Résistance des Entérobactéries à la colistine chez l Homme : état des lieux et actualités récente
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- Jacqueline Dussault
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1 Résistance des Entérobactéries à la colistine chez l Homme : état des lieux et actualités récente Pr Richard Bonnet UMR Inserm 1071 usc INRA 2018 CNR de la résistance aux antibiotiques Service de Bactériologie-Mycologie-Parasitologie CHU de Clermont-Ferrand Université d Auvergne
2 La colistine ou polymyxine E Décapeptide cyclique cationique lié à un acide gras Produit par Bacillus polymyxa subsp. colistinus (1947) Première utilisation en 1950 (prodrug) Activité bactéricide dose dépendante reposant sur les charges positives et l acide gras Lie les charges négatives du lipide A (Phosphate) Déplace les ions Ca++ et Mg++ et augmentation de la perméabilité membranaire Fuite de composant cellulaire => lyse bactérienne Activité anti-endotoxine Spectre utile : Pseudomonas aeruginosa Acinetobacter baumanii Entérobactéries sauf Proteus spp., Providencia spp., Serratia spp., Morganella spp., Hafnia alvei, Enterobacter cloacae complex des groupes Hsp60 Problème : toxicité rénale et neurologique
3 Principales indications chez l homme: Réintroduit pour le traitement systémique de dernier recours lors d infections sévères à bacilles à Gram négatif résistantes aux autres antibiotiques (ex. P. aeruginosa, A. baumanii, Klebsiella pneumoniae, E. coli) Mucoviscidose: Primo-colonisation pulmonaire et poussée infectieuse à P. aeruginosa multirésistants Décontamination intestinale sélective lors des aplasies médullaires prolongées (>10 jours). Consommation chez l homme: Faible et stable en Europe (sauf Italie, Hongrie et Norvège) et en France Europe: 0,012 DDJ/1000H/J France: 0,008 DDJ/1000H/J Antibiotiques en secteur hospitalier: Europe: 2.0 DDJ/1000H/J France: 2.2 DDJ/1000H/J Carbapénèmes: Europe: 0,058 DDJ/1000H/J France: 0,033 DDJ/1000H/J La colistine ou polymyxine E
4 La résistance à la colistine chez les Entérobactéries avant le 18 nov Résistance chromosomique souvent hétérogène lié à des mutations: Diminuant la charge du LPS Inactivation Mutations activatrices > > -1.0 Diminuant la synthèse du LPS Affectant la synthèse de la capsule L expression de système d efflux
5 le 18 nov : la résistance à la colistine plasmidique et donc transférable de façon horizontale!
6 le 18 nov : la résistance à la colistine transférable en Chine le gène mcr-1 codant une phosphoethanolamine transférase plasmidique > > -1.0
7 Résistance plasmidique à la colistine en Chine via mcr Entérobactéries isolées d infections Patients hospitalisés entre 2011 et isolats portant mcr-1 => Fréquence chez l homme : 1,2% en E. coli : 13/902 (1,4 %) K. pneumoniae : 4/420 (0,7 %) Prévalence de mcr-1 entre 2011 et Food animal Retail meat Inpatient
8
9 mcr-1 chez l Homme quelques mois plus tard Emirats Arabes Unies 7 Entérobactéries mcr-1 isolées en France métropolitaine dont 5 depuis décembre Entérobactéries mcr-1 isolées en Nouvelle Calédonie en 2014 mcr-1 est largement distribué
10 Les bactéries porteuses de mcr-1 chez l Homme Des entérobactéries : Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Enterobacter cloacae Enterobacter aerogenes Salmonella Typhimurium Salmonella Paratyphi B var Java Salmonella irchow Shigella sonnei
11 Prévalence de mcr-1 chez l Homme Année Pays Prélèvement % R colistine % mcr-1 % mcr-1/r colistine Espèce Chine Clinique - 1,4% (13/902) - E. coli Chine Clinique - 0,7% (4/420) - K. pneumoniae 2015 Chine Portage - 2,0% (5/250) - E. coli <2010 Chine Portage - 7,0% (27/386) - Méta génomique 2011 Hollande Clinique - 0,08% (1/1250) - E. coli Espagne Clinique/Portage 0,5% (53/10011) 0,15% (15/10011) 30% (15/53) E. coli Danemark Clinique - 0,20% (1/534) - E. coli MDR SENTRY Clinique 0,4% (59/13526) 0,14% (19/13526) 30% (19/59) E. coli SENTRY Clinique 4,4% (331/7480) <0,01% (0/7480) - K. pneumoniae Italie Clinique 6,5% (217/3294) 0,30% (10/3294) 4,6% (10/217) Salmonella
