Transcription

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2 FORMULE SANGUINE (1) ERYTHROPOÏESE PHOTOMETRE CHAMBRE SEDIMENTATION

3 ANEMIE Hb < 120 g./l. Hb < 135 g./l. RETICULOCYTES /L (G/L) REGENERATIVE RETICULOCYTES > 120 G/L HYPOREGENERATIVE RETICULOCYTES < 120 G/L HEMOLYSE BILIRUBINE INDIRECTE L D H HAPTOGLOBINE SPOLIATION HEMORRAGIE MCV MCV MCV - Test de Coombs - Thrombocytes - Morphologie EC - Fragmentocytes - Electrophorèse Hb - - Anamnèse - Examen clinique - Sang occulte selles - Endoscopie Ferritine - Saturation de la transferrine - Récepteurs solubles de la transferrine - CRP / VS - Créatinine - Electrophorèse Hb - - Créatinine - CRP / VS - T4 / TSH - EPO - Electrophorèse protéines - Moelle osseuse OH - Pilule - Folates - Vitamine B 12 - Anticorps anti-fi anti-cell. pariétales - Tests coeliakie - Moelle osseuse -...

4 PRINCIPE DE COULTER COMPTEUR A IMPEDANCE ELECTRIQUE Aspiration lente d'un volume donné Modification mesurable du champ électrique au passage de chaque cellule par l'orifice capillaire avec impulsion proportionnelle à la taille de la cellule. Orifice capillaire par lequel la suspension de cellules peut être aspirée Champ électrique produit entre 1 électrode interne et 1 électrode externe. Suspension de cellules dans solution avec électrolyte

5 ANALYSEURS HEMATOLOGIE

6 FORMULE SANGUINE ERYTHROPOÏESE

7 CYTOMETRIE DE FLUX (1)

8 CYTOMETRIE DE FLUX (2) DIFFUSION LATERALE DIFFUSION AXIALE Mesure de la complexité cellulaire (granulations, noyau, etc.) Mesure de la fluorescence cellulaire Mesure de l'hb cellulaire (EC et RC) En fonction de l'angle d'analyse de la diffusion latérale Mesure du volume cellulaire

9 CYTOMETRIE DE FLUX (3) La coloration par des fluorochromes spécifiques de certains éléments cellulaires (p.ex.: peroxydase) permet le tri des cellules selon le type de fluorescence (couleur émise) par des capteurs sensibles aux différentes émissions. On peut aussi marquer, avec un colorant fluorescent, un anticorps dirigé contre certaines caractéristiques cellulaires (p.ex.antigènes de surface) Le niveau d'absorption de la lumière (avec ou sans coloration) par les cellules est un autre mode de mesure Le logiciel de traitement des données permet de combiner les informations en histogrammes ou cytogrammes ("scattergrams").

10 FORMULE SANGUINE 2011

11 FORMULE SANGUINE COMPLETE 2011

12 FORMULE SANGUINE COMPLETE 2012 ADVIA 120 SIEMENS BAYER IDR: Intervvalle de Distribution Rouges MTV : Volume moyen thrombocytes IDP : Intervalle de Distribution des Plaquettes CHr : contenu en Hb réticulocytes LUC : Large Unstained Cells (grandes cellules négatives pour peroxydase)

13 FORMULE ROUGE COMPLETE 2012 HISTOGRAMMES RBC CYTOGRAMME RBC NUMERATION RETICS CYTOGRAMME DEGRES DE MATURATION HISTOGRAMME HB CELLULAIRE (pg) EC et RETICS (CHr) ADVIA 120 IDR: Intervvalle de Distribution Rouges CHr : contenu en Hb réticulocytes (= RTC CH ) RTC SCAT ABS : Diagramme de répartition des réticulocytes par contenu RNA

14 HISTOGRAMMES ERYTHROCYTAIRES Histogramme des EC selon le volume (permet le calcul du MCV) 60 fl 120 fl 220 g/l 410 g/l Histogramme des EC selon la concentration en Hb permet le calcul du MCH

15 CYTOGRAMME ERYTHROCYTAIRE HISTOGRAMME VOLUME EC CYTOGRAMME EC HISTOGRAMME CONCENTRATION HB EC Document ADVIA 120

16 CYTOGRAMME ERYTHROCYTAIRE Volume Erythrocytes (fl) 120 Macrocytaire Concentration Hb (g/l) Normocytaire Normochrome Microcytaire Hyperchrome Document ADVIA 120

17 CYTOGRAMMES ERYTHROCYTAIRES PATHOLOGIQUES (1) NORMAL ANEMIE FERRIPRIVE THALASSEMIE MINEURE Population EC déplacée vers le bas (microcytaire) et la gauche (hypochrome) Population EC déplacée vers le bas (microcytaire) mais peu vers la gauche (encore normochrome)

18 CYTOGRAMMES ERYTHROCYTAIRES PATHOLOGIQUES (2) Macrocytose non mégaloblastique Anémie mégaloblastique Anémie microcytaire hypochrome transfusée Syndrome myélodysplasique de type anémie réfractaire avec sidéroblastes Population EC macrocytaire mais concentration Hb peu variable. Grand variabilité de la taille cellulaire mais normochromie Double population EC avec une population microcytaire hypochrome et une population normocytaire normochrome. Population macrocytaire avec une population microcytaire hypochrome correspondant aux EC déficients en fer en raison du trouble d'incorporation. (Image presque pathognomonique). (Image semblable en cas de réponse au traitement de fer)

