés contre l antigène injecté. Une mémoire immunitaire se met en place et lors d un second contact avec

Plus en détail

KIT BLUESTAR TRAINING A RECEPTION DU COLIS : CONSERVATION COMPOSITION MATERIEL NECESSAIRE

KIT BLUESTAR TRAINING A RECEPTION DU COLIS : CONSERVATION COMPOSITION MATERIEL NECESSAIRE ZA DES POUPETTES 91580 VILLENEUVE SUR AUVERS KIT BLUESTAR TRAINING : 0033 (0)169922672 : 0033 (0)169922674 : www.sordalab.com @ : sordalab@wanadoo.fr Ref : BLUETRAIN A RECEPTION DU COLIS : Vérifier la

Plus en détail

KIT PRINCIPE DE LA PCR A RECEPTION DU COLIS : COMPOSITION (pour 5 gels de 8 puits soit 40 dépôts d ADN) MATERIEL NECESSAIRE

KIT PRINCIPE DE LA PCR A RECEPTION DU COLIS : COMPOSITION (pour 5 gels de 8 puits soit 40 dépôts d ADN) MATERIEL NECESSAIRE : 0033 (0)169922672 : 0033 (0)169922674 : @ :sordalab@wanadoo.fr KIT PRINCIPE DE LA PCR Ref: PCR A RECEPTION DU COLIS : Vérifier la composition du colis indiquée ci-dessous en page 1 Stocker les articles

Plus en détail

Dosage d anticorps par le test Elisa

Dosage d anticorps par le test Elisa TP23 Dosage d anticorps par le test Elisa Après une vaccination, l organisme réagit par la production d anticorps dirigés contre l antigène injecté. Une mémoire immunitaire se met en place, par la présence

Plus en détail

Comment se manifeste cette maladie? Comment repérer la séropositivité au SIDA? -> Discussion préparatoire.

Comment se manifeste cette maladie? Comment repérer la séropositivité au SIDA? -> Discussion préparatoire. I.7 Immunologie 1/4. Le SIDA Le système immunitaire est l ensemble des cellules et tissus d un individu pouvant s opposer à la pénétration et à l infection par des micro-organismes. Les moyens «de défense»

Plus en détail

Sciences physiques et chimiques

Sciences physiques et chimiques bac pro Philippe Adloff Hervé Gabillot Eyrolles Éducation / Gep Éditions, 2014 ISBN : 978-2-84425-946-2 Sciences physiques et chimiques Seconde professionnelle 100 % Exercices expérimentaux science et

Plus en détail

TP ENZYMES DE RESTRICTION, OUTILS DE LA BIOLOGIE MOLECULAIRE

TP ENZYMES DE RESTRICTION, OUTILS DE LA BIOLOGIE MOLECULAIRE THÈME : Des débuts de la génétique aux enjeux actuels des biotechnologies Niveau : Spécialité terminale S TP ENZYMES DE RESTRICTION, OUTILS DE LA BIOLOGIE MOLECULAIRE EXTRAIT DU BO: Notions et contenus

Plus en détail

1 Contrôle au laboratoire de la pasteurisation du lait

1 Contrôle au laboratoire de la pasteurisation du lait Exploitation d informations scientifiques et présentation d un travail de synthèse Durée : 1,5 h (préparation 1 h et soutenance orale 30 minutes) 1 Etude de la fabrication du Saint-Nectaire Les différentes

Plus en détail

Estimation de la biomasse microbienne par électrophorèse en gel d agarose

Estimation de la biomasse microbienne par électrophorèse en gel d agarose Version : 1 Page : 1 / 8 microbienne par Version Date Modificateur Descriptif 1 22/10/2012 M. Lelievre MAJ mise en page (en tete, filigrane) et corrections générales Version : 1 Page : 2 / 8 1- Mots clés

Plus en détail

KIT COMPOSITION DU LAIT A RECEPTION DU COLIS : COMPOSITION (pour 10 binômes)

KIT COMPOSITION DU LAIT A RECEPTION DU COLIS : COMPOSITION (pour 10 binômes) : 0033 (0)169922672 : 0033 (0)169922674 : @ :sordalab@wanadoo.fr KIT COMPOSITION DU LAIT Ref: CPLAI A RECEPTION DU COLIS : Vérifier la composition du colis indiquée ci-dessous en page 1 Stocker l ensemble

Plus en détail

KIT REALISATION DE LA PCR A RECEPTION DU COLIS : COMPOSITION (pour 5 gels de 8 puits et 10 réactions de PCR)

KIT REALISATION DE LA PCR A RECEPTION DU COLIS : COMPOSITION (pour 5 gels de 8 puits et 10 réactions de PCR) : 0033 (0)169922672 : 0033 (0)169922674 : @ :sordalab@wanadoo.fr KIT REALISATION DE LA PCR Ref: PCRREA A RECEPTION DU COLIS : Vérifier la composition du colis indiquée ci-dessous en page 1 Stocker les

Plus en détail

(aq) sont colorées et donnent à la solution cette teinte violette, assimilable au magenta.»

