Microbiote intestinal et obésité: sur la piste des endotoxines bactériennes. Marie-Caroline MICHALSKI, DR INRA Laboratoire CarMeN, Lyon
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- Yves Guérin
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1 Microbiote intestinal et obésité: sur la piste des endotoxines bactériennes Marie-Caroline MICHALSKI, DR INRA Laboratoire CarMeN, Lyon
2 Problématique Sédentarité, régime déséquilibré Obésité Diabète de type 2 Microbiote Inflammation à bas bruit Endotoxines (LPS) Athérosclérose Insulinorésistance
3 Obésité et inflammation
4 Repas gras et inflammation Lipides
5 Repas gras et inflammation IL-6 Lipides
6 Relations métabolisme-microbiote intestinal etc.
7 Relations métabolisme-microbiote intestinal Des résultats (souris, homme) montrent une augmentation du ratio Gram -/Gram + en situation d obésité
8 Facteur commun lipides/microbiote/inflammation? Régime hyperlipidique Microbiote intestinal? Inflammation
9 Facteur commun lipides/microbiote/inflammation? Régime hyperlipidique Microbiote intestinal Endotoxines (lipopolysaccharides) Inflammation
10 Endotoxines (LPS) et inflammation LPS-binding protein (LBP) Lyse de bactérie Gram LPS micelle LPS lié Induction de l inflammation mcd14 NFκB Inflammation Agrégation plaquettaire TLR4/MD2 Macrophages, monocytes, leucocytes Cytokines (TNF-α, IL-1, IL-6, IL-8, PAF)
11 «Ancien» concept : LPS / infections et maladies cardiovasculaires
12 Nouveau concept : LPS endogènes du microbiote, régime gras et inflammation Liens LPS/obésité/insulinorésistance chez la souris : KO pour TLR4 : résistent à l IR et à l obésité. Régime gras : endotoxémie Perfusion chronique de LPS : induit prise de poids et IR Souris KO pour récepteur CD14 au LPS : résistent à l IR, l obésité, et la production de cytokines induites par régime riche en lipides
13 Régime alimentaire hyperlipidique, inflammation & endotoxines Chez l homme: Endotoxémie / LBP chez l obèse (Basu 2010, Sun 2010) Endotoxémie dans le diabète T2 (Creely et al. 2007, Pussinen 2011) Endotoxémie moyenne (EU/mL) Nombre de paramètres du syndrome métabolique
14 Endotoxines, régime «gras» et inflammation
15 Hypothèse : Co-absorption d endotoxines avec les lipides Chez l homme: transitoire de l endotoxémie postprandiale après une charge en lipides (40 g)chez des fumeurs occasionnels, minces à obèses (Erridge et al. 2007)
16 Hypothèse : Co-absorption d endotoxines avec les lipides Rôle des chylomicrons dans l absorption des endotoxines chez la souris :
17 Hypothèse : Co-absorption d endotoxines avec les lipides Gouttelettes lipidiques Lyse, LBP Bactéries Gram Lipase Entérocytes LBP, TLR4, CD14 Tissu adipeux Chylomicrons LBP mcd14 Résidus de chylomicrons LPL Endothélium vasculaire scd14 TLR4 Cytokines Cytokines
18 «Régime gras»?! Grande variété de composition et structure des lipides alimentaires! Esters de cholestérol Triglycérides Acides Gras Phospholipides Huile Cristaux Gouttelettes lipidiques Globules gras protéines Interface : Micelles Membranes XO XO XO XO Interactions avec : Autres lipides, eau, Ca 2+, protéines, fibres, réseau Lipases Bactéries Muqueuse intestinale
19 Problématique Sédentarité, régime déséquilibré Obésité Diabète de type 2 Microflore Lipides alimentaires (quantité, structure): Augmentation de l absorption intestinale d endotoxines? Inflammation à bas bruit Endotoxines (LPS) Athérosclérose Insulinorésistance
20 Stratégie Etudes cliniques : Un repas varié induit-il une endotoxémie suivant le repas chez des volontaires non obèses? Une période de 2 mois d augmentation des apports alimentaires augmente-t-elle ce phénomène? 5 Etudes sur modèles de rongeurs : Emulsionner une huile modifie-t-il l endotoxémie postprandiale? La composition de l huile utilisée dans un régime hyperlipidique modifie-t-elle l endotoxémie et l inflammation?