19 CYTOGRAMMES ERYTHROCYTAIRES PATHOLOGIQUES (3) Sphérocytose héréditaire Status après hémorragie sévère Anémie hémolytique auto-immune RBC VHC Population d'érythrocytes hyperchromes de petite taille = microsphérocytes Population d'érythrocytes de grande taille relativement hypochromes = réticulocytes Nombreux microsphérocytes (hémolyse) Réticulocytes plus petits car déjà en partie sphérocytaires

20 PARAMETRES DE LA LIGNEE ERYTHROCYTAIRE HGB Hemoglobin level (g/l) RBC Red Blood cell Count (10 12 /L) MCV Mean Corpuscular Volume (fl) HCT Hematocrit (L/L) MCH Mean Corpuscular Hemoglobin (pg) MCHC Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration (g/l) CHCM Corpuscular Hemoglobin Concentration Mean (g/l) Identique MCHC HDW Hemoglobin concentration Distribution Width (%) Anisochromie CH Corpuscular Hemoglobin (pg) Synthèse Hgb RDW Red cell volume Distribution Width (%) Anisocytose %MICRO % RBC < 60 fl EC microcytaire %MACRO % RBC > 120 fl EC macrocytaires %HYPO % RBC < 280 g/l HGB EC hypochromes %HYPER % RBC > 410 g/l HGB EC "hyperchromes"

21 RETICULOCYTES (1) Marquage de l'arn résiduel des réticulocytes (RC) (p.ex. par Oxazine) (colorant spécifique occasionnant une absorption de la lumière par les cellules qui le fixent) ❶ - ❺ Seuils de discrimination Taille des cellules Intensité absorption lumière A Erythrocytes matures (pas d'absorption) B RC à absorption faible (matures) C RC à absorption intermédiaire D RC à absorption forte (immatures) E Thrombocytes F Autres signaux (grandes cellules sans absorption)

22 RETICULOCYTES (2) Histogramme combiné volume RC et EC Histogramme combiné concentration Hb RC & EC Histogramme combiné Hb cellulaire RC & EC (pg / cellule)

23 RETICULOCYTES (3) Traitement par EPO Début Après 4 jours Après 2 semaines Après 1 mois

24 CORRECTION ETAT FERRIPRIVE Paramètre Résultat Référence avant après Hémoglobine g/l MCV fl Erythrocytes hypochromes < 5% CHr pg

25 PARAMETRES RETICULOCYTES %RETIC (% Reticulocytes) #RETIC (# Reticulocytes) MCVr (Mean Cell Volume reticulocytes) (fl) Volume RETIC CHr (Cellular Hemoglobin content reticulocytes) (pg) Synthèse HB récente CHCMr (Cell Hemoglobin Concentration Mean reticulocytes) (g/l) Synthèse HB récente IRF-H (Immature Reticulocytes Fraction High) (%) Production RETIC IRF-M+H (Immature Reticulocytes Fraction Medium + High) (%) Production RETIC

26 ANEMIE Hb < 120 g./l. Hb < 135 g./l. RETICULOCYTES (G/L) Numération automate Paramètres RETIC RETICULOCYTES > 120 G/L et / ou % RETIC IMMATURES REGENERATIVE RETICULOCYTES < 120 G/L et / ou ou % RETIC IMMATURES HYPOREGENERATIVE - CYTOGRAMME EC BILIRUBINE INDIRECTE L D H HAPTOGLOBINE HEMOLYSE SPOLIATION HEMORRAGIE MCV et / ou CYTOGRAMME EC % EC hypochromes RC hypochromes CHr MCV CYTOGRAMME EC MCV CYTOGRAMME EC - Morphologie EC - Fragmentocytes - Test de Coombs - Thrombocytes - - Anamnèse - Examen clinique - Sang occulte selles - Endoscopie - Ferritine - Saturation de la transferrine - Récepteurs solubles de la transferrine - Protoporphyrine érythrocytaire - CRP / VS - Créatinine - Hepcidine - Créatinine - CRP / VS - T4 / TSH - EPO - Electrophorèse protéines - Moelle osseuse - Hepcidine - OH - Pilule - Folates - Vitamine B 12 - Anticorps anti-fi anti-cell. pariétales - Tests coeliakie - Moelle osseuse

27 METABOLISME DU FER CELLULE DUODENALE HEPCIDINE MACROPHAGE HEPCIDINE ERYTHROPOÏESE HEPCIDINE : Fonctionnement normal de la ferroportine. Fer à disposition de l'érythropoïèse HEPCIDINE : Blocage de la ferroportine (intestin et macrophages). Pas de fer à disposition de l'érythropoïèse.

28 ANEMIE INFLAMMATOIRE INFECTION INFLAMMATION MALADIE AUTOIMMUNE TUMEUR MALIGNE INSUFFISANCE RENALE Activation des lymphocytes T Activation des monocytes LYMPHOCYTE T MONOCYTE FOIE REIN Interleukine-1 TNF-α TNF-α Interleukine-6 Hepcidine Erythropoïétine Interleukine-1 TNF-α γ-interféron MACROPHAGE Hémophagocytose des érythrocytes sénescents Erythropoïèse MOELLE OSSEUSE Inhibition de la libération du fer des macrophages Absorption intestinale du fer Fe +++ / Transferrine Carence fonctionnelle en fer