(aq) sont colorées et donnent à la solution cette teinte violette, assimilable au magenta.» Chapitre 5 / TP 1 : Contrôle qualité de l'eau de Dakin par dosage par étalonnage à l'aide d'un spectrophotomètre Objectif : Vous devez vérifier la concentration massique d'un désinfectant, l'eau de Dakin.

Plus en détail

KIT IDENTIFICATION DES MOLECULES DU VIVANT REF : KIMV A RECEPTION DU COLIS : Vérifier la composition du colis indiquée ci-dessous

KIT IDENTIFICATION DES MOLECULES DU VIVANT REF : KIMV A RECEPTION DU COLIS : Vérifier la composition du colis indiquée ci-dessous : 0033 (0)169922672 : 0033 (0)169922674 : www.sordalab.com @ : sordalab@wanadoo.fr KIT IDENTIFICATION DES MOLECULES DU VIVANT REF : KIMV A RECEPTION DU COLIS : Vérifier la composition du colis indiquée

Plus en détail

TP : Suivi d'une réaction par spectrophotométrie

TP : Suivi d'une réaction par spectrophotométrie Nom : Prénom: n groupe: TP : Suivi d'une réaction par spectrophotométrie Consignes de sécurité de base: Porter une blouse en coton, pas de nu-pieds Porter des lunettes, des gants (en fonction des espèces

Plus en détail

05_I7_B_Pro_03.doc I7- Immunologie Fiche sujet - élève RECHERCHE D ANTICORPS ANTI-BSA (ALBUMINE DE SERUM DE BŒUF) PAR L'UTILISATION DU TEST ELISA

05_I7_B_Pro_03.doc I7- Immunologie Fiche sujet - élève RECHERCHE D ANTICORPS ANTI-BSA (ALBUMINE DE SERUM DE BŒUF) PAR L'UTILISATION DU TEST ELISA Fiche sujet - élève L organisme réagit à l introduction d un élément étranger par la production d anticorps. On cherche à déterminer si un lapin a été contaminé par un élément étranger. On utilise pour

Plus en détail

maison-et-compagnie.com

maison-et-compagnie.com FICHE DE DONNÉES DE SÉCURITÉ Nom de la préparation : CREME NETTOYANTE PLAQUES VITROCERAMIQUES ET INDUCTIONS 1 IDENTIFICATION DE LA PRÉPARATION ET DE LA SOCIÉTÉ Nom du produit : CREME NETTOYANTE PLAQUES

Plus en détail

KIT ANTIBIOGRAMME A RECEPTION DU COLIS : COMPOSITION DU COLIS : Kit Antibiogramme - Lycée Page 1 sur 7 www.sordalab.com. Ref : ANTI.

KIT ANTIBIOGRAMME A RECEPTION DU COLIS : COMPOSITION DU COLIS : Kit Antibiogramme - Lycée Page 1 sur 7 www.sordalab.com. Ref : ANTI. : 0033 (0)169922672 : 0033 (0)169922674 : @ : sordalab@wanadoo.fr KIT ANTIBIOGRAMME Ref : ANTI. A RECEPTION DU COLIS : Vérifier la composition du colis indiquée ci-dessous en pages 1 et 2 Stocker les articles

Plus en détail

BACCALAURÉAT PROFESSIONNEL ÉPREUVE DE TRAVAUX PRATIQUES DE SCIENCES PHYSIQUES SUJET CI. 17

BACCALAURÉAT PROFESSIONNEL ÉPREUVE DE TRAVAUX PRATIQUES DE SCIENCES PHYSIQUES SUJET CI. 17 CI.17 Page 1/5 BACCALAURÉAT PROFESSIONNEL ÉPREUVE DE TRAVAUX PRATIQUES DE SCIENCES PHYSIQUES SUJET CI. 17 Ce document comprend : - une fiche descriptive du sujet destinée à l examinateur : Page 2/5 - une

Plus en détail

Les étiquettes de danger et leur signification (transport)

Les étiquettes de danger et leur signification (transport) Les étiquettes de danger et leur signification (transport) 1 Explosif 2.2 Gaz non inflammable et non toxique 3 + 2.1 Liquide ou gaz inflammable 4.1 Solide inflammable 4.2 Spontanément inflammable 4.3 Dégage

Plus en détail

Mise en situation et recherche à mener

Mise en situation et recherche à mener TP 20 : Principes et intérêts de la vaccination 1 Activité 1 : évaluation de l immunisation Mise en situation et recherche à mener Après une vaccination, l organisme réagit par la production d anticorps

Plus en détail

INDUSTRIES TECHNIQUES

INDUSTRIES TECHNIQUES Version 2 «Chimiste» Le métier s entend exercé par des femmes et des hommes. L emploi du pronom personnel «il» est donc générique et concerne autant les femmes que les hommes. APPELLATION(S) DU METIER

Plus en détail

Didactique Kit de chimie

Didactique Kit de chimie Kit de chimie Français p 1 Version : 1110 1 Description 1.1 Généralités Le kit effet d un azurant sur le coton permet la mise en œuvre d une réaction photochimique en utilisant un azurant optique. Cette

Plus en détail

PROTEINE URINE (URP) DIMENSIONS KIT REF 39064 F360 Analyseur F560 Analyseur R1 3x100 ml Σ R1 3x100 ml Σ CAL 1x5 ml.