12 Le niveau de résistance induit par mcr-1 Phosphoethanolamine tranférase Neutralisation modérée des charges négatives du LPS Bas niveau de résistance CMI modale: 4-8 µg/ml Très rares souches à 1-2 µg/ml >95% CMI > «Breakpoint» EUCAST (2µg/ml) Des souches >8 µg/ml => mécanismes de résistance additionnels Distribution des CMI de la colistine chez des Entérobactéries mcr Valeurs des CMI à la colistine (µg/ml)
13 Mécanismes de résistance associés Les β-lactamases à spectre étendu (BLSE) de type blactx-m La céphalosporinase plasmidique CMY-2 Les carbapénèmases NDM-1, NDM-5, NDM-9, KPC-2, OXA-48 et VIM-1 7 E. coli mcr-1 non MDR sur 15 E. coli mcr-1 ( E. coli)
14 Plasmide codant mcr-1 chez l Homme Groupes d incompatibilité variés : IncI2 (~60-65kb) IncX4 ( ~30kb) IncHI2 (>200kb) IncFIB (~30, ~80 kb, ~225kb), inchi1 (210 kb), Non décrit chez l Homme: incp (~80kb), incfii (~90kb) Plasmides conjugatifs (taux de transfert in vitro jusqu à 10 1 à 10-7 )
15 Environnement génétique de mcr-1 Transposon composite basé sur ISApl1 (famille IS30) puis perte d une ou deux copies de ISApl1 Répétitions directes Site d insertion
16 Co-localisation de mcr-1 avec d autres gènes de résistance IncI2 et IncX4: pas de gènes de résistance associés connus Sauf IncI2 + blactx-m-64 (Péninsule Arabique) ou blactx-m-55 (Chine) IncF : blactx-m-55, blatem-1b, stra, strb, sul2, teta et dfra14 (USA) IncHI2 : Europe : blactx-m-14, oqxab, fosa3 blactx-m-1, dfra1b, aada1a, aada1b, aada2, cmla1, qach2, mefb Péninsule Arabique : blatem-1, dfra14, aada1, aada2, sat1,aph(3 )-Ia, stra, strb, flor, sul3, teta, mefb
17 Co-localisation de mcr-1 avec d autres gènes de résistance IncX3-X4 codant mcr-1 et blandm-5 (Chine)
18 Souches mcr-1 chez l Homme en France (CNR) 972 Entérobactéries productrices de carbapénèmases isolées en 2014 => 6,2% (35/972) sont résistantes à la colistine => <0,1% (0/972) contiennent mcr Entérobactéries BLSE non reliées issues de prélèvements cliniques (2014) (France métropolitaine 210, Guadeloupe 100, Guyane 100, Réunion 100 and Nouvelle Calédonie 100) => 0,3% (2/610) des Entérobactéries BLSE => 2,0% (2/100) des Entérobactéries BLSE en Nouvelle Calédonie => 0,7% (2/284) des E. coli BLSE => 4,2% (2/48) des E. coli BLSE en Nouvelle Calédonie
19 Les souches résistantes du CNR 2 souches E. coli mcr-1 en Nouvelle Calédonie (2014) E. coli ST617 Liquide d ascite chez une homme de 42 ans hospitalisé en Réanimation CMI de la colistine : 4 µg/ml Gènes de résistance : blactx-m-55, aph(3 )-IIa, cata2, folp et mcr-1 Plasmide inci2 : 99% de couverture / phnshp45 (Chine) ; 5 SNV sur 63,2kb E. coli ST773 Liquide gastrique chez un nouveau né (Maternité) CMI de la colistine : 4 µg/ml Gènes de résistance : blactx-m-27, stra, strb, aada5, tetar, suli, sulii, dfra17, folp, mpha, ermb et mcr-1 Plasmide inci2 : 86% de couverture / phnshp45 (Chine) ; 219 SNV sur 54,9kb Publication MARS (message d alerte rapide sanitaire) Avis HCSP : mis à jour du document pour la prévention de la transmission croisée des BHRe (sept 2016)
20 Procédure d analyse des souches résistantes colistine Réception Antibiogramme CMI Colistine PCR mcr-1/2 S Colistine R Colistine mcr-1/2 - mcr-1/2 + WGS par NGS WGS par NGS R Chromosomique mcr-like MLST/SNP Autres ARG Plasmides mcr-1/2 MLST/SNP Autres ARG
21 Les souches résistantes envoyées au CNR 20 souches résistantes à la colistine : 5 Enterobacter cloacae et 3 Hafnia alvei : mcr-1/2 négatifs (naturellement résistants) 7 Klebsiella pneumoniae : 1 souche mcr-1 positif 6 souches portant un gène mgrb modifié 5 Escherichia coli : 3 souches mcr-1 positif 1 souche portant un gène pmra modifié 1 souche portant un gène pmrb modifié
22 Conclusion Prévalence faible mais potentiellement croissance => Etude épidémiologique des gènes mcr-1/2 Risque lié - à l utilisation de la colistine - à une localisation sur des plasmides MDR (carbapénèmases, BLSE ) => Surveillance de la consommation de colistine => Etude moléculaire des supports génétiques Diffusion Animal-Homme => Approche «One Health»
23 Conclusion Résistance - plasmidique indépendante de mcr-1 - chromosomique épidémique => Au-delà de mcr-1, surveillance de l ensemble des mécanismes de résistance à la colistine
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