21 1- Etude chez l homme Repas mixte avec lipides endotoxémie 12 jeunes hommes minces/surpoids 28.8 ±6.9 ans IMC = 24.9 ±3.6 kg/m² Digestion d un petit déjeuner mixte (33% lipides) Echantillons de plasma Endotoxémie (LAL), scd14, IL-6 Quantité (g ou ml) Glucides (g) Protéines (g) Lipides (g) Fortimel 200 ml Banane 200 g Pain 85 g Confiture 20 g Margarine 23 g Beurre 9.4 g Huile d olive 1 g Total (g) % Apport calorique repas
22 1- Etude chez l homme Repas mixte avec lipides endotoxémie Endotoxémie et inflammation transitoires : Endotoxémie Transporteur scd14 Inflammation
23 1- Etude chez l homme Repas mixte avec lipides endotoxémie Les chylomicrons transportent des endotoxines : (Immunomarquage des LPS d entérobactéries) Laugerette et al., J Nutr Biochem 2011
24 1- Etude chez l homme Suralimentation endotoxémie postprandiale? 8 hommes jeunes, minces et surpoids 31 ±2 years BMI = 25.7 ±0.8 kg/m² 5 8 semaines : alimentation habituelle + amandes, beurre, fromage (+70 g lipides/jour) Intervention nutritionnelle +20 g +40 g +100 g Test de digestion avant/après intervention
25 1- Etude chez l homme Suralimentation endotoxémie postprandiale? Augmentation de l accumulation d endotoxines suite au repas : Avant intervention nutritionnelle Après intervention nutritionnelle Laugerette et al., (2013) en préparation
26 Questions Chez l homme, l inflammation induite par la consommation excessive de lipides est liée à une endotoxémie transitoire et aux transporteurs d endotoxines Est-ce que la composition et la structure des lipides peuvent modifier ces phénomènes?
27 2-Etudes chez des rongeurs Emulsifier les lipides endotoxémie? Etude de gavage chez le rat(n=5 par groupe) Tampon Huile de tournesol Huile émulsionnée + tampon dans le tampon (lécithine de soja) Cathéter Plasma durant la digestion Endotoxémie (LAL), triglycérides
28 2-Etudes chez des rongeurs Emulsifier les lipides endotoxémie Endotoxémie AUC-LPS (EU.min/mL) Saline Oil + saline Emulsion of oil in saline AUC-TG (mmol.min/l) Lipémie Laugerette et al., J Nutr Biochem. 2011
29 2-Etudes chez des rongeurs Composition des lipides/huiles endotoxémie Régimes hyperlipidiques chez la souris vs témoin, 8 semaines(n=8 / group) 20% Matière grasse laitière 20% Huile de Palme 20% Huile de Colza 20% Huile de Tournesol Plasma, tissu adipeux Inflammation: IL-6, MCP1 Endotoxémie, LBP, scd14 Expression de TLR4 et mcd14 Laugerette et al., Am J Physiol-Endocrinol Metab (2012)
30 2-Etudes chez des rongeurs Composition des lipides/huiles endotoxémie Plasma
31 2-Etudes chez des rongeurs Composition des lipides/huiles endotoxémie Plasma Laugerette et al., Am J Physiol-Endocrinol Metab (2012)
32 2-Etudes chez des rongeurs Composition des lipides/huiles endotoxémie Plasma Laugerette et al., Am J Physiol-Endocrinol Metab (2012)
33 2-Etudes chez des rongeurs Composition des lipides/huiles endotoxémie Tissu adipeux Laugerette et al., Am J Physiol-Endocrinol Metab (2012)
34 2-Etudes chez des rongeurs Composition des lipides/huiles microbiote Laugerette Michalski et 2013 al. (2012)
35 Quel lien établir avec des études épidémiologiques? Les graisses saturées se valent-elles toutes? Lien graisses saturées / risque cardiovasculaire? Etude des 7 pays : recommandation de limiter la consommation d acides gras saturés (Keys, 1980) Cela a été traduit en «réduisez votre consommation de fromages et autres produits laitiers gras» Y a-t-il vraiment un lien? Zivkovic, 2012
36 Quel lien établir avec des études épidémiologiques? Les graisses saturées se valent-elles toutes? Kratz, Eur J Nutr 2012 Sur 15 études d observation : pas de lien entre consommation de produits laitiers (incluant les produits gras) et évènements cardiovasculaires! Les acides gras sont variés, dans des produits variés! Accompagnés de fibres ou de glucides rapides, de protéines ou non, dans un aliment solide ou liquide Association positive AGS de viande/risque CV Association inverse AGS laitiers/risque CV Astrup et al. AJCN 2011 Michalski et al. Chaque augmentation de 5% de l apport énergétique d origine laitière 40% de diminution du risque! Michalski Etudes 2013 chez des H & F américains, différentes ethnies Otto, Mozaffarian et al. Am J Clin Nutr 2012 Zivkovic 2012
37 A retenir Chez l homme Une consommation de lipides en excès induit une endotoxémie transitoire Ce phénomène augmente si l alimentation est excessive de manière chronique Chez la souris nourrie de différents lipides Toutes les matières grasses ne sont pas égales : l inflammation métabolique est différente selon le type d huile en lien avec le métabolisme des endotoxines (LBP) La quantité et la composition des lipides ingérés influent sur les mécanismes liés aux endotoxines et au microbiote intestinal, contribuant à l inflammation métabolique
38 Perspectives Optimiser la composition et la structure des lipides ingérés peut constituer une stratégie contribuant à limiter l inflammation induite par les endotoxines du microbiote Etude clinique LIPINFLOX L émulsification des lipides modifie le métabolisme postprandial des lipides (Vors et al. Am J Clin Nutr 2012) qu en est-il de l endotoxémie? Les obèses sont-ils plus sensibles que les sujets normopondérés à ces phénomènes? 5
39 Merci de votre attention Merci aux membres du laboratoire CarMeN et du CRNH Rhône-Alpes
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