PROTEINE URINE (URP) DIMENSIONS KIT REF 39064 F360 Analyseur F560 Analyseur R1 3x100 ml Σ R1 3x100 ml Σ CAL 1x5 ml. PROTEINE URINE (URP) USAGE PREVU Pour la détermination quantitative in vitro des Protéines Totales dans l urine et le liquide cérébrospinal (CSF). Ce produit est destiné à l utilisation sur les instruments.

Plus en détail

Spectrophotométrie appliquée aux biomolécules

Spectrophotométrie appliquée aux biomolécules UNIVERSITE FRANCOIS RABELAIS FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES TOURS Licence L1 Science et Technologies Mention Sciences du Vivant TRAVAUX PRATIQUES: BIOCHIMIE STRUCTURALE Spectrophotométrie appliquée

Plus en détail

Travaux pratiques d immunologie

Travaux pratiques d immunologie Travaux pratiques d immunologie I. Introduction Ces manipulations ont pour but d étudier certaines techniques immunologiques, de comprendre les mécanismes moléculaires mis en jeu dans chacune, d en tirer

Plus en détail

Toxicité de quelques réactifs utilisés en chimie Edith ANTONOT lycée Louis Vincent (METZ) - edith.antonot@ac-nancy-metz.fr

Toxicité de quelques réactifs utilisés en chimie Edith ANTONOT lycée Louis Vincent (METZ) - edith.antonot@ac-nancy-metz.fr Toxicité de quelques réactifs utilisés en chimie Edith ANTONOT lycée Louis Vincent (METZ) - edith.antonot@ac-nancy-metz.fr Sommaire Toxicité de quelques réactifs utilisés en chimie... 1 Résumé et remerciements...

Plus en détail

A RECEPTION DU COLIS : COMPOSITION DU COLIS :

A RECEPTION DU COLIS : COMPOSITION DU COLIS : Page 1/6 Kit Ouchterlony de substitution Méthode de double diffusion Réf. IMSUB A RECEPTION DU COLIS : þ Vérifier la composition du colis indiquée ci-dessous þ Stocker les articles du colis dans les bonnes

Plus en détail

TEST ELISA (ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSEY)

TEST ELISA (ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSEY) TEST ELISA (ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSEY) Lise Vézina, technicienne de laboratoire Michel Lacroix, agronome-phytopathologiste Direction de l innovation scientifique et technologique Au Laboratoire

Plus en détail

1 IDENTIFICATION DE LA SUBSTANCE/PRÉPARATION ET DE LA SOCIÉTÉ/ENTREPRISE

1 IDENTIFICATION DE LA SUBSTANCE/PRÉPARATION ET DE LA SOCIÉTÉ/ENTREPRISE FICHE DE DONNEES DE SECURITE ULTIMEG 2002T DATE DE RÉVISION : 03/02/2005 1 IDENTIFICATION DE LA SUBSTANCE/PRÉPARATION ET DE LA SOCIÉTÉ/ENTREPRISE NOM DE PRODUIT ULTIMEG 2002T NO DE PRODUIT : U2002T DISTRIBUTEUR

Plus en détail

FICHE DE DONNEES DE SECURITE KOOLNET GRAS PRET A L EMPLOI

FICHE DE DONNEES DE SECURITE KOOLNET GRAS PRET A L EMPLOI FICHE DE DONNEES DE SECURITE KOOLNET GRAS PRET A L EMPLOI Désignation commerciale : KOOLNET GRAS PRET A L EMPLOI Date de création : 29/02/2000 Date de révision : 01/04/2005 FICHE DE DONNEES DE SECURITE

Plus en détail

I. Principe des dosages :

I. Principe des dosages : Dans les cours d'eau, notamment canalisés, et dans les régions densément habitées ou d'agriculture intensive, les nitrites sont souvent un paramètre important de déclassement des cours d'eau. Chez l'homme

Plus en détail

pka D UN INDICATEUR COLORE

pka D UN INDICATEUR COLORE TP SPETROPHOTOMETRIE Lycée F.BUISSON PTSI pka D UN INDIATEUR OLORE ) Principes de la spectrophotométrie La spectrophotométrie est une technique d analyse qualitative et quantitative, de substances absorbant

Plus en détail

D après vous, à qui pourraient appartenir ce(s) sang(s)? Comment pourrait-on le(s) identifier?

D après vous, à qui pourraient appartenir ce(s) sang(s)? Comment pourrait-on le(s) identifier? TP Etude du sang Sur la scène de crime, nous avons retrouvé différents échantillons de sang (sur la victime, à côté d elle, sur la lame de scie, dans des tubes à essai). On se propose de déterminer la

Plus en détail

TP 3 diffusion à travers une membrane

TP 3 diffusion à travers une membrane TP 3 diffusion à travers une membrane CONSIGNES DE SÉCURITÉ Ce TP nécessite la manipulation de liquides pouvant tacher les vêtements. Le port de la blouse est fortement conseillé. Les essuie tout en papier

Plus en détail

ANNEXE 3 EXEMPLES DE CONSEILS DE PRUDENCE ET PICTOGRAMMES

ANNEXE 3 EXEMPLES DE CONSEILS DE PRUDENCE ET PICTOGRAMMES ANNEXE 3 EXEMPLES DE CONSEILS DE PRUDENCE ET PICTOGRAMMES - 297 - Annexe 3 EXEMPLES DE CONSEILS DE PRUDENCE ET PICTOGRAMMES La présente annexe dresse la liste des conseils de prudence les plus fréquemment

Plus en détail

L'ASSIMILATION DU NITRATE PAR LES PLANTES

L'ASSIMILATION DU NITRATE PAR LES PLANTES Université de Neuchâtel Laboratoire de Physiologie végétale Travaux pratiques de Physiologie végétale L'ASSIMILATION DU NITRATE PAR LES PLANTES En général, les plantes couvrent leur besoin en azote par

Plus en détail

Objectif : Effectuer le traitement chimique d une solution dont la composition est représentative de déchets de travaux pratiques.

Objectif : Effectuer le traitement chimique d une solution dont la composition est représentative de déchets de travaux pratiques. OLYMPIADES DE LA CHIMIE 005 EPREUVE PRATIQUE DES ELIMINATOIRES REGIONALES POITOU-CHARENTES le février 005 Traitement de déchets minéraux "D'après la préparation aux olympiades de l'académie de Nancy-Metz

Plus en détail

Règlement de sécurité pour l utilisation des chapelles de chimie au CMI

Règlement de sécurité pour l utilisation des chapelles de chimie au CMI Règlement de sécurité pour l utilisation des chapelles de chimie au CMI Nocif Comburant Corrosif Toxique Inflammable CMI - 2008 Introduction Des produits chimiques de différents degrés de danger sont utilisés

Plus en détail

La sécurité au Laboratoire

La sécurité au Laboratoire La sécurité au Laboratoire Symboles de danger Dans notre environnement de travail de chimiste, nous aurons souvent sous les yeux, diverses informations de sécurité sous forme de symboles, d avertissement,

Plus en détail

1. Identification de la substance ou préparation et de la Société. 2. Composition/ informations sur les composants

1. Identification de la substance ou préparation et de la Société. 2. Composition/ informations sur les composants Date d impression : 23/08/02 Valable à partir du : 08.08.01 Page: 1/7 1. Identification de la substance ou préparation et de la Société Données relatives au produit : Nom commercial : KNAUF ZADUR Mortier

Plus en détail

Quelques expériences sur la corrosion du fer

Quelques expériences sur la corrosion du fer Quelques expériences sur la corrosion du fer TP réalisé en stage «le laboratoire se l approprier et y enseigner» par Mme Lindrec et Mrs Leroux et Tanavelle. L objectif est de tester et réaliser quelques

Plus en détail

(D après sujet de CAP Secteur 1 Groupement interacadémique II Session 2005)

(D après sujet de CAP Secteur 1 Groupement interacadémique II Session 2005) EXERCICES SUR LES RISQUES CHIMIQUES Exercice 1 1) Une solution acide est particulièrement dangereuse lors de sa manipulation. Parmi les pictogrammes,,, et suivants, lequel indique que les solutions sont

Plus en détail

FICHE DE DONNÈES DE SÉCURITÉ. Code produit : CIRE 213 Version : 1 date : 20/05/2007

FICHE DE DONNÈES DE SÉCURITÉ. Code produit : CIRE 213 Version : 1 date : 20/05/2007 Produit CIRE 213 page : 1/5 1. IDENTIFICATION DU PRODUIT ET DE LA SOCIÉTÉ Nom du Produit : CIRE 213 Nom : Bibliothèque nationale de France Adresse : Château de Sablé 72300 Sablé sur Sarthe Téléphone :

Plus en détail

Bleu comme un Schtroumpf Démarche d investigation

Bleu comme un Schtroumpf Démarche d investigation TP Bleu comme un Schtroumpf Démarche d investigation Règles de sécurité Blouse, lunettes de protection, pas de lentilles de contact, cheveux longs attachés. Toutes les solutions aqueuses seront jetées

Plus en détail

GUIDE DE BONNES PRATIQUES POUR LA COLLECTE DE PILES ET ACCUMULATEURS AU LUXEMBOURG

GUIDE DE BONNES PRATIQUES POUR LA COLLECTE DE PILES ET ACCUMULATEURS AU LUXEMBOURG GUIDE DE BONNES PRATIQUES POUR LA COLLECTE DE PILES ET ACCUMULATEURS AU LUXEMBOURG Version 1.0 1 Avant-propos Ce guide de bonnes pratiques a été préparé pour fournir des informations concernant la collecte

Plus en détail

Chap2 Tests de reconnaissance de quelques ions.

Chap2 Tests de reconnaissance de quelques ions. Chap2 Tests de reconnaissance de quelques ions. Items Connaissances Acquis Formule des ions sodium, cuivre(ii), fer(ii), fer(iii) et chlorure Domaines d acidité et de basicité en solution aqueuse. Lien

Plus en détail

Conserver tous les réactifs entre 2 et 8 C. Tous le s réactifs sont prêts à l emploi après avoir atteint la température ambiante du laboratoire.

Conserver tous les réactifs entre 2 et 8 C. Tous le s réactifs sont prêts à l emploi après avoir atteint la température ambiante du laboratoire. Méthode d Immunofluorescence en Générale NOTICE POUR PRODUITS DE DIAGNOSTICS IN VITRO (IVD) USAGE PREVU Les composants indiqués ci-dessous peuvent être utilisés pour la détection des anticorps dans le

Plus en détail

500 ml. BASF Agro S.A.S. 21, chemin de la Sauvegarde 69134 ECULLY cedex Tél. 04 72 32 45 45

500 ml. BASF Agro S.A.S. 21, chemin de la Sauvegarde 69134 ECULLY cedex Tél. 04 72 32 45 45 MYTHIC 10 SC Préparation biocide (TP18) pour lutter contre les fourmis et les punaises des lits Suspension concentrée (SC) contenant : 106 g/l de chlorfenapyr (N CAS : 122453-73-0) MYTHIC 10 SC - (chlorfénapyr

Plus en détail

TP1 Spécificité enzymatique

TP1 Spécificité enzymatique TP1 Spécificité enzymatique L'approvisionnement en glucose commence par la digestion de macromolécules glucidiques comme l'amidon. Cette digestion s'effectue grâce à enzymes digestives. Les enzymes sont

Plus en détail

Exemple de cahier de laboratoire : cas du sujet 2014

Exemple de cahier de laboratoire : cas du sujet 2014 Exemple de cahier de laboratoire : cas du sujet 2014 Commentaires pour l'évaluation Contenu du cahier de laboratoire Problématique : Le glucose est un nutriment particulièrement important pour le sportif.

Plus en détail

TP 8 Détermination de l activité spécifique d une enzyme.

TP 8 Détermination de l activité spécifique d une enzyme. TP 8 Détermination de l activité spécifique d une enzyme. Les objectifs de cette séance : - Apprendre à faire une réaction enzymatique. - Adapter les manipulations de chimie en TP de biologie. - Savoir

Plus en détail

TP 05 : Spectre visible d une espèce colorée Spectres IR

TP 05 : Spectre visible d une espèce colorée Spectres IR TP 05 : Spectre visible d une espèce colorée Spectres IR Ce TP s étale sur une séance de 2 heures (spectre visible), puis une séance d 1 heure (spectre infrarouge). Objectifs : - Identifier un colorant

Plus en détail

Le laboratoire et la gestion des déchets

Le laboratoire et la gestion des déchets Chimie et développement durable Partie 1 : Chimie minérale DOC 01 Le laboratoire et la gestion des déchets http://www.udppc.asso.fr/national/attachments/article/113/article-bup-residus-reaction.pdf Une

Plus en détail

I. Principe des dosages :

I. Principe des dosages : Dans les cours d'eau, notamment canalisés, et dans les régions densément habitées ou d'agriculture intensive, les nitrites sont souvent un paramètre important de déclassement des cours d'eau. Chez l'homme

Plus en détail

Sérodiagnostic de la polyarthrite rhumatoïde

Sérodiagnostic de la polyarthrite rhumatoïde 1 ETSL Sérodiagnostic de la polyarthrite rhumatoïde TP 1 GABIN-GAUTHIER 13/11/2009 I. LA MALADIE... 2 II. TECHNIQUES QUALITATIVES... 2 1. PRINCIPE... 2 2. MODE OPERATOIRE... 3 2.1. WRST ou Waaler Rose

Plus en détail

TP3 Test immunologique et spécificité anticorps - déterminant antigénique

TP3 Test immunologique et spécificité anticorps - déterminant antigénique TP3 Test immunologique et spécificité anticorps - déterminant antigénique Partie 1 : Spécificité d'un anticorps pour un déterminant antigénique du VIH La séropositivité pour le VIH correspond à la présence

Plus en détail

Biologie Appliquée. Dosages Immunologiques TD9 Mai 2015. Stéphanie Sigaut INSERM U1141 stephanie.sigaut@inserm.fr

Biologie Appliquée. Dosages Immunologiques TD9 Mai 2015. Stéphanie Sigaut INSERM U1141 stephanie.sigaut@inserm.fr Biologie Appliquée Dosages Immunologiques TD9 Mai 2015 Stéphanie Sigaut INSERM U1141 stephanie.sigaut@inserm.fr 1 ELISA 2 3 4 [Ac] 5 6 7 8 9 Correction : Faire la moyenne D0-1 et D0-2 pour toute les valeurs

Plus en détail

RECHERCHE D'UNE MOLECULE RESPONSABLE D'ALLERGIES DANS DES LAITS (VACHE SOJA)

RECHERCHE D'UNE MOLECULE RESPONSABLE D'ALLERGIES DANS DES LAITS (VACHE SOJA) Fiche sujet - candidat L ingestion par l Homme d une protéine, la β-lactoglobuline bovine (BLG), peut être responsable d allergies. Pour les personnes allergiques, il peut être recommandé de remplacer

Plus en détail

www.gbo.com/bioscience 1 Culture Cellulaire Microplaques 2 HTS- 3 Immunologie/ HLA 4 Microbiologie/ Bactériologie Containers 5 Tubes/ 6 Pipetage

www.gbo.com/bioscience 1 Culture Cellulaire Microplaques 2 HTS- 3 Immunologie/ HLA 4 Microbiologie/ Bactériologie Containers 5 Tubes/ 6 Pipetage 2 HTS 3 Immunologie / Immunologie Informations Techniques 3 I 2 ELISA 96 Puits 3 I 4 ELISA 96 Puits en Barrettes 3 I 6 en Barrettes de 8 Puits 3 I 7 en Barrettes de 12 Puits 3 I 8 en Barrettes de 16 Puits

Plus en détail

Étude de validation du Bluestar Forensic

Étude de validation du Bluestar Forensic Étude de validation du Bluestar Forensic I. Matériels et matières utilisés II. des tests 2.1. Détermination du seuil de sensibilité du kit Bluestar 2.2. Détermination de taches en fonction de leur volume

Plus en détail

7900003 24 Tests Circulating Tumor Cell Control Kit

7900003 24 Tests Circulating Tumor Cell Control Kit 7900003 24 Tests Circulating Tumor Cell Control Kit 1 APPLICATION Pour usage in vitro Le kit CELLSEARCH Circulating Tumor Cell Control Kit est conçu pour être utilisé comme contrôle de dosage pour vérifier

Plus en détail

Human Epo Immunoassay

Human Epo Immunoassay Quantikine IVD ELISA Human Epo Immunoassay Référence DEP00 Ce document contient le protocole de dosage qui doit impérativement être lu dans son intégralité avant utilisation du produit. Concernant les

Plus en détail

Fiche de données de sécurité

Fiche de données de sécurité Produit NET TONDEUSE Page 1/5 1. IDENTIFICATION DU PRODUIT ET DE LA SOCIETE Nom du produit Référence Utilisation commerciale Fournisseur NET TONDEUSE BNETT Aérosol lubrifiant MINERVA-OIL SAS Rue du 11

Plus en détail

Reformulons donc la question : De quels sucres s agit-il?

Reformulons donc la question : De quels sucres s agit-il? TP : ETUDE D UNE BOISSON POUR LE SPORT : une boisson riche en glucides La nutrition du sportif : Avoir une bonne nutrition contribue non seulement à améliorer les performances mais cela permet aussi de

Plus en détail

AGREGATION DE BIOCHIMIE GENIE BIOLOGIQUE

AGREGATION DE BIOCHIMIE GENIE BIOLOGIQUE AGREGATION DE BIOCHIMIE GENIE BIOLOGIQUE CONCOURS EXTERNE Session 2005 TRAVAUX PRATIQUES DE BIOCHIMIE PHYSIOLOGIE ALCOOL ET FOIE L éthanol, psychotrope puissant, est absorbé passivement dans l intestin

Plus en détail

comfor/tg 2009 Brûlures chimiques Etiquetage et reconnaissance des dangers

comfor/tg 2009 Brûlures chimiques Etiquetage et reconnaissance des dangers comfor/tg 2009 Brûlures chimiques Etiquetage et reconnaissance des dangers 1 Buts Etre capable de reconnaître les dangers indiqués sur une étiquette de produits dangereux. Connaître les pictogrammes du

Plus en détail

Suivi d une réaction lente par chromatographie

Suivi d une réaction lente par chromatographie TS Activité Chapitre 8 Cinétique chimique Suivi d une réaction lente par chromatographie Objectifs : Analyser un protocole expérimental de synthèse chimique Analyser un chromatogramme pour mettre en évidence

Plus en détail

E-II-2.1V1 : DOSAGE DU MERCURE DANS LES EAUX METHODE PAR SPECTROMETRIE ATOMIQUE DE VAPEUR FROIDE. 4. Conditionnement et conservation de l échantillon

E-II-2.1V1 : DOSAGE DU MERCURE DANS LES EAUX METHODE PAR SPECTROMETRIE ATOMIQUE DE VAPEUR FROIDE. 4. Conditionnement et conservation de l échantillon E-II-2.1V1 : DOSAGE DU MERCURE DANS LES EAUX METHODE PAR SPECTROMETRIE ATOMIQUE DE VAPEUR FROIDE 1. Objet Description du dosage du mercure par spectrométrie atomique de vapeur froide. 2. Domaine d application

Plus en détail

DETERGENT DETERGENT DESINFECTANT DESINFECTANT

DETERGENT DETERGENT DESINFECTANT DESINFECTANT DETERGENT DETERGENT DESINFECTANT DESINFECTANT I LES DETERGENTS a) Définition : Substances utilisées pour le lavage ou le nettoyage. Le détergent a uniquement des propriétés nettoyantes. Il ne détruit pas

Plus en détail

FICHE DE DONNEES DE SECURITE

FICHE DE DONNEES DE SECURITE 1. Identification de la substance/préparation et de la société/entreprise Nom du produit : ANTI-MOISISSURES ECOGENE 1 L (réf. 000562) Utilisation du produit Société : Téléphone en cas d'urgence : : Anti-moisissures

Plus en détail

V - Comment faites-vous? Pour chaque situation, rédigez une explication sur votre façon de procéder.

V - Comment faites-vous? Pour chaque situation, rédigez une explication sur votre façon de procéder. TP ph 4 Univers Sécurité au laboratoire! Attention! Un produit chimique ne doit pas être senti, goûté, touché! Objectifs du T.P. : Appliquer les indispensables règles de sécurité de la personne. Découvrir

Plus en détail

MC11 Mélanges d acides et de bases ; solutions tampons

MC11 Mélanges d acides et de bases ; solutions tampons MC11 Mélanges d acides et de bases ; solutions tampons Les définitions d acidité et de basicité ont beaucoup évoluées depuis leur apparition. Aujourd hui, on retient deux définitions valables. Celle donnée

Plus en détail

Entretien des locaux Utilisation de produits chimiques

Entretien des locaux Utilisation de produits chimiques HYGIENE & SECURITE Entretien des locaux Utilisation de produits chimiques Irritations, brûlures, allergies, maladies, l utilisation de produits chimiques lors de l entretien des locaux expose les agents

Plus en détail

Ressources pour le lycée général et technologique

Ressources pour le lycée général et technologique éduscol Ressources pour le lycée général et technologique Baccalauréat sciences et technologies de laboratoire Sujet zéro Option biotechnologies Évaluation des compétences expérimentales Contrôle de l

Plus en détail

FICHES DE DONNES DE SECURITE Selon le règlement CE 1907/2006 modifié par le règlement UE n 453/2010

FICHES DE DONNES DE SECURITE Selon le règlement CE 1907/2006 modifié par le règlement UE n 453/2010 1. IDENTIFICATION DE LA SUBSTANCE/MELANGE ET DE LA SOCIETE/ENTREPRISE 1.1 Identification de la substance/ mélange Nom de la substance/mélange : OXYDOR 1.2 Utilisations identifiées pertinentes de la substance

Plus en détail

Notice d information les cigarettes électroniques et accessoires

Notice d information les cigarettes électroniques et accessoires Notice d information les cigarettes électroniques et accessoires Avant-Propos 2 Cette notice d information concerne les cigarettes électroniques et accessoires de la marque NHOSS. Veuillez lire attentivement

Plus en détail

1. IDENTIFICATION DE LA SUBSTANCE/PREPARATION ET DE LA SOCIETE/ENTREPRISE

1. IDENTIFICATION DE LA SUBSTANCE/PREPARATION ET DE LA SOCIETE/ENTREPRISE Page : 1/8 1. IDENTIFICATION DE LA SUBSTANCE/PREPARATION ET DE LA SOCIETE/ENTREPRISE Identification de la préparation Utilisation de la préparation Identification de la Société / Entreprise Adresse : Eosine

Plus en détail

TVITD-ELISA Cisbio Bioassays - Novembre 2012 - Modèle 01

TVITD-ELISA Cisbio Bioassays - Novembre 2012 - Modèle 01 1. NOM ET DESTINATION Trousse de dosage immunoenzymatique pour la mesure quantitative in vitro de la 25 hydroxyvitamine D2 et D3 (25(OH)Vitamine D2 et 25(OH)Vitamine D3) dans le sérum. 2. INTRODUCTION

Plus en détail

CONSTRUCTION DES COMPETENCES DU SOCLE COMMUN CONTRIBUTION DES SCIENCES PHYSIQUES

CONSTRUCTION DES COMPETENCES DU SOCLE COMMUN CONTRIBUTION DES SCIENCES PHYSIQUES CONSTRUCTION DES COMPETENCES DU SOCLE COMMUN CONTRIBUTION DES SCIENCES PHYSIQUES Compétence du socle : Compétence 6 : Les compétences sociales et civiques. Contribution attendue : Utiliser un produit chimique

Plus en détail

INSTRUCTIONS PRINCIPALES Destiné exclusivement à l analyseur Sofia. Analyzer and Influenza A+B FIA. Choisir le mode de l analyseur.

INSTRUCTIONS PRINCIPALES Destiné exclusivement à l analyseur Sofia. Analyzer and Influenza A+B FIA. Choisir le mode de l analyseur. Eject Analyzer and Influenza FIA INSTRUCTIONS PRINCIPALES Destiné exclusivement à l analyseur Sofia. PROCÉDURE DU TEST Tous les échantillons cliniques doivent être à température ambiante avant de commencer

Plus en détail

Appli Ozyme Western Blot Protocole Complet

Appli Ozyme Western Blot Protocole Complet Appli Ozyme Western Blot Protocole Complet SOMMAIRE Matériel et réactifs nécessaires... P.2 Déroulement de l expérience... P.3 Préparation, électrophorèse et protocole de transfert... P.3 Protocole de

Plus en détail

LABORATOIRES DE CHIMIE Préparation des solutions

LABORATOIRES DE CHIMIE Préparation des solutions LABORATOIRES DE CHIMIE Préparation des solutions La préparation des solutions est un des actes majeurs de la chimie. Une solution se prépare toujours dans une fiole jaugée. Tout prélèvement se fait avec

Plus en détail

MSDS CUPREX 50%WG 2/5 Date d imprimer: 31/08/06

MSDS CUPREX 50%WG 2/5 Date d imprimer: 31/08/06 MSDS CUPREX 50%WG 1/5 FICHE DE SECURITE CUPREX 50% WG 1. Identification de la substance / préparation t de la société / entreprise 1.1. Identification de la substance / préparation Nom commercial: CUPREX

Plus en détail

TP 1 Anticorps et diagnostic de l infection

TP 1 Anticorps et diagnostic de l infection Anticorps et diagnostic de l infection OBJECTIFS Savoir ce qu est un anticorps, son origine et son utilisation en sérodiagnostic. Connaître la structure schématique d une immunoglobuline G (IgG). 1. Les

Plus en détail

Sonde à dioxygène dissous et gazeux

Sonde à dioxygène dissous et gazeux Sonde à dioxygène dissous et gazeux Référence PS-2108 Attention La sonde à dioxygène est livrée montée avec une tête de sonde non crélenée : il s agit de la tête de transport. Dans le colis, vous trouverez

Plus en détail

TSSIBS - Immunoanalyse. Immunoanalyse

TSSIBS - Immunoanalyse. Immunoanalyse Jeudi 14 Novembre RANDHAWA Sunny L2 TSSIBS Docteur DESPLAT-JEGO Sophie 6 pages Immunoanalyse Plan: A. Définition de l'immunoanalyse I. Critères de choix II. Caractéristiques communes B. Exemples de techniques

Plus en détail

Fiche n 9 : Le brunissement des pommes Niveau : 1 ère S SVT

Fiche n 9 : Le brunissement des pommes Niveau : 1 ère S SVT FICHE RÉCAPITULATIVE Lorsque nous croquons une pomme, la chair de celle-ci est blanche. Nous avons tous pu remarquer, après avoir oublié cette même pomme croquée sur une table pendant plusieurs minutes,

Plus en détail

FICHE DE DONNEES DE SECURITE conformément au Règlement (CE) No. 1907/2006 Enclean anti- mousse

FICHE DE DONNEES DE SECURITE conformément au Règlement (CE) No. 1907/2006 Enclean anti- mousse SECTION 1. IDENTIFICATION DE LA SUBSTANCE / DU MELANGE ET DE LA SOCIETE/ L ENTREPRISE 1.1 Identification du produit Nom du produit : Enclean anti-mousse Substance active : Acide Nonanoïque Formule chimique

Plus en détail

1. Les produits chimiques et leurs stockages

1. Les produits chimiques et leurs stockages 1. Les produits chimiques et leurs stockages BUT : Répondre à des questions telles que : Où trouve-t-on les produits chimiques? Quelles informations trouve-t-on sur les étiquettes? Comment les stocker?

Plus en détail

2. La lumière, source d énergie de la photosynthèse est captée par la chlorophylle.

2. La lumière, source d énergie de la photosynthèse est captée par la chlorophylle. Hyp : la chlorophylle absorbe les photons de la lumière et convertit l énergie lumineuse pour permettre la photolyse de l eau et les oxydoréductions mises en évidence précédemment. 2. La lumière, source

Plus en détail

5.5.5 Exemple d un essai immunologique

5.5.5 Exemple d un essai immunologique 5.5.5 Exemple d un essai immunologique Test de grossesse Test en forme de bâtonnet destiné à mettre en évidence l'hormone spécifique de la grossesse, la gonadotrophine chorionique humaine (hcg), une glycoprotéine.

Plus en détail

Document 4 : Evolution du taux d anticorps d un individu suite à une vaccination contre le virus de l hépatite B

Document 4 : Evolution du taux d anticorps d un individu suite à une vaccination contre le virus de l hépatite B TP n 20 Le principe de la vaccination et l évaluation d une immunisation : le test ELISA Thème 3-A-3 Lors d une primo-infection, le système immunitaire produit des anticorps et des lymphocytes T cytotoxiques

Plus en détail

DOMINO 1,rue de la Faltans Z.I. SUD 25220 ROCHE LES BEAUPRE tel/fax : 03 81 88 02 48 mobile : 06 71 28 85 26 e mail : domino@domino.

DOMINO 1,rue de la Faltans Z.I. SUD 25220 ROCHE LES BEAUPRE tel/fax : 03 81 88 02 48 mobile : 06 71 28 85 26 e mail : domino@domino. FICHE DE DONNEES DE SECURITE Selon 91/155/CEE 1. Identification de la substance/préparation et de la société/entreprise Nom du produit : EAU DE CUIVRE BLEUE Version 3 du 12/01/2010 Utilisation : détergent

Plus en détail

β-galactosidase A.2.1) à 37 C, en tampon phosphate de sodium 0,1 mol/l ph 7 plus 2-mercaptoéthanol 1 mmol/l et MgCl 2 1 mmol/l (tampon P)

β-galactosidase A.2.1) à 37 C, en tampon phosphate de sodium 0,1 mol/l ph 7 plus 2-mercaptoéthanol 1 mmol/l et MgCl 2 1 mmol/l (tampon P) bioch/enzymo/tp-betagal-initiation-michaelis.odt JF Perrin maj sept 2008-sept 2012 page 1/6 Etude de la β-galactosidase de E. Coli : mise en évidence d'un comportement Michaélien lors de l'hydrolyse du

Plus en détail

FICHE DE DONNÉES DE SÉCURITÉ

FICHE DE DONNÉES DE SÉCURITÉ MSDS ACTALON 1 FICHE DE DONNÉES DE SÉCURITÉ 1. Identification de la préparation et de la société Produit: Utilisation: ACTALON Herbicide en carotte, céleris, cultures porte-graine mineures, poireau et

Plus en détail